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胡乙素的平均含量为０．２７ｍｇ·ｇ－１。
表２　白花前胡乙素加样回收率实验结果
Ｔａｂ．２Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｉｎ　Ｂ　 （ｎ＝６）
编
号
样品中
量／ｍｇ
加入
量／ｍｇ
测得
量／ｍｇ
回收
率／％
平均回
收率／％
ＲＳＤ
／％
１　 ０．７００　 ０．７５１　 １．４５２　 １００．１３
２　 ０．７０２　 ０．７５１　 １．４３６　 ９７．７４
３　 ０．７０３　 ０．７５１　 １．４６２　 １０１．０７
４　 ０．７０２　 ０．７５１　 １．４５５　 １００．２７
５　 ０．７１２　 ０．７５１　 １．４４７　 ９７．８７
６　 ０．７０４　 ０．７５１　 １．４５７　 １００．２７
９９．６　 １．４
４　讨论
参苏丸中前胡具有散风清热、降气化痰的作
用［５－６］，是参苏丸中的重要成分。但尚未见对参苏丸
中前胡的 ＨＰＬＣ含量测定作为质量标准的报道。因
此，为了完善参苏丸的质量标准，本实验建立了参苏
丸中白花前胡甲素与白花前胡乙素的含量测定方法；
此外，增加了参苏丸中甘草的薄层鉴别，改良了紫苏
叶的薄层鉴别方法，以便更好地控制参苏丸的质量。
参考文献：
［１］　国家药典委员会．中国药典２０１０年版［Ｓ］．一部．北京：
中国医药科技出版社，２０１０：８６１．
［２］　杨智峰，蒙麦侠，杨瑞瑞．肠腑康胶囊 Ａ的质量标准研
究［Ｊ］．西北药学杂志，２０１１，２６（３）：１６７－１６８．
［３］　黄辉庆，陆敏强，蔡殷．十二太保丸中甘草的薄层色谱
鉴别方法［Ｊ］．中国民族民间医药，２０１３，１９（１３）：２１－２２．
［４］　田其学，吴劲松，陈玲珑．护心康片中黄芪、茯苓、炙甘
草的薄层色谱鉴别 ［Ｊ］．湖南中医杂志，２０１３，２９（７）：
１３１－１３２．
［５］　薛俊超．白花前胡化学成分及相关药理作用研究进展
［Ｊ］．海峡药学，２０１２，２４（２）：３４－３６．
［６］　王燕华，张迎春．白花前胡有效成分和临床药理学研究
进展［Ｊ］．辽宁中医药大学学报，２０１２，１４（３）：２５８－２５９．
（收稿日期：２０１３－１１－１１）
高效液相色谱法测定草龙中没食子酸的含量
周小雅１，梁光毅２　，刘雪梅３＊（１．广西卫生职业技术学院，南宁　５３００２３；２．广西梧州市桂康药业有限公司，梧州　５４３０００，
３．广西中医药大学，南宁　５３００２２）
摘要：目的　建立用高效液相色谱法测定草龙没食子酸的方法。方法　采用ＨＰＬＣ法。色谱柱为Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×４．６
ｍｍ，５μｍ）；流动相为乙腈－０．５ｍＬ·Ｌ
－１磷酸（５∶９５）；流速为１．０００ｍＬ·ｍｉｎ－１；在检测波长２７０ｎｍ对没食子酸进行含量测
定。结果　草龙中没食子酸的含量为３．１５ｍｇ·ｇ－１。结论　所建立的高效液相色谱法简便快速，稳定可靠，可用于草龙中没食
子酸的含量测定，为草龙的质量控制研究提供科学的依据。
关键词：草龙；没食子酸；含量测定
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０３．００６
中图分类号：Ｒ２８２　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０３－０２３５－０３
基金项目：２０１３年广西科学研究与技术开发计划项目（编
号：桂科能１３４６００８－９号）
作者简介：周小雅，女，副教授
＊通信作者：刘雪梅，女，副教授
　　草龙为广西壮族民间常用中草药，为柳叶菜科植
物线叶丁香蓼（Ｌｕｄｗｉｇｉａ　ｈｙｓｓｏｐｉｆｏｌｉａ（Ｇ．Ｄｏｎ）Ｅｘ－
ｅｌ）的干燥全草，具有清热解毒、祛腐生肌功效，用于
治疗感冒、咽喉肿痛、疮疥等［１］。民间使用已证明该
药有较显著的疗效，具有很好的应用价值。但因缺乏
专属性的化学对照品，草龙的质量控制研究方面的报
道还是空白，阻碍了草龙药材的临床应用。
有文献报道，对草龙的化学成分和抑菌的药理作
用进行系统研究［２］。药理研究表明，从乙酸乙酯部位
分得的单体没食子酸有较好抑菌作用［３］。因此，本实
验以没食子酸为指标成分，采用ＴＬＣ建立了没食子
酸的薄层鉴别方法，并用高效液相色谱法检测草龙中
没食子酸含量，为草龙药材的制剂开发和质量控制提
供科学依据。
１　仪器与试药
１．１　仪器　７５２Ｎ紫外可见分光光度计（上海分析仪
器厂）；ＬＣ２１０高效液相色谱仪（上海分析仪器厂）。
１．２　试药　没食子酸（购于中国药品生物制品检定
所，批 号 １１０８３１－２００８０３：）；乙 腈 （色 谱 纯）；０．５
ｍＬ·Ｌ－１磷酸溶液；草龙采于广西南宁地区，经广西
中医学院中药研究所刘寿养副教授鉴定为柳叶菜科
丁香蓼属植物线叶丁香蓼（Ｌｕｄｗｉｇｉａ　ｈｙｓｓｏｐｉｆｏｌｉａ
（Ｇ．Ｄｏｎ）Ｅｘｅｌ）的干燥全草。
２　方法与结果
２．１　没食子酸的薄层检识
２．１．１　对照品溶液的制备　取没食子酸对照品约２
５３２西北药学杂志　２０１４年５月　第２９卷　第３期
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ｍｇ，加适量甲醇溶解，摇匀，作为对照品溶液。
２．１．２　样品溶液的制备　取草龙粗粉约１ｇ，置于
５０ｍＬ量瓶中，加入甲醇２５ｍＬ，超声提取３０ｍｉｎ，放
冷，摇匀，滤过，取滤液１０ｍＬ于水浴上浓缩至约１
ｍＬ，即得。
２．１．３　没食子酸的薄层鉴定　照薄层色谱法实验，
吸取上述对照品和样品溶液适量，分别点于同一以羧
甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，以甲苯－
乙酸乙酯－甲酸（３∶５．４∶０．６）为展开剂，薄层板置展
开缸中预饱和３０ｍｉｎ，展开，取出，晾干，喷以５０
ｇ·Ｌ－１的磷钼酸，在１０５℃加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相
同颜色的斑点，证明草龙药材中含有没食子酸。
２．２　没食子酸含量测定
２．２．１　色谱条件　色谱柱为 Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　Ｃ１８（２５０ｍｍ
×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相为乙腈－０．５ｍＬ·Ｌ
－１磷酸
（５∶９５）；流速：１．００ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长为２７０
ｎｍ；柱温：２８℃。理论板数按没食子酸计算应不少
于２　０００。
２．２．２　对照品溶液的制备　取没食子酸对照品约８
ｍｇ，精密称定，加甲醇溶解，并定溶至１０ｍＬ量瓶中，
作为对照品溶液，质量浓度为０．８０ｍｇ·ｍＬ－１。
２．２．３　供试品溶液的制备　取草龙药材粗粉约１ｇ，
精密称定，置于５０ｍＬ量瓶中，精密加入蒸馏水２５
ｍＬ，称定质量，超声提取（功率２５０Ｗ，频率５０ｋＨｚ）
３０ｍｉｎ，放冷，再称定质量，用蒸馏水补足损失的质
量，摇匀，滤过，取续滤液即得。
２．２．４　线性关系考察　在２．２．１项下色谱条件下，
分别精密吸取对照品溶液０．５，１．０，２．０，２．５和３．０
μＬ进行测定，以对照品进样量（μｇ）为横坐标、对应
峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Ｙ＝
２　３８８．１　Ｘ＋２５．７９７（ｒ＝０．９９９　９），结果表明，没食子酸
进样量在０．４～２．４μｇ范围内与峰面积呈良好线性关系。
２．２．５　精密度实验　精密吸取对照品溶液２μＬ
（０．８０ｍｇ·ｍＬ－１），注入液相色谱仪，连续进样５次，
测定峰面积，平均值３　８５２．５５，ＲＳＤ为０．９８％（ｎ＝
５），表明精密度良好。
２．２．６　稳定性实验　将供试品溶液常温保存，分别
在０，４，８，１６和２４ｈ精密吸取５μＬ，注入高效液相色
谱仪中进行测定。结果没食子酸含量分别为３．１４，
３．０４，３．０７，３．０６和３．１６ｍｇ·ｇ－１，平均含量为３．０９
ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ 为２．０８％（ｎ＝５）。说明供试品在
２４ｈ内稳定性良好。
２．２．７　重复性实验　取同一批草龙药材，按２．２．３项
下的方法制备５份供试品溶液，按２．２．１项下色谱条
件测定，结果没食子酸含量分别为３．１４，３．１０，３．１１，
３．０２和３．０６ｍｇ·ｇ－１，平均含量为３．０９ｍｇ·ｇ－１，
ＲＳＤ为１．５１％（ｎ＝５）。
２．２．８　加样回收率实验　取已知含量的草龙药材粗
粉０．５ｇ，共６份，精密称定，置于具塞锥形瓶中，分别
加入没食子酸对照品适量，按供试品溶液制备方法制
备，按２．２．１项下色谱条件测定含量，计算加样回收
率。结果见表１。平均回收率为９８．３６％，ＲＳＤ 为
２．２８％。
表１　回收率实验结果
编号
样品量
／ｇ
加入量
／ｍｇ
加样回
收率／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
１　 ０．５２４　７　 ３．０　 ９５．２８
２　 ０．５０９　９　 ２．７　 ９７．０５
３　 ０．５２８　８　 ３．４　 １０２．０２　 ９８．３６　 ２．２８
４　 ０．５０４　７　 ２．９　 ９８．８７
５　 ０．５０３　３　 ３．１　 ９８．８３
６　 ０．５０８　１　 ３．２　 ９８．１１
２．２．９　样品测定　取３份草龙药材粗粉各１ｇ，精密
称定，按２．２．３项下方法制备供试品溶液，滤过，分别
取续滤液５μＬ进样，用峰面积按外标法计算，没食子
酸的平均含量为３．１５ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ为２．９５％（ｎ＝
３）。色谱图见图１。
图１　ＨＰＬＣ图
Ａ．没食子酸对照品；Ｂ．草龙药材；１．没食子酸
３　讨论
已有文献报道，用高效液相色谱法测定没食子酸
的含量［４］，使用的流动相系统比较多［５－７］。本实验通
过比较，以水、甲醇作为溶剂和超声提取的测定结果，
最终选择以水作为溶剂，采用超声提取法制备草龙供
试品，以乙腈－磷酸水溶液、水－二甲基甲酰胺－冰醋酸、
乙腈－水为流动相进行分离。实验结果表明，以乙腈－
０．５ｍＬ·Ｌ－１磷酸水溶液（５∶９５）为流动相，测定草龙
中的没食子酸的含量，分离效果较好，保留时间适宜。
本实验所采用方法快速、准确、灵敏度高、重复性
好，对草龙的质量进行了薄层鉴别和含量测定，对草
龙药材的品质评价和质量控制具有指导意义。
参考文献：
［１］　中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志：第二
分册：第５３卷［Ｍ］．北京：科学出版社，２０００：３５．
６３２ 西北药学杂志　２０１４年５月　第２９卷　第３期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
［２］　韦建华，卢汝梅，周媛媛．草龙化学成分的研究［Ｊ］．时
珍国医国药，２０１１，２２（２）：３１９－３２１．
［３］　韦建华，卢汝梅，周媛媛．草龙提取物及化学成分的抗
菌活性研究［Ｊ］．时珍国医国药，２０１１，２２（６）：１４４９－
１４５０．
［４］　汗克孜·吐尔逊，迪力努尔·艾合买提．ＨＰＬＣ法测定
血宁安吉把尔糖浆没食子酸含量［Ｊ］．西北药学杂志，
２０１３，２８（１）：３８－３９．
［５］　尹海波，何静，王冰，等．东北８种老鹤草没食子酸含
量比较［Ｊ］．中药材，２００７，３０（６）：６３７－６３８．
［６］　张静，刘文翔，韩艳婷，等．ＨＰＬＣ法测定银黄口服液中
绿原酸、黄芩苷和木犀草苷的含量［Ｊ］．西北药学杂志，
２０１１，２６（４）：２３７－２３９．
［７］　何依玲，李晓誉．高效液相色谱法测定铁苋菜中没食子
酸含量［Ｊ］．中国药业，２００７，１６（１１）：１８－１９．
（收稿日期：２０１３－１１－０８）
响应曲面法优化超声提取芒果叶中芒果苷的工艺研究
张　青，王志祥＊，宋立丹，乐　龙（中国药科大学制药工程教研室，南京　２１０００９）
摘要：目的　优选芒果叶中的芒果苷的超声提取工艺。方法　选择液料比、超声功率、提取温度和提取时间为自变量，以芒果苷
的提取率为响应值，利用响应曲面法分析优选最佳提取工艺。结果　最佳工艺条件为：液料比５０ｍＬ·ｇ－１，超声功率４３８Ｗ，提
取温度４６℃，提取时间３０ｍｉｎ。在此条件下，芒果苷提取率为４．０４％。结论　优选的工艺稳定、可行。
关键词：芒果苷；响应曲面法；超声提取
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０３．００７
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０３－０２３７－０５
Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍａｎｇｉｆｅｒｉｎ　ｆｒｏｍ　ｍａｎｇｏ　ｌｅａｖｅｓ
ｗｉｔｈ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
ＺＨＡＮＧ　Ｑｉｎｇ，ＷＡＮＧ　Ｚｈｉｘｉａｎｇ＊，ＳＯＮＧ　Ｌｉｄａｎ，ＹＵＥ　Ｌｏｎｇ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１０００９，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍａｎｇｉｆｅｒｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｍａｎｇｏ　ｌｅａｖｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐａ－
ｒａｍｅｔｅｒｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｓｏｌｖｅｎｔ／ｓａｍｐｌｅ　ｒａｔｉｏ，ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ　ｐｏｗｅｒ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ，ｏｎ　ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　ｍａｎｇｉｆｅｒｉｎ
ｗｅｒｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｗｉｔｈ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ａｓ　ｆｏｌｏｗｓ：ｓｏｌｖｅｎｔ／ｓａｍｐｌｅ　ｒａ－
ｔｉｏ　５０ｍＬ·ｇ－１，ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ　ｐｏｗｅｒ　４３８Ｗ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　４６℃ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　３０ｍｉｎ．Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｃｏｎｄｉ－
ｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｍａｎｇｉｆｅｒｉｎ　ｗａｓ　４．０４％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ａｒｅ　ｓｔａｂｌｅ　ａｎｄ　ｐｒａｃｔｉｃａｂｌｅ　ｉｎ　ｍａｎ－
ｕｆａｃｔｕｒｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｍａｎｇｉｆｅｒｉｎ；ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ；ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
作者简介：张青，女，硕士研究生
＊通信作者：王志祥，男，教授，博士生导师
　　芒果叶为漆树科植物芒果Ｍａｎｇｉｆｅｒａ　ｉｎｄｉｃａ　Ｌ．
的叶，芒果叶的药理作用主要有平喘、止咳、祛痰、免
疫、抗炎、镇痛、保肝利胆、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等［１］。
芒果苷又名芒果素、知母宁，是芒果叶的主要活性成
分，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、退热、镇痛、抗寄生虫、
神经保护等作用［２］。超声波产生的空化效应、机械效
应、热效应以及其他次级效应能够在不改变有效成分
结构的基础上，缩短提取时间，节约提取溶剂，提高提
取率［３－４］。本文采用超声波法提取芒果叶中的芒果
苷，在单因素实验的基础上采用Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ响应
曲面法进行工艺优化，利用 Ｄｅｓｉｇｎ－Ｅｘｐｅｒｔ８．０．５．０
软件进行数据拟合，得出超声提取芒果叶中的芒果苷
的最佳优化工艺参数。
１　仪器与材料
１．１　仪器　ＤＣＴＺ－２０００型三频多用途恒温超声波
提取机（北京弘祥隆生物技术开发有限公司）；
ＦＷ１００高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公
司）；ＢＴ２５Ｓ型分析天平（北京赛多利斯仪器系统有
限公司）；ＬＣ－１０ＡＴｖｐ高效液相色谱仪（日本岛津公
司）。
１．２　材料　芒果叶购于广东省广州市；芒果苷对照
品（批号：ＭＵＳＴ－１１１１０２０１）购于中国标准品物质
网；甲醇（色谱纯，江苏汉邦科技有限公司）；乙醇（南
京化学试剂有限公司）。
２　实验方法
２．１　芒果苷样品的提取　将已干燥的芒果叶粉碎，
过１０～１２０目筛，每次称取２ｇ粉末放于超声提取机
的反应釜中，再加入一定量的乙醇溶液，超声提取后，
减压抽滤，量取滤液的体积，精确移取１００μＬ滤液于
７３２西北药学杂志　２０１４年５月　第２９卷　第３期