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超声提取素馨花总环烯醚萜苷的单因素实验研究



全 文 :承 德 医 学 院 学 报
JOURNAL OF CHENGDE MEDICAL COLLEGE
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Vol.30 No.1 2013
学生园地
超声提取素馨花总环烯醚萜苷的单因素实验研究
杜乾坤1,刘东海2,杨缓缓1,李文宁1,郝 婷2
(1.承德医学院2009级中药学系,河北承德 067000;2.指导教师)
【关键词】素馨花;总环烯醚萜苷;超声提取
【中图分类号】R284 【文献标识码】A 【文章编号】1004-6879(2013)01-0075-02
素馨花药材又名耶悉茗花,为木犀科茉莉属植物素馨
花(Jasminum officinale L.var. grandiflorum) 的干燥花蕾,
具有疏肝解郁、行气止痛之功效,在我国民间用于治疗消化
不良、十二指肠球部溃疡及慢性肝炎、肝硬化等症[1]。素馨花
主要化学成分为环烯醚萜苷类、黄酮类和三萜皂苷类化合
物[2-3],其中环烯醚萜苷类化合物主要为橄榄苦苷,且具有抗
HBV活性[4]。本研究以素馨花总环烯醚萜苷含量为考察指
标,用紫外分光光度法进行含量测定,考察素馨花总环烯醚
萜苷超声提取工艺中的单因素及水平,为正交实验法优选素
馨花总环烯醚萜苷的超声提取工艺提供实验依据,为素馨花
中环烯醚萜苷类化学成分的进一步分离纯化奠定基础。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药 SP-752型紫外分光光度计(上海光谱仪
器有限公司);电子分析天平(瑞士梅特勒AG-245型);RE-
52AA旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);CHRIST实验室
型冷冻干燥机(德国MARTIN CHRIST); 素馨花(亳州药材
交易中心,军事医学科学院放射与辐射医学研究所药物化
学研究室副研究员、生药学博士李彬鉴定);橄榄苦苷对照
品(实验室自制,纯度99.5%);试剂均为分析纯。
1.2 方法[5]
1.2.1 标准曲线制定:取橄榄苦苷对照品5.00mg,置100ml
容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成每1ml含
0.0500mg的溶液,作为橄榄苦苷对照品溶液。分别精密吸
取对照品溶液2、4、6、8、10ml,置25ml容量瓶中,加甲醇稀释
至刻度,摇匀,在232nm波长处用紫外分光光度计测定吸收
度。得回归方程:A=0.0289,C-0.0049,R2=0.9998。
1.2.2 样品测定:五个水平的总环烯醚萜苷含量测定均
采用紫外分光光度计测定。取各个水平所得的干浸膏各
2.00mg,置50ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,制成
每1ml含0.0400mg的溶液,作为供试液。在232nm波长处用
紫外分光光度计测定吸收度,用标准曲线计算出供试液中
的总环烯醚萜苷的浓度C1,再用公式:总环烯醚萜苷收率(按
药材计算)(%)= (C1/0.0400×M干浸膏)/2.00×100%, 计算出
总环烯醚萜苷的收率。
2 结果
实验选用了提取时间、提取温度、料液比、提取次数以
及乙醇浓度等对总环烯醚萜苷提取率起主要影响的5个因
素,以素馨花总环烯醚萜苷的提取率为考察指标,进行了单
因素考察。
2.1 提取时间对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影响 固
定提取温度25℃,提取次数1次,料液比2:20,乙醇浓度30%,
考察不同的超声时间对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影
响,结果见图1。
图1 提取时间对总环烯醚萜苷提取率的影响
2.2 提取温度对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影响 固
定提取时间20min,提取次数1次,料液比2:20,乙醇浓度
30%,考察不同提取温度对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影
响,结果见图2。
图2 提取温度对总环烯醚萜苷提取率的影响
2.3 料液比对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影响 固定
提取时间20min,提取温度25℃,提取次数1次,乙醇浓度
30%,考察不同料液比对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影
响,结果见图3。
图3 料液比对总环烯醚萜苷提取率的影响
DOI:10.15921/j.cnki.cyxb.2013.01.012
承 德 医 学 院 学 报
JOURNAL OF CHENGDE MEDICAL COLLEGE
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Vol.30 No.1 2013
速和强烈的空化效应、搅拌作用,破坏植物药材的细胞,使
溶剂能渗透到药材细胞中,加速药材中有效成分的浸出提
取。与传统提取工艺相比,超声波提取具有时间短、产率高、
不需加热(不破坏有效成分)、适应性广、提取的药液杂质少,
有效成份易于分离、纯化等优点。超声提取是目前研究中药
有效成分时优先选择的提取工艺之一。
前期工作中,我们考察了素馨花中总环烯醚萜苷的水
冷浸、水煎煮、醇冷浸、醇回流等传统提取工艺[6]。本实验通
过单因素试验对素馨花中总环烯醚萜苷超声提取的5种影
响因素进行了优化。比较5种影响因素所得结果,温度对提
取率影响最小,可以忽略;乙醇浓度、提取时间、提取次数、
料液比等对提取率均有显著影响。相关研究结果可为正交
实验法优选素馨花总环烯醚萜苷的超声提取工艺提供实验
依据。
【参考文献】
南京中医药大学.中药大辞典[M]. 第二版.上海:上海科
学技术出版社,2006.2476
赵桂琴,夏晶晶,董俊兴.素馨花糖苷类化学成分研究[J].
药学学报,2007,42(10):1066-1069.
赵桂琴,董俊兴.素馨花三萜皂苷类化学成分研究[J]. 中
国中药杂志,2008,33(1):38-42.
Zhao GQ, Yin ZF,Dong JX. Antiviral effi cacy against hepatitis B
virus replication of oleuropein isolated from Jaminum offi cinale
L.var.grandiflorum[J].Journal of Ethnopharmacology,2009,125(2):
265-268.
陈文珠,郭伟忠,林茵.栀子药材提取工艺的优化[J]. 井冈
山学院(自然科学),2008,29(6):75-77.
郝婷,赵桂琴,张树峰.素馨花中总环烯醚萜苷提取工艺
的研究[J].时针国医国药,2011,26(6):1353-1355.
(收稿日期:2012-06-13)
[1]
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[4]
[5]
[6]
雷公藤内酯醇对AD细胞模型核因子κB表达的影响
方 圆1,胡晨阳2,王 迪3,李子平4,孙逸达4,王会玲5
(1. 承德医学院中医系2009 级,河北承德 067000;2. 承德医学院基础部2010 级;3. 承德医学院临床学院2009
级;4. 承德医学院心理系2011 级;5. 指导教师)
【关键词】阿尔茨海默病;雷公藤内酯醇;小胶质细胞;核因子κB
【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】1004-6879(2013)01-0076-03
阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD) 是一种以
记忆减退、认知障碍、人格改变为临床特征的中老年中枢
神经系统退变性疾病,发病机制至今尚未完全阐明。β-
淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ) 沉积激活胶质细
胞引发脑内炎症反应在AD的发生发展中扮演着重要角
色,而抑制胶质细胞活化的药物具有神经保护作用。雷公
藤内酯醇(T10) 是从雷公藤中提取的小分子单体活性成
分,主要药理活性为抗炎和免疫抑制。本研究观察了Aβ
作用后,小胶质细胞核因子(nuclear factor,NF-κB) 表
达的变化,并应用T10 进行干预,以进一步阐明T10 的作
用机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药物与试剂: T10 由北京大学药学院屠鹏飞教
2.4 提取次数对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影响 固
定提取时间20min,提取温度25℃,料液比2:20,乙醇浓度
30%,考察不同提取温度对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影
响,结果见图4。
图4 提取次数对总环烯醚萜苷提取率的影响
2.5 乙醇浓度对素馨花总环烯醚萜苷提取率的影响 固
定提取时间20min,提取温度25℃,提取次数1次,料液比
2:20,考察不同提取温度对素馨花总环烯醚萜苷提取率的
影响,结果见图5。
图5 乙醇浓度对总环烯醚萜苷提取率的影响
3 讨论
超声提取的基本原理是利用超声波产生强烈振荡、高