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素馨花的显微与TLC鉴别研究



全 文 :第19卷 第9期
Vol.19 No.9
2013年 9月
September.2013Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
素馨花的显微与TLC鉴别研究
王凤云,王小燕,潘利明
(广东药学院中药学院,广东 广州 510006)
[摘要] 目的:研究并建立素馨花药材的显微与薄层色谱鉴定方法。方法:对其进行组织显微及理化鉴别研究,其中显微
特征的研究采用粉末装片的方法,理化特征的研究采用薄层色谱鉴别方法。结果:粉末的显微鉴别中花粉粒为浅黄色且较
多,柱头细胞具有一定的鉴别特征;对其不同极性化合物成分建立了薄层色谱鉴别方法,斑点清晰。结论:该研究补充了素馨
花在显微鉴别及薄层色谱鉴别的空白,可为其质量标准的建立以及临床应用、科研开发提供参考依据。
[关键词] 素馨花;显微鉴定;薄层色谱鉴别
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X(2013)09-0074-02
Study on the Identification of Flower Jasminum by Microscopy and TLC
WANG Feng-yun, WANG Xiao-yan, PAN Li-ming
(Guangdong Pharmaceutical University, Guangdong Guangzhou 510006, China)
[Abstract] Objective: To study and establish an effective method for the identification of flower Jasminum by microscopy
and TLC. Methods: The flower Jasminum was studied on microstructure and physical and chemical identification of organiza-
tional. The microscope characteristic was examined according to powder method of loading film; TLC was applied for the phys-
ical and chemical characteristics of the study methods. Results: Microscopic identification of the powder is light yellow pollen
and more, with a certain stigma to identify cell characteristics; TLC identification of its compound was established, with clear
spots. Conclusion: This study filles the gap on microscopy and TLC identification of Jasminum complements and can provide
reference for establishment of quality standard, clinical application and scientific research and development.
[Key words] Jasminum; Microscopic identification; TLC
素馨花为木犀花科茉莉属植物素馨Jasminum offlcinale
Linn. Vargrardiflorum (Linn) Kobuski的干燥花蕾或已开放的
花,又名君召针,其性味甘,平,归肝经。本品性平,无毒,生于
石灰岩山地,有疏肝解郁、行气止痛之功效,在我国民间用于
治疗消化不良、十二指肠球部溃疡及慢性肝炎、肝硬化等症[1-3]。
近年来有对其化学成分的研究,但其它方面的研究报道较少。
2012年汤小明等[4]对素馨花药材的性状和显微进行了鉴别,
除此之外国内没有关于其质量标准及鉴定方法的研究。为了
更好地保证其药材的安全、有效、质量均衡,本研究拟对其进
行组织显微及理化鉴别研究,完善其质量标准,为其开发利
用奠定基础。
1 材料与仪器
本实验所用材料经过广东药学院中药学院刘基柱副教
授鉴定为素馨花Jasminum grandiflorum Linn;硅胶G(青岛海
洋化工有限公司制造HG/T2354-92);甲醇、乙醇、甲酸乙酯、
乙酸乙酯、丙酮(天津市富宇精细化工有限公司)、甲酸、石油
醚、三氯甲烷(天津市百世化工有限公司)均为分析纯。水合
氯醛、稀甘油现配即用。SK250LH超声波清洁器(超声功率为
100 W,上海科导超声仪器有限公司);WD―9403C型紫外分
析仪(北京市六一仪器厂);YOKO-PN电动喷雾器(武汉药科
新科技开发有限公司);HHS型电热恒温水浴锅(上海博迅实
业有限公司医疗设备厂);DYG―9143B-2电烘箱(上海福玛
实验设备有限公司);Nikon YS100生物显微镜(日本尼康公
司);HCCP11B·5架盘药物天平(北京市宣武区天平厂),以及
显微实验常用器皿、培养皿。
2 显微鉴别
粉末淡黄色。花粉粒众多,类圆球形或长球形,直径31-
41 μm,表面有网状雕纹,具3孔沟,明显,外壁厚3-5 μm;柱头
顶端细胞多见,类长方形,直径19-38 μm;螺纹导管多见,直
径8-12 μm;表皮细胞呈不规则方形或多角形,大小不一。(见
图1)
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2013.09.048
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2013年 9月
September.2013
图1 素馨花粉末特征图
(1-花粉粒; 2-柱头细胞; 3-导管; 4-表皮细胞)
3 薄层色谱鉴别
3.1 石油醚部位 取本品5个批次药材5 g,加石油醚50 mL,
浸渍3 h,超声处理15 min,抽滤,药渣用石油醚10 mL洗涤,药
渣备用,合并抽滤液,减压回收溶剂,残渣用5 mL石油醚使溶
解。吸取上述溶液各5 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以
石油醚:乙酸乙酯(5∶1)为展开剂,展开缸饱和15 min,展开,取
出,晾干,喷以10 %硫酸乙醇液,在105 ℃加热至斑点显色清
晰。分别置日光及紫外灯(365 nm)下检视。日光下分别显相
同颜色的斑点;紫外光灯(365 nm)下,分别显相同颜色的斑
点。(见图2-3)
图2 素馨花中石油醚部位日光下检视TLC图谱
(1、2、3、4、5为5个批次的素馨花药材)
图3 素馨花中石油醚部位365 nm紫外灯检视TLC图谱
(1、2、3、4、5为5个批次的素馨花药材)
3.2 氯仿部位 取备用药渣,用70 %乙醇加热回流提取2次,
每次50 mL,第1次1 h,第2次0.5 h,合并乙醇提取液,减压回收
溶剂至无醇味,加石油醚萃取3次,每次20 mL,水层加氯仿萃
取3次,每次20 mL,水层备用,合并3次氯仿萃取液,用水洗涤
2次,每次20 mL,减压回收溶剂,残渣加氯仿5 mL使溶解。吸
取上述溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿∶
丙酮∶甲酸乙酯∶甲酸(5∶2.5∶3.5∶0.2)为第1次展开剂,预饱和
15 min,全展开,取出,晾干,再以氯仿∶丙酮∶甲酸乙酯∶甲酸(5∶
3.5∶4∶0.2)为第2次展开剂,预饱和15 min,半展,取出,晾干,喷
以5 %磷钼酸溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰。置日光下
检视,分别在相同位置上显相同颜色的斑点。(见图4)
图4 素馨花中氯仿部位TLC图谱
(1、2、3、4、5为5个批次的素馨花药材)
3.3 乙酸乙酯部位 取备用水层,加乙酸乙酯萃取3次,每次
20 mL,合并3次乙酸乙酯液,减压回收溶剂,残渣加95 %乙醇
5 mL使溶解。吸取上述溶液各5 μL,分别点于同一硅胶G薄层
板上,以氯仿∶甲酸乙酯∶甲醇∶甲酸(5∶1.2∶2∶0.8)为展开剂,展
开,取出,晾干,喷以10 %硫酸乙醇液溶液,在105 ℃加热至斑
点显色清晰。置日光下检视,显相同颜色的斑点。(见图5)
图5 素馨花中乙酸乙酯部位TLC图谱
(1、2、3、4、5为5个批次的素馨花药材)
4 讨 论
显微鉴别发现素馨花的花粉粒浅黄色且较多,这是多数
花类植物的显微特征[5]。其次,发现其粉末特征中含有柱头细
胞,且数量不少,亦可作为素馨花显微鉴定的一大特征。
本文的薄层鉴别首先采用石油醚提取其中低极性成分
进行鉴别,有几个明显斑点,其类别有待于验证。药渣用乙醇
提取后先用石油醚萃取,去除杂质后再进行氯仿部位的分离
鉴别,若没有用石油醚萃取,在相同条件下的薄层斑点成点
性差,且拖尾现象严重。所以用乙醇提取后用石油醚萃取,分
离效果好,斑点匀称。在第1次展开中以氯仿∶丙酮∶甲酸乙酯∶
甲酸(5∶2.5∶3.5∶0.2)为展开剂展开,下部斑点分离不是很好,
尝试用二次展开方法,实验效果好,斑点匀称。对于极性相对
较高的乙酸乙酯部位,实验尝试用多种方法进行展开,但薄
层斑点的分离效果还是有待完善。
根据报道,素馨花主要含三萜皂苷类[6]、环烯醚萜苷类[7-8]
和黄酮苷[9-10]类化合物成分,近来又有人从中分离到几个酚类
化合物。本文建立的薄层色谱鉴别方法分别针对不同极性成
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分,可鉴别斑点较多,后续研究将建立素馨花药材的TCL指纹
图谱,并以标准品进行对照。
本文通过对素馨花的显微鉴别和薄层鉴别研究,补充和
完善了素馨花的鉴别特征,补充了素馨花在显微鉴别及薄层
色谱鉴别的空白,为完善其质量标准,以及临床应用、科研开
发提供了依据。
参考文献
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[6] 杜乾坤,刘东海,杨缓缓,等.超声提取素馨花总环烯醚萜苷
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[8] 赵桂琴,毛晓霞,苏占辉.素馨花中黄酮苷类化学成分研究
[J].中国新药杂志,2012,21(7):791-794
(收稿日期:2013-03-15 编辑:李海洋)
河源产五指毛桃TLC鉴别和HPLC指纹图谱研究
陈慕媛,罗 骞,席 萍,蔡庆群,黄月纯
(广州中医药大学第一附属医院,广东 广州 510405)
[摘要] 目的:建立快速、有效的评价河源产五指毛桃质量的方法。方法:采用TLC法,以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲
酸(20∶4∶5∶0.7)为展开剂,补骨脂素对照品,紫外灯(365 nm)鉴别河源产五指毛桃药材中补骨脂素;采用HPLC法,Zorbax E-
clipse XDB C18为色谱柱,流动相为甲醇-水(梯度洗脱),检测波长为246 nm;柱温为30 ℃;流速为1.0 mL·min-1。结果:薄层色谱
图斑点清晰,分离效果好。高效液相色谱指纹图谱共标示13个色谱峰,9批样品的相似度在0.969-0.996之间。结论:方法简便,
重复性好,可用于五指毛桃药材质量的鉴别。
[关键词] 河源五指毛桃;补骨脂素;TLC;HPLC;指纹图谱
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X(2013)09-0076-03
Study on Radix Fici from Heyuan by Thin-layer Chromatography and HPLC Fingerprint Analysis
CHEN Mu-yuan, LUO Qian, XI Ping, CAI Qing-qun, HUANG Yue-chun
(The First Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM, Guangdong Guangzhou 510405, China)
[Abstract] Objective: To establish the rapid and effective evaluable methods on Radix Fici from Heyuan by thin-layer
chromatography and HPLC fingerprint analysis. Methods: TLC method was adopted with psoralen for reference standards, and
developer was n-hexane-chloroform-ethyl acetate-formic acid (20∶4∶5∶0.7). HPLC was used with the Zorbax Esclipe XDB C18
column; the acetonitrile-water (gradient elution) was employed as a mobile phase; detection wavelength was 246 nm; column
temperature was 30 ℃ , and flow rate was 1.0 mL·min-1. Results: The spots were distinctive and well separated on TLC. 13
Common peaks were separated on HPLC fingerprint in samples. The similarities of 9 batches of samples were between 0.969-
0.996. Conclusion: These methods are reliable and accurate, which are valuable to identify the quality of Heyuan Radix Fici.
[Key Words] Radix Fici from Heyuan ; Psoralen; TLC; HPLC; Fingerprint
五指毛桃(radix fici)为桑科植物粗叶榕(ficus hirta vahl.) 的干燥根。具有健脾补肺、行气利湿、舒筋活络之功,岭南地
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