全 文 ：培养基种类
培养基
编号
基本成分
附加成分
6-BA∥mg/L NAA∥mg/L 香蕉∥g/L 马铃薯∥g/L 活性碳∥g/L 蔗糖∥g/L 琼脂∥g/L pH 值
诱导培养基 1# MS 0.5 0.1 - - - 20 5.8 5.8
2# MS 3.0 0.1 - - - 20 5.8 5.8
继代培养基 2# MS 3.0 0.1 - - - 20 5.8 5.8
3# 花宝 1 号 - - 25 25 1 20 5.8 5.8
促根培养基 4# MS 3.0 0.1 - - 1 20 5.8 5.8
5# 花宝 1 号 - - 50 50 1 20 5.8 5.8
注：花宝 1 号浓度为 30 g/L。
表 1 培养基种类与成分
培养基编号 外植体种类 培养 15 d 后 培养 30 d 后 培养 45 d 后
1# 叶柄基部 55%膨大 50%转化为丛生芽 95%转化为丛生芽
1# 叶片 无膨大，30%叶片边缘褐化 无膨大，80%叶片边缘褐化 全部褐化，死亡
2# 叶柄基部 65%膨大 60%转化为丛生芽 100%转化为丛生芽
2# 叶片 无膨大，33%叶片边缘褐化 无膨大，85%叶片边缘褐化 全部褐化，死亡
表 2 豆瓣绿外植体不定芽诱导培养情况
豆瓣绿组织培养配方筛选研究
汤 楷 郑运欢 黄茜莉 郭英铎
（广东省汕头市农业科学研究所，广东汕头 515000）
摘要 以豆瓣绿叶柄基部、叶片为外植体，采用组培快繁技术，研究了 6-BA 及各种添加物对豆瓣绿的植株诱导、不定芽分化及生根培
养的影响。结果表明：豆瓣绿的组织培养应选取叶柄基部为宜，诱导适宜培养基配方为：MS+6-BA 3.0 mg/L；芽继代增殖适宜培养基配方为：花
宝 1号 30 g/L+香蕉 25 g/L+马铃薯 25 g/L+活性炭 1 g/L；生根适宜培养基配方为：花宝 1号 30 g/L+香蕉 50 g/L+马铃薯 50 g/L+活性炭 1 g/L。
关键词 豆瓣绿；外植体；组织培养
中图分类号 Q813.1+2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）11-0171-02
豆瓣绿（Peperomia obtusifolia）又名豆瓣如意、四瓣金钗、
椒草、翡翠椒草，属胡椒科（Piperaceae）豆瓣绿属（Peperomia），
原产于西印度群岛、巴拿马、巴西和阿根廷等南美洲北部 [1-2]。
豆瓣绿是小型一年生或多年生常绿簇生草本植物，一般作
为盆栽装饰用，适用于室内观赏 [3-4]。药用可以止咳祛痰，祛
风除湿，外用可治跌打损伤、骨折。目前，豆瓣绿多用扦插和
分株的方法进行繁殖，但这些方法苗体整齐度较差，增殖系
数低，无法满足规模化生产的需要。国内目前正开始逐步重
视对胡椒科植物的组织培养工作并取得了一定的成绩，但
大部分还处于初步探索的阶段，有关胡椒科植物组织培养的
报道不多 [5-7]。笔者于 2010 年开始对胡椒科豆瓣绿属进行初
步研究，本试验以叶柄基部、叶片为外植体，对豆瓣绿的组
培快繁技术进行初步研究，以满足生产需要。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料：生长健壮、无病虫危害的豆瓣绿植株。供试
培养基：以 MS（诱导培养和继代培养）和花宝 1 号（继代培
养）作为基本培养基，试验使用的培养基成分见表 1。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的处理。以叶柄基部、叶片为外植体，将叶片、
叶柄用 75%的酒精擦拭数遍，叶片切成 1 cm2的方块，切取
叶柄基部约 0.5 cm2 的小段 ，再用 10% NaClO2 溶液消毒
收稿日期 2014-05-04
15 min，最后用无菌水冲洗 5～8遍。
1.2.2 芽诱导培养。以 MS 培养基为基础培养基。将处理好
的不同外植体分别接种于 1#、2#培养基中。每种培养基 15瓶，
每瓶接 1 个外植体。接种 1 周后置于培养温度为（25±2）℃、
光照时间为 12 h/d、光照强度为 800～1 000 lx 的培养室中培
养。分别在接种后 15、30、45 d 观察生长状况并进行记录。
1.2.3 继代培养。在无菌条件下，将诱导出来的细小芽点分
切成小块，分别接入 2#、3#培养基中进行继代培养，每瓶培
养基接 3～4团并均匀摆放。培养环境条件同上。
1.2.4 生根培养。取健壮的丛生苗，将其切成单苗，转入 4#、
5#中进行生根培养，每瓶接种 20 株。接种后置于培养温度
为（25±2）℃、光照时间为 12 h/d、光照强度为 2 000～3 000 lx
的培养室中培养。
1.2.5 出瓶。接种后置于光照强度为 5 000～6 000 lx 的大棚
中炼苗。经过炼苗，当根数达到 4~5 条、植株健壮时即可出
瓶 [8-9]。出瓶时，用镊子取出小苗，并用流水洗去培养基，移栽
至已灭菌的水苔中并浇透水。
2 结果与分析
2.1 不定芽的诱导
将不同外植体分别接入 1#、2#培养基，结果见表 2。从表
2 中可以看出接种 15 d 后，以叶柄基部为外植体在 1#、2#培
养基中已有部分膨大，而以叶片为外植体在 1#、2#培养基中
均无明显变化或轻微褐化；接种 30 d 后，以叶柄基部为外植
体 1#、2#培养基中均已出现细小芽点，而以叶片为外植体 1#、
2#培养基中均还未出芽且褐化较为严重；接种 45 d 后，培养
基 1#、2#中的以叶柄基部为外植体的均能长出细小芽点，其
中以 2#培养基的芽点较多，而以叶片为外植体的则已全部
褐化死亡，可见叶柄基部为豆瓣绿组织培养较好的外植体。
林业科学现代农业科技 2014年第 11期
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基质处理
成活率
%
开花时间∥d
平均（现蕾） 最早 最晚
竹炭新型颗粒基质 100 92 73 117
珍珠岩 100 97 78 122
陶粒 100 100 82 132
表 4 不同基质中四季桔的开花时间比较
基质处理
挂果时间∥d
平均 最早 最晚
竹炭新型颗粒基质 121 91 142
珍珠岩 128 94 148
陶粒 133 99 168
表 5 不同基质中四季桔的挂果时间比较
季桔中即便成活的，长势也极差，说明尽管纯竹炭有良好的
孔隙度与强大的吸附功能，但其作为主栽培基质并不适宜，
这与王伟龙等 [6]研究得出的竹炭添加过量会出现抑制植物
生长现象的结论相一致，但利用其加工后的竹炭新型颗粒
基质，则效果良好。50~100 目的竹炭颗粒作为基质时，苗木
死亡的速度最快，5~10 mm 颗粒的次之，而 3~5 mm 及 1~
3 mm 的相对缓慢。分析其原因，可能与竹炭呈较强碱性有
关，50~100 目的小颗粒，其竹炭中的 NaHCO3 经浇水迅速
溶于水，使基质很快呈强碱性，因而对植物组织的破坏也
就加速，而 5~10 mm 的颗粒竹炭，一方面由于颗粒太大不利
于基质保水，另一方面也不利于基质跟植物根系的充分接触。
而1~3 mm 与 3~5 mm 刚好介于这两者之间，因此植物组织
受损害的过程要相对长一些。
通过对生长指标的相关分析可以看出，使用新型竹炭
颗粒基质对比传统基质栽培时对植物的根系生长、开花、挂
果的能力均有提高，开花和挂果早晚直接影响到其商品价
值，开花和挂果期较早有助于占领市场，取得较好的经济收
益，可见竹炭新型颗粒基质在作为栽培基质上具有一定的
优势。
4 参考文献
[1] 曹欢玲，李文珠，张蔚.竹炭孔隙性状的探索[J].竹子研究汇刊，2011，30
（3）：33-36，48.
[2] 马嘉伟，胡杨勇，叶正钱，等.竹炭对红壤改良及青菜养分吸收、产量
和品质的影响[J].浙江农林大学学报，2013，30（5）：655-661.
[3] 沈信权，徐佳乐，沈建林，等 .添加竹炭对土壤肥力的影响[J].浙江林
业科技，2012，32（5）：9-12.
[4] 张东升，王戈，张新萍.竹炭利用综合评述 [J].世界竹藤通讯，2004，2
（1）：1-3.
[5] 傅秋华，张文标，钟泰林，等.竹炭对土壤性质和高羊茅生长的影响[J].
浙江林学院学报，2004，21（2）：159-163.
[6] 王伟龙，张文标，钟泰林，等 .竹炭对草本花卉生长的影响[J].世界竹
藤通讯，2005，3（1）：24-26.
（上接第 170页）
2.2 继代培养
接种 35 d 后观察，2#、3#培养基中的细小芽点均已分化
成苗（表 3）。其中以 3#为最多，但苗体较小、较弱，出现此种
现象可能是由于增殖过于旺盛，经过多次分瓶后植株可以
复壮。有时在经过多次继代增殖后，少部分幼苗会有根系长
出，出现此种现象可能与品种特性有关（图 1a）。
2.3 生根培养
将无根苗打散接种于 3#、4#培养基中，接种 60 d 后进行
调查，其生根及生长状况见表 4。
由表 4 可知，4#及 5#培养基都是适宜的生根壮苗培养
基。但 5#培养基中只使用的天然营养添加物而无需使用植
物激素，成本较低，且植株生长状况都比 4#培养基好，因此
5#培养基为适宜的生根培养基配方（图 1b）。
2.4 出瓶
经过炼苗，当根数达到 4~5 条、植株健壮时即可出瓶。
出瓶时，用镊子取出小苗，并用流水洗去培养基，移栽至已
灭菌的水苔中并浇透水。经过此方法，可使试管苗成活率达
到 100%。
3 结论
试验选用豆瓣绿的叶柄基部和叶片作为外植体，通过对
比发现豆瓣绿的组织培养材料应选取叶柄基部为宜，且芽诱
导阶段适宜培养基配方为：MS+6-BA 3.0 mg/L；在继代增殖
阶段，其适宜培养基配方为：花宝 1 号 30 g/L+香蕉 25 g/L+
马铃薯 25 g/L+活性炭 1 g/L；生根壮苗阶段适宜培养基配方
为：花宝 1号 30 g/L+香蕉 50 g/L+马铃薯 50 g/L+活性炭 1 g/L。
试验结果表明，在继代增殖阶段和生根壮苗阶段均采用天
然营养添加物而不添加植物激素，既节约了生产成本 ，又
缩短了成苗时间，为豆瓣绿的快速繁殖提供了新的途径。
4 参考文献
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讯，2002，38（1）：45.
培养基编号 增殖倍数∥倍 苗体状况
2# 15 叶小，苗较弱，增殖率高
3# 30 叶小，苗弱，增殖率极高
表 3 豆瓣绿继代幼苗培养情况
培养基编号 生根率∥% 生根数∥条 根系长势 苗体长势
4# 99 2~3 较幼、较长 较好
5# 100 3~5 较粗、长 好
表 4 豆瓣绿无根苗生根培养及生长情况
a b
图 1 豆瓣绿增殖苗（a）和生根苗（b）
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