全 文 ：　　 GD14-16为颅面部各组织器官中的未分化间充质细胞由
聚集、增殖向细胞分化的转变期 ,在此期间 ,未分化细胞向麦
克尔软骨细胞以及舌肌细胞分化 . 本实验结果表明 , GD14,
在未分化的间充质细胞中 BM P2, 4 m RNA都有表达 ,但只有
BMP4 m RN A在上皮细胞中表达 .当进入 GD15,分化的细胞
中基本都无 BM Ps mRN A的表达 . 例如 ,舌肌细胞中不表达
BMP2, 4 m RNA ,但未分化的舌肌前体细胞中仍有 BM P2, 4
的表达 . 表明一旦细胞完成发育 , BM Ps将不再起促分化作
用 .而在一些软骨形成区 (如鼻中隔、麦克尔软骨 ) ,即使未分
化间充质细胞向软骨细胞的分化已经完成 ,其中仍有 BM P2,
4的强表达 ,因此此时起使用的可能不仅是 BMPs的信号传
递作用 ,其诱骨活性也开始发挥作用 . 因此 , BM P2主要在发
育早期起作用 ,而 BMP4在早期和晚期都起作用 .
参考文献:
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编辑　王小仲
· 经验交流· 　文章编号: 1000-2790( 2001) 07-0671-01
重型颅脑损伤后高血糖 82例
刘　鑫 ,李茂林 ,胡继文 ,王祝峰 ,马　勇
(武警陕西总队医院神经外科 ,陕西 西安 710054)
关键词: 重型颅脑损伤 ;血糖 ;治疗
中图号: R683. 5　　　文献标识码: E
1　临床资料　 1996-08 /1999-08我科共收治重型颅脑损伤患
者 82(男 58,女 24)例 ,年龄 7～ 81(平均 32. 4)岁 . 本组患者
伤前均无糖尿病史 . GCS评分均 < 8分 . 其中 6～ 8分的 42
例 ; 3～ 5分的 28例 ; 3分以下的 12例 . 发病至入院时间均在
24 h以内 . 应用美国产“ One Touch”血糖仪每日在床旁测空
腹血糖 1次 [1] ,连续测 7 d. 对于空腹血糖 > 10 mmo l· L者 ,
给予低糖饮食 ,不用激素 ,少量应用甘露醇 ,适当应用胰岛素
及乳酸林格液等治疗 . 在 82例中 ,首次测血糖值> 10 mmol
· L[2]的 49例 ,最高值为 19. 4 mmo l· L;经上述治疗 ,结果按
Jennet t和 Boncl颅脑伤治疗预后判断标准判定良好 27例 ,中
残 8例 ,植物人状态存活 3例 ,死亡 11例 ;死亡率 22. 4% . 血
糖 < 10 mmo l· L- 1的 33例 ;经上述治疗 ,结果:良好 20例 ,中
残 6例 ,死亡 7人例 ,死亡率为 21. 2% (P < 0. 05) .
收稿日期: 2001-01-02;　修回日期: 2001-02-20
作者简介:刘　鑫 ( 1972-) ,男 (汉族 ) ,陕西省武功县人 . 住院医师 .
Tel. ( 029) 2245817
2　讨论　颅脑损伤的发生率为 36% ～ 40% ,其中 20%为重
型颅脑损伤 [3] . 重型颅脑损伤的死亡率在 35%左右 . 特重伤
老龄组死亡率高达 60%以上 [4] ,国外资料报道重型颅脑损伤
死亡率为 30% ～ 50% . 本组通过上述床旁监测血糖并对血糖
值> 10 mmo l· L- 1者进行降糖治疗 [5 ] ,明显降低了重型颅脑
损伤的死亡率 . 重型颅脑损伤血糖的变化已经得到广泛重
视 ,如能把监测血糖并行降糖治疗作为重型颅脑损伤治疗中
的一项常规方法笔者认为有一定意义 ,且床旁监测血糖具有
方便、及时、准确等优点 [6] .
参考文献:
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Ch in Neurosurg ) , 1998; 14( 1): 1.
编辑　井晓梅
· 经验交流· 　文章编号: 1000-2790( 2001) 07-0671-02
九节龙皂甙对 8株人癌细胞的抑制作用
梁克明 1 ,王四旺 2 ,王晓娟 2　 (第四军医大学: 1西京医院
收稿日期: 1999-06-16;　修回日期: 1999-10-22
作者简介: 梁克明 ( 1969-) ,男 (汉族 ) ,吉林省通化市人 . 硕士研究生
(导师王四旺 ) . Tel. ( 029) 3374018
放疗中心 ,药物研究所 ,陕西 西安 710033)
关键词: M T T;九节龙皂甙 ;药物敏感性 ;人癌细胞
中图号: R979. 1　　　文献标识码: A
0　引言　川产九节龙 (Ardisea pusilla A. PC)系紫金牛科紫
金牛属植物的全草 ,九节龙皂甙 ( Ardipusilloside)是从该全草
中分离出的 C53 H86O22. 2 H2O,经初步药理试验表明具有提高
免疫功能的作用 [1] . 我们采用 M TT法观察九节龙皂甙对 8
671第四军医大学学报 ( J Fourth M il Med Univ ) 2001; 22( 7)
株人癌细胞的细胞毒作用 .
1　材料和方法
1. 1　材料　肝癌 ( SMM C-7721) ,本校西京医院中医科提供 ;
肝癌 ( HCC-9204) ,本校病理科提供 ;胃癌 ( SGC-7901) ,本校西
京医院消化内科提供 ;卵巢癌 ( HO-8910)本校西京医院妇产
科提供 ;宫颈癌 ( Hela )本校 403研究所提供 ;肺癌 ( A549)、食
管癌 ( Eca-109)、肾癌 ( GRC-1)本校实验动物研究中心提供 .
九节龙皂甙由本校药物研究所提纯 ,批号: 971017;丝裂霉素
( M MC)日本协和发酵工业株式会社生产 ,批号: 174AGF;
M T T ( SIGM A公司产品 ) . 两种药物终浓度均为: 50. 0 mg·
L- 1→ 25. 0 mg· L- 1→ 12. 5 mg· L- 1→ 6. 25 mg· L- 1→ 3. 13
mg· L- 1→ 1. 56 mg· L- 1.
1. 2　方法　将 8株人癌细胞制成单细胞悬液 ,接种于 96孔
平面培养板中 ,调正细胞数为 5× 104· m L- 1,每孔细胞悬液
100μL. 将 96孔板置于 37℃ , 50 m L· L- 1 CO2饱和温度的
二氧化碳培养箱培养 24 h,设实验 ,阴性对照及阳性对照孔 .
实验和阳性对照孔分别加入 50. 0 mg· L- 1 , 25. 0 mg· L- 1 ,
12. 5 mg· L- 1 , 6. 25 mg· L- 1 , 3. 13 mg· L- 1 , 1. 56 mg·
L- 1的九节龙皂甙及 M MC,阴性对照孔加入等量的培养液 ,
以不含细胞的 1640完全培养液为空白对照 ,每组 6个平行
孔 ,继续培养 72 h,去除培养液 ,加入 5 g· L- 1 M T T 20μL ,
继续培养 4 h,加入二甲基亚砜 ( DM SO ) 150μL /孔 ,并振荡待
紫蓝色结晶完全溶解 ,采用 DG-3022型酶标仪 (国营华东电
子管厂 )测各孔的吸光度值 (A490 nm ) ,按公式 (实验孔平均
A490 nm值 /阴性对照孔平均 A490 nm值 )× 100%计算 ,并以实验
药物浓度的对数为横坐标 ,细胞存活率为纵坐标绘制剂量效
应曲线 ,并求半数细胞抑制剂量值 ( IC50 ) .
统计学处理: 采用 SPLM软件方差分析 ,q检验 .
2　结果　对照孔光镜下见细胞贴壁生长 ,细胞界限清楚 ,核
分裂相明显 ,有伪足伸出 ;加药孔细胞生长缓慢 ,可见细胞皱
缩 ,分裂相减少或停止 ,胞质粗糙 ,死亡脱落细胞增加 . 人癌
细胞各细胞株对九节龙皂甙敏感性即 IC50 ( mg· L- 1 )分别
为: SMMC-7721 3. 74; HCC-9204 4. 53; A549 4. 31; SGC-7901
7. 09; HO-8910 3. 56; Hela 3. 43; Eca-109 6. 10; GRC-1 9. 36.
九节龙皂甙对 8株人癌细胞的 IC50≤ 9. 36 mg· L- 1 ,同时 ,随
药物浓度的增加 ,细胞存活率逐渐下降呈现剂量—效应依赖
关系 (P < 0. 01, 图 1) .
3　讨论　自 1983年 Mosman [3 ]发表 M T T法以来 ,许多实验
证明 [2- 4]M TT法是一种敏感、稳定、快速、简便、经济的方法 .
我们采用 M TT法观察了九节龙皂甙对 8种人癌细胞株的杀
伤作用 ,以 IC50为指标 ,发现 Hela对九节龙皂甙最敏感 ;而
GRC-1, SGC-7901, Eca-109敏感较差 ,这一结果恰好与临床
上化学治疗对肾癌、胃癌、食管癌大多疗效不佳极为相似 [5] .
癌细胞株存活率与九节龙皂甙的剂量、作用时间有密切关系 ,
剂量大 ,作用时间长 ,其存活率低 ,反之 ,则相反 . 8种人癌细
胞株 MM C处理 1 h, M MC≥ 12. 5 mg· L- 1组 ,光镜下可见癌
细胞呈散在碎片坏死 ,看不见完整的细胞结构 , MMC≤ 6. 25
mg· L- 1组 ,细胞皱缩不等 ;相同剂量和作用时间相同情况
下 ,九节龙皂甙处理组癌细胞变化不明显 ,而处理 24 h ,九节
龙皂甙组细胞出现皱缩 ,多呈圆形 ,胞质粗糙 ,死亡脱落细胞
增多 ;处理 72 h,九节龙皂甙≥ 25. 0 mg· L- 1与 MM C组细胞
存活率相比无差异 (P> 0. 05) . 表明 MM C具有较强细胞毒
作用 ,而九节龙皂甙直接作用癌细胞的细胞毒较低 . 至于九
节龙皂甙影响癌细胞的生长机制 ,还有待进一步研究 .
图 1　九节龙皂甙处理后人癌细胞存活率
◆: A594; ■: SGC-7901; ▲: SMM C-7721; ×: GRC-1; * : HO-
8910; ●: HCC-9204; + : Hela; - : Eca-109.
参考文献:
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编辑　王小仲
672 第四军医大学学报 ( J Four th M il Med Univ ) 2001; 22( 7)