全 文 ：8　金冬雁 ,黎孟枫主译 .分子克隆实验指南 .第二版 . 北京: 科学出版 社 , 1996. 880～ 897
鸭嘴花碱对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响
高春艳 ,聂珍贵 ,梁翠茵 ,王世全 ,王世渝
(首都医科大学顺义校区 ,北京　 101300)
摘　要　目的: 研究鸭嘴花碱对组胺和乙酰胆碱所致气管收缩的抑制作用。方法: 离体豚鼠气管条。结果: 鸭嘴花碱能
抑制氯化钾、乙酰胆碱、磷酸组胺所致气管平滑肌收缩 ,而且能使磷酸组胺、乙酰胆碱收缩气管平滑肌的量效曲线右移 ,并
抑制最大效应 ,其作用为剂量依赖性。结论: 鸭嘴花碱对气管平滑肌具有显著舒张作用。
关键词　鸭嘴花碱 ,氯化钾 ,组胺 ,乙酰胆碱
中图分类号: R965　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1006-5687( 2003) 06-0004-03
Effects of vasicine on construction of smooth muscle of isolated guinea pig trachea
Gao Ch unyan, Nie Zhengui, Liang Cuiyin, Wang Shiquan and Wang Shiyu
( Shunyi Branch o f Capital Univ ersity of Medical Sciences, Beijing 101300, China)
ABSTRACT Object: To study th e inhibito ry effect o f v asicine on histamine( His) , acety lcho line( Ach ) - induced constr uction
of isolated guinea pig trachea Methods: Smooth muscle o f isola ted guinea pig trachea were used. Results: Vasicine could
significantly inhibit the construction of isolated guinea pig trach ea induced by His, Ach and KCl. Vasicine shifted the dose
response curv es fo r Ach and His nonpara llelly to right and depressed their max imal r esponse in a does dependent manner.
Conclusion: Vasicine could significantly distend smoo th muscle of isola ted guinea pig trachea.
KEY WORDS va sicine, po tassium chlo ride ( KCl) , histamine, acety lcho line
　　鸭嘴花碱 ( Vasicine) ,是从新疆骆驼蓬 ( Peganum
harmala L. Zygophy llaceae)草本植物种子的总生物碱
中分离出的一种单体 ,为骆驼蓬总生物碱中主要成分
之一。近年来 ,临床及动物实验均证明其具有明显的抗
肿瘤 [ 1]及抗早孕作用 [2, 3 ]。新疆维吾尔族医生称骆驼蓬
为 Adzasman,用骆驼蓬种子治疗气管炎已有悠久历
史 ,将骆驼蓬种子粉末同蜂蜜制成丸剂 ,用于镇咳、祛
痰 ,治疗哮喘及慢性支气管炎 [ 4]。本实验通过鸭嘴花碱
对各种介质引起的气管平滑肌收缩的影响 ,探讨其舒
张气管平滑肌作用。
1　实验材料
1. 1　药品　鸭嘴花碱 ,将采用离子交换法提取的骆驼
蓬总生物碱 ,溶于热氯仿中 ,将氯仿液倒入丙酮中 ,静
置析出白色针状结晶 ,经重结晶 ,氧化铝薄层层析显示
一斑点 , mp197～ 200,紫外吸收光谱 UVmax ( MeoH)
nm: 290, 220,与文献报道相符 [5 ] ,并经红外光谱确认
为鸭嘴花碱。
1. 2　试剂　氯化钾 ( potassium chloride, KCl) ,汕头市
化学试剂厂 ,批号 871004;磷酸组胺 ( histamine, His粉
剂 ) ,上海丽珠东风生物技术有限公司生产 ,批号
010310;氯化乙酰胆碱 ( acety lchline, Ach粉剂 ) ,北京
化学试剂公司生产 ,批号 000602; Krebs-Henselev t ( K-
H)液 ,含 ( mmol /L) NaCl 118、 KCl 4. 7、 MgSO4 1. 2、
KH2 PO4 1. 2、 NaHCO3 25、 CaCl2 2. 5和葡萄糖 11. 1;所
有、试剂均为分析纯。
1. 3　离体气管平滑肌标本制备 (螺旋条法 [6 ] )　体重
300～ 350 g健康豚鼠 ( Hartley品系 ,北京大学医学部
动物实验中心提供 ) ,性别不拘。击头部致死后 ,迅速取
出气管 ,浸入通有 5% CO2和 95% O2混合气的 K-H液
中。轻柔剥去气管周围组织后 ,剪成宽约 3 mm,长约 30
mm的螺旋条 ,将气管螺旋条置于盛有 20 ml K-H液的
LH586-3型恒温浴槽 (上海沪西仪器厂生产 )中 ,保持
37 oC恒温 ,持续通以混合气 ,上端接张力换能器 ,标本
负荷 1. 5 g ,用 NSA-Ⅱ A型生理信号处理系统 (中国人
民解放军海军医学高等专科学校研制 )记录张力变化 ,
每 15分钟更换 1次营养液 ,平衡 45分钟后开始实验。
2　实验方法
2. 1　鸭嘴花碱对 KCl、 Ach、 His引起气管平滑肌收缩
4 天津药学　 Tianjin　 Pha rmacy　 2003年 12月　第 15卷第 6期
收稿日期: 2003-10-29作者简介:高春艳 ,女 ( 1973～ ) ,讲师 ,研究方向:心血管及呼吸系统药理。
的拮抗作用　分别将 3条气管螺旋条置于 3个恒温浴槽
中 , 给药方法 [7 ]: 分别加入 KCl 40 mmol /L、 Ach 0. 1
mmol /L和 His 0. 02 mmol /L(均为终浓度 )。气管平滑
肌迅速增加达张力平台 ,观察 45分钟发现无明显变化 ,
用 K-H液冲洗 3次 ,将这一张力平台作为空白对照。平
衡 45分钟 ,每 15分钟换 1次营养液 ,再次用相同浓度
KCl、 Ach和 His诱发气管平滑肌收缩 ,张力达平台 5分
钟后 ,用累计方法加入鸭嘴花碱。KCl组加入鸭嘴花碱
溶液 ,使浴槽内累计浓度分别为 1. 25× 10- 4、 2. 5×
10- 4、 5. 0× 10- 4、 1. 0× 10- 3、 2. 0× 10- 3mol /L, Ach组
加入鸭嘴花碱溶液 ,使浴槽内累计浓度分别为 3. 1×
10
- 4、 6. 19× 10- 4、 1. 33× 10- 3、 295× 10- 3 , 5. 43×
10- 3mol /L; His组加入鸭嘴花碱溶液 ,使浴槽内累计浓
度分别为 1. 43× 10- 4、 2. 62× 10- 4、 4. 99× 10- 4、 1. 09
× 10- 3mol /L,每次加药均在前一个剂量达到最大舒张
效应后立即加入。
2. 2　鸭嘴花碱孵育对 Ach量效曲线的影响　先作出
Ach累积量效反应曲线 ,浓度为 10- 9～ 10- 4 mol /L ,直
至标本张力不再上升 ,冲洗 3次。待标本重新稳定后 ,实
验组则加鸭嘴花碱 ,终浓度分别为 4. 0× 10- 4 , 9. 0×
10- 4 , 1. 6× 10- 3 mol/L,孵育 15分钟后 , 3组均再作
Ach累积量效反应曲线。
2. 3　鸭嘴花碱孵育对 His量效曲线的影响　先作出
His累计量效反应曲线 ,浓度为 10- 9～ 10- 4mol /L ,直
至标本张力不再上升 ,冲洗 3次。待标本重新稳定后 ,实
验组则加鸭嘴花碱 ,终浓度分别为 1. 2× 10- 4、 2. 4×
10
- 4、 4. 8× 10- 4 mol /L,孵育 15分钟后 , 3组均再作 His
累积量效反应曲线。
2. 4　统计学方法　气管平滑肌收缩强度以相对最大
收缩强度的百分率表示 ,实验结果以 x-± s表示。分别
求得 PD2、 PD2 和 IC50。
3　结果
3. 1　对豚鼠离体气管平滑肌的影响　鸭嘴花碱对
KCl、 Ach和 His所致的气管平滑肌收缩有明显拮抗作
用 ,以刺激剂 ( KCl、 Ach和 His)所达到的最大效应为
100% ,计算每次给药的反应率 ,回归求得拮抗参数
( IC50 , n = 8) , IC50分别为 5. 89× 10- 4、 2. 88× 10- 3和
4. 17× 10- 4 mol /L,结果见图 1、图 2和图 3。
图 1　鸭嘴花碱对 KCl ( 40 mmol /L)引起的离体气管
平滑肌收缩的影响 ( n = 8)
fig1　 Dilatation eff ect of Vasicine on KCl ( 40
mmol /L in final concentration ) systol ic
bronchi pieces isolated from guinea pig( n= 8)
图 2　鸭嘴花碱对 Ach( 0. 1mmol /L)引起的离体气管
平滑肌收缩的影响 ( n = 8)
Fig2　 Dilatation effect of Vasicine on Acetylchl ine ( 01
mmol /L in final concentration) systol ic bronchi
pieces isolated from guinea pig (n = 8)
图 3　鸭嘴花碱对 His( 0. 02 mmol /L )引起的离体气管
平滑肌收缩的影响 ( n= 8)
Fig3　 Dilatation effect of Vasicine on histamine ( 0. 02
mmol /L in final concentration) systol ic bronchi
pieces isolated from guinea pig (n = 8)
3. 2　鸭嘴花碱对 Ach量效反应曲线的影响　以未加
鸭嘴花碱的 Ach收缩气管平滑肌的最大反应为
100% ,计算加鸭嘴花碱前、后 Ach各浓度时收缩反应
的百分率 ,结果见图 4。Ach量效反应曲线 , PD2为 6. 02。
终浓度分别为 4. 0× 10- 4、 9. 0× 10- 4、 1. 6× 10- 3mol /L
的鸭嘴花碱使 Ach量效反应曲线发生右移 ,浓度越高
量效曲线右移越明显 , PD2 分别为 5. 09, 3. 87和 181。
3. 3　鸭嘴花碱对 His量效反应曲线的影响　以未加
鸭嘴花碱的 His收缩气管平滑肌的最大反应为 100% ,
计算加鸭嘴花碱前、后 His各浓度时收缩反应的百分
率 ,结果见图 5。 His量效反应曲线 , PD2为 6. 03。终浓度
分别为 1. 2× 10- 4、 2. 4× 10- 4、 4. 8× 10- 4mol/L的鸭嘴
花碱使 His累积量效反应曲线发生右移 ,浓度越高量
5天津药学　 Tianjin　 Pha rmacy　 2003年 12月　第 15卷第 6期
效曲线右移越明显 , PD2 分别为 5. 47, 4. 70和 2. 00。
图 4　鸭嘴花碱孵育对 Ach量效曲线的影响
Fig4　Eff ect of Vasicine on dose response curve of Ach
图 5　鸭嘴花碱孵育对 His量效曲线的影响
Fig5　 Effect of Vasicine on dose response curve of His
4　讨论
研究结果表明 ,鸭嘴花碱能够抑制 KCl、 Ach及
His引起的豚鼠气管平滑肌收缩 ,又能够使 His和 Ach
收缩豚鼠气管平滑肌的累积量效曲线右移 ,为新疆民
间治疗支气管哮喘及慢性气管炎 [4 ]提供了理论依据。
因为能够使 Ach和 His收缩豚鼠气管平滑肌的累积量
效曲线呈现非平行右移 ,并能使最大收缩反应降低 ,说
明鸭嘴花碱拮抗 Ach和 His收缩豚鼠气管平滑肌可能
不是通过竞争受体的特异性抑制 ,而是通过其他途径
的非竞争性抑制。
在离体豚鼠气管条标本中 ,鸭嘴花碱既可以舒张
由非生物激动剂 KCl所致的平滑肌收缩 ,也可以剂量
依赖性舒张由生理依赖性激动剂 Ach和 His刺激所引
起的气管平滑肌的收缩。Ach和 His通过启动受体操
纵型 Ca2+ 通道 ( ROC)和促进 Ca2+ 从其储存位点释放
来发挥作用 ;高 K+ 通过引起细胞膜去极化激活电压依
赖型 Ca2+ 通道 ( V DC) ,导致外 Ca2+ 内流来发挥作用 ,
由于 Ca2+ 代谢是这些致痉剂作用的共同点 ,因此 ,鸭
嘴花碱是否通过影响 Ca2+ 的跨膜转运 ,钙从储库到释
放和 /或收缩系统中 Ca2+ 与其受体蛋白的结合来发挥
作用 ,有待进一步实验研究。
参考文献
1　田晓丽 ,孙殿甲 ,堵年生 .新疆骆驼蓬种子抗肿瘤活性成分的研究 .新
疆医科大学学报 , 2003, 26( 2): 113
2　 Gupta O p, Sharma M l, Ghatak B J, et al . Poten t Uterine activity of
alkaloid vasicine. Indian J Med Res, 1997, 66( 5): 856
3　王世渝 . 鸭嘴花生物碱抗早孕作用的研究 .中草药 , 1985, 16( 6): 13
4　卫生部药品生物制品检定所 .中国民族药志 .第一卷 .北京:人民卫生
出版社 , 1984. 396
5　Marth a Windhol. Th e Merck Index 10th. Publish ed by Merck& Co. ,
Inc. U SA. 1983. 665, 1420
6　徐叔云 .药理实验方法学 .第二版 .北京:人民卫生出版社 , 1991. 1172
7　高木敬次郎 .药理实验法 .北京:化学工业出版社 , 1981. 739
6 天津药学　 Tianjin　 Pha rmacy　 2003年 12月　第 15卷第 6期