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狗肝菜不同相对分子质量多糖对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用



全 文 :[收稿日期] 20121117(001)
[基金项目] 国家科技重大专项课题(2011ZX09102-007-03) ;广东省科技计划项目(2011A030100013,2010B030700044) ;2010 年广东省
教育厅高层次人才资助项目;广东高校优秀青年创新人才培育项目(WYM10036) ;广州市科技计划项目(12A062131631)
[第一作者] 崔红花,博士,副教授,从事中药质量控制及其成分分析,Tel:020-39352177,E-mail:honghuacui@ 163. com
[通讯作者] * 沈志滨,博士,教授,从事中药药效物质基础、复方制剂质量控制研究和新药研发,Tel:020-39352173,E-maili:szb8113@
yahoo. com. cn
狗肝菜不同相对分子质量多糖对四氯化碳
所致大鼠急性肝损伤的保护作用
崔红花,于治成,沈志滨* ,吴洁莹,邹忠杰
( 广东药学院中药学院,广州 510006)
[摘要] 目的:比较狗肝菜不同分子量多糖对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保肝降酶作用,研究其可能的保肝机制。
方法:将 70 只雄性 SD大鼠随机分成模型、联苯双酯、狗肝菜总多糖(A组)、相对分子质量 < 6 000 狗肝菜多糖(B组)、相对分
子质量 6 000 ~ 10 000 狗肝菜多糖(C组)和相对分子质量 > 10 000 狗肝菜多糖(D 组)和对照组;A 组(250 mg·kg -1)、B 组
(500 mg·kg -1)、C组(150 mg·kg -1)和 D组(300 mg·kg -1)、联苯双酯组(150 mg·kg -1)在造模前灌胃给药 7 d,其他各组用生
理盐水对照;在末次给药 1 h除对照组外,均灌胃 0. 1% CCl4 花生油(0. 01 mL·g
-1)建立大鼠急性肝损伤模型,对照组用生理
盐水对照。于 16 h行腹主动脉取血用于检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、总蛋白(TP) ;肝组织中超氧
化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量及肝脏病理形态学变化;计算肝脏指数(肝
体比)、脾脏指数(脾体比)、肾脏指数(肾体比)。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清中 ALT,AST,TP 水平显著升高
(P <0. 01) ,提示本实验模型成功。狗肝菜各多糖组大鼠血清 ALT,AST活性降低与模型组比较有显著性差异(P < 0. 01) ,A,
B组可显著减少由于肝损伤造成的 TP升高,与模型对照组比较,差异具有统计学意义(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ,其中 B 组效果
最佳;与模型对照组比较,A,B组升高 SOD活性(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ;A,C组升高 GSH-Px活性,(P < 0. 01) ;对于 MDA 含
量狗肝菜多糖各部位组降低均具有统计学意义(P < 0. 01) ;模型肝组织大片坏死、淤血,狗肝菜多糖各给药组组织损伤程度明
显降低,以 B组效果最佳;对于肝脏指数,D组效果最优(P < 0. 05)。结论:狗肝菜各多糖组均对 CCl4 所致大鼠急性肝损伤效
果显著,综合分析相对分子质量 < 6 000 组(B组)保肝效果最佳。
[关键词] 狗肝菜;多糖;保肝作用
[中图分类号] R285. 5 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2013)09-0185-06
[doi] 10. 11653 /syfj2013090185
Hepatoprotective Effect of Dicliptera chinensis Polysaccharide
with Diffent Molecular Weight on Carbon
Tetrachloride-induced Acute Liver Injury in Rats
CUI Hong-hua,YU Zhi-cheng,SHEN Zhi-bin* ,WU Jie-ying,ZOU Zhong-jie
(College of Chinese Traditional Medicine,Guangdong Phamaceutical University,Guangzhou 510006,China)
[Abstract] Objective:To compare the hepatoprotective effect of Dicliptera chinensi polysaccharide
(DCH)with different molecular weight on carbon tetrachloride -induced acute liver injury in rats and its possible
mechanism was evaluated. Method:Seventy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into model,
biphenyl dimethyl dicarboxylate treated group,the total polysaccharide of DCH treated group (Group A) ,the
polysaccharide of DCH treated groups (Group B,Group C,Group D,which molecular weight is < 6 000,6 000-
10 000, > 10 000)and normal control group. It should be lavaged during 7 day before established the model of
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Group A (250 mg·kg -1) ,Group B (250 mg·kg -1) ,Group C (250 mg·kg -1) ,Group D (250 mg·kg -1)
and biphenyl dimethyl dicarboxylate treated group (250 mg·kg -1) ,while other groups were controlled by
administration of normal saline. One hour after the final intragastric administration,all rats apart from the rats in
the normal control group were lavaged with 0. 01% ip carbon-tetrachloride (CCl4)with peanuts oil (10 mL·
kg -1)according to establish the model of acute liver injury in rats,while other groups were controlled by
administration of normal saline. To detect the ALT,AST and TPA,serum sample were collected after 16 hours by
aorta sampling. Result:Compared with the normal control group,the AST,TP and ALT in serum of rats in
model group were significantly increased (P < 0. 01). The content of TP was reduced by the total polysaccharides
of D. chinensis (the A group) (P < 0. 05 or P < 0. 01). The SOD activity was obviously increased by the
molecular weight < 6 000 group (the B group) (P < 0. 01). The GSH-Px activity was increased by the A group
and the molecular weight 6 000-10 000 group (the C group) (P < 0. 01). Necrosis and passive congestion of
hepatic tissue in model group were numerous. The injury of hepatic tissue were inhibited in different polysaccharide
of DCH treated groups while the optimum effect is in Group B. The optimum effect of hepatic index appeared in
Group D. Conclusion:It was significant that the inhibition of hepatic injury in the polysaccharide of DCH which
had different molecular weight treated groups while the effect was the best when molecular weight < 6 000.
[Key words] Dicliptera chinensis;polysaccharide;hepatoprotective effects
狗肝菜为爵床科植物狗肝菜的全草,一年生或
两年生草本植物,又称羊肝菜、土羚羊、六角英、青蛇
菜等,分布广西、广东、福建、安徽等地,为我国南方
常见野菜之一。狗肝菜具有清热解毒、凉血、生津、
利尿作用的功效,用于热病斑疹、急性肝炎、便血、溺
血、小便不利、肿毒疔疮等[1]。主要含有机酸、氨基
酸、糖类成分[2],其中多糖类成分的免疫调节作用
及肝损伤作用是近年来一个十分活跃的研究课
题[3-6]。但现有技术研究报道基本集中在狗肝菜粗
多糖的研究,还未见对狗肝菜不同相对分子质量多
糖保肝作用的研究报道。
四氯化碳(CCl4)是目前常用的复制动物急性
肝损伤模型的经典方法,以探讨化学毒素性肝损
伤[7]。CCl4 进入体内以后,在肝细胞内质网中经细
胞色素 P450 酶依赖性混合功能氧化酶的代谢,生成
活泼的强毒性的自由基 CCl3·和 Cl·,这些自由基可
与细胞内和细胞膜的大分子共价结合,使酶的功能
丧失,细胞膜脂质过氧化,细胞质 Ca2 +浓度升高,导
致肝细胞损伤,细胞质内转氨酶渗入血液[8]。活性
氧损伤细胞高度参与了一些人类疾病,包括肝硬化
和纤维化[9],因此可以使用抗氧化性能的化合物。
狗肝菜多糖优良的抗氧化活性,可以预防或减轻活
性氧相关性疾病。
本实验在总多糖保肝作用基础上继续深入研
究,试图从生化、组织学等多角度比较狗肝菜总多糖
组(A组)、相对分子质量 < 6 000 狗肝菜多糖组(B
组)、相对分子质量 6 000 ~ 10 000 狗肝菜多糖组(C
组)和相对分子质量 > 10 000 狗肝菜多糖组(D 组)
对保肝作用的影响[10-11],为其进一步开发研究提供
理论依据。
1 材料
1. 1 试药与试剂 狗肝菜药材购于广州市清平药
材市场,经广东药学院刘基柱副教授鉴定为爵床科
植物狗肝菜 Dicliptera chinensis(L.)Juss. 的全草。
联苯双酯滴丸 (由北京协和药厂生产,批号
09040202)。丙氨酸转氨酶(ALT,批号 20110111)、
天冬氨酸转氨酶(AST,批号 20110111)、超氧化物
歧化酶(SOD,批号 20110110)、谷胱甘肽过氧化物
酶(GSH-Px,批号 20110108)、丙二醛(MDA,批号
20110110)、总蛋白(TP,批号 20110110)试剂盒(均
购自南京建成生物工程研究所)。其他所有试药和
试剂均为分析纯。
1. 2 仪器 BA300 生物显微镜(麦克奥迪,Motic) ,
MoticDigiClass /DigiLab 1. 2 数码显微镜,FA2104 型
电子天平(Hangping) ,ZK-82A 型电热真空干燥箱
(上海实验仪器厂有限公司) ,半透膜(截流相对分
子质量 6 000,10 000,MYM Biological Technology
company Ltd.) ,1800 紫外分光光度计(北京瑞利) ,
离心机(美国,Thermo公司)。
1. 3 动物 SD 大鼠,SPF 级,雄性,体质量(220 ±
20)g,由广东省实验动物中心提供,许可证号 SCXK
(桂)2007-0001。
2 方法
2. 1 狗肝菜多糖的制备 狗肝菜多糖提取方法参
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照文献进行[5]。称取干燥的狗肝菜全草粗粉 1 kg,
加入适量石油醚脱脂,无水乙醇除杂,各回流提取 2
h。药渣挥尽乙醇后沸水提取 2 次,每次 2 h,合并提
取液,浓缩至 800 mL,氯仿-正丁醇 (4∶ 1)多次萃取
(即 Sevag 法) ,除去蛋白质,加 95%乙醇使醇含量
达到 80%,于 4 ℃冰箱中醇沉 12 h。抽滤,滤渣用
无水乙醇洗涤。并经 50 ℃真空干燥 4 h,即得狗肝
菜总多糖,得率 9%左右。
狗肝菜多糖的分离与纯化参照文献进行[12]。
取狗肝菜总多糖 70 g,用 150 mL 纯化水溶解,将截
流相对分子质量为 6 000 半透膜制成透析袋,将溶
解液装入透析袋中加 1 000 mL纯化水 25 ℃进行透
析,每次 3 h,透析 3 次,然后将 3 次透析液合并浓缩
至 300 mL,加 95%乙醇使醇含量达到 80%,于 4 ℃
冰箱中醇沉 12 h。抽滤,滤渣经 50 ℃真空干燥 4 h,
即得相对分子质量低于 6 000 狗肝菜多糖。得率为
总多糖的 48%。
将透析袋内剩余溶解液转移至截流相对分子质
量为 10 000 半透膜制成透析袋,按上述方法进行分
离与纯化,即得相对分子质量高于 6 000 低于 10
000 的狗肝菜多糖。得率为总多糖的 15%。将截流
相对分子质量为 10 000 的透析袋内剩余的溶解液
加 95%乙醇使醇含量达到 80%,于 4 ℃冰箱中醇沉
12 h。抽滤,滤渣经 50 ℃真空干燥 4 h,即得相对分
子质量高于 10 000 狗肝菜多糖。得率为总多糖
的 34%。
2. 2 分组与给药 SD 大鼠 70 只,随机分成 7 组,
每组 10 只,分别为正常对照组、肝损伤模型组、联苯
双酯组、狗肝菜多糖 A,B,C,D 组。正常对照组和
模型组每天 ig给予注射用水,受试药和阳性对照组
的动物每天根据剂量 ig给药,连续 7 d,联苯双酯阳
性对照组 150 mg·kg -1;A组:250 mg·kg -1,B组 500
mg·kg -1,C 组 150 mg·kg -1,D 组 300 mg·kg -1(多
糖给药组给药量根据提取得率算得,狗肝菜人的日
用量(50 ~ 100 g)。在给药的第 7 天,除正常对照组
外,其余各组动物均 ig 0. 1% CCl4 花生油(0. 01
mL·g -1) ,进食不禁水 16 h,全部大鼠麻醉后腹主动
脉取血,3 500 r·min -1离心 10 min,血清于 - 20 ℃
低温保存至分析 ALT,AST,TP生化指标。采血后迅
速取出肝脏、肾脏、脾脏,用冰冷的盐水立即删除尽
可能多的血,称重,计算绝对和相对脏器指数[脏器
指数 =脏器质量 /体重(mg·g -1) ],并在同一肝小叶
上取 1. 00 g肝组织匀浆,离心,取上清液,- 20 ℃保
存至分析。同时取同一肝小叶上取 1 小块做病理组
织检查。
2. 3 检测指标
2. 3. 1 血清 ALT,AST,TP 测定 血清 ALT,AST,
TP具体操作参照试剂盒操作说明。
2. 3. 2 抗氧化酶活性的测定 肝组织加冷冻生理
盐水匀浆,4 000 r·min -1离心 5 min,上清液用于测
定 SOD,GSH-Px MDA,具体操作参照试剂盒操作
说明。
2. 3. 3 肝损伤评估 肝组织样品立即固定于 10%
中性缓冲甲醛溶液[4%多聚甲醛在 4 ℃,pH 7. 4]
中 24 h。经过流水冲洗,梯度乙醇脱水,二甲苯透
明,石蜡包埋切片,3 μm 厚连续切片并进行 HE 染
色,光学树脂胶封片,光镜下观察。
2. 4 统计分析 数据分析采用 SPSS 13. 1 统计软
件包进行处理。所有的结果以 珋x ± s 表示,对组间比
较进行 t检验,P < 0. 05 为有统计学意义。
3 结果
3. 1 对血清 ALT,AST,TP 水平的影响 与正常对
照组比较,模型对照组大鼠血清中 ALT,AST,TP 水
平显著升高(P < 0. 01) ,提示本实验模型成功。阳
性对照药物组大鼠血清 ALT,AST,TP活性与模型对
照组比较,差异具有统计学意义(P < 0. 05 或 P <
0. 01)。狗肝菜各多糖组大鼠血清中 ALT,AST活性
与模型对照组比较,差异具有统计学意义(P <
0. 01)。狗肝菜各多糖组对于肝损伤大鼠血清总蛋
白 TP的影响却不尽相同。其中 A,B组可显著减少
由于肝损伤造成的 TP 升高,与模型对照组比较,差
异具有统计学意义(P < 0. 05 或 P < 0. 01)。见表 1。
3. 2 对肝组织 SOD,GSH-Px及 MDA的影响 由表
2 可见,与正常对照组比较,模型对照组大鼠肝组织
SOD,GSH-Px活性显著降低(P < 0. 01) ,而 MDA 含
量明显提高(P < 0. 01) ,提示肝损伤模型大鼠肝脏
的抗氧化水平显著降低,氧化损伤明显。阳性对照
药组大鼠肝组织中 SOD,GSH-Px,MDA 活性与模
型对照组比较,差异具有统计学意义(P < 0. 01)。
狗肝菜各多糖组大鼠肝组织 SOD,GSH-Px,
MDA与模型对照组比较:对于 SOD 酶活性,A,B 组
显示差异具有统计学意义(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ;
对于 GSH-Px酶活性,A,C 组显示,差异具有统计学
意义(P <0. 01) ;对于 MDA含量,狗肝菜各多糖组均
具有统计学意义(P < 0. 01) ,说明狗肝菜多糖能提高
CCl4 所致急性肝损伤的抗氧化能力,显著降低肝脏的
氧化损伤。此外,A组肝组织 MDA 与阳性药物联苯
双酯组比较,差异具有统计学意义(P <0. 01)。
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崔红花,等:狗肝菜不同相对分子质量多糖对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用
表 1 狗肝菜多糖各部位对血清 ALT,AST及 TP水平的影响(珋x ± s,n = 10)
组别 剂量 /mg·kg -1 ALT /U·L -1 AST /U·L -1 TP /g·L -1
正常对照 - 25. 39 ± 3. 41 72. 21 ± 8. 67 89. 13 ± 10. 93
模型对照 - 244. 43 ± 21. 892) 393. 72 ± 52. 282) 101. 01 ± 10. 341)
联苯双酯 150 52. 31 ± 8. 014) 183. 18 ± 25. 644) 90. 84 ± 10. 483)
狗肝菜总多糖(A组) 250 85. 02 ± 9. 784) 192. 43 ± 24. 014) 91. 45 ± 10. 693)
狗肝菜多糖相对分子质量 < 6 000(B组) 500 78. 84 ± 9. 144) 178. 14 ± 24. 044) 85. 55 ± 11. 464)
狗肝菜多糖相对分子质量 6 000 ~ 10 000 (C组) 150 201. 36 ± 26. 174) 243. 73 ± 37. 544) 94. 47 ± 7. 37
狗肝菜多糖相对分子质量 > 10 000 (D组) 300 146. 63 ± 16. 994) 216. 35 ± 30. 304) 92. 36 ± 9. 62
注:与正常组比较1)P < 0. 05,2)P < 0. 01;与模型组比较3)P < 0. 05,4)P < 0. 01;与联苯双酯 150 mg·kg -1组比较5)P < 0. 05,6)P < 0. 01(表
2 ~ 3同)。
表 2 狗肝菜多糖各部位对肝组织酶活性及MDA含量的影响(珋x ± s,n = 10)
组别 剂量 /mg·kg -1 MDA /nmol·mg -1 SOD /U·mg -1 GSH-Px /U·mg -1
正常对照 - 4. 29 ± 0. 34 64. 52 ± 19. 74 128. 34 ± 24. 12
模型对照 - 7. 53 ± 0. 932) 39. 92 ± 11. 952) 72. 34 ± 14. 092)
联苯双酯 150 5. 46 ± 0. 784) 55. 13 ± 10. 984) 110. 54 ± 25. 454)
狗肝菜总多糖(A组) 250 4. 84 ± 0. 384,6) 61. 61 ± 24. 354) 96. 57 ± 15. 084)
狗肝菜多糖相对分子质量 < 6 000(B组) 500 4. 98 ± 0. 594) 50. 43 ± 7. 923) 72. 28 ± 19. 32
狗肝菜多糖相对分子质量 6 000 ~ 10 000(C组) 150 6. 58 ± 0. 553) 48. 13 ± 11. 90 103. 19 ± 23. 724)
狗肝菜多糖相对分子质量 > 10 000(D组) 300 5. 02 ± 0. 764) 42. 95 ± 12. 30 84. 32 ± 13. 23
表 3 狗肝菜多糖各部位对急性肝损伤大鼠脏器指数的影响(珋x ± s,n = 10) mg·g - 1
分组 剂量 /mg·kg -1 肝脏指数 肾脏指数 脾脏指数
正常对照 - 27. 81 ± 4. 09 7. 46 ± 0. 93 4. 31 ± 1. 32
模型对照 - 34. 44 ± 6. 421) 6. 66 ± 0. 96 3. 05 ± 1. 051)
联苯双酯 150 28. 31 ± 3. 613) 6. 36 ± 0. 37 3. 69 ± 0. 783)
狗肝菜总多糖(A组) 250 30. 00 ± 2. 65 6. 42 ± 0. 56 3. 87 ± 1. 07
狗肝菜多糖相对分子质量 < 6 000(B组) 500 29. 61 ± 4. 37 6. 63 ± 0. 43 3. 23 ± 0. 63
狗肝菜多糖相对分子质量 6 000 ~ 10 000(C组) 150 29. 94 ± 2. 24 6. 69 ± 0. 54 3. 76 ± 0. 98
狗肝菜多糖相对分子质量 > 10 000(D组) 300 28. 89 ± 3. 763) 6. 68 ± 0. 83 3. 54 ± 0. 69
3. 3 狗肝菜多糖和 CCl4 对病理组织学影响 模型
对照组肝损伤严重,肝脏中央静脉周围肝细胞结构
紊乱,肝细胞肿胀、脂肪变性、坏死,血管周围炎性细
胞浸润,中央静脉和肝窦淤血,造模成功。阳性药物
联苯双酯组对 CCl4 的损伤基本没有保护作用,肝脏
中央静脉周围或弥散性肝细胞脂肪变性、坏死,血管
周围少量炎性细胞浸润,中央静脉和肝窦淤血。A
组,肝脏中央静脉周围少量肝细胞肿胀、脂肪变性、
坏死,中央静脉和肝窦轻度淤血,有少量炎性细胞浸
润。B组,肝脏中央静脉周围少量或无肝细胞脂肪
变性、坏死,血管周围炎性细胞浸润,中央静脉和肝
窦轻微淤血。C 组,肝脏中央静脉周围少量肝细胞
脂肪变性、坏死,轻度炎性细胞浸润,中央静脉周围
肝窦扩张。D组,肝脏中央静脉周围肝细胞脂肪变
性、坏死,肝窦扩张,炎性细胞浸润,中央静脉和肝窦
有淤血。效果从好到差依次 B 组≥C 组 > A 组≥D
组 >联苯双脂组,见图 1。
3. 4 狗肝菜多糖和 CCl4 对肝脏指数、脾脏指数、肾
脏指数影响 各实验组肝脏、脾脏、肾脏指数见表
3。对于肝脏指数,与正常对照组比较,模型对照组
肝脏质量明显增加(P < 0. 05) ,说明实验模型成功。
阳性对照药物(联苯双酯)组肝脏指数与模型对照
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组比较,差异具有统计学意义(P < 0. 05)。狗肝菜
各多糖组亦能减小肝脏系数,其中 D 组与模型对照
组比较,差异具有统计学意义(P < 0. 05)。对于脾
脏指数,与正常对照组比较,模型对照组肝脏质量明
显增加(P < 0. 05) ,说明实验模型成功。阳性对照
药物(联苯双酯)组脾脏指数与模型对照组比较,差
异具有统计学意义(P < 0. 05)。狗肝菜多糖各部位
组亦能增大肝损伤造成的脾脏系数,其中总多糖组
效果最优,但无显著性差异。
对于肾脏指数,各给药组均无显著差异。
A. 狗肝菜多糖相对分子质量 < 6 000 500 mg·kg -1组;B. 狗肝菜多糖 6 000 ~ 10 000 150 mg·kg -1组;C. 狗肝菜多糖相对分子
质量 > 10 000 300 mg·kg -1组;D. 狗肝菜总多糖 250 mg·kg -1组;E. 联苯双脂 150 mg·kg -1组;F. 模型组;G正常对照组
图 1 狗肝菜不同相对分子质量多糖对四氯化碳致急性肝损伤大鼠肝脏组织病理的影响(HE染色,× 400)
4 讨论
在机体内,由 SOD,GSH-Px 等组成的抗氧化酶
系统的协同作用,能够清除多余的活性氧(ROS) ,使
得 ROS 浓度维持在正常的生理范围内,维持氧化-
抗氧化平衡,这对于细胞行使正常的生理功能及适
应各种生长环境至关重要。作为机体内的主要抗氧
化酶,SOD与 GSH-Px不仅在活性上能协同作用,还
能组成相互保护的防御群,更有效的清除机体内自
由基,保护细胞免遭氧化损伤,维持体内代谢
平衡[7]。
MDA是重要的脂质过氧化产物,MDA 的含量
可反映组织过氧化损伤程度,间接反映细胞的损伤
情况[12]。对 CCl4 所致急性肝损伤大鼠用药后,明
显提高肝组织 SOD,GSH-Px 活性,降低 MDA 含量,
其部分机制抗脂质过氧化和增加脂质代谢有关。联
合检测 SOD,GSH-Px活力及MDA含量,能间接反映
机体脂质过氧化反应对组织的损伤程度。
本实验采用 CCl4 大鼠急性肝损伤模型,首次将
狗肝菜多糖按相对分子质量大小进行分段,观察对
血清 ALT,AST 活力,TP 含量;对肝组织中 SOD,
GSH-Px活性,MDA 含量及肝组织形态学的变化的
影响,发现狗肝菜总多糖及 3 种不同相对分子质量
多糖均对 CCl4 所致急性肝损伤具有不同程度的保
护作用,并改善血清中肝毒性生物参数,其中相对分
子质量 < 6 000 组(B 组)效果最佳,优于总多糖效
果。与粗多糖相比,改善了粗多糖成分复杂、含量较
低的现象,总结出了多糖相对分子质量组成与肝损
伤功能之间的关系,有利于提高狗肝菜多糖药物的
药效重复性和质量稳定性。综合分析显示,相对分
子质量 < 6 000 组(B 组)保肝降酶效果最理想,且
得率可达总多糖的 48%,有望进一步开发。下一步
我们工作的重点是将进一步分析多糖药效物质基础
及保肝机制研究。
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[责任编辑 聂淑琴]
[收稿日期] 20121008(020)
[基金项目] 国家自然科学基金项目(81102809)
[第一作者] 苏敏,本科,主治医师,从事妇科的临床和科研研究,
[通讯作者] * 孟江,博士,教授,从事中药炮制及饮片质量标准化研究,Tel:020-39352169,E-mail:jiangmeng666@ 126. com
姜炭对虚寒性出血证大鼠凝血功能,血栓素 B2 和
6-酮-前列腺素 F1α的影响
苏敏1,梁慧超2,孟江2* ,朱琼华2,严金娣2,吕秋洋2
( 1. 深圳宝安区龙华人民医院,广东 深圳 518000; 2. 广东药学院中药学院,广州 510006)
[摘要] 目的:观察姜炭对虚寒性出血证大鼠凝血 5 项指标和血栓素 B2(TXB2)、6-酮-前列腺素 F1α(6-keto-PGF1α)的影
响。方法:将 80 只 SD大鼠随机分为 8 组:空白组、模型组、姜炭组和姜炭加模型组高、中、低剂量组,每组 10 只。模型组和姜
炭加模型组均以大黄水煎液 ig造成虚寒模型,共 10 d。从造模第 6 天开始,空白组和模型组 ig生理盐水,姜炭组 ig给与不同
剂量的姜炭混悬液(10,20,40 g·kg -1) ,1 次 /d,连续 5 d;模型组和姜炭组采用眼眶放血法造成出血模型。末次给药后 1 h 采
血测定凝血 5 项:凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)
和血栓素 B2(TXB2)和 6-酮-前列腺素 F1α(6-keto-PGF1α)。结果:姜炭高、中剂量组能显著缩短虚寒性出血证大鼠的 TT(P <
0. 05) ,PT(P < 0. 05) ,APTT(P < 0. 05) ,提高 FIB的含量(P < 0. 01)、减少 D-D的含量 (P < 0. 05) ,提高 TXB2(P < 0. 01)而下
调 6-keto-PGF1α(P < 0. 01)的含量。结论:姜炭可能是通过影响大鼠凝血系统和调节 TxB2,6-酮-前列腺素 F1α含量来发挥止
血、凝血作用。
[关键词] 姜炭;凝血 5 项;血栓素 B2、6-酮-前列腺素 F1α
[中图分类号] R285. 5 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2013)09-0190-04
[doi] 10. 11653 /syfj2013090190
Investigation of Zingiber officinale Carbo on Coagulation functionand TXB2,
6-keto-PGFla in Asthenia Cold and Blood Deficiency Syndrome Rats
SU Min1,LIANG Hui-chao2,MENG Jiang2* ,ZHU Qiong-hua2,YAN Jin-di2,LV Qiu-yang2
(1. Shenzhen Longhua Peoples Hospital,Shenzhen 518000,China;
2. Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China)
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第 19 卷第 9 期
2013 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19,No. 9
May,2013