全 文 ：书收稿日期:2012-05-14; 修订日期:2012-10-15
基金项目:河北省自然科学基金资助项目( No． C2010001354)
作者简介:郝 婷( 1984-) ，女( 汉族) ，陕西渭南人，现为承德医学院研究
实习员，硕士学位，主要从事天然药物化学研究工作．
* 通讯作者简介:赵桂琴( 1971-) ，女( 汉族) ，河北张家口人，现任承德医
学院副教授，博士学位，主要从事抗病毒天然产物的研究与开发工作．
素馨花总环烯醚萜苷质量标准的研究
郝 婷，张树峰，赵桂琴*
(承德医学院中药研究所 /河北省中药研究与开发重点实验室，河北 承德 067000)
摘要:目的 建立素馨花的总环烯醚萜苷提取物的质量标准。方法 采用颜色反应和 TLC( 薄层色谱) 对素馨花提取物中总
环烯醚萜苷进行定性鉴别; 用紫外分光光度法测定了有效部位总环烯醚萜苷的含量; 用高效液相色谱法测定了橄榄苦苷的
含量。结果 在 TLC图谱中可检出橄榄苦苷的特征斑点; 建立了 UV法测定总环烯醚萜苷含量的分析方法，总环烯醚萜苷的
标准曲线为: A = 0． 028 9 C － 0． 004 9( Ｒ2 = 0． 999 8) ，3． 96 ～ 19． 8 0 μg /ml 的范围内线性关系良好，平均回收率为
102． 64%，ＲSD = 0． 65 % ( n = 6 ) ; 建立了 HPLC法测定橄榄苦苷含量的分析方法，橄榄苦苷的标准曲线为: Y = 133 959X
+23． 44 ( Ｒ2 =0． 999 8) ，0． 02 ～0． 10 mg·ml －1范围内线性关系良好，平均回收率为 100． 12% ，ＲSD = 0． 883% ( n =6)。结
论 该方法稳定、准确、精密度高、专属性强、操作简便可行，适用于提取工艺和纯化工艺优化过程中的含量测定。
关键词:素馨花; 总环烯醚萜苷; 橄榄苦苷
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 01． 029
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 01-0069-03
Study on quality standard of total iridoid glycosides from Jasminum officinale L． var．
grandiflorum
HAO Ting，ZHANG Shu-feng，ZHAO Gui-qin*
( Institute of Chinese Materia Medica，Chengde Medical College，Chengde 067000 China)
Abstract: Objective To establish the quality standards for total iridoid glycosides from Jasminum officinale L． var． grandiflo-
rum． Methods Color reaction and TLC for qualitative identification of total iridoid glycosides from Jasminum officinale L． var．
grandiflorum; Effective part of total iridoid glycosides content was determined by UV; Oleuropein content using HPLC． Ｒesults -
Characteristic spots can be detected in the TLC maps of oleuropein; Established UV method for determination of total iridoid gly-
coside content analysis method，the standard curve of total iridoid glycosides as follows: A = 0． 0289 C － 0． 0049( Ｒ2 = 0． 999 8) ，
3． 96 ～ 19． 8 μg / ml linear in the rangegood relationship，the average recovery was 102． 64%，ＲSD = 0． 65% ( n = 6) ; Estab-
lished HPLC determination of oleuropein content analysis method，oleuropein standard curve: Y = 133959X + 23． 44 ( Ｒ2 =
0． 999 8) ，0． 02 ～ 0． 10mg·ml －1 range a good linear relationship ，the average recovery was 100． 12%，ＲSD = 0． 883% ( n =
6) ． Conclusion The method is stable，accurate，high precision，strong specificity，operation is simple and feasible，is suitable
for extraction and purification process optimization content determination．
Key words: Jasminum officinale L． var． grandiflorum; Total iridoid glycosides; Oleuropein
素馨花为木犀科茉莉属植物素馨花 Jasminum officinale L．
var． grandiflorum的干燥花蕾，又名素馨针、耶悉茗花，世界各地
广为栽培，具有疏肝解郁、行气止痛之功效。我国民间用其治疗
消化不良、十二指肠球部溃疡及慢性肝炎、肝硬化等症。素馨花
主要化学成分为环烯醚萜苷类、黄酮类和三萜皂苷类化合物，其
中环烯醚萜苷类化合物主要为橄榄苦苷［1 ～ 4］。近年来，随着国内
外学者对橄榄苦苷研究的不断深入，发现其具有许多药理活性，
引起人们的广泛关注。橄榄苦苷具有抗 VHSV、HIV、HBV 等病
毒的作用，抗肿瘤作用，抗氧化作用，降血糖作用，对心血管系统
的作用，对物质代谢的影响，抑菌活性和抗炎作用等一系列药理
活性。
素馨花中总环烯醚萜苷为主要活性成分，总环烯醚萜苷主要
为橄榄苦苷，橄榄苦苷是一种苯酚类裂环烯醚萜苷，橄榄苦苷易
溶于乙醇、丙酮、吡啶等，可溶于水、丁醇、乙酸乙酯，几乎不溶于
乙醚、石油醚、氯仿等。本实验进行了素馨花总环烯醚萜苷质量
标准的研究，采用颜色反应，薄层色谱法进行鉴别，紫外分光光度
法测定总环烯醚萜苷的含量和高效液相色谱法测定橄榄苦苷的
含量。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 SP － 752 型紫外分光光度计(上海光谱仪器有限公
司) ;Agilent1200 高效液相色谱仪(自动进样器，四元泵，柱温箱，
DAD检测器，Agilent公司，美国) ;电子分析天平(瑞士梅特勒 AG
－245 型) ;ＲE － 52AA 旋转蒸发仪;CHＲIST 实验室型冷冻干燥
机(德国 MAＲTIN CHＲIST) ;L － 550 离心机(湘仪离心机仪器有
限公司) ;KQ －100E超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1． 2 试药 总环烯醚萜苷提取物(实验室自制) ;橄榄苦苷对照
品(实验室自制，纯度 99． 5 % ) ;聚酰胺薄膜(浙江省台州市路桥
四甲生化塑料厂) ;试剂均为色谱纯。
2 方法与结果
2． 1 性状 本品为木犀科植物素馨花的干燥花蕾的总环烯醚萜
苷提取物，黄色至棕黄色粉末，气微香，味淡。
2． 2 定性鉴别
2． 2． 1 颜色反应
乙酸 －铜离子反应:取本品约 10mg，将样品溶于 10ml 冰乙
酸中，加入少量的铜离子试液，于 100℃的水浴中，放置 5min 后，
即产生蓝色反应。
FeCl3 颜色反应:取本品约 10mg，加甲醇 10ml 溶解后，取一
滴点于滤纸上，喷以 5%的三氯化铁乙醇溶液，晾干后显墨绿色。
素馨花总环烯醚萜苷提取物的实验结果均为阳性反应，因此，可
作为本品的一种鉴别反应。
2． 2． 2 薄层色谱法 取本品约 10mg，加甲醇 10ml 溶解后，作为
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书供试品溶液，另取橄榄苦苷对照品，加甲醇制成 0． 1mg /ml 的溶
液，作为对照品溶液，按薄层色谱实验，吸取上述溶液分别点于同
一聚酰胺薄膜上，无水乙醇∶ 水 = 85∶ 15 为展开剂，展开，取出，
晾干，5%的三氯化铁甲醇溶液显色。结果见图 1。
1．素馨花提取物 2．素馨花总环烯醚萜苷 3．橄榄苦苷对照品
图 1 素馨花提取物 TLC图
2． 3 素馨花总环烯醚萜苷的含量测定方法［5 ～ 7］ 素馨花中主要
活性成分为环烯醚萜苷类化合物，主要包括橄榄苦苷等，确定采
用 UV测定总环烯醚萜苷的含量。
2． 3． 1 对照品溶液的配制 精密称取橄榄苦苷对照品 1． 89 mg，
置 100 ml 容量瓶中，加甲醇溶解，超声 10 min，冷却至室温，用甲
醇定容至刻度，摇匀。分别精密量取 5，10，15，20，25 ml，置 25 ml
容量瓶中，加甲醇稀释置刻度，摇匀，备用。
2． 3． 2 样品溶液的配制 精密称取样品干浸膏 3． 98 mg，置 100
ml 容量瓶中，加甲醇溶解，超声 10min，冷却至室温，用甲醇定容
至刻度，摇匀，备用。
2． 3． 3 检测波长的确定 采用紫外分光光度法，以橄榄苦苷对
照品溶液和样品溶液，在 200 ～ 500 nm下扫描，在 232 nm 波长处
均具有最大吸收，故确定检测波长为 232 nm。见图 2。
图 2 对照品和样品的 UV扫描图
2． 3． 4 标准曲线的绘制 取上述配制的对照品溶液，在 232nm
波长下测定吸光度。结果见表 1。
表 1 UV线性关系考察结果
橄榄苦苷浓度 /μg·ml －1 吸光度(OD值)
3． 96 0． 109
7． 92 0． 226
11． 88 0． 339
15． 84 0． 449
19． 80 0． 570
以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得
回归方程为:A = 0． 028 9 C － 0． 004 9，Ｒ2 = 0． 999 8。
由此可见橄榄苦苷的浓度在:3． 96 ～ 19． 8 0 μg /ml 的范围
内线性关系良好。结果见图 3。
图 3 UV橄榄苦苷标准曲线
2． 3． 5 方法学考察 精密度考察:取 6 份浓度为 19． 8 μg / ml 的
橄榄苦苷对照品溶液，在 232 nm 波长下测定吸光度，计算 ＲSD =
0． 79 %，表明方法的精密度良好。见表 2。
表 2 UV法精密度考察结果
编号 吸光度
1 0． 569
2 0． 570
3 0． 567
4 0． 565
5 0． 564
6 0． 572
ＲSD(%) 0． 79
稳定性考察:取乙醇冷浸提取的干浸膏，按样品溶液的配制
项下配制，精密量取 15 ml置 25 ml容量瓶中加甲醇稀释至刻度，
测定吸光度，每小时测定 1 次，连续测定 6 次，计算 ＲSD =
0． 46%，表明样品溶液在 6 h内基本稳定。见表 3。
表 3 UV法稳定性考察结果
编号 吸光度
1 0． 458
2 0． 457
3 0． 456
4 0． 453
5 0． 456
6 0． 453
ＲSD(%) 0． 46
重复性考察:取同一批乙醇冷浸提取的干浸膏 6 份，按样品
溶液的配制项下配制，精密量取 15 ml置 25 ml 容量瓶中加甲醇
稀释至刻度，分别测定吸光度，计算 ＲSD = 1． 68 %，表明重复性
良好。见表 4。
表 4 UV法重复性考察结果
编号 吸光度
1 0． 450
2 0． 449
3 0． 460
4 0． 467
5 0． 463
6 0． 465
ＲSD(%) 1． 68
回收率考察:取素馨花药材 6 份，每份 4． 00 mg ，精密称定，
加入浓度为 99． 02 μg /ml 的对照品溶液 10 ml，按乙醇冷浸的方
法和样品溶液的配制方法操作，精密量取 15 ml 至 25 ml 容量瓶
中，加甲醇稀释至刻度，测定吸光度，计算加样回收率，其平均值
为 102． 64 %，ＲSD = 0． 65 % (n = 6 )。见表 5。
表 5 UV法回收弦考察结果
编号
样品橄榄苦苷
含量 /μg·ml － 1
加入量
/μg
测得量
/μg
回收率
(%)
平均值
(%)
ＲSD
(%)
1 1016． 1 990． 2 2039． 6 103． 36
2 1023． 7 990． 2 2033． 4 101． 97
3 1028． 8 990． 2 2036． 3 101． 74 102． 64 0． 65
4 1018． 6 990． 2 2034． 3 102． 58
5 1021． 2 990． 2 2043． 2 103． 21
6 1026． 3 990． 2 2046． 5 103． 03
2． 4 素馨花橄榄苦苷含量测定方法［8］ 色谱条件:色谱柱为 Agi-
lent ZOＲBAX SB － C18(4． 6 mm × 250 mm，5μm) ;流动相为乙腈 －
水梯度洗脱程序:0→12 min(9%) ，12→13 min(9% ～ 20%) ;13
→35 min(20%) ;流速 1． 0 ml·min －1;柱温 30℃;检测波长 232
nm;进样量 10μl。
2． 4． 1 溶液的制备 对照品溶液的制备:精密称取橄榄苦苷对
照品 2． 00 mg，置 100 ml 容量瓶中，加甲醇溶解，超声 10 min，冷
却至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，备用。
供试品溶液的制备:取纯化后所得干浸膏，置于 100ml 容量
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书瓶中，加甲醇溶解后，超声 10min，冷却至室温，用甲醇定容至刻
度，摇匀，备用。
2． 4． 2 线性关系的考察 取对照品备用液，将橄榄苦苷对照品
配置成浓度分别为 0． 02，0． 04，0． 06，0． 08，0． 10mg /ml，用上述
色谱条件，对系列浓度的样品分别进样 10μl进行分析，并记录峰
面积。见表 6。
表 6 HPLC线考察结果
榄苦苷浓度 /mg·ml －1 峰面积
0． 02 2 635． 8
0． 04 5 433． 5
0． 06 8 114． 9
0． 08 10 744． 5
0． 10 13 376． 2
以进样浓度为横坐标(X) ，峰面积为纵坐标(Y) ，绘制标准曲
线，得回归方程为 Y = 133 959X + 23． 44，Ｒ2 = 0． 999 8，表明在
0． 02 ～ 0． 10mg·ml －1之间有良好的线性关系。结果见图 4。
图 4 HPLC橄榄苦苷标准曲线
2． 4． 3 精密度实验 取浓度为 0． 06 mg /ml的对照品溶液 10 μl，
按上述色谱条件，连续进样 5 次，橄榄苦苷的峰面积的 ＲSD =
0． 101%。见表 7。
表 7 HPLC精密度考察结果
编号 峰面积
1 8 132． 4
2 8 114． 9
3 8 125． 6
4 8 122． 3
5 8 108． 3
6 8 119． 7
ＲSD(%) 0． 101
2． 4． 4 重复性实验 精密称取 0． 1g富集纯化所得干浸膏 5 份，
按供试品溶液方法制备，按上述色谱条件分别进样 10μl，测得干
浸膏中橄榄苦苷的含量，其 ＲSD = 0． 929%。见表 8。
表 8 HPLC重复性考察结果
编号 峰面积
1 10 758． 8
2 10 825． 3
3 10 869． 4
4 10 697． 9
5 10 618． 6
ＲSD(%) 0． 929
2． 4． 5 稳定性实验 精密称取 0． 1g 富集纯化所得干浸膏，按供
试品溶液方法制备制成供试品溶液，于 0，2，4，6，8，10，12 h 进
样，橄榄苦苷峰面积的 ＲSD = 1． 254%(n = 7)。结果表明，供试
溶液在 12 h内基本稳定。见表 9。
2． 4． 6 回收率实验 精密称取 0． 1g 富集纯化所得干浸膏共 6
份，分别精密加入 1ml 80 mg /ml 的对照品溶液。按供试品溶液
方法制备，按上述色谱条件分别进样 10μl，测得 6 次加样回收率
平均值为 100． 12% ，ＲSD = 0． 883%。见表 10。
表 9 HPLC稳定性考察结果
编号 峰面积 ＲSD(%)
1 10741． 2
2 10744． 5
3 10742． 9
4 10653． 7 1． 254
5 10695． 2
6 10548． 6
7 10387． 6
表 10 HPLC回收率考察结果
编号
样品橄榄苦苷
含量 /mg·ml － 1
加入量
/mg
测得量
/mg 回收率
(%)
平均值
(%)
ＲSD
(%)
1 0． 0790 0． 080 0． 1586 99． 5
2 0． 0813 0． 080 0． 1625 101． 5
3 0． 0827 0． 080 0． 1632 100． 6 100． 12 0． 883
4 0． 0749 0． 080 0． 1552 100． 3
5 0． 0758 0． 080 0． 1556 99． 8
6 0． 0782 0． 080 0． 1574 99． 0
3 小结
本实验研究素馨花中总环烯醚萜苷和橄榄苦苷的含量测定
方法及制定素馨花总环烯醚萜苷提取物质质量标准草案。
采用颜色反应、薄层色谱法进行鉴别，建立了紫外分光光度
法法测定总环烯醚萜苷含量和高效液相色谱法测定橄榄苦苷含
量的分析方法。总环烯醚萜苷的标准为曲线:A = 0． 0289 C －
0． 004 9(Ｒ2 = 0． 999 8) ，3． 96 ～ 19． 80 μg /ml 的范围内线性关系
良好，平均回收率值为 102． 64 %，ＲSD = 0． 65 % (n = 6 )。
橄榄苦苷的标准曲线为 Y = 133 959X + 23． 44(Ｒ2 = 0． 999 8)0． 02
～ 0． 10 mg /ml线性关系良好，平均回收率为 100． 12% ，ＲSD =
0． 883%(n = 6 )。该方法稳定、准确、精密度高、专属性强、操
作简便可行，适用于提取工艺和纯化工艺优化过程中的含量测
定。
本实验对原料药做了质量标准的研究，以橄榄苦苷为对照
品，选用紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量，平均回收率
为 102． 64%，ＲSD为 0． 65%，本实验建立了应用紫外分光光度法
测定素馨花提取物中总环烯醚萜苷含量的方法，并进行了方法学
考察;同时通过参考文献建立了应用高效液相色谱法测定橄榄苦
苷含量的方法，并进行了方法学考察。该方法稳定、准确、操作简
便可行，适用于提取工艺和纯化工艺优化过程中的含量测定。
参考文献:
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出版社，2006:2476．
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