全 文 ：基金项目：国家自然科学基金资助项目（编号：２１６６００９）；海南省社会
发展专项（编号：２０１５ＳＦ１１）；海口市应用技术研究与开发
项目（编号：２０１４－９０）；海南省省级创新训练项目（编号：
２０１３１１６５８０）
作者简介：马艺丹，女，海南师范大学在读硕士研究生。
通讯作者：刘红（１９６７—），女，海南师范大学教授，博士，硕士生导师。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｈｙｄ１２３＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ
收稿日期：２０１５－１１－２８
第３２卷第２期
２ ０ １ ６年２月 食 品 与 机 械
OOD&MACHINERY Ｖｏｌ．３２，Ｎｏ．２
Ｆｅｂ．２ ０ １ ６
ＤＯＩ：１０．１３６５２／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－５７８８．２０１６．０２．０３５
神秘果种子多酚大孔树脂纯化工艺研究
Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ Ｓｙｎｓｅｐａｌｕｍ ｄｕｌｃｉｆｉｃｕｍ
ｓｅｅｄ ｗｉｔｈ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ
马艺丹１
ＭＡ Ｙｉ－ｄａｎ１
刘 红１，２
ＬＩＵ Ｈｏｎｇ１，２
马思聪１
ＭＡ Ｓｉ－ｃｏｎｇ１
闫瑞昕１
ＹＡＮ Ｒｕｉ－ｘｉｎ１
廖小伟１
ＬＩＡＯ Ｘｉａｏ－ｗｅｉ１
（１．海南师范大学化学与化工学院，海南 海口 ５７１１５８；
２．热带特色药食同源植物研究与开发重点实验室，海南 海口 ５７１１２７）
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈａｉｎａｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｉｋｏｕ，
Ｈａｉｎａｎ５７１１５８，Ｃｈｉｎａ；２．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｎ Ｔｏｐｉｃａｌ ａｎｄ
Ｓｐｅｃｉａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｅｄｉｂｌｅ Ｐｌａｎｔ，Ｈａｉｋｏｕ，Ｈａｉｎａｎ５７１１２７，Ｃｈｉｎａ）
摘要：分别采用６种大孔树脂（ＡＢ－８、Ｄ１０１、ＨＰＤ－５００、Ｓ－８、
ＤＭ１３０、Ｘ－５）纯化神秘果种子多酚，以吸附量、吸附率、解吸
量、解吸率为评定参数，优选出Ｘ－５为最佳树脂。研究其吸附
等温线，发现其与Ｌａｎｇｍｕｉｒ等温线拟合良好。静态吸附与解
吸结果表明：最佳ｐＨ ５．８，最佳解吸液为７０％乙醇。动态吸
附与解吸结果表明：最优样品液浓度为１．２ｍｇ／ｍＬ，吸附液体
积为１００ｍＬ，解吸液体积为５０ｍＬ，吸附流速为１．０ｍｇ／ｍＬ，
解吸流速为１．５ｍｇ／ｍＬ。研究结果表明：经Ｘ－５纯化后的神
秘果种子多酚含量提高了２倍，Ｔ－ＡＯＣ测定总抗氧化能力提
高了２．５倍。说明该工艺适用于神秘果种子多酚的纯化。
关键词：神秘果；多酚；纯化；抗氧化活性；大孔树脂
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｓ ｐａ－
ｒａｍｅｔｅｒｓ，ｔｈｅ ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ ｆｒｏｍ Ｓｙｎｓｅｐａｌｕｍ
ｄｕｌｃｉｆｉｃｕｍｓｅｅｄ ｂｙ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ，ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｆｉｖｅ ｔｙｐｅｓ ｏｆ
ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ Ｘ－
５ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｏｎｅ．Ｔｈｒｏｕｇｈ ａ ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｃｕｒｖｅ
ｆｉｔｔｉｎｇ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｌａｎｇｍｕｉｒ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌｓ，ｉｔ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ
ｆｉｔｔｉｎｇ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｓｏｔｈｅｒｍ ａｎｄ Ｌａｎｇｍｕｉｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅ
ｗａｓ ｖｅｒｙ ｈｉｇｈ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｓ
ｆｏｌｏｗｅｄ：ｐＨ ５．８，１．０ｍＬ／ｍｉｎ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｖｅｌｏｃｉｔｙ．Ｂｅｓｉｄｅｓ，ｔｈｅ
ｂｅｓｔ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ：ｓａｍｐｌｅ ｖｏｌｕｍｅ １００ｍＬ，ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ
ｖｅｌｏｃｉｔｙ ｏｆ ｆｌｏｗ １．５ｍＬ／ｍｉｎ，ｄｙｎａｍｉｃａｌｙ ｅｌｕｔｅ ｗｉｔｈ ５０ｍＬ ｃｏｎｃｅｎ－
ｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｓｏｌｕｎｔｉｏｎ ７０％．Ａｆｔｅｒ ｂｅｉｎｇ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ａｎｄ ｐｕｒｉ－
ｆｉｅｄ ｂｙ ｒｅｓｉｎ，ｔｈｅ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ａｂｏｕｔ ２ｔｉｍｅｓ ａｎｄ ｔｏ－
ｔａｌ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ａｂｏｕｔ ２．５ｔｉｍｅｓ．Ｔｈｅ
ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍＳｙｎｓｅｐａｌｕｍ
ｄｕｌｃｉｆｉｃｕｍｓｅｅｄ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｙｎｓｅｐａｌｕｍ ｄｕｌｃｉｆｉｃｕｍ；ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ；ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ａｎ－
ｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ
神秘果又称变味果或蜜拉圣果，属山榄科，是一种天然
的药食同源植物，目前国内外已大量种植［１］。据报道［２］，其
种子中含有大量的多酚类物质（１１．５４ｍｇ／ｇ）。医学研究［３］
表明，氧化损伤是导致许多慢性疾病，如血管病、癌症和衰老
性疾病的重要原因，多酚的抗氧化功能可以对这些慢性病起
到预防作用。
目前纯化多酚的方法主要有：柱层析分离法、色谱分离
法、膜分离法等［４］。其中大孔树脂可作为柱层析的填料。大
孔树脂具有良好的物化性质，无污染，操作简单，高选择性、
大吸附量、易再生、易吸附、易解吸等优点，已广泛用于多酚、
黄酮等目标成分的分离纯化［５］，但却尚未见此法用于纯化神
秘果种子多酚的相关报道。不同成分物质所适用的大孔树
脂的种类也不尽一致，极性、比表面积、孔径等均可作为参考
条件［５］。因此，本试验拟以神秘果种子为研究原料，分别采
用６种大孔树脂（ＡＢ－８、Ｄ１０１、ＨＰＤ－５００、Ｓ－８、ＤＭ１３０、Ｘ－５）纯
化神秘果种子多酚，优选大孔树脂以及最优纯化工艺条件，
旨为神秘果种子多酚的工业化纯化生产提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料与试剂
神秘果种子：采摘于海南省保亭县；
大孔 吸 附 树 脂 （表 １）：ＡＢ－８、Ｄ１０１、ＨＰＤ－５００、Ｓ－８、
ＤＭ１３０、Ｘ－５型，天津南开大学化工厂；
９３１
表１ ６种大孔树脂的理化性能指标
Ｔａｂｌｅ １ Ｔｈｅ ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ ｓｉｘ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ
树脂型号 外观 极性
比表面积／
（ｍ２·ｇ－１）
粒径范围／
ｍｍ
平均孔径／
ｎｍ
ＡＢ－８ 乳白色半透明球状颗粒 弱极性 ４８０～５２０ ０．３１５～１．２５０ １２～１６
Ｄ１０１ 乳白色不透明球状颗粒 非极性 ５００～５５０ ０．３００～１．２５０ １０～１２
ＨＰＤ－５００ 白色不透明球状颗粒 极性 ５００～５５０ ０．３００～１．２５０ ５５～７５
Ｓ－８ 黄色不透明球状颗粒 极性 １００～１２０ ０．３００～１．２５０ ２８～３０
ＤＭ１３０ 乳白色不透明球状颗粒 中极性 ５００～５５０ ０．３００～１．２５０ ９～１０
Ｘ－５ 乳白色不透明球状颗粒 弱极性 ５００～６００ ０．３００～１．２５０ ２９～３０
无水碳酸钠、丙酮、石油醚、无水乙醇：分析纯，国药集团
化学试剂有限公司；
没食子酸标准品：分析纯，上海金穗生物科技有限公司；
福林酚试剂：分析纯，美国Ｓｉｇｍａ公司。
１．２ 主要仪器设备
超声波清洗仪：ＸＯ－５２００ＤＴＳ型，南京先欧仪器制造有
限公司；
双光束紫外可见分光光度计：ｉ８型，济南海能仪器股份
有限公司；
实验室纯水机：Ｕｎｉｑｕｅ－Ｒ１０（ＵＶ＋ＵＦ）型，厦门锐思捷
科学仪器有限公司；
电子天平：ＴＰ－２１４型，丹佛仪器北京有限公司；
数显恒温水浴锅：ＨＨ－１型，江苏智博瑞仪器制造有限
公司：
回旋振荡器；ＴＨＺ－８２Ａ型，金坛市荣华仪器制造有限
公司；
蠕动泵：ＢＴ－１００ＣＡ型，重庆市杰蠕动泵有限公司。
１．３ 方法
１．３．１ 大孔树脂预处理流程
分别 取 ６ 种 大 孔 树 脂 （ＡＢ－８、Ｄ１０１、ＨＰＤ－５００、Ｓ－８、
ＤＭ１３０、Ｘ－５）→９５％乙醇浸泡２４ｈ（充分溶胀）→过滤→反复
用去离子水洗（流出液无白色浑浊，无乙醇味，中性）→５％盐
酸浸泡１２ｈ→去离子水洗（中性）→５％氢氧化钠浸泡１２ｈ→
去离子水淋洗（中性）→用蒸馏水保鲜（密封备用）
１．３．２ 多酚的提取
神秘果种子→粉碎过筛（６０目）→石油醚脱脂（３倍体积
石油醚，脱脂３次）→粉末烘干至恒重→双水相体系一次超
声浸提（硫酸铵０．２２ｇ，６０ ℃，１１０（ｍＶ），１００ｍｉｎ，
２００Ｗ）→静置分层→上层为浸提液
１．３．３ 种子多酚标准曲线的建立 根据文献［６］，修改如
下：精密称取没食子酸对照品０．１ｇ，用蒸馏水溶解，配制
１００μｇ／ｍＬ的标准液。准确量取０．００，０．０５，０．１０，０．１５，
０．２０，０．２５，０．３０，０．３５ｍＬ于８个１０ｍＬ容量瓶，分别精确
移取２ ０００，１ ９５０，１ ９００，１ ８５０，１ ８００，１ ７５０，１ ７００，１ ６５０μＬ
蒸馏水于８个容量瓶中，摇匀，分别加２ｍｏｌ／Ｌ福林试剂
１．０ｍＬ，静置６ｍｉｎ后分别加入１０％的碳酸钠溶液１．０ｍＬ，
置于２５℃水浴中避光静置２ｈ，测定溶液在７６５ｎｍ处的吸
光值（Ａ７６５）。以种子多酚浓度为横坐标Ｃ（ｍｇ／ｍＬ），以吸光
度Ａ为纵坐标。
１．３．４ 吸附树脂的初步选择
（１）各树脂吸附量、吸附率的动态趋势：准确称取６种预
处理后经滤纸吸干的树脂各２ｇ，分别置于１５０ｍＬ锥形瓶
中，依次加入１．２ｍｇ／ｍＬ多酚样品液５０ｍＬ，密封后水浴摇
床振荡（２５℃、１２０ｒ／ｍｉｎ、２４ｈ），分别在开始吸附后的０．５，
１．０，２．０，３．０，４．０，６．０，８．０，１０．０，１２．０ｈ时，依次取上清液，
测剩余多酚浓度，按式（１）、（２）计算吸附量、吸附率。绘制静
态吸附曲线。
Ａ＝
（Ｃ０－Ｃｅ）×Ｖ０
ｍ
（１）
Ｂ＝
（Ｃ０－Ｃｅ）
Ｃ０ ×
１００％ （２）
式中：
Ａ———树脂饱和时的吸附量，ｍｇ／ｇ；
Ｂ———树脂的吸附率，％；
Ｃ０———多酚提取液的初始浓度，ｍｇ／ｍＬ；
Ｃｅ———吸附平衡后多酚的质量浓度，ｍｇ／ｍＬ；
Ｖ０———多酚提取液的体积，ｍＬ；
ｍ———吸附树脂的质量，ｍｇ。
（２）各树脂解吸量、解吸率的动态趋势：将６种充分吸附
的树脂过滤后置于１５０ｍＬ锥形瓶中，加入同体积７０％的乙
醇，密封后摇床振荡（２５℃、１２０ｒ／ｍｉｎ、８ｈ），分别在洗脱后
的１，２，３，４，６，８ｈ时，取适量洗脱液测多酚浓度，按式（３）、
（４）计算解吸量、解吸率。绘制静态解吸曲线。
Ｚ＝Ｃｄ×Ｖｄｍ
（３）
Ｙ ＝ Ｃｄ×Ｖｄ（Ｃ０－Ｃｅ）×Ｖ０×
１００％ （４）
式中：
Ｚ———树脂的解吸量，ｍｇ／ｇ；
Ｙ———树脂的解吸率，％；
Ｃｄ———洗脱液中多酚的浓度，ｍｇ／ｍＬ；
Ｖｄ———洗脱液的体积，ｍＬ；
ｍ———吸附树脂的质量，ｍｇ；
Ｃ０———多酚提取液的初始质量浓度，ｍｇ／ｍＬ；
Ｃｅ———吸附平衡后多酚的浓度，ｍｇ／ｍＬ；
０４１
提取与活性 ２０１６年第２期
Ｖ０———多酚提取液的体积，ｍＬ。
１．３．５ 静态吸附与解吸附
（１）等温线的绘制：准确称取６份预处理后经滤纸吸干
的树脂各２ｇ，分别置于１５０ｍＬ锥形瓶中，依次加入浓度分
别为０．４，０．６，０．８，１．０，１．２，１．４，１．６ｍｇ／ｍＬ的多酚样品液
各５０ｍＬ，密封后分别在３０℃水浴摇床振荡（１２０ｒ／ｍｉｎ、
２４ｈ）充分吸附，取适量上清液测剩余多酚含量，计算不同浓
度时树脂吸附多酚的含量。
（２）ｐＨ对吸附效果的影响：将提取的多酚样品液用１％
ＨＣｌ和１％ ＮａＯＨ调节ｐＨ分别为２．８，４．８，５．８，６．８，８．８。
按照１．３．５（１）的方法，依次加入不同ｐＨ的样品液各５０ｍＬ，
置于恒温振荡器（３０℃、１２０ｒ／ｍｉｎ、２４ｈ）。测定平衡液中多
酚含量。计算不同ｐＨ条件下吸附多酚的含量。
（３）乙醇浓度对解吸效果的影响：准确称取８份预处理
后经滤纸吸干的树脂各２ｇ，置于１５０ｍＬ锥形瓶，依次加入
１．２ ｍｇ／ｍＬ 多酚样品液 ５０ ｍＬ，密封后水浴摇床振荡
（３０℃、１２０ｒ／ｍｉｎ、２４ｈ），充分吸附后，测定平衡液中多酚浓
度，计算吸附量。将树脂过滤后，依次用３０％，４０％，５０％，
６０％，７０％，８０％，９０％，１００％的乙醇溶液５０ｍＬ洗脱，密封
后水浴摇床振荡（３０℃、１２０ｒ／ｍｉｎ、２４ｈ），测定解吸液中多
酚含量。比较不同浓度乙醇对解吸附效果的影响。
１．３．６ 动态吸附与解吸附
（１）样品液浓度的优选：称取预处理后的树脂，装入
２０ｍｍ×３００ｍｍ层析柱１５ｃｍ处，一段时间树脂平衡后，配
制浓度为０．８，１．０，１．２，１．４，１．６，１．８ｍｇ／ｍＬ的样品液，在
３０℃，ｐＨ ５．８（用１％ ＨＣｌ和１％ ＮａＯＨ调节）的条件下，分
别以１．０ｍＬ／ｍｉｎ的速度对样品液进行动态吸附。收集流出
液，测定平衡液中多酚含量，计算吸附量。
（２）吸附液 体 积 的 确 定：选 取 最 佳 样 品 液 浓 度 以
１．０ｍＬ／ｍｉｎ的流速上样，收集流出液，每流出２０ｍＬ样品液
测其多酚含量。绘制流出液体积与多酚含量关系的曲线。
（３）解吸液体积的确定：使上述树脂达到吸附平衡后，
用适量蒸馏水淋洗，用７０％乙醇以１．０ｍＬ／ｍｉｎ的流速解
吸，收集流出液，每流出５ｍＬ解吸液测其多酚含量。绘制流
出液体积与多酚含量关系的曲线。
（４）吸附流速的优选：选取如上最佳浓度的样品液，调
节ｐＨ ５．８，控制蠕动泵分别以０．５，１．０，１．５，２．０，２．５ｍＬ／ｍｉｎ
的吸附流速，分瓶收集流出液测其体积和多酚浓度，计算吸
附多酚含量。
（５）解吸流速的优选：选取浓度为１．０ｍｇ／ｍＬ、ｐＨ ５．８
的样品液，以最佳吸附流速上样，直到吸附达到平衡后，取
７０％乙醇分别以０．５，１．０，１．５，２．０，２．５ｍＬ／ｍｉｎ的流速对其
洗脱，分瓶收集流出液测其吸光度。绘制不同洗脱流速下的
解吸曲线。
１．３．７ 经Ｘ－５纯化后总抗氧化能力测定 将纯化前后的样
品液扫描紫外光谱，对比前后吸光度，考察纯化效果。分别
取提取液和纯化后的洗脱液适量，用７０％乙醇稀释５倍。采
用Ｔ－ＡＯＣ试剂盒，测定经Ｘ－５纯化前后总多酚的总抗氧化
能力。
２ 结果与分析
２．１ 多酚标准曲线
通过对不同质量浓度多酚吸光值的测定，得到种子多酚
的线性回归方程为Ｙ＝０．０１３ ９２ｘ＋０．０３６ ９２，Ｒ２＝０．９９９ ５。
图１ 没食子酸标准曲线
Ｆｉｇｕｒｅ １ Ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｏｆ ｇａｌｉｃ ａｃｉｄ
２．２ 树脂的优选
２．２．１ 对６种树脂的吸附量、吸附率、解吸附量、解吸附率
的评定 由表２可知，Ｓ－８和Ｘ－５均有较高的吸附率，但Ｓ－８
的解吸率只有４１．７５％，说明吸附量不仅仅与平均孔径有关，
同时也受比表面积的影响，导致Ｓ－８吸附的多酚不易被解吸
出来［７］，由于 ＨＰＤ５００和Ｘ－５的比表面积相对较大，因此解
吸率也相对较高。通过吸附与解吸附率的宏观评定，初步筛
选Ｘ－５为宜。
表２ ６种树脂静态吸附与解吸试验结果
Ｔａｂｌｅ ２ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｓｔａｔｉｃ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｓｉｘ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎｓ
树脂型号
平衡浓度／
（ｍｇ·ｍＬ－１）
吸附量／
（ｍｇ·ｇ－１）
吸附率／
％
解吸量／
（ｍｇ·ｇ－１）
解吸率／
％
ＡＢ－８ ０．３６３ ８ １５．９１ ６３．６２ １２．４５ ７８．３４
Ｄ１０１ ０．２３２ ４ １９．１９ ７６．７６ １３．５５ ７０．６１
ＨＰＤ５００ ０．２９８ ９ １７．５３ ７０．１１ １４．０７ ８０．２７
Ｓ－８ ０．１６４ ６ ２１．７３ ８３．５４ ９．０７ ４１．７５
ＤＭ１３０ ０．２４５ ６ １８．８６ ７５．４４ １４．２６ ７５．６３
Ｘ－５ ０．１８２ ７ ２０．４３ ８１．７３ １７．１４ ８３．９１
１４１
第３２卷第２期 马艺丹等：神秘果种子多酚大孔树脂纯化工艺研究
２．２．２ ６种树脂静态吸附的动态趋势 大孔树脂的吸附能
力与极性、比表面积、孔径等因素有关。因此，考察几种不同
类型的大孔树脂的吸附能力。由图２可知，６种树脂都具有
较快吸附多酚的能力，随着时间的变化，吸附速率在１ｈ后
变化比较稳定，且在１２ｈ时６种树脂均已经达到吸附平衡。
但是不同树脂因理化性质不尽相同，对多酚的吸附量差别也
较大。Ｓ－８吸附量最大（２１．７３ｍｇ／ｍＬ），其余依次为：Ｘ－５、
Ｄ１０１、ＤＭ１３０、ＨＰＤ５００、ＡＢ－８。
图２ ６种树脂静态吸附的动态趋势
Ｆｉｇｕｒｅ ２ Ｓｔａｔｉｃ ａｂｓｏｒｐｔｉｖｅ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｔｒｅｎｄ ｏｆ
ｓｉｘ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｒｅｓｉｎｓ
２．２．３ ６种树脂静态解吸附的动态趋势 由图３可知，６种
树脂解吸多酚的能力均不相同。解吸速率也有明显的差异，
Ｘ－５在１ｈ时，解吸率已经达到８３．９１％，且２ｈ时基本已经
达到平衡。其次，ＨＰＤ５００、ＡＢ－８和ＤＭ１３０的解吸率较Ｘ－５
稍低，但均在４ｈ后才达到解吸平衡，时间较长。Ｓ－８的解吸
率最低只有４１．７５％，可能是由于Ｓ－８的极性比解吸液的极
性还要强所导致的。虽Ｄ１０１的解吸率较Ｓ－８高，但均６ｈ才
达到解吸平衡。综合表２和图２、３可知，Ｘ－５为最佳树脂。
图３ ６种树脂静态解吸附的动态趋势
Ｆｉｇｕｒｅ ３ Ｓｔａｔｉｃ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｔｒｅｎｄ ｏｆ
ｓｉｘ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｒｅｓｉｎｓ
２．３ 静态吸附与解吸附
２．３．１ Ｌａｎｇｍｕｉｒ等温线 由图４可知，Ｌａｎｇｍｕｉｒ等温线
Ｒ２＝０．９９５ ５，说明此等温线可以用来描述神秘果种子多酚，
Ｑｍ＋＝４５．２５ｍｇ／ｇ表明为单分子层吸附［８－９］。因此，较适用
于低浓度吸附。
图４ Ｌａｎｇｍｕｉｒ等温线
Ｆｉｇｕｒｅ ４ Ｔｈｅ Ｌａｎｇｍｕｉｒ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｓｏｔｈｅｒｍ
２．３．２ ｐＨ对吸附效果的影响 由图５可知，ｐＨ对树脂吸
附量影响显著。ｐＨ值过高或过低都会导致吸附量下降。当
ｐＨ在２．８～５．８时，随着ｐＨ增大吸附量升高。当ｐＨ为５．８
时，吸附量达到最大，为２４．４ｍｇ／ｍＬ。当ｐＨ 大于５．８时，
吸附量降至更低。可能是种子多酚中含有某些不稳定且受
ｐＨ影响较大的物质（如酚羟基），过碱会解离出氢离子，减弱
氢键间作用力，使吸附量降低。弱酸条件多酚多以分子态存
在，更易于树脂对多酚的吸附［１０－１１］。因此，选ｐＨ ５．８最佳。
图５ ｐＨ对吸附效果的影响
Ｆｉｇｕｒｅ ５ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｐＨ ｖａｌｕｅ ｏｎ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｃａｐａｃｉｔｙ
２．３．３ 乙醇浓度对解吸附效果的影响 乙醇浓度对大孔树
脂的解吸附率有明显的影响，选用乙醇作为解吸液具有无
毒、经济等优点。由图６可知，乙醇浓度为３０％时，解吸率很
低，仅５９．８％。乙醇浓度增大至７０％时，解吸率达到最大
（８２．９％）。继续增大乙醇浓度，解吸率反而显著下降。可能
是多酚易溶于水，所以高浓度的乙醇因含水量低不利于多酚
溶解，乙醇浓度过低又不利于极性物质解吸出来［１２－１３］。因
此，综合成本与效果，选７０％乙醇最佳。
图６ 乙醇浓度对解吸附效果的影响
Ｆｉｇｕｒｅ ６ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｎ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｃａｐａｃｉｔｙ
２４１
提取与活性 ２０１６年第２期
２．４ 动态吸附与解吸附
２．４．１ 样品浓度对吸附量的影响 由图７可知，低浓度时
随着多酚浓度增大吸附量也随之升高，当浓度为１２ｍｇ／ｍＬ
时，吸附量达到最大（２４．５ｍｇ／ｍＬ）。继续增大样品浓度，吸
附量持续下降。原因是低浓度时，多酚可与树脂的孔径充分
接触，利于吸附。而增大浓度的同时，当多酚进入到树脂孔
径内无法充分扩散，树脂吸附杂质的量也随之增多，甚至阻
碍多酚进入孔径，导致吸附量下降。因此，样品液浓度为
１．２ｍｇ／ｍＬ最佳。
图７ 样品浓度对吸附量的影响
Ｆｉｇｕｒｅ ７ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｏｎ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｃａｐａｃｉｔｙ
２．４．２ 吸附液体积与浓度的动态变化趋势 由图８可知，
样品液流出１５ｍＬ前，流出液的浓度变化幅度稍大，随后
１５ｍＬ到９５ｍＬ，浓度增大较为均匀。流出９５ｍＬ以后，浓度
不再变化，说明树脂已经吸附饱和。因此，考虑效果与耗时
因素，上样１００ｍＬ最佳。
２．４．３ 解吸液体积与浓度的动态变化趋势 由图９可知，解
图８ 吸附液体积与浓度的动态变化趋势
Ｆｉｇｕｒｅ ８ Ｄｙｎａｍｉｃ ｃｈａｎｇｅｓ ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
ｖｏｌｕｍｅ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
图９ 解吸液体积与浓度的动态变化趋势
Ｆｉｇｕｒｅ ９ Ｄｙｎａｍｉｃ ｃｈａｎｇｅ ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｐａｒｓｉｎｇ ｆｌｕｉｄ
ｖｏｌｕｍｅ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
吸液体积５～１０ｍＬ时，已有少量多酚解吸出来。随着体积
增大，解 吸 液 浓 度 迅 速 升 高，１５ ｍＬ 时 浓 度 达 到 最 大
（４．５ｍｇ／ｍＬ）。随着体积继续增大，浓度逐渐降低，５０ｍＬ
时解吸液的浓度趋近于零，之后浓度变化甚小。说明此时多
酚已被完全解吸。因此，考虑回收因素，选５０ｍＬ解吸液
最佳。
２．４．４ 吸附液流速对吸附量的影响 由图１０可知，流速过
低（０．５ｍＬ／ｍｉｎ）时，吸附量只有１０．２ｍｇ／ｇ。当流速为
１ｍＬ／ｍｉｎ时，吸附量可达到最大值（２０．４ｍｇ／ｇ）。相对于
０．５ｍＬ／ｍｉｎ，吸附量增大了１倍。而继续增大吸附液流速，
吸附量却呈现降低趋势。原因是高吸附液流速的多酚物质
还没来得及被树脂吸附就流出，使多酚与树脂的接触时间过
短［１４－１５］。但吸附流速若太低，使树脂的孔径不能得到充分
利用吸附不完全，会延长吸附周期。因此，综合考虑选
１ｍＬ／ｍｉｎ为最佳吸附流速。
图１０ 吸附液流速对吸附量的影响
Ｆｉｇｕｒｅ １０ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｎ
ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｃａｐａｃｉｔｙ
２．４．５ 解吸液流速对解吸率的影响 由图１１可知，解吸液
流速为 ０．５ ｍｇ／ｍｉｎ时，解吸率为 ７６．４％，当流速达到
１．５ｍｇ／ｍｉｎ时，解 吸 率 达 到 最 大 （８３．９％）。流 速 大 于
１．５ｍＬ／ｍｉｎ时，解吸液与多酚接触时间短作用不充分，洗脱
不完全，导致解吸率降低［１６－１８］。因此，选１．５ｍＬ／ｍｉｎ为解
吸流速。
图１１ 解吸液流速对解吸率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ １１ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｎ
ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｃａｐａｃｉｔｙ
２．５ 纯化后总多酚含量和总抗氧化能力测定
由图１２可知，纯化前后紫外图谱走势相同，而且纯化后
的吸光度明显高于纯化前，２８０ｎｍ存在多酚的特征峰，说明
此工艺纯化效果良好。
３４１
第３２卷第２期 马艺丹等：神秘果种子多酚大孔树脂纯化工艺研究
图１２ 种子多酚溶液纯化前后的吸收曲线
Ｆｉｇｕｒｅ １２ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅ ｏｆ ｓｅｅｄ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｓｏｌｕｔｉｏｎ
ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ
经优化方案纯化后，神秘果种子多酚提取液中总多酚含
量由原来的０．９２ｍｇ／ｇ提高到１．９３ｍｇ／ｇ，提高了２倍。通过
Ｔ－ＡＯＣ试剂盒测定，纯化前总抗氧化能力为４６７．７Ｕ／ｍＬ，
纯化后为１ １６９．３Ｕ／ｍＬ，提高了２．５倍。说明纯化效果
良好。
３ 结论
（１）以吸附量、吸附率、解吸量、解吸率为评定参数，结
合静态吸附与解吸附的动态趋势曲线，比较（ＡＢ－８、Ｄ１０１、
ＨＰＤ－５００、Ｓ－８、ＤＭ１３０、Ｘ－５）６种树脂对神秘果种子多酚的纯
化效果，优选出Ｘ－５为最佳吸附树脂。
（２）静态吸附与解吸附表明：神秘果种子多酚的等温曲
线符合Ｌａｎｇｍｕｉｒ等温线，由斜率和截距可知最大吸附量为
４５．２５ｍｇ／ｇ，说明Ｘ－５对神秘果种子多酚是单分子层吸附，
因此，适于选用低浓度样品液。ｐＨ ５．８时吸附效果好，解吸
液选用７０％乙醇时解吸率高。
（３）动态吸附与解吸附表明，最佳条件为：样品液浓度
１．２ｍｇ／ｍＬ、吸附液体积１００ｍＬ、解吸液体积５０ｍＬ、吸附液
流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ、解吸液流速１．５ｍＬ／ｍｉｎ。解吸曲线对称
性良好，无拖尾，解吸液用量少，解吸完全。因此，适用于吸
附神秘果种子多酚。
（４）按筛选出的吸附与解吸条件经Ｘ－５纯化后，神秘果
种子多酚提取液中总多酚含量提高了２倍。采用Ｔ－ＡＯＣ试
剂盒测定，总抗氧化能力提高了２．５倍。说明如上方案适用
于对神秘果种子多酚的纯化。
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