全 文 ：·工艺研究·
收稿日期:2011 － 03 － 21
基金项目:贵州省教育厅自然科学研究项目［黔教科(2007)074 号］
作者简介:刘亮(1981 －) ，男，讲师，理学硕士。研究方向:中药、民族药化学成分及质量研究。
苗药观音草超声提取工艺的研究
刘 亮1，杜 江2，姚 丽1，罗海明1
(1．遵义医药高等专科学校，贵州 遵义 563002;2．贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)
摘 要:目的 优选观音草总皂苷的最佳超声提取工艺。方法 采用正交试验法，以提取液中总皂苷的
含量为考察指标。结果 试验设计 4 个因素中频率及功率有显著影响，最佳的提取工艺为:频率 70 KHz、功
率 255 W、10 倍量 60%乙醇、超声提取 30 min。结论 本法操作简便、经济、可行，总皂苷得率高。
关键词:观音草;超声提取;提取工艺
中图分类号:R282． 710． 2 文献标识码:B 文章编号:1003 － 8450(2011)05 － 0046 － 03
观音草 Reineckia carnea(Andr．)Kunth 为百合
科植物吉祥草的带根全草，又名结实兰、竹叶草、佛
顶珠、小青胆，是一味著名的苗药，苗药理论认为其
药性为性冷，质征为气微味甜，入热经，走肺、肝二
架，表、中、里三关，主要用于治疗肺热咳嗽、跌打损
伤、疮毒等。通过查阅文献，我们发现观音草在工艺
优选方面的研究极少，难以进行深入开发。本试验
旨在为超声提取法提取观音草中的总皂苷积累参
数，为观音草的进一步开发、利用提供试验数据。
1 仪器与试药
JBT /C － YCL400T /3P(D)型超声波药品处理
机，济宁金百特工程机械有限公司;UV75 － 18 可见
分光光度计，天津市拓普仪器有限公司;DHG
90AOA 型电热恒温鼓风干燥箱，宁波江南仪器厂;
Senco R系列旋转蒸发仪，上海申生科技有限公司;
FY130 型药物粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司;
DKS －26 型电热恒温水浴锅，宁波江南仪器厂。
薯蓣皂苷对照品，购于上海华壹生物科技有限
公司，批号 19057 － 60 － 4;观音草药材采集于贵州
遵义，经遵义医药高等专科学校张学愈副教授鉴定
为百合科植物观音草 Reineckia carnea (Andr．)
Kunth;其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 正交试验设计
本试验以观音草中总皂苷的含量为指标，选择
超声频率及功率、超声时间、乙醇浓度、液料比 4 个
因素为考察因素［1 － 3］，采用 L9(3
4)正交设计表进行
试验。正交因素水平表见表 1。
表 1 正交试验因素水平表
水平 /因素
频率 /KHz及功率 /W
A
超声时间 /min
B
乙醇浓度 /%
C
液料比
D
1 27，172 30 60 10
2 50，85 45 70 15
3 70，255 60 80 20
2． 2 供试品溶液的制备
称取观音草粗粉 5 g，共 9 份，在 55 ℃水温下，
分别按正交表安排进行超声提取，提取液浓缩至干，
加入蒸馏水溶解，并转移至 100 mL容量瓶中加蒸馏
水稀释至刻度，摇匀，准确吸取 10 mL 于分液漏斗
中，用石油醚分 6 次萃取(15，10，10，10，10，
10 mL) ，弃去石油醚液，水液再用水饱和正丁醇分 4
次萃取(15，10，10，10 mL) ，正丁醇萃取液用正丁醇
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饱和水 20 mL洗涤，减压回收正丁醇至干，残渣用甲
醇溶解并定容于 25 mL 容量瓶中，作为供试品溶
液［4］。
2． 3 对照品溶液的制备
精密称取薯蓣皂苷对照品 1． 2 mg 置于 10 mL
容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为对
照品溶液。
2． 4 标准曲线的制备
分别精密移取薯蓣皂苷对照品溶液 0，0． 2，
0． 4，0． 6，0． 8，1． 0 和 1． 2 mL 置于 10 mL 具塞试管
内，挥干甲醇，再分别加入 5%的香草醛冰醋酸溶液
0． 2 mL和高氯酸 0． 8 mL，摇匀，密塞，60 ℃水浴显
色 15 min，取出后立即用冰水冷却 5 min，再加入
5 mL冰醋酸稀释，摇匀，静置 10 min，于 460 nm处测
定其吸光度［5］。以吸光度(A)为纵坐标，质量浓度
(C)为横坐标进行线性回归。结果表明，薯蓣皂苷
在4 ～ 24 μg /mL范围内与吸光度呈良好的线性关
系。回归方程为 A = 0． 019 121C + 0． 006 133，r =
0． 999 5。标准曲线见图 1。
图 1 薯蓣皂苷对照品标准曲线
2． 5 供试品溶液的测定
分别精密吸取供试品溶液 0． 2 mL，按 2． 4 项下
的操作方法显色，于 460 nm处作含量测定。
2． 6 结果与方差分析
试验设计及数据处理结果见表 2，方差分析见
表 3。
表 2 L9(3
4)正交试验结果
因素
试验号
A B C D
观音草总皂苷
的含量 /%
1 1 1 1 1 2． 23
2 1 2 2 2 2． 00
3 1 3 3 3 2． 02
4 2 1 2 3 1． 73
5 2 2 3 1 2． 20
6 2 3 1 2 1． 31
7 3 1 3 2 2． 88
8 3 2 1 3 2． 43
9 3 3 2 1 3． 03
K1 2． 083 2． 280 1． 990 2． 487
K2 1． 747 2． 210 2． 253 2． 063
K3 2． 780 2． 120 2． 367 2． 060
R 1． 033 0． 160 0． 377 0． 427
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表 3 方差分析表
因素 偏差平方和 自由度 F比值 F临界值 显著性
A 1． 666 2 42． 718 19． 000 P ＜ 0． 05
B 0． 039 2 1． 000 19． 000
C 0． 224 2 5． 744 19． 000
D 0． 361 2 9． 256 19． 000
误差 0． 04 2
由表 2 分析可知最佳的提取工艺为 A3B1C3D1。
由表 3 方差分析可知，各因素对总皂苷得率的影响
大小顺序为 A﹥ D﹥ C﹥ B，结果显示超声频率及
功率对总皂苷的得率有显著影响，其余 3 个因素均
无显著性。因此，考虑节约成本等实际情况，提取工
艺调整为 A3B1C1D1，即频率 70 KHz、功率 255 W、10
倍量 60%乙醇、超声提取 30 min。
3 讨论
超声波提取法是利用其空化作用加速观音草中
总皂苷的溶出，从理论上考虑，提取时间越长、液料
比越大，总皂苷得率应越高，但本试验结果不支持该
观点，可能是因为提取时间过长，超声强化作用增加
了杂质的溶出，液料比越大，超声强化作用减弱，从
而导致总皂苷溶解量减少。本试验是在 55 ℃水温
中提取，主要是考虑到苷类化合物的酶水解问题。
总皂苷的纯化先用石油醚萃取是为了除去脂溶性的
杂质，再应用皂苷在含水正丁醇中溶解度较大的性
质进行萃取，进而除去水溶性的杂质，得到纯化的总
皂苷。
本研究结果表明只有超声的频率及功率对总皂
苷的含量有显著性影响，故试验的最佳工艺为在
55 ℃水温下，选择超声频率 70 KHz及功率 255 W，
用 10 倍量 60%乙醇进行超声提取 30 min，所得提
取液用正丁醇萃取法纯化。本工艺的优点是提取时
间短，操作简便，皂苷提取率高。
参考文献:
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櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊
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