全 文 ：　项目来源：临沂市科技发展计划项目（Ｎｏ：０８０１０３０５４）
　作者简介：徐向田（１９５４－），男，山东省莒南县人，１９７８年毕
业于山东医学高等专科学校，教授，现从事传染
病学教学与研究工作。
　收稿日期：２０１３－０３－１２
　　山东医学高等专科学校学报２０１３，３５（３）：２２７－２２８Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｈａｎｄｏｎｇ　 Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ
小叶女贞叶及复方制剂中齐墩果酸含量测定实验研究
徐向田１，刘 刚１，张叔芳１，郑世琴２，唐国栋３
（１山东医学高等专科学校，山东临沂２７６０００；２临沂市人民医院；３临沂肝胆病医院）
　　摘要：目的　测定小叶女贞叶、小叶女贞茶和清醇健肝胶囊有效成分，建立小叶女贞含量测定
方法。方法　筛选小叶女贞含量测定方法，采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定样品中齐墩果酸含
量。结果　小叶女贞叶中齐墩果酸的含量为０．０４９３％；小叶女贞茶中齐墩果酸含量为０．０５２５％；清
醇健肝胶囊干浸膏中齐墩果酸含量为０．０６３６％。结论　本实验中小叶女贞叶单方中的含量较低，
清醇健肝胶囊干浸膏中含量较高。
关键词：小叶女贞叶；高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）；齐墩果酸；含量测定
　　中图分类号：Ｒ　２８４．１　　　文献标识码：Ａ 文章编号：１６７４－０９４７（２０１３）０３－０２２７－０２
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－０９４７．２０１３．０．０００　　 网络出版时间：２０１３－４－１　１７：００
网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３７．１４５１．Ｒ．２０１３０４０１．１７００．００１．ｈｔｍｌ
ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　ＯＮ　ＴＨＥ　ＣＯＮＴＥＮＴ　ＡＳＳＡＹＩＮＧ　ＯＦ
ＯＬＥＡＮＯＬＩＣ　ＡＣＩＤ　ＩＮ　ＬＯＢＵＬＡＲ　ＰＲＩＶＥＴ　ＬＥＡＶＥＳ
ＡＮＤ　ＣＯＭＰＯＵＮＤ　ＰＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮ
ＸＵ　Ｘｉａｎｇ－ｔｉａｎ，ＬＩＵ　Ｇａｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｓｈｕ－ｆａｎｇ，ｅｔ　ａｌ
（Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｌｉｎｙｉ，Ｃｈｉｎａ２７６０００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｌｏｂｕｌａｒ　ｐｒｉｖｅｔ　ｌｅａｖｅｓ，ｌｏｂｕｌａｒ　ｐｒｉｖｅｔ
ｔｅａ　ａｎｄ　Ｑｉｎｇｃｈｕｎｊｉａｎｇａｎ　ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｓｓａｙｉｎｇ　ｏｆ　Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｌｏｂｕｌａｒ　ｐｒｉｖｅｔ．
Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｓｓａｙｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
（ＨＰＬＣ）ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｓａｍｐｌｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｏｌｅａｎｏｌｉｃ
ａｃｉｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｏｂｕｌａｒ　ｐｒｉｖｅｔ　ｌｅａｖｅｓ，ｔｈｅ　ｌｏｂｕｌａｒ　ｐｒｉｖｅｔ　ｔｅａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｑｉｎｇｃｈｕｎｊｉａｎｇａｎ　ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｗｅｒｅ　０．０４９３％，
０．０５２５％ａｎｄ　０．０６３６％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＩｎ　ｔｈｉｓ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｓ　ｌｏｗ　ｉｎ
ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｏｂｕｌａｒ　ｐｒｉｖｅｔ　ｌｅａｖｅｓ　ｂｕｔ　ｈｉｇｈ　ｉｎ　Ｑｉｎｇｃｈｕｎｊｉａｎｇａｎ　ｃａｐｓｕｌｅｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｌｏｂｕｌａｒ　ｐｒｉｖｅｔ　ｌｅａｖｅｓ；Ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ；Ａｓｓａｙｉｎｇ
　　小叶女贞在我国大部分地区均有栽培，叶和果
实中主要含有齐墩果酸、熊果酸等物质，有抗氧化作
用［１－２］。既往的研究发现，复方小叶女贞茶中还含有
黄酮类物质，以小叶女贞叶为主组方的清醇健肝胶
囊具有降脂作用［３－５］。本研究测定小叶女贞叶及其
复方制剂小叶女贞茶和清醇健肝胶囊干浸膏中齐墩
果酸含量，以建立小叶女贞中药物的测定方法。
１　材料与方法
１．１　仪器与对照品　美国ＳＳＩⅢ型高效液相色谱，
Ｍｏｄｅｌ２００紫外检测器，７７２５ｉ手动定量进样阀。
Ｈａｍｉｌｔｏｎ微量进样器。ＦＡ２００４Ｂ电子分析天平。
ＫＱ２２００Ｂ型超声波清洗器。甲醇为色谱纯，其他均
为分析纯。齐墩果酸对照品（中国药品生物制品检
验所，批号１１０７０９－２００５０５）。
１．２　试验样品　小叶女贞叶由莒南雪溪茶厂提供；
小叶女贞茶及清醇健肝胶囊均由临沂肝胆病医院制
剂室研制［６］。
１．３　 色谱条件 　 色谱柱安捷伦 Ｃ１８ 柱 （４．
６ｍｍＸ２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇一水（９５∶５），
用磷酸调节ｐＨ值至３．０；流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；检测波
长：２０５ｎｍ；柱温：室温；进样量：２０μｌ。
１．４　测定方法的建立
１．４．１　精密度试验　精密吸取中间浓度的对照品
溶液２Ｏμｌ，重复进样５次，测得齐墩果酸峰面积的
ＲＳＤ分别为１．０９％、０．８３％，表明仪器精密度良好。
１．４．２　稳定性试验　取中间浓度的对照品溶液室
温放置８小时，分别在０、１、２、４、６、８小时时取样测
定，测得齐墩果酸峰面积的ＲＳＤ分别为０．９１％、１．
０３％，表明本品稳定性良好。
１．４．３　检测限试验　齐墩果酸检测限：精密称取齐
墩果酸对照品５．１ｍｇ，置１００ｍｌ量瓶中，加甲醇溶
解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取１ｍｌ加甲醇稀释
至２５ｍｌ，再精密吸取５ｍｌ加甲醇稀释至１０ｍｌ。吸
取上述溶液２０μｌ，按上述色谱条件进样分析，此时
信噪比约为３∶１，计算得齐墩果酸检测限为２０．
４ｎｇ。
２　结果
小叶女贞中药物测量方法为，分别精密称取小
叶女贞叶、小叶女贞茶及清醇健肝胶囊干浸膏１ｇ，
按上述方法制成供试品溶液；精密称取齐墩果酸对
照品各１２．５ｍｇ，置２５ｍｌ量瓶中，加甲醇溶解并稀
释至刻度，摇匀，精密吸取５ｍｌ加甲醇稀释至５０ｍｌ，
作为对照品溶液；分别精密量取供试品溶液和对照
品溶液各２０μｌ，在上述色谱条件下，测量峰面积并
用外标法计算样品中齐墩果酸的含量。测得：小叶
女贞叶中齐墩果酸的含量为０．０４９３％；小叶女贞茶
中齐墩果酸含量为０．０５２５％；清醇健肝胶囊干浸膏
中齐墩果酸含量为０．０６３６％。
４　讨论
目前，我国酒精性肝病（下成称“酒精肝”）的发
病率约为１０％，它表现为脂肪肝、酒精性肝炎、酒精
性肝硬化等，有的可发展成高脂血症、肥胖或糖尿
病。酒精性肝病严重危害人类健康［７］。加快研制有
效而服用方便的防治酒精肝的相关产品十分必要。
复方小叶女贞茶（又称“清醇绿宝茶”），由小叶
女贞叶、山楂叶、枸杞叶按制茶工艺加工而成。临床
初步观察发现有调节血脂、减轻体重、防治酒精肝作
用。清醇健肝胶囊由小叶女贞叶、茶叶、葛根等加工
制成。系硬胶囊剂型，内容物为棕褐色粉末；气微
香，味苦。功能主治：清利湿热、祛浊消脂；疏肝理
气，健脾和胃。用于各型肝炎、脂肪肝、酒精性肝损
伤［３－６］。
为了明确有效成分和含量，制定药品质量标准，
特对小叶女贞叶及其复方制剂小叶女贞茶和清醇健
肝胶囊干浸膏中主要有效成分齐墩果酸进行含量测
定。本研究结果显示，小叶女贞叶、小叶女贞茶、清
醇健肝胶囊干浸膏中齐墩果酸的含量分别为０．
０４９３％、０．０５２５％、０．０６３６％，提示小叶女贞叶单方
中的含量较低，清醇健肝胶囊干浸膏中含量较高。
关于其含量与制剂的生产工艺、剂量、疗效关系
有待进一步探讨。
参考文献
［１］　李晓蒙，蔡志蓬，李显奇．小叶女贞化学成分研究［Ｊ］．
广东药学院学报，１９９８，１３（２）：５．
［２］　洪新，杨肇享，周向东．小叶女贞提取物 Ｍ２自由基清
除剂作用的实验研究［Ｊ］．第三军医大学学报，１９９５，１６
（０４）：３４１－３４２．
［３］　徐向田．复方小叶女贞茶调节大鼠血脂和影响动物体
重实验研究［Ｊ］．中华中医药学刊，２００９，２７（８）：６２．
［４］　魏延军，刘彦英，徐向田．清醇绿宝茶（复方小叶女贞
茶）治疗脂肪肝的临床疗效观察［Ｊ］．临沂医学专科学
校学报，２００２，１２（０３）：１７５－１７６．
［５］　徐向田，李玉英，李玉兰，等．清醇健肝胶囊防治酒精性
肝病临床和实验研究［Ｊ］．中国中医药信息杂志，
２００４，１０（０２）：１０５－１０６．
［６］　徐向田．清醇健肝茶［Ｐ］．发明专利号，９７１０６１６０．２．公
开号：ＣＮ１２１４８６８．１９９９．０４．２８．
［７］　庄辉．酒精性肝病的流行病学［Ｊ］．中华肝脏病杂志，
２００３，１０（１１）：５１．
（编辑　范　伟）
８２２ 　　　　　　　　　　　　　　　　　山 东 医 学 高 等 专 科 学 校 学 报　　　　　　　　　　２０１３年３５卷