全 文 :第11卷第7期·总第159期
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及己根醇提物抗炎作用的研究※
孙淑萍1 李胜利2
(1 皖南医学院药学系,芜湖241002;2 安徽省亳州市华佗中医院骨伤科,亳州236800)
摘 要:目的 考察及己根醇提物是否有抗炎效果。方法 以生理盐水为阴性对照,以雷公藤多苷片为阳性对照,及己根醇提物分
低、中、高三个剂量组,灌胃给药,考察及己根醇提液对角叉菜胶足跖肿胀的影响、对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响、对小鼠腹腔毛
细血管通透性的影响及对大鼠棉球肉芽肿增生的影响。结果 及己根醇提液对小鼠角叉菜胶性足跖肿胀具有显著的抑制作用、有减轻
二甲苯所致小鼠耳肿胀的效果、能抑制醋酸所致的腹腔毛细血管通透性增加、对大鼠棉球肉芽肿增生有抑制作用。结论 及己醇提物
具有抗炎作用。
关键词:及己;醇提物;抗炎
doi:10.3969/j.issn.1672-2779.2013.07.099 文章编号:1672-2779(2013)-07-0149-02
炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子的防御
性反应,是许多疾病发生、发展的基础。对于非感染性
炎症,抗生素是无益的。非感染性炎症性疾病的治疗多
以水杨酸为代表的非甾体类抗炎药、糖皮质激素为代表
的甾体类抗炎药、甲氨蝶呤为代表的免疫抑制药为主,
但由于这三类药物均存在明显的不良反应而限制了它们
的临床应用。因此,寻找抗炎疗效好,不良反应小的新
型抗炎药物成为目前抗炎药研究的重要方向之一。雷公
藤具有糖皮质激素样抗炎、免疫抑制作用,却无糖皮质
激素的副作用,广泛用于治疗类风湿性关节炎等自身免
疫性疾病,其见效快、疗效确切,几乎没有可以完全替
代的类似中药。但在使用过程中,雷公藤引起的毒副反
应事件屡见报道,成为近半个世纪以来发生中毒事件最
多的中草药之一,其毒副作用在传统中草药中排第三,
其毒副作用限制了其在许多领域的应用。因此进一步寻
找抗炎疗效好,毒副作用小的中药很有必要、非常迫切。
及己 (Chloranthus serratus Roem.et Schalt.)为金
粟兰科金粟兰 (Chloranthaeeae)属植物及己的根。鉴于
目前国内外尚无及己抗炎作用及其机制的研究报道,本
文拟进行及己抗炎作用的研究。
1 材料与仪器
1.1 材料 及己 (采于安徽黄山);角叉菜胶 (上海金
穗生物科技有限公司);伊文思蓝 (上海速科实业有限公
司);醋酸、生理盐水、二甲苯 (天津市百世化工有限公
司);雷公藤多苷片 (黄石飞云制药有限公司)等。
1.2 动物 昆明种雄性小鼠,体重18~22g,SD雄性大
鼠,体重 (220±30)g,均由南京江宁青龙山动物繁殖
场提供。
1.3 仪器 紫外分光光度计 (上海分析仪器厂);紫外
分光光度计 (UV-2550,岛津SHIMADZU);电子分析
天平 (上海良平仪器仪表有限公司);BS系列电子天平
(塞多利斯);TGL-16G型台式离心机 (上海安亭科学仪
器厂);高速离心机 (TDL-5型,上海利扬仪器有限公
司);旋转蒸发仪 (上海爱明仪器有限公司)。
2 实验方法
2.1 及己醇提液的制备 将及己根洗净,晾干后粉碎成
粗粉,置于圆底烧瓶中,加10倍量75%乙醇浸泡1h,
回流提取1h,用三层纱布过滤。药渣再加10倍量75%
乙醇,回流提取1h,用三层纱布过滤,两次滤液合并,
用旋转蒸发仪回收乙醇,浓缩至1g/ml。
2.2 及己根醇提液对角叉菜胶足跖肿胀的影响 取昆明
种雄性小鼠50只 (18~22g),随机分为5组,每组10
只,分别为高、中、低剂量组,雷公藤多苷片组 (阳性
组),生理盐水 (NS)组即空白组。于灌胃给药后1h,
在大鼠右后足跖皮下注射角叉菜胶0.1ml。致炎后1~
5h,每小时用窄带尺分别测量左右踝关节周径,以其差
值作为肿胀度。结果 (见表1)。说明及己根醇提液对小
鼠角叉菜胶性足跖肿胀具有显著的抑制作用。
表1 及己根醇提液对角叉菜胶足跖肿胀的影响 (χ±S)
组别 n 剂量/g·kg-1 1h 2h 3h 4h 5h
生理盐水组 10 - 7.19±0.54 9.79±0.38 11.85±0.25 10.58±1.14 9.14±1.37
低剂量组 10 1.2 5.98±1.15** 7.37±0.97** 9.89±1.27** 9.43±1.13** 7.48±1.53**
中剂量组 10 2.4 3.47±1.75** 5.20±1.19** 7.43±0.58 6.35±1.87** 5.36±0.64**
高剂量组 10 3.6 2.15±0.59** 2.39±1.15** 2.43±1.51** 1.50±0.93** 1.39±1.67**
雷公藤多苷片组 10 0.00363 2.24±0.1.03** 2.49±0.84** 2.51±1.09** 1.57±0.78** 1.52±1.33**
注:与生理盐水组相比,**P<0.01
※ 基金项目:皖南医学院大学生科研资助金、皖南医学院中青年科研
基金[No:WK201218]、安徽高校省级自然科学研究项目[No:
KJ2013B310]
2.3 及己根醇提液对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响[1]
昆明种雄性小鼠,分组同上。根据小鼠体重按每10g灌
胃0.2ml,计算给药量。连续灌胃给药4d。末次给药后
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1h,用移液枪在小鼠左耳涂抹二甲苯正反两面各10μl。
30min后,将小鼠颈椎脱臼处死,沿耳廓基线剪下两耳。
用6mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片,电子天
平称重。计算肿胀抑制率。肿胀抑制率 (%)=A
(B)/A×100%式中,A代表空白组肿胀度,B代表受试
药物组或阳性对照药物组肿胀度。肿胀度 (g)=左耳重
量-右耳重量,结果见表2。表2说明及己根醇提液有减
轻二甲苯所致小鼠耳肿胀的效果。
表2 及己根醇提液对小鼠耳肿胀度的影响 (χ±S,%)
组别 n 剂量/g·kg-1 耳肿胀度/g 抑制率
生理盐水组 10 - 0.008430±0.0001077 -
低剂量组 10 1.2 0.006965±0.0001100** 17.4
中剂量组 10 2.4 0.006115±0.0002015** 27.5
高剂量组 10 3.6 0.004755±0.0001663** 43.6
雷公藤多苷片组 10 0.00363 0.004231±0.0001037** 50.2
注:与生理盐水组相比,**P<0.01
2.4 及己根醇提液对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[2]
昆明种雄性小鼠,分组同上。根据小鼠体重按每10g
灌胃0.2ml,计算给药量。空白组按体重灌服等量生理
盐水。连续灌胃给药4d。末次给药后1h,各鼠尾静脉注
射1%伊文思蓝生理盐水0.1ml/10g,随即腹腔注射
0.6%醋酸0.1ml/10g。20min后将小鼠颈椎脱臼处死,
腹腔注射NS6ml。轻揉小鼠腹部后,沿腹中线剪1小口,
倾出腹腔溶液约5~6ml,1000r/min离心5min。在紫外
分光光度计590nm波长处测定吸收度。并进行t检验,
结果见表3。表3说明及己根醇提液高、中、低剂量组、
雷公藤多苷片组与生理盐水组相比均有显著性差异,低、
中、高三组之间及三组与雷公藤多苷片组之间都没有显
著性差异。说明及己根醇提液具有与雷公藤多苷片相当
的抑制醋酸所致的腹腔毛细血管通透性增加的效果。
表3 及己根醇提液对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 (χ±S)
组别 n 腹腔洗出液吸收度值
生理盐水组 10 0.452±0.006
低剂量组 10 0.343±0.009**
中剂量组 10 0.316±0.002**
高剂量组 10 0.310±0.012**
雷公藤多苷片组 10 0.304±0.007**
注:与生理盐水组相比,**P<0.01
2.5 及己根醇提液对大鼠棉球肉芽肿增生的影响[3] 昆
明种雄性大鼠,分组同上。在乙醚麻醉下,无菌操作,
在大鼠双侧腋窝各植入一消毒棉球 (20mg/只)。灌胃给
药qd×7d,第8天处死,剥离肉芽组织,在80℃下烘干
1h,精密称重,减去棉球重量,即为肉芽肿干重,结果
见表4。表4说明及己根醇提液对大鼠棉球肉芽肿增生有
抑制作用。
表4 及己根醇提液对大鼠棉球肉芽肿增生的影响 (χ±S,%)
组别 n 剂量/g·kg-1 肉芽肿干重(mg) 抑制率
生理盐水组 10 - 98.508±0.4440 -
低剂量组 10 1.2 78.487±0.3619** 20.3
中剂量组 10 2.4 52.479±0.2334** 46.7
高剂量组 10 3.6 30.659±0.2023** 68.9
雷公藤多苷片组 10 0.00363 28.540±0.2573** 71.0
注:与生理盐水组相比,**P<0.01
总之,通过及己根醇提液对角叉菜胶足跖肿胀的影
响、对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响、对小鼠腹腔毛细
血管通透性的影响、对大鼠棉球肉芽肿增生的影响这几
个实验可以说明及己确有抗炎作用。
3 讨论
既往研究发现,雷公藤含有萜类 (二萜类、三萜类、
倍半萜)等成分,具有抗炎、镇痛、抗风湿的作用,被
广泛应用于类风湿性关节炎及各种自身免疫性疾病的治
疗[4]。昆明山海棠含有萜类等成分,具有良好的抗炎作
用,能抑制炎症时毛细血管通透性增高,减少渗出,抑
制增生,对免疫功能有影响[5]。千年健含有萜类成分,
有抗炎、镇痛、抗风湿作用。因此,可以从含有萜类成
分的中药中寻找有效抗炎药物[6]。
及己中含有的化合物结构复杂,其骨架可分为桉叶
烷型、环桉烷型、吉马烷型、菖蒲烷型等数种类型,同
时它们具有内酯、酮、醇、多聚体等多种形式。在 《中
药大辞典》中记载及己含有以下成分:二氢焦莪术呋喃
烯酮、焦莪术呋喃烯酮、银线草内酯E、F、新菖蒲酮、
金粟兰内酯C、银线草内酯C、环银线草醇A、B、C、D
等。这些化合物中,以单萜和倍半萜为主,其中金粟兰
内酯等倍半萜类化合物在及己中含量较多,是及己中的
主要指标性成分[7]。
《中药大辞典》记载及己功用主治:活血散瘀,祛风
止痛,解毒杀虫。主治跌打损伤,骨折,经闭,风湿痹
痛等 (中医风湿痹证范畴包括西医的风湿性关节炎、类
风湿性关节炎等疾病)。 《全国中草药汇编》指出及己
“舒筋活络、祛风止痛、消肿解毒,主治跌打损伤、风湿
腰腿痛、疔疮肿毒、毒蛇咬伤”[8]。故从及己含萜类成分
及临床应用两方面分析均支持其有抗炎作用。
本文通过实验证实及己根醇提液对小鼠角叉菜胶性
足跖肿胀具有显著的抑制作用、有减轻二甲苯所致小鼠
耳肿胀的效果、能抑制醋酸所致的腹腔毛细血管通透性
增加、对大鼠棉球肉芽肿增生有抑制作用,也充分说明
及己确有抗炎作用。
参考文献
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(本文校对:张文娟 收稿日期:2013-03-19)