全 文 ：·研究论文 ·
走马胎中的三萜皂苷类成分及其体外抗肿瘤活性研究
穆丽华① ,赵海霞② ,龚强强① ,周小江① ,刘　屏①
　　[摘　要 ] 　目的　研究走马胎根茎的三萜皂苷类成分及其体外抗肿瘤活性。方法　采用溶剂萃取和柱色谱方法分离纯
化 , 根据理化性质和波谱学数据鉴定化合物结构。采用 MTT法测试三萜皂苷化合物的抗肿瘤活性。结果　分离得到了 7个
三萜皂苷类化合物 , 包括 3 β -O-{β -D-吡喃木糖基-(1※ 2)-β -D-吡喃葡萄糖基-(1※ 4)-α-L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏 A
(1);3 β -O-{α-L-吡喃鼠李糖基-(1※ 3)-[ β -D-吡喃木糖基-(1※ 2)] -β -D-吡喃葡萄糖基-(1※ 4-[ β -D-吡喃葡萄糖-(1※
2)] -α-L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏 A(2);lysikoianoside(3);3 β -O-β -L-吡喃鼠李糖基-(1※ 3)-[ β -D-吡喃葡萄糖基-(1※
3)-β -D-吡喃木糖基-(1※ 2)] -β -D-吡喃葡萄糖基-(1※ 4)-[ β -D-吡喃葡萄糖基-(1※ 2)] -α-L-吡喃阿拉伯糖基-西克拉敏 A
(4), 3 β -O-{β -L-吡喃鼠李糖基-(1※ 3)-[ β -D-吡喃木糖基-(1※ 2)] -β -D-吡喃葡萄糖基-(1※4)-[ β -D-6-O-乙酰氧基-吡喃
葡萄糖基(1※ 2)] -α-L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏 A(5), ArdisiacrispinA(6)和 3 β -o-{α-L-rhamnopyranosyl-(1※ 3)-[ β -D-
xylopyranose-(1※ 2)] -β -D-glucopyranosyl-(1※ 4)-α-L-arabinopyranosyl}-3 β -hydroxy-13 β , 28-epoxy-oleanan-16-oxo-30-al(7)。
结论　化合物 1和 3为首次从该植物中分离得到 , 化合物 7首次从该属植物中分离得到。其中化合物 2对 BCG-823, EJ和
Hepg2细胞有较好的抑制活性(IC50分别为 0.29, 9.99和 2.03 μg/ml)。化合物 3对 EJ细胞有选择性抑制作用(IC50为 7.20
μg/ml),化合物 7对 Hepg2细胞有选择性抑制活性(IC50为 8.53 μg/ml)。
　　[关键词 ] 　走马胎;化学成分;皂苷;抗肿瘤活性;MTT法
　　[中图分类号 ] 　R914.4　　　[文献标志码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1008-9926(2011)01-01-06
　　[ DOI] 　10.3969/j.issn.1008-9926.2011.01.01
TriterpenoidSaponinsandtheAntitumorActivityfrom
theRhizomeofArdisiaGigantifoliaStapf
MULi-hua① , ZHAOHai-xia② , GONGQiang-qiang① , ZHOUXiao-jiang① , LIUPing①
①DepartmentofClinicalPharmacology, GeneralHospitalofPLA, Beijing 100853, China;
②TianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine, Tianjin 300193, China
　　[ Abstract] ObjectiveTostudytriterpenoidsaponinsandtheantitumoractivityofthe60% ethanolextractof
therhizomeofArdisiagigantifoliaStapf.MethodsThechemicalcomponentswereisolatedbysolventextraction
andcolumnchromatographyandtheirstructureswereidentifiedonthebasisofphysical-chemicalconstantsand
spectraldata.TheantitumoractivitiesofthecompoundswerescreenedbyMTTmethods.ResultsSeventriterpe-
noidsaponinswereisolatedandidentifiedas3 β -O-{β -D-xylopyranosyl-(1※2)-β -D-glucopyr-anosyl-(1※4)-α
-L-arabinopyranosyl}-3 β -hydroxy-13 β , 28-epoxy-16 β -hydroxy-30-al(1);cyclamiretinA 3 β -O-α-L-rham-
nopyranosyl(1※ 3)-[ β -D-xylopyranosyl-(1※ 2)] -β -D-glucopyranosyl-(1※ 4)-[ β -D-glucopyranosyl(1※
2)] -α-L-arabinopyranoside(2);lysikoianoside(3);cyclamiretinA3 β -O-α-L-rhamnopyranosyl-(1※3)-[ β -
D-glucopyranosyl-(1※3)-β -D-xylopyranosyl-(1※2)] -β -D-glucopyranosyl-(1※4)-[ β -D-glucopyranosyl-(1※
2)] -α-L-arabinopyranoside(4), 3 β -O-{α-L-rhamnopyranosyl-(1※3)-[ β -D-xylopyranosyl-(1※2)] -β -D-
galactopyranosyl-(1※4)-[ β -D-6-O-acetyl-glucopranosyl-(1※2)] -α-L-arabinopyranoside}-cyclamiretinA(5),
Ardisiacri-dpinA(6)and3 β -o-{α-L-rhamnopyranosyl-(1※3)-[ β -D-xylopyranose-(1※2)] -β -D-glucopyrano-
syl-(1※4)-α-L-arabinopyranosyl}-3 β -hydroxy-13 β , 28-epoxyoleanan-16-oxo-30-al(7).Conclusion Compound
基金项目:国家自然科学基金资助项目 , No.31000153
作者简介:穆丽华 ,硕士 ,药师。研究方向:中药化学。 Tel:(010)66936678;E-mail:mulihua@sohu.com
作者单位:① 100853 北京 ,解放军总医院药理研究室;② 300193 天津 ,天津中医药大学
通讯作者:刘　屏 , Tel:(010)66936678;E-mail:liuping126@ 126.com
·1·　解放军药学学报 2011年 2月 20日 第 27卷 第 1期　PharmJChinPLA, Vol.27, No.1, Feb20, 2011　
1 and3wereobtainedfromthisplantand7fromthisgenusforthefirsttime.Amongthecompounds, No.2showed
cytotoxicactivityof0.29, 9.99 and2.03μg/ml(IC50)inBCG-823, EJandHepg2celsrespectively.Compound
3 showedselectivecytotoxicactivitytoEJcels(IC50 7.20μg/ml).Compound7showedcytotoxicactivityof8.53
μg/ml(IC50)inHepg2cels.
　　[ Keywords] 　ArdisiagigantifoliaStapf;chemicalconstitutents;triterpenoidsaponins;antitumoractivity;
MTTmethods
　　走马胎又名大叶紫金牛[ 1] 、走马风 [ 2] 、豆收 [ 3] ,
学名 ArdisiagigantifoliaStapf,为紫金牛科紫金牛属
植物 ,全株具有活血化淤 、祛风湿壮筋骨 、止血生肌
等功效 [ 4] ,为民间常用的跌打伤科药。目前从紫金
牛属植物中已经分离得到苯酚 、苯醌 、香豆素 、黄酮 、
皂苷 、环肽和甾体等类化合物 [ 5, 6] 。走马胎中的三
萜皂苷类成分主要为齐墩果烷型 ,根据文献报道 ,这
类成分具有抗肿瘤 、抗 HIV等方面的活性 [ 7] 。作者
对走马胎根茎进行了进一步的分离研究 ,共分得 7
个皂苷类化合物 ,其中化合物 1和 3为首次从该植
物中分离得到 ,化合物 7为首次从该属植物中分离
得到。
1　仪器和材料
　　1100 seriesLC-MSTrapsl质谱仪(美国 Agilent
公司);JNN-ECA-400型核磁共振仪(日本电子株式
会社);Altech制备型高效液相色谱仪(美国 Altech
公司);YMCODS色谱柱 (20 mm×250 mm, 10
μm);Altechuvis200检测器。薄层色谱硅(GF254)
和柱色谱硅胶(青岛海洋化工有限公司);Sephadex
LH-20(瑞士 PharmaciaBiotech公司)。 PerkinElmer
1420-012型酶标仪(上海 PerkinElmer公司)。生物
倒置显微镜(重庆光电仪器有限公司 XDS-1B), CO2
气瓶(北京华宇辰气体有限公司), CO2减压器(上
海三友仪器厂), pH计(葡萄牙 HANNApH211),噻
唑蓝 (methylthiazolyltetrazolium, MTT, Merck产
品), DMEM培养基 (Gibco公司),马血清和胎牛血
清(北京索莱宝科技有限公司),走马胎(采自广东 ,
经解放军总医院中药房刘萍主任鉴定为走马胎
ArdisiagigantifoliaStapf的根茎 ,标本保留在解放军
总医院中药房)。
2　提取分离
　　干燥的走马胎根茎(13.5 kg)粉碎 ,用 60%乙
醇渗漉提取 ,减压回收乙醇后得干粉(1.54kg)。将
浸膏干粉混悬在水中 ,分别用石油醚 、乙酸乙酯和水
饱和的正丁醇各萃取 3次 ,减压浓缩干燥得到乙酸
乙酯提取物 (197.0 g), 水饱和正丁醇提取物
(620.0g),石油醚层是油状物质未称重。正丁醇萃
取物上 D101大孔吸附树脂 , 依次用 30%、50%、
70%和 95%乙醇洗脱。 70%乙醇洗脱部分经过反
复的硅胶柱 、SephadexLH-20色谱柱和制备高效液
相得到 5个三萜皂苷类化合物分别为化合物 1(7.3
mg), 2 (84.0 mg), 3 (20.0 mg), 4 (10.0 mg), 5
(15.0mg), 6 (12.0 mg)和 7(71 mg)。
3　结构鉴定
3.1　化合物 1　白色粉末。 Liebermann-Burchard
反应阳性 , 10%H2SO4 -EtOH喷雾显紫红色 , Molish
试剂显紫红色;薄层酸水解检测到含有阿拉伯糖 、葡
萄糖和木糖;HR-MALDI-MS给出 m/z921.48199[ M
+Na] +和 m/z937.45706[ M+K] + ,给出化合物 1
的分子式为 C46H74O17;1H-NMR(C5D5N, 400MHz)
δ∶0.84 (3H, s, 24-H), 0.99(3H, s, 25-H), 0.99
(3H, s, 29-H), 1.27 (3H, s, 23-H), 1.27 (3H,
s, 26-H), 1.55(3H, s, 27-H), 3.14 (1H, d, J=
7.6, 28-Ha), 3.31(1Hdd, J=4.4, 11.4, 3-H),
3.53 (1H, d, J=7.2, 28-Hb), 4.64(1H, d, J=
5.4, Ara-H-1), 4.88 (1H, d, J=5.6, Xyl-H-1),
5.02 (1H, d, J=8.0, Glc-H-1), 9.52(1H, s, 30-
CHO);13C-NMR(C5D5N, 100mHz)δ∶39.3(C-1),
26.9 (C-2), 88.8 (C-3), 39.7(C-4), 55.7 (C-
5), 17.9 (C-6), 32.7 (C-7), 42.6 (C-8), 50.5
(C-9), 36.9(C-10), 19.2 (C-11), 34.4 (C-12),
86.4 (C-13), 44.0 (C-14), 36.8 (C-15), 76.9
(C-16), 44.6 (C-17), 53.4 (C-18), 33.4 (C-
19), 48.3 (C-20), 30.5 (C-21), 32.4 (C-22),
28.1(C-23), 16.5(C-24), 16.8(C-25), 18.6(C-
26), 19.8 (C-27), 77.6 (C-28), 24.1 (C-29),
207.6(C-30), 107.6 (C-ara-1), 73.8 (C-ara-2),
74.5 (C-ara-3), 81.3 (C-ara-4), 66.5 (C-ara-5),
105.4 (C-glc-1), 86.3(C-glc-2), 78.0 (C-glc-3),
71.0 (C-glc-4), 77.6 (C-glc-5), 62.4 (C-glc-6),
·2· 　解放军药学学报 2011年 2月 20日 第 27卷 第 1期　PharmJChinPLA, Vol.27, No.1, Feb20, 2011　
108.1 (C-xyl-1), 76.3 (C-xyl-2), 78.4 (C-xyl-3),
70.4(C-xyl-4), 67.3 (C-xyl-5)。以上波谱数据与
已知化合物波谱数据基本一致[ 8] ,故将化合物鉴定
为 3 β -O-{β -D-吡喃木糖基 -(1※ 2)-β -D-吡喃葡
萄糖基-(1※ 4)-α-L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏
A。
3.2　化合物 2　白色粉末 。 Liebermann-Burchard
反应阳性 , 10%H2SO4 -EtOH喷雾显紫红色 , Molish
试剂显紫红色;薄层酸水解检测到含有阿拉伯糖 、葡
萄糖 、木糖和鼠李糖;HR-MALDI-MS给出 m/z
1229.58348[ M+Na] +和 m/z1245.55699 [ M+
K] + ,给出化合物 2的分子式为 C58H94O26.1H-NMR
(C5D5N, 400 mHz)δ∶0.82 (3H, s, 25-H), 1.00
(3H, s, 29-H), 1.00 (3H, s, 24-H), 1.15 (3H,
s, 23-H), 1.26 (3H, s, 26-H), 1.54 (3H, s, 27-
H), 1.65 (d, J=5.6, rha-H-6), 3.15 (1H, d, J
=7.6, 28-Ha), 3.51 (1H, d, J=7.6, 28-Hb),
4.83(1H, d, J=5.6, Ara-H-1), 5.41 (d, J=
7.6, Glc-H-1), 4.86(d, J=7.6, GlcⅡ -H-1), 5.02
(1H, d, J=6.8, Xyl-H-1), 5.97 (1H, s, rha-H-
1), 9.52 (1H, s, 30-CHO);13C-NMR(C5D5N, 100
mHz)δ∶38.7 (C-1), 26.1 (C-2), 88.5 (C-3),
39.2(C-4), 55.2 (C-5), 17.5 (C-6), 34.0 (C-
7), 42.1(C-8), 50.1 (C-9), 36.5 (C-10), 18.7
(C-11), 32.4 (C-12), 86.0 (C-13), 44.2 (C-
14), 36.5 (C-15), 76.5 (C-16), 43.6 (C-17),
52.9 (C-18), 32.9 (C-19), 47.9 (C-20), 30.2
(C-21), 31.9 (C-22), 27.7 (C-23), 16.2 (C-
24), 16.0 (C-25), 18.1 (C-26), 19.3 (C-27),
77.2(C-28), 23.7(C-29), 207.1 (C-30), 103.9
(C-ara-1), 79.0 (C-ara-2), 72.2 (C-ara-3), 77.7
(C-ara-4), 62.7(C-ara-5), 104.6(C-glc-1), 75.7
(C-glc-2), 77.6 (C-glc-3), 71.3 (C-glc-4), 77.6
(C-glc-5), 62.6 (C-glc-6), 103.4 (C-glcⅡ-1),
80.7 (C-glcⅡ-2), 85.3 (C-glcⅡ-3), 69.1 (C-glc
Ⅱ -4), 77.7(C-glcⅡ-5), 61.6(C-glcⅡ-6), 105.2
(C-xyl-1), 74.7 (C-xyl-2), 77.7 (C-xyl-3), 70.3
(C-xyl-4), 66.5(C-xyl-5), 103.3 (C-rha-1), 71.9
(C-rha-2), 72.2 (C-rha-3), 73.4 (C-rha-4), 70.1
(C-rha-5), 18.1 (C-rha-6).通过与文献 [ 9]比较确
定为 3 β -O-{α-L-吡喃鼠李糖基-(1※3)-[ β -D-吡
喃木糖基-(1※2)] -β -D-吡喃葡萄糖基-(1※4-[ β -
D-吡喃葡萄糖-(1※2)] -α-L-吡喃阿拉伯糖基}-西
克拉敏 A。
3.3　化合物 3　白色粉末。 Liebermann-Burchard
反应阳性 , 10% H2SO4-EtOH喷雾显紫红色 , Molish
试剂显紫红色;薄层酸水解检测到含有阿拉伯糖 、葡
萄糖和木糖;HR-ESI-TOF-MS给出 m/z1045.5686
[ M-H] - ,给出化合物 3的分子式为 C52H86 O21.1H-
NMR(C5D5N, 400 mHz)δ∶0.84 (3H, s, 25-H),
0.97 (3H, s, 29-H), 1.07 (3H, s, 24-H), 1.07
(3H, s, 30-H), 1.20 (3H, s, 23-H), 1.33 (3H,
s, 26-H), 1.53(3H, s, 27-H), 3.30 (1H, d, J=
7.6, 28-Ha), 3.59(1H, d, J=7.6 , 28-Hb), 4.78
(1H, d, J=5.8, Ara-H-1), 5.47 (d, J=5.6,
Xyl-H-1), 5.01 (d, J=7.6, GlcⅡ -H-1), 4.91
(1H, d, J=7.0, Glc-H-1);13C-NMR(C5D5N, 100
mHz)δ∶39.1 (C-1), 26.5 (C-2), 89.0 (C-3),
39.7 (C-4), 55.7 (C-5), 17.9 (C-6), 34.4 (C-
7), 42.4 (C-8), 50.5 (C-9), 36.9 (C-10), 19.2
(C-11), 32.8 (C-12), 86.3 (C-13), 44.6 (C-
14), 36.8 (C-15), 77.1 (C-16), 44.6 (C-17),
51.5 (C-18), 39.0 (C-19), 31.8 (C-20), 36.8
(C-21), 31.8 (C-22), 28.0 (C-23), 16.6 (C-
24), 16.4 (C-25), 18.5 (C-26), 19.5 (C-27),
77.8 (C-28), 24.7 (C-29), 33.8 (C-30), 104.6
(C-ara-1), 79.7 (C-ara-2), 73.2 (C-ara-3), 78.3
(C-ara-4), 64.1(C-ara-5), 104.8(C-glc-1), 76.2
(C-glc-2), 77.5 (C-glc-3), 71.8 (C-glc-4), 78.2
(C-glc-5), 62.9 (C-glc-6), 104.1 (C-glcⅡ -1),
85.4 (C-glcⅡ -2), 77.9 (C-glcⅡ -3), 70.6 (C-glc
Ⅱ-4), 78.2(C-glcⅡ -5), 62.3(C-glcⅡ -6), 107.6
(C-xyl-1), 76.2 (C-xyl-2), 77.8 (C-xyl-3), 70.3
(C-xyl-4), 67.4 (C-xyl-5)。与文献 [ 10]比较确定
为 lysikoianoside。
3.4　化合物 4　白色粉末。 Liebermann-Burchard
反应阳性 , 10% H2SO4-EtOH喷雾显紫红色 , Molish
试剂显紫红色;薄层酸水解检测到含有阿拉伯糖 、葡
萄糖 、木糖和鼠李糖;HR-ESI-TOF-MS给出 m/z
1233.6385[ M-H] - ,给出化合物 4的分子式为 C64
H104O31。1H-NMR(C5D5N, 400MHz)δ∶0.81 (3H, s,
25-H), 1.00 (3H, s, 29-H), 1.02 (3H, s, 24-
H), 1.17 (3H, s, 23-H), 1.27 (3H, s, 26-H),
1.52 (3H, s, 27-H), 1.64 (d, J=6.5, rha-H-6),
3.15 (1H, d, J=7.6 , 28-Ha), 3.52 (1H, d, J=
7.6, 28-Hb), 4.83 (1H, d, J=4.8, Ara-H-1),
5.35 (d, J=7.5, Glc-H-1), 4.84(d, J=7.0, glc
Ⅱ-H-1), 5.01 (1H, d, J=7.0, Xyl-H-1), 5.90
·3·　解放军药学学报 2011年 2月 20日 第 27卷 第 1期　PharmJChinPLA, Vol.27, No.1, Feb20, 2011　
(1H, s, rha-H-1), 5.15(d, J=7.5, GlcⅢ -H-1),
9.61 (1H, s, 30-CHO);13C-NMR(C5D5N, 100
mHz)δ∶39.1 (C-1), 26.4 (C-2), 88.9 (C-3),
39.6(C-4), 55.6 (C-5), 17.9 (C-6), 34.3 (C-
7), 42.5(C-8), 50.4 (C-9), 36.8 (C-10), 19.1
(C-11), 32.6 (C-12), 86.3 (C-13), 44.5 (C-
14), 36.8 (C-15), 76.8 (C-16), 44.0 (C-17),
53.2 (C-18), 33.8 (C-19), 48.3 (C-20), 30.4
(C-21), 32.3 (C-22), 28.0 (C-23), 16.5 (C-
24), 16.3 (C-25), 18.5 (C-26), 19.7 (C-27),
77.6(C-28), 24.1(C-29), 207.5 (C-30), 104.3
(C-ara-1), 79.7(C-ara-2), 72.6 (C-ara-3), 78.1
(C-ara-4), 63.1(C-ara-5), 104.9(C-glc-1), 76.1
(C-glc-2), 78.1 (C-glc-3), 71.7 (C-glc-4), 77.9
(C-glc-5), 62.8 (C-glc-6), 103.7 (C-glcⅡ-1),
81.0 (C-glcⅡ-2), 85.5 (C-glcⅡ-3), 69.6 (C-glc
Ⅱ -4), 78.0(C-glcⅡ-5), 62.0(C-glcⅡ-6), 105.1
(C-xyl-1), 75.1 (C-xyl-2), 86.6 (C-xyl-3), 69.1
(C-xyl-4), 66.2(C-xyl-5), 103.6(C-rha-1), 72.2
(C-rha-2), 72.6 (C-rha-3), 73.8 (C-rha-4), 70.4
(C-rha-5), 18.5 (C-rha-6), 104.8 (C-glcⅢ-1),
73.9 (C-glcⅢ-2), 77.9 (C-glcⅢ-3), 71.5 (C-glc
Ⅲ -4), 78.4(C-glcⅢ-5), 62.3(C-glcⅡ-6)。与文
献 [ 9]比较将化合物鉴定为 3 β -O-α-L-吡喃鼠李
糖基-(1※3)-[ β -D-吡喃葡萄糖基-(1※3)-β -D-吡
喃木糖基 -(1※2)] -β -D-吡喃葡萄糖基 -(1※ 4)-
[ β -D-吡喃葡萄糖基-(1※2)] -α-L-吡喃阿拉伯糖
基 -西克拉敏 A。
3.5　化合物 5　白色粉末 。Liebermann-Burchard反
应阳性 , 10% H2SO4 -EtOH喷雾显紫红色 , Molish试
剂显紫红色 HR-ESI-MSm/z1271.6026 [ M+Na] + ,
给出化合物 5的分子式为 C60H96O27。薄层酸水解
检测到含有阿拉伯糖 、葡萄糖 、木糖和鼠李糖;1H-
NMR(C5D5N, 400MHz)δ∶0.85(3H, s, 25-H), 0.97
(3H, s, 29-H), 1.00 (3H, s, 24-H), 1.16 (3H,
s, 23-H), 1.31 (3H, s, 26-H), 1.53 (3H, s, 27-
H), 1.65 (d, J=5.6, rha-H-6), 2.06 (3H, s,
COCH3), 3.16 (1H, d, J=8.0, 28-Ha), 3.55
(1H, d, J=8.0, 28-Hb), 4.81 (1H, d, J=4.8,
Ara-H-1), 5.40(d, J=8.0, Glc-H-1), 4.92 (d,
J=8.0, glcⅡ-H-1), 5.09 (1H, d, J=5.6, Xyl-
H-1), 5.95 (1H, s, rha-H-1), 9.52 (1H, s, 30-
CHO);13C-NMR(C5D5N, 100 mHz)δ∶39.7 (C-1),
27.0(C-2), 89.6 (C-3), 40.2 (C-4), 56.2 (C-
5), 18.5 (C-6), 34.9 (C-7), 43.0 (C-8), 50.9
(C-9), 37.3(C-10), 19.0 (C-11), 33.2 (C-12),
86.8 (C-13), 45.1 (C-14), 37.4 (C-15), 76.8
(C-16), 44.5 (C-17), 53.8 (C-18), 33.9 (C-
19), 48.8 (C-20), 31.0 (C-21), 32.9 (C-22),
28.5 (C-23), 17.0 (C-24), 16.9 (C-25), 19.0
(C-26), 20.2(C-27), 77.4(C-28), 24.7(C-29),
207.1(C-30), 105.0 (C-ara-1), 79.8 (C-ara-2),
72.4 (C-ara-3), 77.9 (C-ara-4), 63.4 (C-ara-5),
105.6 (C-glc-1), 76.0(C-glc-2), 77.9 (C-glc-3),
70.8 (C-glc-4), 74.8 (C-glc-5), 64.6 (C-glc-6),
21.4 (COCH3), 171.1(COCH3), 103.4(C-glcⅡ -
1), 80.8 (C-glcⅡ -2), 86.4 (C-glcⅡ-3), 69.4
(C-glcⅡ-4), 77.9(C-glcⅡ -5), 61.8(C-glcⅡ-6),
106.0 (C-xyl-1), 74.8(C-xyl-2), 78.0 (C-xyl-3),
70.3 (C-xyl-4), 66.8 (C-xyl-5), 104.2 (C-rha-1),
72.2 (C-rha-2), 72.6 (C-rha-3), 73.6 (C-rha-4),
70.8(C-rha-5), 19.0(C-rha-6)。与文献 [ 9]比较 ,
将化合物确定为 3 β -O-{α-L-吡喃鼠李糖基-(1※
3)-[ β -D-吡喃木糖基 -(1※ 2)] -β -D-吡喃葡萄糖
基-(1※4)-[ β -D-6-O-乙酰氧基 -吡喃葡萄糖基(1
※2)] -α-L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏 A。
3.6　化合物 6　白色粉末。 Liebermann-Burchard
反应阳性 , 10%H2SO4 -EtOH喷雾显紫红色 , Molish
试剂显 紫红色 。 ESI-MS给 出伪分 子离 子峰
m/z1083 [ M+Na] + , 给出化合物 6的相对分子质
量为 1060。薄层酸水解检测到含有阿拉伯糖 、葡萄
糖和木糖;1H-NMR(C5D5N, 400 MHz)δ∶0.85 (3H,
s, 25-H), 0.97(3H, s, 29-H), 1.00(3H, s, 24-
H), 1.16 (3H, s, 23-H), 1.31 (3H, s, 26-H),
1.53(3H, s, 27-H), 2.06 (3H, s, COCH3), 3.16
(1H, d, J=8.0, 28-Ha), 3.55 (1H, d, J=8.0,
28-Hb), 4.81 (1H, d, J=4.8 , Ara-H-1), 5.40
(d, J=8.0, Glc-H-1), 4.92 (d, J=8.0, GlcⅡ -
H-1), 5.09(1H, d, J=5.6, Xyl-H-1), 9.61(1H,
s, 30-CHO);13 C-NMR(C5D5N, 100 MHz)δ∶39.1
(C-1), 26.8 (C-2), 89.2 (C-3), 40.0 (C-4),
55.8 (C-5), 17.5 (C-6), 34.5 (C-7), 42.6 (C-
8), 50.4(C-9), 36.8 (C-10), 19.1 (C-11), 33.2
(C-12), 86.5 (C-13), 45.1 (C-14), 37.2 (C-
15), 76.8 (C-16), 44.0 (C-17), 53.3 (C-18),
33.4 (C-19), 48.2 (C-20), 31.0 (C-21), 32.3
(C-22), 28.2 (C-23), 16.6 (C-24), 16.9 (C-
25), 18.5 (C-26), 19.8 (C-27), 77.6 (C-28),
·4· 　解放军药学学报 2011年 2月 20日 第 27卷 第 1期　PharmJChinPLA, Vol.27, No.1, Feb20, 2011　
24.7 (C-29), 207.5 (C-30), 104.7 (C-ara-1),
79.6(C-ara-2), 72.4 (C-ara-3), 78.2 (C-ara-4),
64.2(C-ara-5), 104.9(C-glc-1), 76.3(C-glc-2),
77.6(C-glc-3), 71.8 (C-glc-4), 78.2 (C-glc-5),
62.3 (C-glc-6), 104.1 (C-glcⅡ -1), 85.2 (C-glc
Ⅱ -2), 77.4 (C-glcⅡ -3), 71.1 (C-glcⅡ -4), 78.2
(C-glcⅡ-5), 61.8 (C-glcⅡ-6), 107.5 (C-xyl-1),
76.2(C-xyl-2), 77.8 (C-xyl-3), 70.3 (C-xyl-4),
67.2(C-xyl-5).与文献 [ 11]比较 ,将化合物确定为
ArdisiacrispinA。
3.7　化合物 7　白色粉末 。 Liebermann-Burchard
反应阳性 , 10%H2SO4 -EtOH喷雾显紫红色 , Molish
试剂 显紫红 色。 ESI-MS给出伪 分子 离子峰
m/z1065 [ M+Na] + ,给出化合物 7的相对分子质
量为 1042。薄层酸水解检测到含有阿拉伯糖 、葡萄
糖 、鼠李糖和木糖;1H-NMR(C5D5N, 400 MHz);1H-
NMR(C5D5N, 400 MHz)δ∶0.82 (3H, s, 25-H),
0.89(3H, s, 29-H), 1.00 (3H, s, 24-H), 1.10
(3H, s, 27-H), 1.26 (3H, s, 23-H), 1.28 (3H,
s, 26-H), 1.65 (d, J=6.4, rha-H-6), 3.35 (1H,
d, J=8.0, 28-Ha), 3.87 (1H, d, J=8.0, 28-
Hb), 4.66(1H, d, J=5.2, Ara-H-1), 4.90(d, J
=7.8, Glc-H-1), 4.91 (1H, d, J=8.0, Xyl-H-
1), 6.00 (1H, s, rha-H-1), 9.63 (1H, s, 30-
CHO);13C-NMR(C5D5N, 100 MHz)δ∶39.1 (C-
1), 26.7 (C-2), 88.6 (C-3), 39.7 (C-4), 55.5
(C-5), 17.7 (C-6), 33.8 (C-7), 43.0 (C-8),
50.0(C-9), 36.7(C-10), 18.8(C-11), 31.5 (C-
12), 86.1 (C-13), 50.1 (C-14), 45.7 (C-15),
212.6 (C-16), 55.3 (C-17), 55.7 (C-18), 33.8
(C-19), 47.9 (C-20), 29.6 (C-21), 33.7 (C-
22), 28.0 (C-23), 16.7 (C-24), 16.1 (C-25),
18.8 (C-26), 21.8 (C-27), 74.3 (C-28), 23.8
(C-29), 206.1 (C-30), 107.4 (C-ara-1), 73.8
(C-ara-2), 74.3(C-ara-3), 81.5 (C-ara-4), 65.9
(C-ara-5), 105.2(C-glc-1), 81.8(C-glc-2), 86.0
(C-glc-3), 70.6 (C-glc-4), 78.0 (C-glc-5), 62.1
(C-glc-6), 106.0 (C-xyl-1), 75.3 (C-xyl-2), 78.2
(C-xyl-3), 69.6(C-xyl-4), 66.8 (C-xyl-5), 103.7
(C-rha-1), 72.3 (C-rha-2), 72.6 (C-rha-3), 73.7
(C-rha-4), 70.5 (C-rha-5), 18.5(C-rha-6)。该化
合物是走马胎中分离得到的新化合物 3 β -o-{α-L-
rhamnopyranosyl-(1※ 3)-[ β -D-xylopyranose-(1※
2)] -β -D-glucopyranosyl-(1 ※ 4)-α-L-arabinopyr-
anosyl}-3 β -hydroxy-13 β , 28-epoxy-oleanan-16-oxo-
30-al(7),其结构解析部分我们已进行了相关报
道[ 12] 。
4　体外抗肿瘤活性
4.1　细胞培养　人胃癌细胞株(BCG-823),人膀胱
癌细胞株(EJ),人肝癌细胞株 (Hepg2),人宫颈癌
细胞株(Hela),由解放军总医院肿瘤科提供 。BCG-
823、Hela、Hepg2、EJ均培养于含 10%小牛血清 、青
霉素 100 IU/ml及链霉素 100 μg/ml的 RPMI1640
培养基中 ,每 3天换液 1次 ,每 5天传代 1次 。细胞
均置于 37℃、体积分数为 0.05的 CO2饱和湿度的
培养箱中 ,取对数生长期细胞用于实验 。
4.2　体外抗肿瘤活性筛选　将对数生长期细胞密
度稀释成 1 ×104 /ml,立即接种于 96孔培养板 , 0.1
ml/孔 ,然后分别按设计加入不同浓度药液(浓度见
表 1),每浓度平行 3孔 ,对照组加等体积溶剂 ,置
37℃ CO2培养箱培养 96h,然后离心(1000r/ min,
20 min),弃上清液 ,每孔加 0.2 ml新鲜配制的 0.2
mg/mlMTT的无血清培养基 , 37℃继续培养 4h,再
离心 ,倾出血清后 , 0.2 mlDMSO溶解 MTT沉淀 ,用
微型超声震荡器震荡 5 min混匀 ,在 PerkinElmer
1420-012型酶标仪上以波长 570 nm,参比波长 450
nm测定光密度 D(λ)值 ,重复 3次 ,按下式计算药
物对肿瘤细胞生长的抑制率:
　　肿瘤细胞生长抑制率(%)=〔1-D(λ)实验
组 /D(λ)对照组〕×100%
　　以各个不同药物的浓度对数为横坐标 ,相应的
细胞生长抑制率为纵坐标 ,求出直线回归方程 ,根据
方程计算出半数抑制浓度(IC50)。
4.3　统计学处理　两组间均数差异以 SPSS11.5
forwindows统计软件进行 t检验 。
4.4　结果　化合物对不同肿瘤细胞的抑制活性见
表 1和表 2。
5　讨论
　　采用溶剂萃取和柱色谱方法进行分离纯化 ,从
走马胎中得到 7个皂苷类化合物 ,均进行了结构鉴
定。化合物 1和 3为首次从该种植物中分离得到 ,
化合物 7为首次从该属植物中分离得到 。由于样品
量的问题 ,对其中的 4个化合物进行了抗肿瘤活性
筛选 ,结果化合物 2对 4种肿瘤细胞都有明显的抑
制作用 ,对 BCG-823和 Hepg2的抑制作用尤为明
显 ,其 IC50分别为 0.29和 2.03 μg/ml。化合物 3对
·5·　解放军药学学报 2011年 2月 20日 第 27卷 第 1期　PharmJChinPLA, Vol.27, No.1, Feb20, 2011　
EJ细胞有选择性抑制作用(IC50为 7.20 μg/ml),且
有一定的剂量依赖性。化合物 7对 Hela细胞有弱
的抑制作用 ,但对 Hepg2细胞的抑制作用较明显 ,
其 IC50为 8.53 μg/ml,活性明显好于阳性药顺铂。
表 1　化合物 2 3 4 7和顺铂对肿瘤细胞
株增殖的抑制作用(n=3)
样品 剂量(μmol/L)
抑制率(%)
BCG-823 Hela EJ Hepg2
2 6.91 67.45 48.80 43.63 58.33
3.45 68.38 41.94 38.85 53.48
1.72 59.81 39.28 20.74 52.70
3 6.37 -11.6 39.59 46.89 2.36
3.18 -22.7 35.57 27.21 -0.76
1.59 -8.6 34.31 12.05 0.23
4 7.82 46.76 9.57 21.85 12.65
3.91 39.17 -1.41 13.27 10.36
1.96 21.66 -1.28 13.89 8.64
7 6.39 19.34 41.85 12.24 14.91
3.19 12.73 37.51 8.41 19.67
1.59 16.14 35.27 5.16 19.96
顺铂 [ a] 5.00 49.95 34.29 17.99 36.14
3.00 38.23 17.35 15.23 26.52
1.00 17.42 9.56 6.24 22.43
　　注:[ a]为阳性药。
表 2　化合物 2 3 4 7和顺铂对人肿瘤细胞体外毒性
样品 IC50(μg/ml)BCG-823 Hela EJ Hepg2
2 0.29 10.95 9.99 2.03
3 >100 99.47 7.20 >100
4 11.57 >100 >100 >100
7 >100 38.11 >100 8.53
顺铂 [ a] 4.98 12.15 32.61 28.95
　　注:[ a]为阳性药。
　　本实验中分离得到的三萜皂苷类化合物结构
相似 ,都有一定的抑瘤作用 。由于分离和测试的
化合物的数量有限 ,本文仅就它们的活性和结构
特点进行初步的构效关系讨论 。化合物 2 , 3, 4, 7
都是齐墩果烷型五环三萜皂苷 ,并且在 13 , 28位
都具有氧桥 ,提示该位置的氧桥对活性影响是主
要的 ,但还需要得到更多化合物与没有氧桥的类
似物进行比较 ,为这种设想提供丰富证据 。另外
化合物 2, 4具有相同的苷元 ,只是糖链略有不同 ,
化合物 4比化合物 2多一个葡萄糖基 ,但化合物 2
对 4种肿瘤细胞的抑制活性明显好于化合物 4 ,因
此初步推断糖链中糖基的位置和数量对活性有一
定的影响 。
　　化合物 3和化合物 7为首次从走马胎中分离得
到且首次发现具有良好的抗肿瘤活性 ,其中化合物
2在本植物中含量较高 ,对 4种肿瘤细胞都显示了
较好的抗肿瘤活性 ,具有较好的开发价值。本文报
道结果为走马胎抗肿瘤物质基础以及抗肿瘤中药的
开发提供了实验依据。
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(收稿日期:2010-08-25;修回日期:2010-10-21)
(本文编辑　金杨红)
·6· 　解放军药学学报 2011年 2月 20日 第 27卷 第 1期　PharmJChinPLA, Vol.27, No.1, Feb20, 2011