全 文 ：第 38卷第 7期
2009年 7月
应 用 化 工
AppliedChemicalIndustry
Vol.38 No.7
Jul.2009
收稿日期:2009-03-23 修改稿日期:2009-05-11
作者简介:黄秀香(1969 -), 女 , 广西都安人 , 河池学院副教授 , 主要从事天然有机化学方面的研究。电话:0778 -
3143616, E-mail:hxx1372@163.com
正交实验法优选石南藤黄酮苷的提取工艺
黄秀香 ,赖红芳 ,刘云英
(河池学院 化学与生命科学系 ,广西 宜州 546300 )
摘 要:以乙醇提取石南藤中的黄酮苷 , 考察了料液比 、提取温度 、提取时间以及乙醇体积分数对提取率的影响。
结果表明 , 最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数 50%, 料液比 1∶40, 提取温度 90 ℃,提取时间 2.5h, 在此条件下 ,黄
酮苷的提取率可达 4.2%。
关键词:石南藤;黄酮苷;乙醇;提取
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1671-3206(2009)07-1040-03
Extractionprocedureofflavonoidglycosidesof
piperwalichi(Miq.)Hand.-Mazz.byorthogonalexperiment
HUANGXiu-xiang, LAIHong-fang, LIUYun-ying
(DepartmentofChemistryandLifeSciencesofHechiUniversity, Yizhou546300, China)
Abstract:Tooptimizetheextractionprocedureforflavonoidglycosidesfrompiperwalichi(Miq.)
Hand.-Mazzbyethanol.Theefectofsolid-liquidratio, extractiontemperature, time, volumefractionof
ethanolonextractionyield.Theresultshowedthattheoptimumextractionconditionwasasfolows:volume
fractionis50%, solid-liquidratiois1∶40, theextractiontimeis2.5 h, thetemperatureis90 ℃.The
extractionratioofflavonoidglycosidescanbeupto4.2% underthiscondition.
Keywords:piperwalichi(Miq.)Hand.-Mazz;flavonoidglycosides;ethanol;extracting
石南藤 [ Piperwalichi(Miq.)Hand.-Mazz]别
名大麻散 、爬岩香等 ,为胡椒科植物石南藤的全草 。
生于较阴湿地 ,攀援于树上或岩石上 ,分布于广西 、
四川 、贵州 、湖南 、湖北等省区 。能祛风湿 、强腰膝 、
止痛 、止咳 ,用于风湿痹痛 、扭挫伤 、腰膝无力 、痛经 、
风寒感冒 、咳嗽气喘 [ 1] 。目前 ,我国在石南藤药用
价值方面研究还较少 ,对石南藤中黄酮苷的提取工
艺的文献也鲜见 。本论文以乙醇为提取溶剂 ,研究
从石南藤中提取黄酮苷的工艺 ,为合理开发利用石
南藤提供科学依据。
1 实验部分
1.1 试剂与仪器
石南藤 ,采集于宜州市郊区;芦丁 ,购于中国生
物制品检定所;无水乙醇 、甲醇 、氢氧化钠 、硝酸铝 、
亚硝酸钠均为分析纯 。
FZ102型微型植物粉碎机;UV-2501紫外分光
光度计;AE240型电子分析天平;SHB-3循环水多用
真空泵 。
1.2 实验方法
1.2.1 石南藤预处理 石南藤采集于广西宜州市
郊区 ,经干燥 、粉碎 ,备用 。
1.2.2 黄酮苷的提取 [ 2] 准确称取石南藤粉末
2.000g,投入到 250mL的圆底烧瓶中 ,加入一定体
积分数的乙醇水溶液 ,配上冷凝管 ,在恒温水浴锅中
回流提取 、冷却 、抽滤 , 用 50%的乙醇洗涤滤渣
2次 ,合并滤液并转移到 100 mL的容量瓶中 ,定容
待测 。
1.3 分析方法
1.3.1 芦丁标准曲线的绘制 [ 3] 精确称取
0.100 0 g芦丁 ,置于烧杯中完全溶解 ,冷却 ,转移至
1 000 mL的 容 量 瓶中 , 定 容 , 即 得 标 准 液
(0.100 0 g/L)。
精确吸取该标准液 0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0,
10.0 mL,分别置于 6支比色管中 ,加体积分数为
30%的乙醇至 10 mL,加 5%亚硝酸钠 0.7 mL,摇
匀 ,静置 5 min。加 10%硝酸铝溶液 0.7 mL, 加
DOI :10.16581/j.cnki.issn1671-3206.2009.07.041
第 7期 黄秀香等:正交实验法优选石南藤黄酮苷的提取工艺
1 mol/L氢氧化钠溶液 5 mL,加体积分数为 30%的
乙醇至 25mL,摇匀 ,静置 10min。以芦丁空白为对
照 ,在波长 510 nm处测定吸光度值 ,以浓度对吸光
度值进行线性回归 ,得回归方程:
A=0.288 4C+0.003 6, r=0.999 5
式中 A———吸光度值;
C———芦丁的浓度 , mg/mL。
线性范围:8 ～ 40 μg/mL。
1.3.2 黄酮苷含量的测定 [ 4] 精确吸取待测样液
1 mL于比色管中 ,其制备方法同上。用体积分数为
30%的乙醇调 0,在波长 510 nm处测定吸光度值 ,
然后代入回归方程计算 ,即可得样品液中黄酮苷的
质量浓度 ,再经计算就得其含量。黄酮苷得率的计
算公式:
黄酮苷得率 =(C1 ×100 ÷1 000W)×100%
式中 C1———样品液中黄酮苷的质量浓度 , mg/mL;
W———石南藤的质量 , g。
2 结果与讨论
2.1 提取溶剂的选择
按料液比 1∶30分别加入水 、体积分数为 50%
的甲醇和体积分数为 50%的乙醇 , 在水温为 70 ℃
的水浴锅中恒温回流 2.0h,测定不同提取溶剂的黄
酮苷得率。
实验结果表明 ,水 、甲醇 、乙醇的黄酮苷得率分
别为 1.78%, 3.09%, 3.34%,由此可见 ,乙醇作为
提取溶剂的效果明显比前面两者要好得多 ,而且考
虑到试剂的价格和安全性 ,本研究选用乙醇为提取
溶剂。
2.2 提取温度的影响
按料液比 1∶40加入体积分数为 50%的乙醇 ,
分别在不同温度下回流提取 1.5 h,结果见图 1。
图 1 提取温度对黄酮苷得率的影响
Fig.1 Efectofextractiontemperatureonthe
yieldofflvonoidglycosides
由图 1可知 ,随着温度的升高 ,黄酮苷得率不断
增加 , 90 ℃时黄酮苷得率达最大;90 ℃后 ,黄酮苷
得率下降。温度的升高 ,有利于黄酮苷的溶出 ,但
是 ,温度过高 ,杂质的溶出增加 ,同时 ,黄酮苷可能会
部分分解 ,因此 ,选择最佳提取温度为 90 ℃。
2.3 提取时间的影响
按料液比 1∶40加入体积分数为 50%的乙醇 ,
在 90 ℃回流提取一定时间 ,实验结果见图 2。
图 2 提取时间对黄酮苷得率的影响
Fig.2 Effectofextractiontimeontheyield
offlvonoidglycosides
图 2可知 ,当提取时间增加到 2.5 h时 ,黄酮苷
得率达到最大值。因此 ,最佳提取时间为 2.5 h。
2.4 乙醇体积分数的影响
按料液比 1∶40加入不同体积分数的乙醇 ,
90 ℃下回流提取 1.5h,结果见图 3。
图 3 乙醇体积分数对黄酮苷得率的影响
Fig.3 Efectofvolumefractionofethanolon
theyieldofflvonoidglycosides
由图 3可知 ,乙醇体积分数为 50%时 ,黄酮苷
的得率达到最大。
2.5 料液比的影响
按不同料液比用体积分数为 50%的乙醇在
1041
应用化工 第 38卷
90 ℃下回流提取 1.5 h,结果见图 4。
图 4 料液比对黄酮苷得率的影响
Fig.4 Influenceofliquid-solidrateonthe
yieldofflvonoidglycosides
由图 4可知 ,随着溶剂用量的增大 ,黄酮苷得率
也逐渐增加 ,当料液比为 1∶40时达到最大。
2.6 正交实验结果
根据单因素实验结果 ,选用 L9(34)进行正交实
验 ,因素水平见表 1,结果见表 2。
表 1 因素水平表
Table1 Factorsandlevels
水平
A B C D
温度 /℃ 时间/h
乙醇体积分数
/% 料液比
1 70 1.5 50 1∶30
2 80 2.0 60 1∶40
3 90 2.5 70 1∶50
由表 2可知 ,较佳提取条件为 A3B3C1D2 ,即乙
醇的体积分数为 50%,料液比 1∶40 ,在 90℃下回流
提取 2.5h。在最佳工艺条件下的验证实验 ,黄酮苷
得率为 4.22%,得到最高产率 。
表 2 正交实验结果
Table2 Resultsoforthogonalexperiment
实验号 A B C D 黄酮苷得率 /%
1 1 1 1 1 3.828
2 1 2 2 2 3.724
3 1 3 3 3 3.793
4 2 1 2 3 3.239
5 2 2 3 1 3.273
6 2 3 1 2 3.377
7 3 1 3 2 3.991
8 3 2 1 3 4.012
9 3 3 2 1 3.977
K
1 11.345 11.058 11.217 11.078
K2 9.889 11.009 10.940 11.092
K3 11.980 11.147 11.057 11.044
k1 3.782 3.686 3.739 3.693
k2 3.296 3.670 3.647 3.697
k3 3.993 3.716 3.686 3.680
R 0.679 0.046 0.092 0.017
3 结论
正交实验结果表明 ,用乙醇浸提石南藤黄酮苷
的最佳工艺条件为:乙醇的体积分数为 50%,料液
比 1∶40,在 90℃下回流提取 2.5 h。在最佳工艺条
件下 ,黄酮苷的提取率达 4.22%。
参考文献:
[ 1] 梁启成 , 钟鸣.中国壮药学 [ M] .南宁:广西民族出版
社 , 2005:64-65.
[ 2] 丁利群 ,吴振辉 , 蔡创海.槐花中黄酮类物质提取工艺
的研究 [ J] .农业工程学报 , 2002, 18 (1):141-144.
[ 3] 苏燕评 , 刘育梅 , 陈炳华 , 等.红花桑寄生茎叶总黄酮
提取工艺 [ J] .亚热带植物科学 , 2002, 31(2):21-24.
[ 4] 靳桂敏 , 钟瑞敏 , 林朝朋 , 等.岗稔黄酮苷提取工艺研
究 [ J] .现代食品科技 , 2007, 23(3):42-44.
1042