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Effects of antibiotics on the growth of Isochrysis zhangjiangensis and axenic culture

湛江等鞭金藻对抗生素的反应及无菌化培养


研究了5种抗生素在不同浓度下对湛江等鞭金藻(Isochrysis zhangjiangensis)生长的影响,采用混合添加抗生素法获得无菌藻株。结果表明,(1)不同抗生素对湛江等鞭金藻生长的影响存在差异,湛江等鞭金藻对氯霉素最敏感,浓度为50μg·mL-1时抑制率为27.02%,浓度>50μg·mL-1时抑制率达80%,湛江等鞭金藻对青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素不敏感,后3种抗生素在低浓度时对藻细胞生长有促进作用;(2)除50μg·mL-1青霉素处理外,青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素其它浓度处理均有明显的抑菌作用;(3)采用500μg·mL-1链霉素,1000μg·mL-1卡那霉素和50μg·mL-1庆大霉素的4个组合混合添加抗生素,均获得了无菌藻株,且对生长有促进作用。

Effects of 5 kinds of antibiotics (chloramphenicol, ampicillin, streptomycin, kanamycin, gentamycin) at different concentrations on the growth of Isochrysis zhangjiangensis were studied, the axenic culture was obtained by mixed antibiotics. The results showed that:(1) There were differences among different antibiotics, chloramphenicol was the most susceptible antibiotic, the inhibition rate was 27.02% at the concentration of 50 μg·mL-1, more than 50 μg·mL-1 the inhibition rate was 80%. I.zhangjiangensis was not susceptible to ampicillin, streptomycin, kanamycin and gentamycin, there was stimulation at the lower concentration of the last three antibiotics. (2) Except for ampicillin at the concentration of 50 μg·mL-1, there were bacteriostasis effects of the other treatments. (3) Mixed antibiotics (500 μg·mL-1streptomycin,1000 μg·mL-1 kanamycin, and 50 μg·mL-1 gentamycin) were added to the culture medium by 4 combinations, the axenic culture was obtained, and there were stimulation on the growth of I.zhangjiangensis.


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均有明显的抑荫作用;(3)采用5妻妻峙哪L4链霉素,1童gO
ll莲·m一卡那霉索和50岭.吼i1庆丈霉素的4个组合混合添
加抗生素,均获得了无菌藻株,且对生长有促进作用。关键词:湛江等鞭金藻:抗生素;无菌中图分类号:Q949.26’2 文献标识码:A
文章编号:1008.8873(2童17)02-12毒;02Ef;|;j; of蛐帅jo墩$oni蟊eFowi螽5iMi|樯曲埘螂钿增删曲舳d
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k卸蛳vcm.and 50哼mL‘群m;i;myc;矗)we}#ad;毒d』;螽蠢ic矗jnHem iumby4㈣蠢!Ⅱa虹。吐,the铂【朋陋训nl转w镐ob;童ine蠹;舶d毒i雠wc咒s
i;i;;u蜥衄仰也。乒dW;矗of上拍删妇啊弘淞血.Keywor菇; 血o£胁”妇州蜊m性椰越Ann蕃iohcs;Ax锄ic
cu№湛江等鞭
金藻(血础硼扫拍n,冽蛔删括)是一种重要的
等特点,多不饱和脂肪酸占总脂肪酸高达§§.8%
,EPA和D姒含量很高”^“。因此,近年来对于湛江等
鞭金藻的研究较多,然而微藻研究领域中的藻种多为
等)和物理法等,其中,抗生素法比较快速有效。本
文研究了抗生素对湛江等鞭金藻生长的影响,采用混合
的研究工作提供试验材料。l材料与
方法iil藻种
来源与培养试验藻种
湛江等鞭金藻(砌咖如拍d,呵妇学Ⅲ括)来自暨南
大学水生生物研究所藻种室。采用舵培养液,盐度
为30,培养温度为24±l(℃),光照强度为100p moL啊i;·;!‘,光暗比为12L:12D,pH为6.5~7.O
用l0睡睦
mL三角瓶在人工气候箱中培养,培养到较高浓度后,
2&&mL三角瓶中培养,藻液为lOo
mL。1.2 试
验方法1.2.
1抗生素对湛江等鞭金藻生长的影响选用氯霉素(ch
ln#amp二;;÷col,cn!i!青霉素(ampic{{{{n,Arnn)、链霉素(s
Ⅱ印;自mycin,S囊;、卡那霉素(k∞锄yc!;,Km)和庆大霉
素@曲响Gml萋种抗生素,设置50pg·m冀i‘,1瞧区旧m
加抗生素为对照。l;i.2
抗生素的抑菌效果将对数生长后期的上述藻液稀释, 取0.5
mL涂布于2216E细菌培养基平板上,25℃下
万方数据
2期 黄振华,等:湛江等鞭金藻对抗生素的反应及无菌化培养 121
和50鹇·mL一庆大霉素;(3)500蜡·mL.1链霉素和
50甥.II盯。庆大霉素;(4)looO鸺·mLd卡那霉素、
500岭·mLd链霉素和50嵋咖E1庆大霉素加入生长初
期的藻液中。
lj细胞密度
用分光光度计于第8d测定680nm处藻液的吸光
值,以反映细胞密度的大小。抑制率(%)=(对照组
OD啪一试验组0D6∞)/对照组oD瑚
2结果
2.1抗生素对湛江等鞭金藻生长的影响
试验表明,5种抗生素对湛江等鞭金藻生长的影
响存在差异(图1)。青霉素在低浓度时对藻细胞生长
基本无影响,浓度为l000姑·mL-1时抑制藻细胞生
长,抑制率为11.72%。链霉素和卡那霉素对藻细胞无
伤害作用。浓度为500嵋.1IIL以时分别比对照提高了
12.39%和16.48%,浓度为l000岖·n盯1时分别比对照
提高了9.83%和21.07%。
1.2
O.9
“s
O.3
OO
口O口50圈l∞日5∞团100日
住素 键霉素 卡≈5霉素庆大霉案氯霉素
圈l抗生素对湛江等鞭金藻生长的影响
Flg.1E肋出面蛐曲柚妇蛐岫删酊正嘲啊徊椰加
岫俨d盯
庆大霉素低浓度时促进藻细胞生长。浓度为
50峙·mL-1和loo岭·mL.1时分别比对照提高了8.76%
和13.03%,浓度为1000喀·mL.1对藻细胞生长有明显
的抑制作用,抑制率为54.75%。氯霉素对藻细胞生长
的抑制作用最大,浓度越高,抑制作用越明显,浓度
为50增咖E1时的抑制率为27J021%,浓度为100峙·mL.1、
500峙·mLd和I000嵋·mL-1时的抑制率分别为
83.60%、81.18%和81.40%。
2.2抗生素的抑菌效果
通过细菌平板试验,培养48h后,未加抗生素处
理的藻液中有大量细菌存在,除50昭·mL-1青霉素处
理的藻液中有少量细菌外,其它抗生素各浓度处理的
藻液中均无细菌(表1)。从而表明链霉素、卡那霉素、
庆大霉素对藻液中的细菌有明显的抑制作用。

8
0 2 4 6
培井时阃”me(d)
图2混合抗生素对湛江等鞭金藻生长的影响
Fig.2E恤c扭of出emIIed_n曲洲瑚蚰n尬g删hof上z^4一咖g翻睫酊l蚰the8硼day
2.3混合抗生素对湛江等鞭金藻生长的影响
选取500岖·mL.1链霉素,l000雌r.mL.。卡那霉素
和50烬·mL-l庆大霉素,采用四种不同的混合方式,
分别加入生长初期的藻液中,混合抗生素不仅对湛江
等鞭金藻的生长没有抑制作用,还能促进藻细胞的生
长(图2)。用2216E固体培养基检验无细菌存在,因
此,采用混合抗生素法获得了无菌藻株。
寰l 4种抗生素的抑菌作用
1hbleBacteriostasiseffectoffourndsofanHblotics
o燃‰。。警筝蒜篱吲黜-,
青霉素AInpicillin++
链霉素鼬唧ltomycill++
庆大霉素0I疵咖ycin++
卡那霉素K趾锄ycin++
一 一
++大量菌~hlch洲蚰y;+少量菌落A缸wcol∞y:一无菌落NocohM搿
3讨论
采用抗生素法培养无菌藻,是较为常见的方法。
根据微藻对抗生素的敏感性不同,选用合适的抗生素
种类和浓度。微藻普遍对氯霉素敏感,如本文的湛江
等鞭金藻、颤藻(弧姚fD,.j口sp.)【l¨和眼点拟微绿球
藻(舭矾加如7口咧粥妇D洲细肠)112J等。微藻普遍对链霉
素和卡那霉素不敏感,如本文的湛江等鞭金藻、颤
藻【ll】和杜氏盐藻(D删,i:B『f口删f,搬)【H】等.因此链霉
素和卡那霉素经常作为微藻无菌化培养的抗生素。本
文的结果表明,低浓度庆大霉素对湛江等鞭金藻生长有
一定的促进作用,高浓度抑制生长。大多数抗生素高浓
度对微藻生长有抑制作用,一些抗生素在低浓度时对藻
细胞的生长有一定的促进作用。可能原(下转第125页)
万方数据
2期 洪渊,等:深圳市园林植物叶片含硫量的特点 125
不同环境中都是一个吸收s侥能力较强的树种“q。五爪
金龙和南美蟛蜞菊叶片具有较高的含硫量,由于该植
物为外来植物,大量种植物可能会产生其它的生态安
全问题,会影响本地植物种类与生态系统多样性。
大气硫的浓度与叶片含硫量的相关性代表了植物
对大气硫的富集能力较高,这些具有较高相关性的植
物可以作为今后大气监测的植物种类。海桐和黄叶假
连翘等部分植物叶片硫含量与大气中s02含量有明显
的相关性,表明这些植物除对大气硫有一定的净化能
力,今后还可以作用大气硫监测的植物种类。本次实
验发现多数植物中含硫量与大气中含硫量相关性不明
显,与Balsbefg-P神hlsson的报道一致驯,同一植物污
染物含量与污染物浓度并非绝对呈正相关关系,说明
不同植物对硫的积累能力不同,同一植物在不同地点
叶片含硫量也存在显著差异。
比较2004年11月与2005年4月的u种相同植物叶
片的含硫量,除个别植物外,绝大部分植物均为春季
的含硫量高于秋季,说明植物叶片含硫量具有明显的
季节动态。薛皎亮(2001)在研究槐树(脚^Ⅲ
却DHE∞)内硫含量的变化时发现其体内的含硫量也随
(上接第12l页)
因为“毒物刺激效应”。毒物刺激效应是指较低浓度毒
物对生物非但无害而且表现出刺激生长的现象,s曲bin
等称这种现象为毒物刺激效应(HⅧesis)”q。目前,低
浓度重金属、有机磷农药、石油和污水、抗生素等对浮
游植物尤其是藻类的生长具有刺激效应Il^M17t“J,如低
浓度的链霉素对亚心型扁藻(州田m∞∞Ⅲ6cm蜘m打)、新月菱形藻(Ⅳf眺出㈣)、三角褐指藻
(陬4B口出叻也fm州ⅫM加”)、小球藻(c7如,讹踢)和
金藻870l(幻c奶g括朋,6口m8701)的生长有促进作用
“”。可见,毒物刺激效应是一种普遍现象。但是关于刺
激效应的机制尚不清楚,可能原因为低浓度的毒物导致
细胞体内有一定活性氧增多.低浓度的活性氧激活蛋白
酶,调节合成以及诱导基因表达等,从而促进细胞生长。
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万方数据
湛江等鞭金藻对抗生素的反应及无菌化培养
作者: 黄振华, 刘晓娟, 胡章喜, 段舜山, HUANG Zhen-hua, LIU Xiao-juan, HU Zhang-xi
, DUAN Shun-shan
作者单位: 暨南大学水生生物研究所,广州,510632
刊名: 生态科学
英文刊名: ECOLOGIC SCIENCE
年,卷(期): 2007,26(2)
被引用次数: 2次

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