全 文 ：生态科学2006年4月第25卷第2期EcOLOGICSCIENcE
Apr．，2006，25(2)：1 02～105VB
、VB12和VH对雨生红球藻生长及类胡萝l＼素含
量的影响李立欣，段舜山+，李爱芬，徐
宁(暨南大学水生生物研究中心，广州510632)【摘要】
以淡水经济微藻雨生红球藻(胁Pm口幻cDcc淞p胁v扬凰cH．1)为试验藻种，分别添加维生素B】(vBl)、Bl2
(VBl2)和维生素H(I『童；二鋈鋈萎鋈酾鞘美妻馊釜再譬霪i莽希喜霾霞薹麓蓁雾篓冀霪篓!雾囊翼。霆雾蓑薹羹冀霎
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1．2标本采集及处理
定量采集使用60目的D型网和Surber网，每样
点1次，1个重复。样品经60目铜筛筛洗后，置于白
色解剖盘中分检，标本用10％的福尔马林固定保存。
1．3生活史
小裳蜉(Leptophlebiasp．)和蜉蝣(Ephemerasp．)
属不完全变态类型的水生昆虫。小裳蜉以0．15mnl为一
个体长龄组，蜉蝣则以0．25mm为一个体长龄组，根据
cr
皇
●．
勺
．三
、√
占
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。
倒
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·——-●-——·Abundance
·-◆-·Biomass
03’6 03’8 03’1003’1204’2 04’4 04’6
时间Time
1．2
1，、
目
0．83
砌
0．6零
∞
0．4Ⅲ咖{
S
o．2酬
各月两种蜉蝣稚虫体长组的分布频率，推测其种群结构
动态和发育情况，从而获得种群的生活史状况【l’4l。
1．4生产量的测算
计数和测量每月个体数、体长，并选择足够数量
各体长组的个体，测算小裳蜉和蜉蝣各体长的平均体
重。采用体长频率法(size．frequencymethod)测算其
周年生产量【5。7J，计算公式：
上 172
P=ib∑(Ⅳ，一Nj+1)(％×％+t)
』=1
其中，f为体长组数，b为一周年完成的世代数，
M是，体长组的个体数，孵为，体长组的个体均重。
在此，以1周年完成的世代数(b)估算365／CPI
(Cohortp oductioninterval)，并忽略矫正系数i
(Pe／P)，令其等于1，原因是Pe／P在实际计算非常困
难，而且造成的误差极小【5j。
2结果
2．1种群动态
2．1．1小裳蜉小裳蜉种群周年现存量动态如图2a。由
万方数据
2期 李立欣，等：VB。、VB。。和VH对雨生红球藻生长及类胡萝卜素含量的影响 103
l材料与方法
1．1藻种来源与培养条件
试验藻种胁删删撇船p胁惋脑CH—l由张成武
教授提供。采用BBM培养基，在LRH一400一G型培养箱
中培养，培养温度24士1℃，光照周期12h：12h，光照强度
60岫ol·m～·s～。将对数生长期藻细胞接种到250mL
锥形瓶的150mL培养液中，接种密度为5×103～10×10’
cells·mL-l，在培养过程中每天定时摇动锥形瓶3次。
1．2试验设计
试验设置了分别添加维生素B1、B12和维生素H三
组，每组再分6个浓度梯度的3x6个处理，每处理设3
个重复(表1)。
表l 三种维生素及其各分6个浓度等级的试验处理
Tab．1Treatmentsonthree“ndsofVitaminw thsix
concentrationgrades(肛g·L。1)
处理 浓度等级Concentrationgrade8Treatment—矿——T——■r———j————了————F—一
vBl O 10 100 100010000100000
VBl2O 0．05 O．5 5 50 500
VH 0 0．5 5 50 500 5000
1．3测定指标与方法
1．3．1细胞密度每隔48h取样测定1次，采用血球计
数板计数。
13．2生物量每隔6d取10nlL藻液，用0．45um醋酸纤
维滤膜过滤，80℃恒温条件下烘干36h，置于干燥器中自
然冷却至室温后，用san硎usBS210S型电子天平称重。
1．3．3 叶绿素a含量 根据Bochiroc方法【13J，每隔6d
提取并测定叶绿素a含量。
1．3．4类胡萝卜素含量每隔6d取lOmL藻液，用
0．45um醋酸纤维滤膜过滤，90％丙酮提取色素，放入
4℃冰箱中冷藏36h，然后反复加丙酮抽提至藻体呈白
50
一
40
色 30
型×
稍≮
基0 20
最’：
。
10
o
O
0 4 8 12 16 20
时间Time／d
色，用TU—1900型双光束紫外／可见分光光度计测定OD
值，并按Bochiroc方法㈣计算类胡萝卜素含量。
1．4数据处理
用SPSS11．50软件对数据进行统计分析。
2结果与分析
2．1细胞密度
试验表明，VBl、VBl2和VH均能够促进雨生红
球藻细胞密度的增加(图1)。添加VBl的5个处理
中，藻细胞密度值均显著高于对照。在浓度10“g·L-I～
10mg·LJ的范围内，藻细胞密度值随着VBl浓度的增
加而提高。浓度10mg·L‘1处理的藻细胞密度值最大，
在培养的第18d达到4．48×103cell．mL一，比对照提高了
20．1％(P<0．01)。而当Ⅶ】添加浓度达100mg·L 1时，
藻细胞密度值虽然高于对照，但却是5个添加处理中的
最低者(图la)。
在VBl2添加试验中，藻细胞密度值随着VBl2浓
度的提高而增加。其中，浓度50pg·L_处理的藻细胞
密度值为最大(图1b)，并显著高于其它处理，在培养
的第18d达到4．96×10’cells．mL～，比对照提高了
29．5％(P度500pg·L。时，藻细胞密度却降低。
在vH添加试验中，在0．5～500¨g·L。浓度范围
内，藻细胞密度值随着VH浓度的提高而增加(图1c)。
添加浓度500“g·L。处理的藻细胞密度值在培养后期
(12～22d)高于其它处理，在培养的第22d达到了
4．36x103cells．mL～，比对照提高了17．1％(P但是，当添加VH浓度为5000“g·L。时，藻细胞密度
值不仅不再提高，反而低于对照。
0 4 8 12 16 20
时间Time／d
O 4 8 12 16 20
时间Time／d
图1维生素Bl、B12和H对雨生红球藻细胞密度的影响
Fig．1E觚缸ofvitamin—Bl，Vitamin—B12andⅥtamin—HonceⅡdens蚵ofthe日h删舳∞∞船肋妇施
加
∞
加
加
O
∞
∞
∞
加
加
。
万方数据
万方数据
2期 李立欣，等：vB，、vB。。和vH对雨生红球藻生长及类胡萝卜素含量的影响 105
0 1 2 3 4 5 SD
处理Treatm饥t
0 1 2 3 4 5 SD 0 l 2 3 4 5 SD
处理1’reatment 处理Tr∞tment
图4维生素B1、B12和H对雨生红球藻类胡萝l、素积累的影响
Fig．4Effectsofvitamin—Bl，vitamin-B12andⅥtamin·Hoca阳tenoidaccumulationof曰矗删口fDcDcc附p缸，妇脑
在添加VB】2的0～4浓度水平范围内，类胡萝卜
素含量随着VBl2浓度的升高而增加，当添加浓度为
50¨g·L。1时，类胡萝卜素含量达最高(4．53mg·L。1)，
比对照提高了24．4％。但在VBl2浓度为500pg·L。1时，
类胡萝卜素含量却几乎与对照相等。
VH添加浓度500肛g·L。1时，类胡萝卜素含量达
4．01mg·L～，比对照显著提高10．1％(P<0．05)。在其
它的4个浓度处理中，除了浓度50“g·L以处理的类胡
萝卜素含量高于对照外，另外3个处理均与对照无显
著差异(P>0．05)。
3结论
3．1在BBM培养基中添加VBl、VBl2和Ⅶ均能不同程
度地促进雨生红球藻游动细胞的生长。添加VBl2可以
显著提高细胞密度值、生物量、叶绿素a和类胡萝卜素
含量，维生素B。的促进程度次之，而Ⅶ的促进效果不
及VBl。
3．2雨生红球藻对于VB】、VBl2和Ⅶ的生长适宜浓
度存在明显差异，该三种维生素对雨生红球藻的最佳
添加浓度分别是10mg·L～、50pg·L～、500pg·L～。
3．3在三种维生素不同浓度条件下，雨生红球藻游动
细胞阶段的细胞密度、生物量、叶绿素a和类胡萝卜素
含量等4项指标分别比对照提高17．1％～29．5％、
14．6％～30．0％、21．8％～28．0％和10．1％～24．4％。因此．
在雨生红球藻规模化生产的游动细胞培养阶段，可以
通过适当地分别添加VBl、VBl2和Ⅶ来达到提高藻细
胞密度、生物量、叶绿素a和类胡萝卜素含量的目的。
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—黝■■——一：曩———■_
万方数据
VB1、VB12和VH对雨生红球藻生长及类胡萝卜素含量的影响
作者： 李立欣， 段舜山， 李爱芬， 徐宁， LI Li-xin， DUAN Shun-shan， LI Ai-fen， XU
Ning
作者单位： 暨南大学水生生物研究中心,广州,510632
刊名： 生态科学
英文刊名： ECOLOGIC SCIENCE
年，卷(期)： 2006,25(2)
被引用次数： 3次

参考文献(13条)
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3.李立欣.段舜山.战友 复合维生素对雨生血球藻生长及虾青素积累的影响[期刊论文]-黑龙江科技学院学报
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