全 文 ：应 用 生 态 学 报 年 月 第 ! 卷 第 ∀ 期
#∃ %& ∋ ( ∋ )∗ + , & − . ∗/ − 00.% ∋ 1 ∋ #∗. ∗ 2 3 , − 4 5 6 , ! 7∀ 8 9 ! : 一! ; <
三种主要环境因子对茶尺雄核型
多角体病毒毒力的影响
叶恭银 胡 萃 晰江农业大学植物保护系 , 杭州 ∀ , = ! ’
【摘要】 本文对温度 、 紫外线和茶园露水对茶尺镬核型多角体病毒孟7∋ >& 0 ? 8
究 6 结果表明 , 在 一!: ℃下 , 适于病毒感染各龄幼虫 , 幼虫病死率达= 。≅ Α
毒力的影响进行了研
除能但在∀ = 、 ∀ <℃下 ,
Β 龄初饲毒外 , 病死率、 化蛹率和 羽化率明显下降或上升 , ∀ 龄初或其以后饲毒 , ;< ≅ 以上幼虫
心
曰 ,
化蛹 , ≅以上蛹能羽化 。 离体病毒经<Χ ℃处理 ! 天 , 毒力开始明显减退 6 紫外线照射 ! 一 分钟 ,
离体病毒毒力减退不明显 , 照射: 分钟 , 毒力开始明显减退 6 紫外线对离体病毒的影响与温度及 病
毒浓度有关。 茶园露水对离体病毒无明显影响6
关妞词 茶尺蟆核型多角体病毒 毒力 温度 紫外线辐射 茶园露水
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ΦΓ Ε ΔΚΗ Ο Φ ΚΛ ΟΦ ϑ Η Ψ Ε ΚΛ 5 = = ≅ , ΦΓ Ε Ι > Η Φϑ ΒΚΦΘ , 04 0ϑ Φ Κ>Λ ϑ Λ Π ΕΙ Ε Η 5 ΕΛ Ε Ε Ηϑ Φ Ε ϑ Η Ε Χ 助 ΚΔΚΝϑ Λ Φ ΒΘΠ ΕΝ ΗΕϑ Ο Ε Π > Η ΚΛ Ε Η Εϑ Ο Ε Π 6 ς 五Ε Λ ΦΓ Ε 认Η Μ ϑ Ε ΔΕ Π ς ΚΦΓ Μ ΚΗ 4 Ο ϑ Φ > Η ϑ ΔΦ Ε Η ΦΓ Ε Ψ Ε 5 ΚΛ Λ ΚΛ 5 > Δ ΦΓ Ε
∀ Η Π ΚΛ Ο Φ ϑ Η , Ι > Η Ε ΦΓ ϑ Λ ; < ≅ Βϑ Η Μ ϑ Ε 040 ϑ ΦΕ Π ϑ Λ Π Ι > Η Ε ΦΓϑ Λ ≅ 040 ϑ Ε ΕΙ ΕΗ 5 Ε Π 6 Ζ Γ Ε & 0 ?
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引 言
茶尺蟆核型多角体病毒 7∋ > & 0 ? 8 于 ; ;
年在我国首次发现 。 它是我国茶树主要害虫茶
尺蟆 7∋ Ν ΦΗ > Ω ΔΟ > ΨΒΚ⊥ > ϑ ΓΘΩ > ΒΚΛ ϑ Ξ Ε ΓΗ ΒΚ8
的重要天敌 , 颇具应用潜力6 近年来, 曾在局
部茶区作过小范围的应用试验 , 在茶尺蟆的第
、 ! 、 Χ 、 : 代防治效果达 = ≅以上 , 但在
本文子 = Χ 。年 ! 月! < 日收到 。
发生严重的第 ∀ 、 < 代7 ; 、 月高温季节 8防
治效果不佳 ￡∀ ’ , 未能真正解决生产实际问题 6
因此 , 探明高温季节防治效果不佳的原因 , 无
论在理论或实践上均具指导意义 。 本文分析了
主要环境因子—温度 、 紫外线和茶园露水对其毒力的影响 6
! 材料与方法
! 6 材 料
# Γ ΚΛ 6 ) 6 − 00%。∋ Ε > Β 6 , ! 9 ∀ 7 8
态!功 应 用 生 了 报 ! 卷
试验用∋>& 0 ? 先经 < 龄初茶尺镬幼虫增殖 次 , 然
后以差速离心法提取 6 供试茶尺镬为室内传代饲养、
生长基本一致 、 健康的各龄初幼虫 6 食料为近期内未
喷布农药的茶树叶片 6
! 6 ! 方 法
! 6 ! 6 一般养虫方法 、 ! 龄初饲毒的在 6 ; ∴ ΟΝ Ι
平底玻管中饲养 , 管口塞以棉花团 , 每管 ! 头 , ∀ 、
< 、 Χ 龄初饲毒的在 Χ 火 ∴ ∀ Ν Ι 0∋ #塑料盒中饲养 ,
盒盖上用 ∀ 号昆虫针刺有 Ν 个小孔 , 每盒Χ 头 6
! 6 ! 6 ! 温度对病毒毒力的影响 设 ! Χ 、 ! ! 、 ! : 、 ! Χ 、
Χ =和∀ < ℃ : 种饲育温度 , Υ 、 ! 、 ∀ 、 < 和 Χ 龄初饲
毒 Χ 种饲毒时间 , 共∀= 个处理 , 每处理∀= 头供试虫 6 饲
毒浓度为! 6 : ∴ = , 0 %[ _ Ι Β , 持续饲毒 ! 吐小时 6 每 日
定时观察记录幼虫 、 蛹病死数 , 直至全部病死或羽化
为止6 计算幼虫和蛹的总病死率 、 化蛹率及蛹的羽化
率 6 试验重复 次 6 数据处理分析 参考 文献〔! 〕,
下同 。
在!: 与∀= ℃下 , 饲毒 ∀ 龄初幼虫 6 于开始饲毒后
、 ! 、 ∀ 、 < 、 Χ 天分别将Ρ2 ℃下饲养的转置 ∀ = ℃ ,
∀= ℃下饲养的转置 !: ℃ , 并分别设持续饲养于 !: 和
∀= ℃下的处理 , 共! 个处理 6 以开始饲毒后 ; 天内的
幼虫病死数计算结果 6
分别于 Χ 一 月在杭州室内自然变温下 , 饲毒 、
! 、 ∀ 、 < 、 Χ 龄初幼虫 Α 在 < 、 、 = 月饲毒 ∀ 龄
初幼虫 。
将! 6 : ∴ = ’0%[ _ Ι Β的病毒悬液置 < Χ ℃恒温水浴
中 , 在黑暗条件下处理 。 、 Κ 、 ! 、 ∀ 、 < 、 Χ 天 6
然后分别于!: 和 ∀= ℃ 下用各处理液喂饲 ∀ 龄初幼虫!<
小时 , 共! 个处理 6 每处理∀= 头供试虫 , 重复次 6 每
日定时观察病死虫数 , 以开始饲毒后 ; 天内的病死数
按下式计算相对毒力减退率 9
相对毒力减退率7≅ 8 二
复次 。
! 6 ! 6 < 温度 、 紫外线对离体病毒毒力的联合影响 设
! Χ 、 ∀ = 、 ∀ Χ 、 < = 、 连Χ ℃ Χ 种处理温度 , ! 、 凌 、 、
: 、 ∀! 、 :< 分钟 : 种紫外线照射时间 , 共∀= 个处理 ,
所用病毒悬液的浓度均为 ! 6 : 又 = ; 0%[ _ Ι Β。 紫外线
处理方法和病毒液用量同 ! 6 ! 6 ∀ 6 尔后在室 温 7平 均
! Χ 6 ! ℃ 8下用各处理液分别喂饲 != 头 ∀ 龄初幼虫 !< 小
时 , 以未经处理的为对照 6 每日定时考查病死虫数 ,
以开始饲毒后 ; 天内的病死虫数 , 按下式计算结果 6
毒力测定重复 次 6
相对毒力减退率7≅ 8 ⎯
未经处理的死亡率 一经处理的死亡率
未经处理的死亡率
! 6 ! 6 Χ 茶园露水对离体病毒毒力的影响
∴ = = ≅
7 ! 8
Χ年 < 一
: 、 一。月 , 以盘拍法用小白瓷盘收集晨: 9 ∀= 茶园
露水!= 一 ∀ >Ι Β , 带回室内用( 一!型酸度计测定 0∃ 值 6
设病毒悬液 7! 6 : 又 ! = ’ 0 %[ _ Ι Β8与露水的比例为
9 和 9 ∀ , 室温下混合处理时间为 和 ∀ 天 , 并以病
毒悬液与蒸馏水按 9 和 9 ∀ 混合为对照 , 共 : 个处
理 6 在!: ℃下 , 分别用以喂饲 ∀ 龄初幼虫! <小时 6 每
处理供试虫 ∀= 头 , 重复 次 6 每 日定时考查病 死 虫
数 , 以开始饲毒后= 天内的病死虫数按7 飞 8式计算结
果6 试验分别于 : 月和 月进行 6
∀ 结 果
夫经处理在适温7!: ℃ 8下的死亡率 一 经处理的死亡率
未经处理在适温7! : ℃ 8下的死亡率
欠 = = ≅ 7 8
! 6 ! 6 ∀ 紫外线对离体病毒毒力的影响 设 。 、 < 、 、
: 、 ∀ ! 、 : < 分钟 : 种∀ >ς 紫外灯管下 Χ = Ε Ι 处照射时
间 , ! 6 : α = ’、 α Β> Ο 、 α Β> 5 Ω %[ _ Ι Υ Ο种病 毒 浓
度 ,共 个处理 , 每处理病毒悬液用量为 Χ Ι Β饰5 Ν Ι 培
养皿 6 然后 , 分别在!: 和 ∀= ℃下用各处理液喂饲∀= 头 ∀
龄初幼虫! <小时 6 每 日定时考查病死虫数 , 以开始饲
毒后 ; 天内的病死虫数按78 式计算结果 6 毒力测定重
∀ 6 温度对病毒毒力的影响
∀ 6 6 恒温 结果如表 6 方差分析表明 ,饲育
温度、 饲毒虫龄以及两者 间的不同组合均极显
著地影响病毒毒力 6 在 一!: ℃范围内 , 同一龄
期饲毒 , 幼虫平均致死速率一般随温度上升而
极显著加快 6 温度越高 , 饲毒虫龄越低 , 病死
越快 Α 反之 , 病死越慢 6 但它们的最终病死率
均为 = ≅ , 幼虫不能化蛹 、 羽化 。 ℃ 下分
别于 、 ! 、 ∀ 、 < 、 Χ 龄初饲毒 , 其平均致死
速率各为= 6 ; 、 = 6 = 、 = 6 : ∀ 、 > 6 Κ Η ∀ 、
。6 = 川天 6 而在! 一∀< ℃范围内 , 同一龄期
饲毒 , 病死率和平均致死速率一般随温度上升
而明显下降 , 化蛹和羽化率则明显上升 6 ∀= 、
∀< ℃ 下, 除 % 龄初饲毒外 , 病死率 极 显 著 下
降 , 尤其是在 ∀ 龄初或其以后饲毒;< ≅ 以上幼
#Γ ΚΛ 6 ) 。− 00%6 ∋ Ε > Β6 , ! 9 ∀7 8
∀ 期 叶恭银等 9 三种主要环境因子对茶尺镬核型多角体病毒毒力的影响 ! ;
裹 恒温和饲毒虫龄对病毒毒力的影晌
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化蛹率 7≅ 8
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羽化率 7≅ 8
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幼 虫和蛹病死率 7≅ 8
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平均致死速率 7_ 天8
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注 Χ % ∀ 平均致死速率为各处理幼虫致死时间的倒数—致死速率 Δ其中非死幼虫的致死速率作为&Ε 的平均值 , 下同 , # ∀ 表中各数值均为两 次试验所得的平均值 ∀ 具相同大、 小 写字母的平均值间分别未达 Φ 。 ∀ 。 , 、 Φ Γ ∀ ΓΗ 水平差异 , 下同 ∀
Ι Γ ϑ ∋ Χ % ∀ Κ ∋ Λ <∋ ϑ= < 7 ϑ ∋ ΑΛ ( Α 8 ϑ ∋ Η ϑ五∋ 7 ∋ ∋ Α Μ 7 Γ ∋ < Γ > Ν ∋ 7 Ο ∋ <∋ ϑ= < ( Π Η Γ > << < 7 Ν ∋ Α Λ ∋ ∋ = ϑ 7 ∋ ϑ口 ∋ Λ ϑ Δ Α Λ
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虫能化蛹 , 0 , Υ以上蛹能羽化 , 说明温度等于
或高于1& ℃时不适于5 Γ Ι Φ ς 感染茶尺蟆幼虫 ∀
1 ∀ % ∀ # 人为变温 由表 # 可看出 , #∃ ℃ 下幼虫
病死率极显著高于1& ℃ , 随着饲毒后#∃ ℃下饲
育时间的延长 , 1& ℃下饲育时间的缩短 , 病死
率一般明显上升 , 反之则明显下降 ∀ 平均致死
速率随 #∃ ℃下饲育时间的延长或1& ℃ 下饲育时
间的缩短而加快 Ω 反之则减慢 ∀
1 ∀ % ∀ 1 自然变温 由表 1 可看出 , 自然变温下
所得结果类似于恒温试验 ∀ − 一 ∃ 月和 0 月中
旬至 Ο 月 , 日均温为#% ∀ # 一#∃ ∀ ,0 ℃ , 有利于
病毒感染幼虫 , 病死率一般均达 % & Υ , 除高
龄幼虫外 , 难以化蛹 、 羽化 ∀ 但在 . 月初至 0
月上旬 , 日均温为# , ∀ −互一1 Γ ∀ ΗΞΓ) , 除 Α 、 #
龄初饲毒外 , 病死率明显下降 , − Υ以上幼虫
能化蛹 , 0− Υ以上蛹能羽化 ∀ 此外 ,在 / 、 , 、
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! ;! 应 用 生 态 学 报 ! 卷
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衰! 人为变沮对病毒毒力的形晌
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温度对离体病毒毒力的影响
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表 1 自然变温对病毒毒力的影晌们 1 0 0 , 杭州Ε
Τ 4 ∀ 1 5 >> ∋ 8 ϑ Γ > Λ ϑΣ 7 < ><Σ ∋ ϑΣ ϑ Α Λ Ο ϑ ∋ ≅ Μ ∋ 7 ϑ Σ 7 ∋ Γ Λ ϑ= ∋ Ν Α 7 Σ <∋ Λ 8 ∋ Γ > 5 Γ Ι Φ ς
日期 Δ 月 一 日Ε
∗ ϑ ∋ Δ皿 Γ Λ ϑ= _ ( ϑ∋ Ε
日均温 Δ℃ Ε
∗ Α <Π ≅ ∋ Λ
ϑ ∋ ≅ Φ ∋ 7 ϑ Σ 7 ∋
虫龄
ΨΛ Η ϑ 7
幼虫和蛹病死率 Δ Υ Ε⊥ 7 Ν Λ ( ΦΣ Μ
≅ Γ 7 ϑ Γ <Α ϑΠ
化蛹率 Δ Υ ΕΦΣ Μ ϑ ΑΓ Λ
7 ϑ ∋
羽化率 Δ Υ Ε
5 ≅ ∋ 7 Ο ∋ Λ Γ ∋ 7 ϑ ∋
平均致死速率 Δ <_ 天 ΕΚ Γ Λ <∋ ϑ=‘ % 7 ϑ∋Δ % _ ( Π Ε
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感染幼虫 , 1 龄初幼虫饲毒后 , 幼虫% & Υ死亡 ∀
1 ∀ % ∀ / 对离体病毒的影响 如图 % 所示 , 方差
分析表明 , /− ℃下处理时间和饲育温度以及两
者间的不同组合都极显著地影响毒力的表现 ∀
饲育温度为 #∃ ℃ 时, 处理 % 天 , 毒力不 受 影
响 Ω 处理 # 天开始 , 毒力明显下降 ∀ 饲育温度
为1& ℃时 , 相对毒力减退率随/− ℃下处理时间
的延长而增大的趋势不及 #∃ ℃下明显和规则 ,
但其减退率均极显著高于#∃ ℃下的相应值 ∀
) = ΑΛ ∀ 3 。 Φ Ψ ∀ 5 ∋ Γ < ∀ , # Χ 1 Δ % , , % Ε
∀ 期 叶恭银等 9 三种主要环境因子对茶尺蟆核型多角体病毒毒力的影响
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Ζ Κ 6 Ε Δ时 紫外线照射时间
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田 ! 不 同条件下紫外线对离体病毒毒力 的影响
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— 二 ’ : 犯萦外线照射时间 7分 8Ζ Κ 6 Δ> Η Ε ∴卯 一叮目 Φ > + ? Η ϑ Π Κϑ Φ Κ> 6 恤6 8
处理时间的延长而减退的趋势远不及!: ℃下明
显 , 但其减退程度均极显著强于!: ℃ 。 病毒浓
度为 ! 6 Ε ∴ 一> ∗ 0 %[ _ Ι Β时, 处理超过 Ο分钟Ο
毒力开始明显减退 , 且随处理时间的延长而显
著加剧 6
∀ 6 ∀ 温度 、紫外线对离体病毒毒力的联合影响
如图 ∀ 所示 , 方差分析表明, 处理温度和
紫外线照射时间分别显著和极显著影响离体病
毒的毒力 , 但二者 间的不同组合则 无 显 著 影
响 。 离体病毒毒力基本上随处理温度上升而减
退 , 其中以<Χ ℃处理减退最多, !Χ 一 <= ℃处理
时 , 各处理间毒力减退程度无显著差异 。 当紫
外线照射时间为 ! 一 分钟 , 不论处理温度高
低 , 对毒力均无 明显影响Α 照射: 一 :< 分钟 ,
在同一照射时间下 , 毒力减退大体上随处理温
度的上升而加剧 6 处理温度越高 , 紫外线处理
时间越长 , 毒力减退越多。
∀ 6 < 茶园露水对离体病毒毒力的影响
∀ 6 < 6 露水Ω ∃值 晨 : 9 ∀= 茶园露水的 Ω ∃ 值均
在: 6 <∀ 一: 6 ! 范围内, 近中性 , 不致 引起病毒
多角体的破裂降解 6
∀ 6 < 6 ! 对毒力的影响 由表 < 可看出 , : 、
月茶园露水对离体病毒毒力无显著影响 6 相对
毒力减退率在露水不同处理浓度 、 处理时间之
间均无显著差异。
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圈 1 温度、 萦外线对离体病毒毒力的联合影响
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1 ∀ # 紫外线对离体病毒毒力的影响
如图 # 所示 , 方差分析表明 , 紫外线照射
时间 、 饲育温度、 病毒浓度三者均极显著影响
病毒毒力 。 由图 # 可知 , 饲育温度为#∃ ℃ 、 病
毒浓度为# ∀ ∃ δ < Γ . 或 又 # & 名Φ Ψ 2 _ ≅ <时 , 紫外线
处理 +一 0 分钟 , 毒力减退不明显 Ω 处理 %∃ 分
钟开始 , 毒力明显减退 , 一般随处理时间的延
长而加剧 。 病毒浓度为 # ∃ 火 % & “Φ Ψ 2 _间 时 ,
毒力减退不显著 , 仅 自处理 ∃/ 分钟开始 , 毒力
才略有减退 ∀ 当饲育温度为1& ℃ 、 病毒浓度为
# ∀ ∃ η 功 . 或<Γ 0 Φ Ψ 2 _ ≅ <时 , 病毒毒力随紫外线
裹 / 茶∴ ∀ 水对离体病毒的形晌
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/ 讨 论
有关饲育温度对昆虫病毒毒力影响的试验
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!;< 应 用 生 态 学 报 ! 卷
都巳证实 , 温度能明显影响毒力的表现 6 在适
宜温度范围内 , 温度上升有利于病毒感染其宿
主幼虫 , 病死率随之上升 , 温度过高 , 一般高
于阳℃时 , 病死率明显下降 , 即高温对病毒具
有一定的热抑制作用 6 就不同的病毒来说 , 热
抑制温度不同6 如家蚕 7[ > 二 Ψ夕, 。> Η‘8 〔“ 、
大蜡螟 72 ϑ ΒΒΕ Η Κϑ 二 Ε ΒΒ> Λ Ε ΒΒϑ 8 及 一 点 粘 虫
70 Ο Ε 4 Π ϑ ΒΕ ΦΚϑ 4 , Κ0 4 Λ Ν Φϑ 8& Ω ? 的热抑 制 温
度分别为∀ Χ 、 <= 和∀; ℃ 6 本文结果与前人的结
论基本相符 6 ∀= 、 ∀< ℃对 ∋ ∗ & 0? 具热抑制作
用、 其作用大小尚受饲毒虫龄的影 响 6 虫 龄
小 , 高温热抑制作用表现较弱 , 其原因可能主
要在于低龄幼虫的抗病力相对较弱 6 此外 , 热
抑制作用还受高温持续时间的影响 , 宿主在相
应热抑制温度下饲育时间越长 , 热抑制作用表
现越强 Α 反之越弱 6 本文结果也证 实 了 这 一
点 6 自然变温条件下 , 温度对 ∋ ∗ & 0 ? 毒力影
响的趋势与恒温基本一致 , 说明自然条件下 ,
∋ > &0 ? 毒力的表现与温度直接有关 6 至于高
温对 ∋ > & 0 ? 热抑制作用的内在原 因, 主要在
于高温阻制 了其形态发生 〔“’和增殖 “ ’。
本文结果表明 , 紫外线对离体 ∋ > & 0 ? 具
有显著的灭活作用 , 可使毒力明显减退 , 且基
本上随紫外线处理时间的延长 , 即照射总剂量
的增大而加剧 6 此外 , 其作用尚与处理温度有
关 , 即随处理温度上升而有加剧的趋势 6 自然
条件下 , 由太阳辐射到达地面的不仅有近紫外
线 7波长 ∀= 一∀ = Λ Ι 8, 且周期地还有相当数
量的远紫外线 7波长 Ν 一∀= = Λ Ι 8 , 紫外线辐
射总量是季节性变化 的 , 其 中 以 夏 至 为 最
高 〔“’ 6 因此 , 紫外线是影响离体∋ > & 0 ? 稳定
性的 自然因子之一 , 不同季节影响程度不同 6
在夏季 , 加 6丘高温效应影响更为显著 6 鉴于离
体 ∋ > & 0? 经<Χ ℃处理 天 , 毒力不受影响 ,
处理 ! 天才开始明显减退 , ! Χ一<= ℃处理时 ,
毒力减退无显著差异 , 说明病毒喷布后宿主有
足够时间摄入未经 温度 灭活的病毒 , 加上茶园
露水对离体 ∋ > & 0 ? 毒力无明显灭活作用 , 故
认为紫外线是影响该病毒稳定性的重要因子 6
紫外线 、 处理温度对离体 ∋ > & 0 ? 毒力影
响的最终表现 , 直接与饲育温度有关 6 饲育温
度不适宜时 , 毒力减退更为明显 6 当饲育温度
为拍℃ 时, ∋ ∗ &0 ? 即使未经紫外线或温度 处
理 , 其毒力也明显弱于饲育温度为!: ℃时经紫
外线或温度处理过的病毒 6 由此可见 , 在自然
条件下温度是影响该病毒毒力的主要因子 6
由本文结果及杭州市茶科所 : ∀一 年
气象资料分析可知 , 杭州茶区 < 一 : 、 一Λ
月, 茶尺镬第 、 ! 、 Χ 、 : 代发生期间 , 月
均温!: 年平均为 6 <一! ∀ 6 ℃ , 各月 日最高气
温平均为; 6 :一! 6 ℃ ,适宜于∋ > & 0? 感染茶
尺镬幼虫 6 月 日照时数为 = 6 ;一 ! 6 小时 ,
紫外线辐射总量相对较低 , 对离体病毒灭活作
用较弱 , 加上温度较低 , 短时间内不影响离体
病毒活性 , 病毒较为稳定 6 因此, 防治效果可
达= ≅ 以上 6 但是 , ; 、 月 , 茶尺蟆第 ∀ 、
< 代发生期间 , 月场温平均为!; 6 :一! 6 ℃ ,
各月日最高气温平均为∀ ∀ 6 =一∀; 6 <℃ , 不利于
该病毒感染宿主幼 虫, 反而促使宿主化蛹 、 羽
化 , 免于病死 Α 加上此期间月 日照时数为 ; Χ 6 =
一 : 6 ; 小时 , 紫外线辐射总量较高 , 对离体
病毒的灭活作用较强 , 病毒较不稳定 。 因此 ,
该病毒对第 ∀ 、 < 代茶尺蝮的防治效果不佳 6
·主要参考文献
叶恭银、 胡 萃 6 。。 温度对茶尺嫂核型多角体病
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