全 文 :— 66 — 现代中药研究与实践2011年第25卷第5期Chin Med J Res Prac,2011 Sept.,Vol.25 No.5
苷、蒙花苷的含量测定方法对本制剂均不可行,为最
终确定选择黄芩苷作为指标提供了依据。
3.2 供试品制备 根据本品提取工艺、剂型的特点
以及黄芩苷的性质,采用了甲醇超声提取方法,该方
法简单有效,可有效提取制剂中的黄芩苷。
3.3 波长的选择 根据黄芩苷的全波长紫外吸收光
谱,在 266 nm、230 nm、350 nm 处有最大吸收,参照《中
国药典》2010 年版(一部)中黄芩苷的检测波长,
确定检测波长为 280 nm,供试品色谱中黄芩苷峰与
其它峰能够达到很好的分离,阴性样品无干扰。因此
将测定波长定为 280 nm。
3.4 方法评价 本品所用的 HPLC 法具有方法准确
可靠,简便易行,重现性及稳定性均良好,是一种测
定清瘟颗粒中黄芩苷的较好方法。
参考文献
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齿叶白鹃梅不同部位总黄酮的含量测定
王 聪,刘玉强,才 谦 *
(辽宁中医药大学,辽宁 大连 116600)
摘要 :目的 建立齿叶白鹃梅叶总黄酮含量测定的方法,并以此方法测定其不同部位总黄酮的
含量。方法 以芦丁为对照品,采用分光光度法于 267 nm 处测定齿叶白鹃梅中总黄酮的含量。结
果 芦丁在 0.005 6~0.022 4 mg/mL(r=0.999 8) 范 围 内 线 性 关 系 良 好, 平 均 回 收 率 为 97.77%,
RSD=1.78%(n=6),其叶、花、、茎、根含总黄酮分别为 6.39%, 6.84%,1.04%,1.11%(n=3)。结
论 该方法简便、准确、可靠, 可作为该植物中总黄酮含量检测的方法。
关键词 :齿叶白鹃梅 ;总黄酮 ;分光光度法
中图分类号 :R284.1 文献标识码 :A 文章编号 :1673-6427(2011)05-0066-03
Content Determination of Total Flavonoids in Different Part of
Exochorda serratifolia S.Moore.
WANG Cong,LIU Yu-qiang, CAI Qian
(Liaoning University of TCM,Dalian 1l6600,China)
Abstract:Objective To establish the method of content determination of total flavonoids in the leaves
of Exochorda serratifolia S.Moore., and determine the content of total flavonoids in other different part.
Methods Ultraviolet spectrophotometry was used with rutin as the reference and detection wavelength was set
at 267nm. Results The liner range of rutin was 0.005 6~0.022 4 mg/mL(r=0.999 8),the average recovery was
97.77%, the contents of total fl avonoids in leaves,fl ower, stem and root were 6.39%, 6.84%,1.04%,1.11%
(n=3),respectively. Conclusion The method is accurate and reliable that can be used to determine the content
of total fl avonoids of Exochorda serratifolia S.Moore.
Key words: Exochorda serratifolia S.Moore.; total fl avonoids; ultraviolet spectrophotometry
收稿日期:2010-09-12
作者简介:王 聪(1984- ),女,在读硕士,研究方向:中药化学成分研究。
*通讯作者:才 谦(1972-),女,副教授,主要从事中药及天然药物化学成分研究。Tel:0411-87586318,E-mail:caiqianmail@sina.com
DOI:10.13728/j.1673-6427.2011.05.021
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齿叶白鹃梅 Exochorda serratifolia S.Moore. 为蔷
薇科绣线菊亚科白鹃梅属的植物 [1],生长在辽宁省朝
阳、凌源、喀左等地区和河北一带 , 药用价值尚不明
确 ;白鹃梅属的另一个种白鹃梅主要生长在我国的江
苏、浙江、安徽一带,以其根皮、树皮入药,用于
腰骨酸痛的治疗 [2]。在朝阳凌源,当地居民把齿叶白
鹃梅的嫩叶做为一种野菜食用,并且民间流传其具
有治疗和预防糖尿病的功效,但是目前尚无齿叶白
娟梅化学成分和药理作用方面的研究报道。本课题
组通过对其叶化学成分的系统分离研究,分得芦丁、
芹菜素苷等多个黄酮类化合物。本论文以芦丁为对
照品,采用分光光度法 [3,4] 测定齿叶白鹃梅叶、花、
根和茎中总黄酮的含量,为其深入开发奠定基础。
1 仪器与试药
UV-3010型紫外分光光度计(日本岛津);
A R 2 1 4 0 电 子 分 析 天 平 ( 上 海 奥 豪 斯 公 司 ) ;
sartorius CP225D型电子天平( 十万分之一, 德国
sartorius公司) ;恒温水浴锅( 巩义市英峪予华仪器厂)
;KH-300P型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限
公司); DFT型药用万能粉碎机(温岭市大得中药
机械有限公司生产)。
齿 叶 白 鹃 梅( 采 收 地 :辽 宁 省 朝 阳 市 凌 源
县,由辽宁中医药大学王冰教授鉴定为齿叶白鹃梅
Exochorda serratifolia S.Moore.) ; 芦 丁 对 照 品 ( 自
制,纯度为 98% 以上 ) ; 所有试剂均为分析纯 ( 天
津科密欧化学试剂有限公司 )。
2 方法与结果
2.1 对照品与供试液的制备
精密称取芦丁对照品 7 mg,置 10 mL 量瓶中,
加 85% 乙醇溶解并稀释至刻度,置水浴上微热使其
溶解,放冷,加 85% 乙醇至刻度,摇匀,即得对照
品溶液 ( 浓度为 0.7 m g/mL),待用。
取齿叶白鹃梅药材各部位粉末 ( 4 0 目 ) 约 0.5
g,精密称定,置于烧瓶中,加 85%乙醇 50 mL,冷
浸 30 min 后,在水浴上加热回流提取 2 h,滤过,合
并滤液,浓缩至 10 mL,作为供试品溶液,待用。
2.2 测定波长的选择
取对照品溶液和供试品溶液 0.1 mL,分别置于
25 mL 量瓶中,加 85%乙醇定容至刻度,混匀,在
200~400 nm 波长范围内扫描,二者均在 267 nm 有最
大吸收,故选择 267 nm 为测定波长。
2.3 标准曲线的绘制
精 密 移 取 对 照 品 溶 液( 浓 度 为 0.703 mg/mL)
0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mL 分 别 置 于 25
mL 量瓶中,加 85%乙醇至刻度,混匀,于 267 nm
波长下测定吸光度。以芦丁的浓度 (mg/mL) 为横坐
标 (X)、芦丁吸光度值为纵坐标 (Y),进行回归,回
归方程为 Y =33.878X+0.013 9( r=0.999 8)。线性范围
0.005 6~0.022 4 mg/mL。
2.4 精密度实验
取同一供试品溶液,于 267 nm 波长处测定吸收
度,连续 6次,RSD值为2.64%,表明仪器精密度较好。
2.5 稳定性实验
取同一供试品溶液,于 267 nm 波长处,在 0、
20、30、40、50、60 min 测定其吸收度,RSD 值为 1.85%,
表明供试品溶液在 60 min 内基本稳定。
2.6 重现性实验
精密称取齿叶白鹃梅药材干叶样品 0.5 g,按
“2.1” 项下供试品溶液的制备方法平行制备供试液 5
份,于 267 nm 波长处测定吸收度,计算总黄酮的含
量平均值为 58.71 mg/g,RSD 值为 2.5%,表明实验
重现性良好。
2.7 回收率试验
精密称取已知含量的齿叶白鹃梅干叶药材 6
份。按样品中总黄酮含量的 100%精密加入对照品,
按 “2.1” 项下方法制备,测定吸收度,平均回收率为
97.77%, RSD 值为 1.78%,结果见表 1 。
2.8 样品的测定
取齿叶白鹃梅药材各部位粉末 ( 4 0 目 ) 约
0.5g,精密称定,按供试品溶液制备方法制备,于
267nm 波长处测定吸收度,代入回归方程,计算总
黄酮的含量。结果见表 2 。
表1 加样回收率实验结果
Tab.1 Results of recovery test
样品中总黄酮含
量(mg)
29.75
30.48
30.03
29.82
30.12
29.95
加入芦丁
量(mg)
30.00
30.00
30.00
30.00
30.00
30.00
测得总黄酮含量
(mg)
58.92
59.54
59.61
59.39
58.67
60.01
回收率
(%)
97.23
96.87
98.6
98.57
95.17
100.2
平均回
收率(%)
97.77
RSD
(%)
1.78
表2 齿叶白鹃梅不同部位总黄酮含量结果(n=3)
Tab.2 Assay test results
编号
1
2
3
4
部位
叶
花
茎
根
平均含量(%)
6.39
6.84
1.04
1.11
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3 讨论
3.1 本文采用紫外分光光度法建立了测定齿叶白鹃
梅叶中总黄酮的含量测定方法,该方法快速、简便、
准确、可靠。
3.2 本文采用此方法测定了齿叶白鹃梅不同部位总
黄酮的含量。结果可知花和叶的总黄酮含量大于根和
茎,达到 6% 以上,表明黄酮可能是齿叶白娟梅叶防
治糖尿病的主要活性成分,因此具有非常重要的开发
利用价值,值得进一步深入研究。
参考文献
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obus (Thunb.) Koidz. 或 毛 刺 楸 K. septem lobus var.
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中药材标准》(1987 年版)收载。具有祛风湿、通络、
止痛等功效 [1]。用于类风湿性关节炎、腰膝疼痛 ;外
用跌打损伤。本品含有皂苷、多炔、苯丙烷类、木
HPLC 法测定川桐皮中常春藤皂苷元的含量
谭邬丽 1,李 敏 1*,吴蜀瑶 2
(1.成都中医药大学药学院,四川 成都 611137 ;2.江西中医学院,江西 南昌 330006)
摘要 :目的 采用 HPLC 法测定川桐皮中常春藤皂苷元的含量。方法 色谱柱为 Welch Materials
XB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 µm) ;流动相为乙腈 -0.05% 磷酸溶液(68:32),流速为 1.0 mL/min ;柱温 :
40℃ ;检测波长为 210 nm。结果 常春藤皂苷元在进样量为 0.693 4~3.467 0 μg 范围内有良好的线性关系,
平均回收率为 99.5%,RSD=2.50%。结论 本方法简便准确,重复性好,可用于川桐皮中常春藤皂苷元的
含量测定。
关键词 :川桐皮 ;常春藤皂苷元 ;HPLC
中图分类号 :R284.7 文献标识码 :A 文章编号 :1673-6427(2011)05-0068-03
Determination of Hederagenin in Septemlobate kalopanax Bark. by HPLC
TAN Wu-li1, LI Min1 ,WU Shu-yao2
(1.Pharmacy College of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137 ,China;
2. Jiangxi College of traditional Chinese medicine, Nanchang 330006, China)
Abstract:Objective To establish an HPLC method for the determination of hederagenin in Septemlobate
kalopanax Bark. Methods The Welch Materials XB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)column was used,the
mobile phase consisted of Acetonitrile-0.05%Phosphate (68:32),the fl ow rate was 1 mL•min-1 ,the column
temperature was 40 ℃ ,and the UV detector wavelength was set at 210 nm.Results The cablibration curve
of hederagenin was linear within a range of 0.693 4~3.467 0 μg, the average recovery was 99.50% and the RSD
was 2.50%.Conclusion The method is simple,accurate and repeatable, it can be applied in determination of
hederagenin in Septemlobate kalopanax Bark.
Key words: Septemlobate kalopanax Bark;hederagenin;HPLC
收稿日期:2010-09-15
作者简介:谭邬丽(1985-),女,硕士,主要从事中药材质量标准研究。
*通讯作者:李敏,教授,Tel:13980038316,E-mail:0281imin@163.
脂素和简单酚苷等成分 [2]。皂苷类成分为其主要成
分,其中刺楸皂苷 A 具有显著的抗炎活性,其水解
后可得到常春藤皂苷元 [3]。故选择以常春藤皂苷元为
指标,建立了分离效果好、专属性强、灵敏度高的
HPLC 含量测定方法。
1 仪器与试药
Varian 高效液相色谱仪 ;超声波清洗器(昆山
市超声仪器有限公司,KQ3200E 型);电热恒温水浴
锅(DZKW-4,北京中兴伟业仪器有限公司);薄层
层析硅胶 G(青岛海浪硅胶干燥剂厂制造);羧甲基