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蒙古扁桃药材不同部位蛋白质含量测定



全 文 :* 基金项目:国家自然科学基金 (81102760)
通讯作者:石松利
蒙古扁桃药材不同部位蛋白质含量测定*
周红兵1,2,钮树芳2,石松利2,王迎春1
(1.内蒙古大学生命科学学院,内蒙古 呼和浩特 010021;2.包头医学院)
摘 要 目的:测定蒙古扁桃种仁和叶片中蛋白质含量,为其资源综合开发利用提供一定的科学依据。方法:采用凯氏定氮法测定
蒙古扁桃种仁和叶片中蛋白质含量。结果:蒙古扁桃种仁和叶片中蛋白质含量分别为 22. 21 %和 12. 99 %,该方法的回收率为 96 % ~
105 %,RSD为 0. 29 %。结论:该法简便、快速、准确,蒙古扁桃种仁和叶片中均含有丰富的蛋白质。
关键词 凯氏定氮法;蒙古扁桃种仁和叶片;蛋白质,含量测定
Determination of the contents of protein in different parts of Prunus mongolica
ZHOU Hongbing1,2,NIU Shufang2,SHI Songli2 WANG Yingchun1
(1. College of Life Sciences,Inner Mongolia University,Huhhot 010021,China;2. Baotou Medical College,Baotou 014040,China)
Abstract Objective:To establish a method for determination of the protein contents in the kernels and leaves of Prunus mongolia and provide
a scientific basis for its comprehensive exploitation and utilization of resources. Methods:Kjeldahl method was adopted to determine the protein
contents in the kernels and leaves of Prunus mongolia. Results:The contents of protein in the kernels and leaves were 22. 21 % and 12. 99 %,re-
spectively. The recovery rate of the method was 96 % ~105 %,with the relative standard deviation (RSD)0. 29 % . Conclusion:Kjeldahl method
is rapid,simple and accurate,and the contents of protein in the kernels and leaves of Prunus Mongolia were both abundant.
Key words Kjeldahl method;Kernels and leaves of Prunus mongolica;Protein;Determination of content
蒙古扁桃(Prunus mongolica )又称山樱桃、土豆子、乌兰布
依勒斯,是蔷薇科李属的多年生木本植物,为蒙古高原特有的
阿拉善荒漠种,是集药用、食用、饲用、工业用、经济、生态、社会
效益为一体的优良的木本油料树种。种仁含油率达40 %,含
有苦杏仁苷、黄酮类、不饱和脂肪酸、多糖类、蛋白质及人体所
必需的维生素和微量元素等多种药用成分[1]。为传统的中药
材,以种仁入药,性苦,味平,主治干咳及支气管炎、咽喉干燥、
阴虚便秘。还可制成镇静剂和止痛剂,对高血压、神经衰弱、糖
尿病、肺炎等有一定疗效[2]。蒙古扁桃亦是荒漠区重要牧草,
其嫩枝、叶、花及果实均为家畜喜食,在干旱少雨植被稀疏荒漠
区草原牧民称之为“救命草”[3]。由此可见蒙古扁桃具有广阔
的开发利用价值和经济效益。
植物是蛋白质资源的巨大宝库,也是人类获取蛋白质最廉
价的途径之一。作为植物体的初生代谢产物,蛋白质在催化体
内的生化反应、调节代谢及抵御逆境等方面都起着重要作
用[4]。研究表明,药材中的蛋白质含量与中药的药性有一定的
相关性[5]。蛋白质含量高低是鉴别药材品质的重要指标之一。
到目前为止,对蒙古扁桃药材的药用成分研究主要集中在黄
酮、多糖、有机酸、苦杏仁苷、维生素和微量元素等方面[6,7],有
关蒙古扁桃蛋白质分析测定未见报道。因此,本文采用凯氏定
氮法对蒙古扁桃药材不同部位蛋白质含量进行测定并比较,为
蒙古扁桃药材质量评价和资源综合开发利用提供一定的实验
依据。
1 材料
1. 1 仪器 FA1004 型电子分析天平(上海恒华科技仪器有限
公司),GZX - 9023 MBE 型数显鼓风干燥箱(上海启威电子有
限公司),微量滴定管(10 mL),干燥器,常压蒸馏装置,电热
板,电炉。
1. 2 试剂 浓硫酸,40 % 氢氧化钠溶液,盐酸标准溶液
(0. 09 mol /L),2 %硼酸溶液,无水碳酸钠,五水硫酸铜,二氧化
钛,硫酸钾,氯化铵标准溶液(0. 033 27 mol /L),定氮混合指示
剂(0. 5 g溴甲酚绿和 0. 1 g甲基红放入玛瑙研钵中,加100 mL
95 %的乙醇研磨溶解,然后用稀盐酸或稀氢氧化钠调节 pH 约
为 4. 5),纳氏试剂(取 16 g氢氧化钠溶于 50 mL水中冷却至室
温,另取 7 g碘化钾和 10 g 碘化汞溶于水,将此溶液在搅拌下
徐徐注入氢氧化钠溶液中,稀释至 100 mL,静置过夜,取清液存
于棕色瓶中,密塞保存)。所用试剂均为分析纯,水为无氨去离
子水。
1. 3 药材 蒙古扁桃种仁和叶片(2013 年 8 月采自贺兰山沟
口),经内蒙古大学生命科学学院王迎春教授鉴定。
2 方法与结果
2. 1 样品前处理 将蒙古扁桃种仁和叶片用去离子水洗涤数
次,将叶片置 80 ℃的烘箱中烘至恒重,种仁置 105 ℃的烘箱中
烘至恒重,取出冷却、研成细粉,放干燥器中备用。
2. 2 蛋白质含量的测定
2. 2. 1 消化 精密称取一定质量样品粉置于 100 mL 锥形瓶
中,加入 0. 4 g 硫酸铜、0. 3 g 二氧化钛、10 g 硫酸钾,再加入
3 滴石蜡油,之后加浓硫酸 20 mL,锥形瓶口加小漏斗,在电热
板上低温消化至不冒气泡,然后转移至电炉上,使硫酸大量发
烟,保持溶液微沸,温度大约为 400 ℃,直到样品由黑色变为棕
褐色再变至翠绿色溶液,再加热 20 min,消化完全。
3
2015 年第 31 卷第 4 期
Vol. 31 No. 4 2015
包 头 医 学 院 学 报
Journal of Baotou Medical College
2. 2. 2 蒸馏 消化完毕,待消化液完全冷却后,将消化液转移
至圆底烧瓶中,锥形瓶用 50 mL 蒸馏水少量多次冲洗,缓慢加
入 80 mL 40 %氢氧化钠溶液,避免氢氧化钠与过量浓硫酸反
应过于剧烈,产生爆沸现象,连接蒸馏装置。将盛有 50 mL
2 %硼酸吸收液(加三滴定氮混合指示剂)的锥形瓶,连接在牛
角管下端,然后开始蒸馏。60 min后检查是否蒸馏完全。检查
方法:取下牛角管,用白瓷板在冷凝管下端接一滴液体,加一滴
纳氏试剂,如无黄色,即表示蒸馏完全,如有黄色,应继续蒸馏,
直到蒸馏完全为止。
2. 2. 3 滴定 蒸馏完毕,取下牛角管,用少量蒸馏水冲洗牛角
管(洗 入 锥 形 瓶 中),然 后 用 盐 酸 标 准 溶 液 (c =
0. 092 87 mol /L)滴定,溶液由蓝色变为微红色即达终点,记录
消耗盐酸体积V mL。同时做空白实验,记录消耗盐酸体积 V0
mL。根据所用标准盐酸的量可用下式计算出待测物中的蛋白
质含量。
蛋白质含量(%)=
(V - V0)× c × 10
-3 × 14
ms
× 100 % × 6. 25
V -滴定样品所用标准盐酸的量,mL;
V0 -滴定空白所用标准盐酸的量,mL;
c -标准盐酸浓度,mol /L;
ms -烘干样品质量,g;
14 -氮的摩尔质量,g /mol;
6. 25 -蛋白质与氮的换算因子
2. 3 精密度实验 平行称取 5 份蒙古扁桃种仁样品粉末 0. 5 g
(精确至 0. 0001 g),按 2. 2 项下方法消化、蒸馏、滴定,计算得
RSD为 0. 29 %,表明该法精密度高。
2. 4 回收率实验 精密称取 3 份蒙古扁桃种仁样品粉末
0. 25 g,分别按照样品含氮量的 80 % ~120 %加入 NH4Cl的标
准溶液(分别为 4. 00、5. 00、6. 00 mL),按 2. 2 项下方法消化、蒸
馏、滴定,计算氮的回收率在 96 % ~105 %之间,结果如表 1 所
示。结果表明,该法准确度高。
2. 5 样品含量测定 平行称取 3 份蒙古扁桃叶片粉末 1. 0 g、
种仁粉末 0. 5 g(精确至 0. 000 1 g)于 100 mL 锥形瓶中。按
2. 2 项下的方法测定蒙古扁桃种仁和叶片中蛋白质含量,求平
均值,结果如表 2。
表 1 加标回收实验(%)
样品质量(g) 含氮量(mg) 加标量(mg) 回收量 (mg) 回收率(%)
0. 2508 8. 912 7. 120 16. 389 105. 02
8. 900 17. 579 97. 38
10. 680 20. 075 104. 52
0. 2530 8. 991 7. 120 16. 103 99. 89
8. 900 17. 701 97. 86
10. 680 20. 075 103. 78
0. 2512 8. 927 7. 120 16. 350 104. 26
8. 900 17. 809 99. 80
10. 680 19. 173 95. 94
表 2 蒙古扁桃种仁和叶片中蛋白质含量(x ± s)
样品 蛋白质含量(%)
蒙古扁桃种仁 22. 21 ± 0. 02
蒙古扁桃叶片 12. 99 ± 0. 01
3 讨论
结果表明,蒙古扁桃种仁和叶片中的蛋白质含量较为丰
富,分别为 22. 21 %和 12. 99 %。本实验建立的凯氏定氮法测
定蒙古扁桃蛋白质含量的方法,简单、快速、准确,为蒙古扁桃
蛋白质含量的测定提供了一种可靠方法。本文为研究蒙古扁
桃药效与蛋白质之间的关系提供实验依据,同时为蒙古扁桃药
材的质量评价以及资源的合理开发利用提供了参考。
参考文献
[1] 杨月欣,王光亚,潘兴昌.中国食品成分表[M]. 北京大学医学出
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[3] 李爱平,王晓江,张纪钢,等. 优良生态灌木蒙古扁桃生物学特性
与生态经济价值研究[J].内蒙古林业科技,2004,(1) :10 - 13.
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[5] 李健,李峰,王厚伟.中药药性与蛋白质含量相关性研究[J].山东
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[6] 石松利,白迎春,周红兵,等. 蒙古扁桃药材中多糖的提取及含量
测定[J].时珍国医国药,2013,24(2):257 - 258.
(收稿日期:2014-10-11)
左侧门脉高压致反复上消化道出血 1 例分析
杨红燕,吉鹏飞
(包头市中心医院内分泌科,内蒙古 包头 014040)
左侧门脉高压多继发于胰腺及腹膜疾病,由于脾静脉血流
受阻,从而出现左侧门脉高压,其后会继发出现以胃底静脉曲
张、上消化道大出血为主要表现的门脉高压,需要认真鉴别门
脉高压病因。由于解剖结构异常导致的左侧门脉高压相对较
少见,而且是可以完全治愈的一种疾病,在确诊左侧门脉高压
后,需要积极鉴别病因,以确定最佳治疗措施。我们诊治了1 例
左侧门脉高压致反复上消化道出血患者,现分析报告如下。
1 临床资料
女性患者 54 岁,因“反复呕血、黑便 2 月”入院,体格检查
(下转第 7 页)
4 包 头 医 学 院 学 报 Vol. 31 No. 4 2015