全 文 ：工艺技术 食品工业科技
Vol.29 , No.03 ,2008
2008年第 03期 159　
翻白草活性成分的萃取
张　俭 ,李胜华 ,胡　浩 ,刘立中 ,唐优良 ,伍贤进＊
(怀化学院生物工程系 ,湖南怀化 418008)
摘　要:以翻白草全草为实验材料 ,用 70%的乙醇为溶剂 ,采用超声波环流提取方法对翻白草进行粗提取 ,再用石油
醚 、乙酸乙酯 、正丁醇依次对提取液进行萃取 ,减压干燥得到提取产物 。测定萃取产物黄酮的含量 ,结果显示 ,用乙酸
乙酯萃取翻白草活性成分效果最好 。
关键词:翻白草 ,黄酮 ,活性成分 ,萃取
ExtractionofactivesubstanceofPoterntila
ZHANGJian, LISheng-hua, HUHao, LIULi-zhong, TANGYou-liang, WUXian-jin＊
(BioengineeringDepartmentofHuaihuaUniversity, Huaihua418008, China)
Abstract:Theethanol(70%)wasusedtorefinePoterntilabysupervoicewaving-circulation.Therefined
productionwasextractedwithusingpetroleumether, ethylacetateandn-butylalcohol, thengotentheproduction
bytorrefying.TheexperimentresultsshowedthatwasbesttorefinetheactivesubstanceofPoterntilaby
examiningthecontentofflavonoidintheextractedproduct.
Keywords:Poterntila;flavonoid;activesubstance;extraction
中图分类号:TS201.2　　　　文献标识码:A　　　　文 章 编 号:1002-0306(2008)03-0159-02
境 。改进后的工艺先用丙酮及乙醇分步纯化 ,产品
用乙酸乙酯溶解 ,再进行碱提酸沉及重结晶 ,建立了
一条快速 、简便 、高效的纯化工艺路线 。结果表明 ,
该工艺容易控制 ,无毒副作用 ,适合于工业化生产。
参考文献:
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　　翻白草(PoterntiladiscolorBge)为蔷薇科植物 ,
主要分布在北半球的温带和寒带 ,少数几种分布在
南半球 。在中国有 88种 ,其中 24种为中国特有 ,主
产于山东 、辽宁 、安徽 、河北 、河南 、内蒙古 、湖北 、江
苏 、广西 、福建等地 [ 1 ] 。翻白草味苦性平 ,应用历史悠
久 ,多种医药典籍中均有记载。由于翻白草的提取
物具有特殊药理学活性 ,人们对翻白草的化学成分
开展了大量的研究 ,其主要化学成分有:萜类 、甾体 、
黄酮类和多酚类等 [ 2 ～ 4] 。翻白草的降血糖等活性多
与黄酮类化合物有关 [ 5] ,民间多用翻白草的水提液即
水煎液治疗糖尿病 ,国内外的大部分研究都是以水
为溶剂 ,对翻白草进行提取 。本实验用 70%乙醇对
翻白草全草粉末进行超声波环流提取 , 得到粗
提液 [ 6 ] ,以石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇三种不同有机溶
收稿日期:2007-08-14　＊通讯联系人
作者简介:张俭(1967-),男 ,硕士 ,副教授 ,主要从事细胞生物学和药
物学的研究。
基金项目:国家科技基础条件平台建设子项目(2005DKA21006);湖
南省植物学重点建设学科资助项目。
剂依次对翻白草粗提液进行萃取 ,为翻白草药效实
验提供材料和参考数据 。
1　材料与方法
1.1　材料与设备
翻白草样品　2004年 10月采自湖南省溆浦县
西南山坡地 ,采集后移栽至怀化学院生物园种植 ,
2006年 7月取鲜样;石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇 、乙醇
　均为国产分析纯 。
TXNW-10B超声波循环提取机　北京弘祥生物
技术开发公司;RE-52AA旋转蒸发仪　上海亚荣生
化仪器厂;微波真空干燥箱　贵州新奇微波工业有
限责任公司;UV-752紫外分光光度计　上海光谱仪
器有限公司。
1.2　实验方法
1.2.1　翻白草的粗提　称取翻白草全草适量 , 50～
60℃干燥 8h,粉碎 ,称取 300g放入超声波环流提取
机 ,加入 3L70%的乙醇 ,要确保超声波变幅杆末端潜
入液面的深度大于 30mm。设置超声波功率 、时间 、工
作间隙 , 40℃超声波循环提取 40min,工作频率 40kHz。
DOI :10.13386/j.issn1002-0306.2008.03.081
食品工业科技 工艺技术
　　　ScienceandTechnologyofFoodIndustry
160　 2008年第 03期
将乙醇提取液用旋转蒸发仪 35℃减压浓缩到较小体
积 ,再放入真空干燥箱干燥 ,直至得到浸膏。
1.2.2　三种不同溶剂对翻白草粗提液的萃取　用适量
30℃去离子水回收浸膏 ,将溶液转移至 500mL分液漏
斗 ,首先用石油醚萃取 ,将萃取液装入 2L的广口瓶 ,标
号 1。萃取后的上层残液再以乙酸乙酯萃取 ,萃取液
装入 2L的广口瓶 ,标号 2。萃取后的上层残液再以正
丁醇萃取 ,萃取液装入 2L广口瓶 ,标号 3。将不同溶
剂的萃取液分别合并 ,将萃取完的最后残液装入 2L广
口瓶 ,标号 4。萃取过程中 ,两液层由于乳化而形成界
面不清时 ,可将分液漏斗在水平方向上缓慢地旋转摇
动 ,消除界面处的 “泡沫”,促进分层。
1.2.3　萃取物的干燥　将翻白草石油醚萃取液分批
装入圆底烧瓶 , 在旋转蒸发仪上减压浓缩 , 温度
60℃,直至冷凝管中不再有溶剂下流 ,回收石油醚;
将翻白草乙酸乙酯萃取液分批装入圆底烧瓶 ,旋转
蒸发仪浓缩 ,温度 75℃,直至冷凝管中不再有溶剂下
流 ,回收乙酸乙酯;将翻白草正丁醇萃取液分批装入
圆底烧瓶 ,旋转蒸发仪浓缩 ,温度 80℃,直至冷凝管
中不再有溶剂下流 ,回收正丁醇;将残留液分批装入
圆底烧瓶 ,旋转蒸发仪浓缩 ,温度 80℃,直至冷凝管
中不再有溶剂下流 。将以上 3种浓缩物在 70～ 80℃
烘箱中烘干称重 。
1.2.4　总黄酮含量的测定
1.2.4.1　工作曲线的建立　称取在 120℃减压干燥至
恒重的芦丁对照品 10mg,置于 50mL的容量瓶中 ,加
95%的乙醇 30mL,置于水浴上微热使溶解 ,放冷 ,加
乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,使之成为浓度为 0.2mg/mL
的芦丁标准品溶液 ,作为贮备液备用。精密量取已
制备的对照品溶液 0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL,分别置
于 10mL带塞试管中 ,加 1.0mL亚硝酸钠(1∶20)溶
液 ,混匀 ,放置 6min,加 0.5mL硝酸铝(1∶10)溶液 ,混
匀 ,放置 6min,加 1mol/L的氢氧化钠 4mL,再加水至
刻度 ,摇匀 ,放置 15min,用分光光度法在 λ=500nm
处测定吸光度 ,用最小二乘法作线性回归得芦丁浓
度(Y)与吸光度(X)的关系曲线的回归方程式:Y=
0.8577X-0.0005, R2 =0.9992.
1.2.4.2　样品黄酮含量的测定　每种萃取产物精密
量取 1g样品 ,加超纯水 5mL,装入 25mL的容量瓶 ,
加 5%亚硝酸钠 1mL,混匀 ,放置 6min,加 5%的硝酸
铝 1mL, 混匀 , 放置 6min, 加 1mol/L的氢氧化钠
10mL,再加水至刻度 ,摇匀 ,放置 15min,用分光光度
法在 λ=510nm处测定吸光度 ,根据回归方程计算样
品中总黄酮含量 。
2　结果与分析
采用三种不同溶剂对翻白草粗提液进行萃取 ,
得到的萃取产物测定见表 1,产物总黄酮含量的测定
见表 2。
表 1　不同溶剂萃取产物的测定
溶剂 提取物干重(g) 提取物比率(%)
石油醚 3.21 1.07
乙酸乙酯 3.07 1.02
正丁醇 2.93 0.98
表 2　不同萃取产物总黄酮含量的测定
溶剂 样品质量(g) 总黄酮质量(mg)
石油醚 1 0.5
乙酸乙酯 1 5.6
正丁醇 1 1.7
3　讨论
萃取溶剂应具备如下一些条件:选择性强 ,使原
组分间的相对挥发度能显著增大 , 溶解度 、沸点适
当;除以上条件外 ,还应满足其它一些条件 ,如热稳
定 、不易燃易爆 、来源方便 、价格低廉等 。石油醚 、乙
酸乙酯 、正丁醇是天然产物提取研究中常用的三种
有机溶剂 ,它们不(微)溶于水 ,可用做萃取剂 。本实
验选取这三种溶剂作为萃取溶剂 。在萃取过程中按
照石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇的顺序是由这三种溶剂
的极性所决定的 ,从石油醚到正丁醇极性逐渐减小 ,
可以分别萃取出翻白草粗提液中极性不同的成分 。
石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇三种有机溶剂都具有一
定的毒性 。在用于药用成分提取时 ,若在产物中有萃
取溶剂残留将直接对受试动物产生毒害作用 ,因此在
提取药用成分时 ,必须考虑溶剂在产物中的残留问题 。
石油醚的沸点为 40～80℃,性质稳定;乙酸乙酯沸点为
77.2℃,易挥发;正丁醇沸点为 117.7℃,难挥发。减压
浓缩过程中正丁醇萃取液耗时最长 ,乙酸乙酯萃取液
耗时最短 ,石油醚萃取液居中。综合考虑以上三种溶
剂的毒性大小以及挥发的难易程度 ,选取乙酸乙酯做
为萃取剂 ,但乙酸乙酯在循环使用中可水解产生乙酸 ,
会影响到产品的得率和质量。
实验结果显示 ,乙酸乙酯萃取物的总黄酮含量
较石油醚 、正丁醇萃取物的总黄酮含量高 。黄酮类
成分都有一定程度的消除超氧阴离子 O-2 ·等自由
基的作用 ,这种抗氧化能力来自于其酚性羟基等供
氢或供电子能力 [ 7 ] ,因此黄酮类物质是一种重要的药
效成分。翻白草中含有一定的黄酮 ,这可能是其具
有抗糖尿病药效的重要原因之一。实验得知 ,翻白
草的黄酮成分主要存在于乙酸乙酯层 ,可推测翻白
草的乙酸乙酯提取物可能具有最佳抗糖尿病药效 ,
这为翻白草的后续药效研究提供一定的参考。
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