全 文 ：《食品工业》2014 年第35卷第 6 期 277
福林-酚比色法检测欧李多酚方法的建立
蔡愈杭，王小曼，赵珂
上海东锦食品集团有限公司（上海 201812 ）
摘 要 以没食子酸为对照品, 用福林-酚 (Folin-Ciocalteu)比色法测定3种欧李鲜果中的多酚含量。试验表明, 没
食子酸在0 mg/L~40 mg/L范围内, 吸收度与浓度呈良好的线性关系, 回归方程为y=0.012 86x+0.004 99, 相关系数
r=0.999 6, 测定方法的平均回收率为99.56%, RSD为0.84%。试验建立的方法稳定、可靠, 为欧李的开发和检测提供
了依据。
关键词 欧李; 多酚; 福林-酚 (Folin-Ciocalteu) 试剂; 分光光度法
Establishment of Folin-Ciocalteu Colorimetric for Determining
Cerasus humilis Polyphenol
Cai Yu-hang, Wang Xiao-man, Zhao Ke
Shanghai Tohkin Food Group Co., LTD. (Shanghai 201812 )
Abstract Gallic acid was used as a standard material, he total polyphenol content in Cerasus humilis was analyzed by
spectrophotometry with Folin-Ciocalteu reagent. In this method, the concentration of Gallic acid showed a good linearity with
absorbance at the range of 0 mg/L~40 mg/L, the regression equation was y=0.012 86x+0.004 99, with the correlation
coeffi cient of 0.999 6, the average recovery was 99.56%, and RSD was 0.84%. The method was accurate and reliable; It
provided the basis for the development and determination of Cerasus humilis.
Keywords Cerasus humilis; polyphenol; Folin-Ciocalteu reagent; spectrophotometry
欧李（Cerasus humilis （Bge） Sok）为蔷薇科樱
属野生果树，分布于我国的东三省、内蒙古、河北、
山东、山西等地，多生长在向阳山坡或沙丘边缘，资
源丰富[1]。欧李植株根系庞大，有防沙固土、美化环
境的作用，其茎叶、果实、根皮均具有较高的经济价
值[2]。欧李果实颜色艳红，形似李子，有独特香气，
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分析检测
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分析检测
味酸甜，不仅可直接食用，也可用于果酱、果干、果
汁、果酒等深加工产品的开发。欧李果实中维生素、
矿物质、蛋白质等营养成分含量丰富，其中矿物质中
钙的含量尤其丰富，远远高于其他常见水果品种，有
“高钙果王”、“钙果”的美称。
多酚（polyphenols），又被称为植物单宁，是一
种具有抗氧化活性的次生代谢产物，在医药、食品、
保健、化妆品中有很大的开发前景，具有抗辐射、抗
衰老、抗肿瘤、降血脂等药理作用[3-4]。欧李中富含酚
类物质，研究表明，欧李多酚能够抑制自由基，从而
避免生物膜、脂蛋白、血清白蛋白的氧化损伤，其机
理可能与其花青素富含的可水解单宁单元成分、活性
羟基数目及空间构象有关[5]。
多酚含量的测定方法普鲁士蓝法、酒石酸分光光
度法、原子吸收法、福林-酚法等。较为常用的是福
林-酚法，本试验参考李静等的方法[6]并略有改进，以
没食子酸为标准品，采用福林-酚法测定欧李中多酚
类物质的含量，建立起精确的欧李多酚检测方法，旨
在为欧李多酚的定量及生物功能评价提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
京欧2号欧李、山西欧李、内蒙古欧李，分别采
于河北、山西、内蒙古，于实验室-20 ℃保存备用；
福林-酚、没食子酸，均购于国药集团化学试剂有限
公司；乙醇、碳酸钠，均为分析纯；所有用水均为
MillinQ超纯水。
Millin-Q 超纯水制备机：密理博中国有限公司；
AL 104电子天平：梅特勒-托利多仪器上海有限公
司；UV-2450PC 型紫外-可见分光光度计：日本岛津
公司；SK5210LHC 型KUDOS 超声波清洗仪：上海科
导超声仪器有限公司。
1.2 试验方法
1.2.1 试验原理
在碱性溶液中，钨酸钼可以将多酚化合物定量氧
化，自身被还原生成蓝色化合物，蓝色化合物在最大
吸收波长处的吸光度与多酚类化合物含酚基团的数目
成正比。
1.2.2 标准溶液配制
称取0.100 0 g没食子酸，用蒸馏水溶解，定容至
100 mL，摇匀备用，此溶液质量浓度为1 000 mg/L。
1.2.3 标准曲线建立
最佳检测波长选择：没食子酸标准溶液于600
nm~900 nm范围内进行扫描，确定多酚的最大吸收
波长。
标准曲线建立：精确吸取质量浓度为800 mg/L的
没食子酸溶液0.00 mL，1.00 mL，2.00 mL，3.00 mL，
4.00 mL，5.00 mL至100 mL容量瓶中，用蒸馏水定容
至刻度，摇匀，所得没食子酸标准溶液的质量浓度分
别为0.0 mg/L，8.0 mg/L，16.0 mg/L，24.0 mg/L，32.0
mg/L，40.0 mg/L。精确吸取1.00 mL没食子酸标准溶液
于10 mL比色管中，加入1.00 mL福林-酚试剂，摇匀，
再加入3.00 mL 7.5% Na2CO3溶液，加蒸馏水定容至10
mL，摇匀，室温下显色1 h，765 nm处测定吸光度，
同时以未添加没食子酸标准溶液作空白对比，以吸光
度对没食子酸质量浓度作图。
1.2.4 样品测定
样品预处理：将欧李鲜果拣选、清洗、晾干，
去核，取可食部分切碎，组织捣碎机打碎成匀浆，
备用。
样品多酚的提取：称取5 g欧李匀浆，以80 mL
60%乙醇溶液洗入100 mL容量瓶中，至超声仪中60 ℃
超声30 min，取出，冷却，以60%乙醇溶液定容，摇
匀，过滤，弃初滤液20 mL，取续滤液备用。
测定：精确吸取1.00 mL样品滤液（若多酚含量过
高，可适当稀释）或没食子酸标准溶液于10 mL比色
管中，加入1.00 mL福林-酚试剂，摇匀，再加入3.00
mL 7.5% Na2CO3溶液，加蒸馏水定容至10 mL，摇匀，
室温下显色1 h，765 nm处测定吸光度，根据稀释倍数
和从标准曲线中查出的浓度，计算样品多酚含量。
样品中多酚含量=（C-C0）×V1×f/1 000 m
（1）
式（1）中：C-稀释液中多酚含量（mg/L）；C0-
空白中多酚含量（mg/L）；V1-定容体积（mL）；f-
稀释倍数；m-样品质量（g）。
2 结果与分析
2.1 最佳检测波长的选择及标准曲线线性关系的考察
在765 nm的波长处测定吸光度，得到回归方程y=
0.012 86x+0.004 99，相关系数r=0.999 6。表明没食子酸
在0 mg/L~40 mg/L范围与吸光度有良好的线性关系。
图1 没食子酸标准曲线
2.2 显色稳定性试验
取没食子酸标准溶液，随着放置时间的推移，于
“1.2.3”中标准曲线建立的测定条件下每20 min测定
其吸光度，共6次，分析测定多酚含量，并计算标准
偏差、相对标准偏差，结果见表1。标准溶液中多酚
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含量的RSD小于1%，表明没食子酸标准溶液2 h内显
色稳定。
表1 没食子酸标准溶液中多酚2 h的稳定性（n=6）
项目 测定值 /mg·L-1 测定平均 /mg·L-1 标准差 /% RSD/%
1 24.80
25.05 18.63 0.74
2 24.87
3 25.06
4 25.07
5 25.22
6 25.26
2.3 精密度和准确度验证
精密称取京欧2号样品6份，分别于“1.2.4”中样
品多酚的提取和测定的测定条件下测定其吸光度，分
析多酚含量，结果见表2。6次测定平均值为7.33 mg/
g，RSD小于1%，表明本试验具有良好的重现性。
表2 京欧2号中多酚含量测定的精密度
项目 测定值 /mg·g-1 测定平均值 /% 标准差 /% RSD/%
1 7.32
7.33 6.37 0.87
2 7.37
3 7.44
4 7.25
5 7.31
6 7.31
2.4 加样回收率试验
精确称取5.00 g京欧2号样品各数份，分别添加适
量没食子酸标准品，以少量60%乙醇溶液溶解并转移
至100 mL容量瓶中，其余按分别于“1.2.4”中样品多
酚的提取和测定的测定条件下测定其吸光度，计算
多酚含量，以加标测得量减去原样含量，再除以加
标量，得到回收率，结果见表3。多酚平均回收率为
99.56%，RSD=0.84%，表明本试验方法稳定可靠。
表3 样品加样回收率试验结果（n=5）
样品 回收的量 /mg·g-1 回收率 /%
平均回收
率 /% RSD/%
样品 7.33
99.56 0.84
样品 +2 mg 标准品 9.32 99.32
样品 +4 mg 标准品 11.35 100.49
样品 +5 mg 标准品 12.28 98.86
2.5 测定结果
按“1.2.4”将3种欧李鲜果进行预处理，各称取
3份做平行试验，分别于“1.2.4”中样品多酚的提取
和测定的条件下处理样品及测定其吸光度，对照标
准曲线，计算各样品中多酚含量，结果见图2。京欧
2号、山西欧李、内蒙古大欧李中总多酚的含量平均
值分别为7.33 mg/L，8.67 mg/L，7.50 mg/L。其中京
欧2号与内蒙古大欧李中总多酚含量相差不大，山西
欧李中总多酚含量较为突出，值得深入研究和开发
利用。
图2 3种欧李的多酚含量
3 结论与讨论
试验以没食子酸为标准品，采用福林-酚比色法
测定欧李中多酚类物质的含量，经过试验分析，摒弃
原先略不稳定的显色时间（30 min），采用更为稳定
的显色时间（60 min），测得京欧2号、山西欧李及
内蒙大欧李中多酚的含量分别为7.33 mg/L，8.67 mg/
L，7.50 mg/L。多酚的检出限为0.007 mg/L，定量限为
0.023 mg/L。方法稳定可靠，可为欧李中多酚的测定
提供方法和依据。
欧李因其易存活、能挂果、可固沙、营养丰富等
特点而具有巨大的经济开发潜质。现阶段在欧李植株
栽培方面已积累了相当多的经验，在其相关产品的工
艺研究上也不乏成果，但目前对欧李的理论和应用研
究还处于初级阶段，欧李产品要量产，其营养成分的
分析与检测是十分必要的。
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