全 文 ：2010年 12月（上） 253
凹叶景天中甘草苷含量的测定
魏艳芬 吴士筠 殷 明 徐文广
（中南民族大学工商学院 湖北·武汉 430065）
摘 要 目的：建立HPLC法测定凹叶景天中甘草苷含
量。方法：以 Kromasil C18（250mm×4.6mm，5 m）为色
谱柱，以乙腈-0.5％醋酸溶液 (1: 4) 为流动相，流速为
0.8ml· min-1，检测波长为 276nm，采用外标法定量检
测。结果：甘草苷在 0.096~0.48 g范围内成呈良好的线
性关系,回归方程为Y=638941X-634.28（R2 =0.9996)，平
均回收率为 99.50％，RSD=2.20％（n=6）。结论：此方法
简便，高效，准确度较高，结果令人满意，为制定凹叶景
天的质量标准及指纹图谱的研究提供了依据。
关键词 凹叶景天 甘草苷 含量测定 高效液相色谱
中图分类号：O6 文献标识码：A
凹叶景天（Sedum emarg inatum），又名石板还阳、石马齿
苋,为景天科景天属植物。湖北省主要分布于鄂西州及五峰、
兴山、神农架、武穴、崇阳、大冶、咸宁、石首等县(市)，生于海拔
560~1400m阴湿石缝中。其中产于神农架的凹叶景天应用最
为广泛，为神农架“三十六还阳”民间草药之一，当地称之为“石
板还阳”、“石雀还阳”。凹叶景天以全草入药，有清热解毒、止
血、利湿之功效。用于吐血、衄血、肝炎、血崩、白带、跌打损伤、
痈疥等证。①浙江民间用来治疗肝炎，疗效较好，②在我国民间
及多个少数民族地区以其作药用。
凹叶景天属植物中含有黄酮类化合物，③甘草苷是其中
主要的黄酮类成分之一，药效显著，具有抗溃疡，抗艾滋病毒
等作用。④目前国内测定甘草苷的方法有比色法，⑤紫外分光
光度计法，⑥薄层扫描法，⑦RP-HPLC 法，⑧HPLC⑨⑩法前三种
方法繁琐复杂耗时，本实验方法具有快速、准确、简便、重现
性较好的优点。景天属植物在药用价值方面都有重要研究
的价值，然而凹叶景天有效成分甘草苷含量测定的报道在我
国鲜见。本实验拟采用高效液相色谱法测定凹叶景天有效
成分甘草苷含量，为制定凹叶景天的质量标准及指纹图谱的
研究提供依据。
1仪器、试剂与材料
1.1仪器与试剂
山东鲁南瑞虹化工仪器有限公司LC-1000型高效液相色
谱仪 (LC-1000型紫外检测器、N-2000色谱数据工作站、自动
进样器、柱温箱、Kromasil C18柱)，甘草苷对照品由成都曼斯
特生物科技有限公司提供，乙腈为色谱纯,其它试剂均为分析
纯，水为超纯水。
1.2材料
凹叶景天产地为武昌蛇山，经中南民族大学药学学院万
定荣老师鉴定并提供。
2实验方法与结果
2.1色谱分析条件
采用 Kromasil C18柱，（250mm×4.6mm，5 m），乙腈-0.5%
冰醋酸（1：4）为流动相，流速: 0.8ml/min，检测波长 276nm，柱
温：室温，进样量:10 l 。在上述条件下，对照品甘草苷达到基
线分离，且其它组分色谱峰无干扰(见图 1)。
2.2标准曲线的绘制
（1）对照品溶液的配制。精密称取甘草苷对照品适量，加
入甲醇充分溶解后，稀释至刻度，制成 240 g/ml的对照品溶
液，于冰箱中保存，备用。
（2）检测波长的选择。取上述对照品储备液，以分析纯甲
醇为参比溶液，于紫外分光光度计上 200—400nm范围内测定其
紫外吸收曲线，结果表明：甘草苷在 276nm 处有一较大吸收峰，
故选 276nm为测定波长。
（3）线性关系考察。准确吸取经稀释后的 48 g/ml甘草苷
对照品溶液 2 l、4 l、6 l、8 l、10 l分别进样，记录其峰面积，
并以峰面积与甘草苷进样量进行回归，得回归方程：y = 638941x
- 634.28,R2 = 0.9996。结果表明，甘草苷进样量在 0.096~0.48 g
范围内呈良好的线性关系。
2.3供试品溶液的制备及测定
准确称取过 50目筛的凹叶景天样品粉末 1.00g，置 50ml
的锥形瓶中，加入 70%乙醇 10ml，于超声波清洗器中超声提
取 30min，过滤，滤液于水浴锅中加热挥干乙醇，然后用甲醇溶
解，定容至 10ml，备用。
取供试品溶液 10 l 注入液相色谱仪，结果见图 2。与图
1比较，出峰时间一致，表明该峰为样品中甘草苷。
图 1 甘草苷对照品色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of chemical reference sub-
stance
图 2 凹叶景天样品色谱图
Fig.2 HPLC chromatograms of sample
2.4精密度实验
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DOI:10.16400/j.cnki.kjdks.2010.12.005
2010年 12月（上）254
取 240 g/ml的对照品溶液 6 l，按“2.2”项色谱条件，重复
进样 5次，以峰面积计算，其 RSD为 1.22%，说明仪器操作过
程中精密度良好。
2.5重复性实验
精密称取样品 5份，按“2.3”项制备供试品溶液，按拟定色
谱条件进行测定，并用面积外标法计算，结果甘草苷的平均含
量为 0.2431mg/g（n=5)，RSD为 1.57%。
2.6稳定性实验
取同一浓度的供试品溶液,分别于 2、4、6、8、10、12、24h进
样,以峰面积计算RSD为 1.56%,说明样品溶液在 24h内稳定。
2.7回收率实验
取样品约 1.00g，精密称定，共 6份，置锥形瓶中，分别精
密加入 240 g/ml对照品溶液 1ml，挥去溶剂，按“供试品溶液
制备”项下操作，稀释 1倍后吸取溶液 10 l进样检测，计算平
均回收率和 RSD，结果见表 1。
表 1 回收率测定结果（n=6）
样品含量
/mg.g-1
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
2.2099.50101.54
100.33
98.17
97.04
102.29
97.62
0.4868
0.4842
0.4788
0.4760
0.4890
0.4772
0.2400.2431
0.2434
0.2432
0.2431
0.2435
0.2429
2.8样品含量测定
按上述方法制备提取时间不同的样品溶液，在上述色谱
条件下各进样 10 l，测定了样品中甘草苷的含量，结果见表 2。
表 2 样品含量测定
提取时间/min 峰面积/ V· s 甘草苷质量/mg 甘草苷含量/mg.g-1
0.0655
0.0741
0.2573
0.1156
0.1365
0.0656
0.0741
0.2613
0.1158
0.1366
10
20
30
40
50
41289.098
46711.934
166333.328
73381.906
86657.242
由表 2可见，超声提取 30min，甘草苷含量最高。
3讨论
3.1流动相的选择
比较了以乙腈-0.5%醋酸（1：4）和甲醇-0.3%醋酸（1：2）为
流动相，进行液相色谱测定，最终以乙腈-0.5%醋酸（1：4）为流
动相时，系统对待测组分的保留时间较适宜且分离效果较好。
3.2样品的提取
（1）甘草苷可分别溶于乙醇、甲醇和水，但因为溶剂极性
的不同，它在其中的溶解度也不同，我们选择比较了数种溶剂
即甲醇、无水乙醇、95％乙醇、70％乙醇、水进行了超声提取实
验，结果表明用 70%乙醇提取效率最好，所以选用 70％乙醇作
为提取溶剂。
（2）比较了不同提取时间（10min，20min，30min，40min，
50min）对提取效率的影响，实验结果表明超声提取 30min的
效果最好。
（3）比较了称取 1g样品，采用不同体积的溶剂（5，10，
15ml）对提取效率的影响，结果表明溶剂体积为 10ml时，提取
效果最好。
凹叶景天中除了含有甘草苷成分外 ,还含有其它成分,本
研究分别考察了以上几种不同提取方法得到甘草苷较为完全，
其它成分干扰较小。
3.3结论
本文采用高效液相色谱法测定凹叶景天中甘草苷含量的
方法，可以较好地反映凹叶景天中甘草苷成分的含量，结果准
确、重复性良好，对于凹叶景天的质量标准及指纹图谱研究有
一定的应用意义。
注释
① 乔剑峰,胡伟,李祖光,胡宝祥,王瑾.凹叶景天的生理活性成分研究[J].浙江
科技学院学报,2003.15(11):26-28.
② 程艳芹, 梁东升, 詹亚华. 凹叶景天组织结构特征研究 [J]. 时珍国医国药,
2000.11(4):314.
③ 苏志恒,华会明.垂盆草化学成分和药理作用的研究进展[J].中药研究与信
息,2005.7(8):19-20.
④ 付玉杰,祖元刚,赵春建,李春英.RP-HPLC法测定甘草中甘草苷和异甘草苷
的含量[J].中草药,2004.35(5): 576-577.
⑤ 邓立育,姚德海,李铁柱等.薄层比色法测定甘草苷中甘草酸含量的研究[J].
化学工程师,2001(1):35-36.
⑥ 韩博,陈文,翟科峰,杨春梅,郑丽丽.甘草苷做对照品测定乌拉尔甘草中总黄
酮的量[J].石河子大学学报（自然科学版）,2006.24(4):472-474.
⑦ 张继,杨永利,王莱.双波长薄层扫描法测定乌拉尔甘草中甘草酸的含量[J].
西北师范大学学报,1998.34(11):63-65.
⑧ 张萍,马银海,郭亚东,马涛,熊春媚,杨玉婷.RP-HPLC法测定果脯中甘草苷
和甘草酸的含量[J].食品科学,2007.28(5):284-286.
⑨ 犹卫,王敏,马天俊.HPLC法测定复方甘草合剂中甘草苷的含量[J].资源开
发与市场, 2005.21(6):491-492,506.
⑩ 伍蔚平,阎宏涛,孙文基.HPLC法测定甘草中甘草苷的含量[J].药物分析杂
志,2004.24(4):425-427.
（上接第 249页）阔的空间感。正是因为作者捕捉了适当的瞬
间景象，又巧妙地发挥了线条的表现功能，所以仅用十个字就
勾画了一幅壮美的边塞图景。将线条的形式美引进诗歌确乎
前无古人，后嗣者也是不多的。王维诗中，我们还可以看到不
少具有类似的特点的诗句，如：“青山横苍林，赤日团平陆”（《冬
日游览》）、“雾中远树力州出，天际澄江巴字回”（《送崔王五太
守》）。有的直接使用了表示线条的字眼，有的没有使用，都能
使读者联想到多种多样的线条形式，从而在自己的头脑中构
成生动的画面。
4结束语
从以上论述不难看出，王维将绘画艺术的多种表现形式
引进了诗歌领域，他的作品具有色彩美、构图美、线条美、堪称
“美的文字”。他所采用的形式和所要表达的内容达到了高度
完美的结合。
参考文献
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[2] 张国荣.唐诗三百首译解[M].北京:中国文联出版公司.
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[4] 李泽厚.美的历程[M].天津:天津社会科学院出版社,2001.
[5] 刘士林.中国诗性文化[M].江苏:江苏出版社,1999.
[6] 陈传席.六朝绘画美学[M].北京:人民美术出版社,2000.
[7] 章利国.中国绘画与中国文化[J].杭州:中国美术学院,1996.
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