全 文 ：质溶解度增大 , 提取所得浸膏收率以及浸膏中 SSa和 SSd的含量
增大;从另一方面考虑 ,随着萃取压力的升高 ,萃取所得浸膏收率
和浸膏中 SSa的含量变化不大 ,因此实际生产中可以根据实际情
况选择萃取压力。
　　图 4　萃取温度对浸膏收率　　　　　　　图 5　萃取压力对浸膏收率　　　
　　和浸膏中 SSa/SSd含量的影响　　　　和浸膏中 SSa/SSd含量的影响　
3.2　SC-CO2与水提醇沉法的比较 将 SC-CO2萃取柴胡皂苷
的实验结果与水提醇沉法提取柴胡皂苷的实验结果的比较见表
1。
表 1　SC-CO2 萃取法与水提醇沉法的比较
萃取方法 浸膏收率(%)
SSa含量 /
(mg/g浸膏)
SSd含量 /
(mg/g浸膏)
WEEP 1.90 7.12 0.00
SC-CO2 11.87 15.44 14.68
4　结论
以乙醇 -水溶液做共溶剂 ,利用 SC-CO2萃取柴胡皂苷 ,可
以在萃取 SSa的同时萃取 SSd, 从而有效地避免传统水提醇沉法
造成的 SSd的热解。利用 SC-CO2萃取所得浸膏收率约为水提
醇沉提取所得浸膏的 6倍 , 浸膏中SSa含量约是水提醇沉工艺
提取所得浸膏中 SSa含量的 2倍。
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收稿日期:2009-10-02;　修订日期:2010-06-24
作者简介:崔英杰(1977-),女(汉族),山东泰安人 ,现任泰山医学院讲师 ,
硕士学位 ,主要从事毛细管电泳相关研究工作.
中药材祈州漏芦几种有效成分的
高效毛细管电泳法测定
崔英杰 , 李玉琴 ,于学美 ,冯　蕾 ,张　颖 ,赵晓民
(泰山医学院 ,山东 泰安　271000)
摘要:目的 建立一种高效毛细管区带电泳快速分离和测定祈州漏芦中的有效成分。方法 pH 8.0, 30mmol· L-1磷酸 -
硼砂缓冲液;毛细管柱 75 μm(i.d)×50.2 cm, 有效长度 40 cm, 压力进样(3.45 kPa)3 s, 25 kV恒压分离;214 nm检测 ,
柱温 25℃。结果 6 min内将祈州漏芦样品中的芦丁 、槲皮素 、甘草苷完全基线分离 , 线性范围 10 ～ 500.0 μg· ml-1。结
论 该法具有良好的精密度 、回收率及线性关系 ,可以用来快速定量测定祈州漏芦中 3种有效成分的含量 。
关键词:毛细管电泳;　祈州漏芦;　芦丁;　槲皮素;　甘草苷
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.09.129
中图分类号:R284.2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)09-2399-02
　　祁州漏芦(RaidxRhapontici)为菊科植物 Rhaponticumuniflo-
rum(L.)DC.的干燥根 , 始载于 《神农本草经》 , 被列为上品 , 具
有清热解毒 、消痈排脓 、通乳的功效。研究表明漏芦提取物对 D
-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用 [ 1];其甾酮总提取物有改
善小鼠学习记忆障碍的作用 [ 2] 。
祈州漏芦根中主要成分为鞣质 、甾酮类化合物。对其化学成
分的分离测定报道有高效液相法 [ 3 , 4]和紫外分光光度计法 [ 5] , 而
且测定成分少。本文首次采用高效毛细管电泳(HPCE)法同时
分离祈州漏芦中的芦丁 、槲皮素 、甘草苷 3种化学成分。现报道
如下。
1　仪器与试药
毛细管电泳仪, 美国 BeckmanP/ACEMDQ型 ,二极管阵列检
测器;自动控制软件 32 KaratSoftware(Version5.0);Orion868型
pH测试仪 ,美国 Orion公司;Milli-QSYSTHESIS型超纯水系统,
法国 Millipore公司;AX-205型 0.01 mg/220 g电子分析天平 , 瑞
士梅特勒公司;氢氧化钠(山东单县有机化工厂)、磷酸(山东兖州
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.9 时珍国医国药 2010年第 21卷第 9期
化工厂)、硼砂(天津市博迪化工有限公司)、乙醇(天津市盛奥化
工有限公司)为分析纯;对照品芦丁(批号 10270-080128)和甘草
苷(批号 10162-080301)均购自江西本草天工科技有限公司;槲皮
素(批号 100081-200406)购于中国药品生物制品检定所。祈州漏
芦产地河北 , 购于山东鄄城志远中药饮片有限公司 (批号
081108), 经泰山医学院时元林教授鉴定为祈州漏芦干燥根。
2　方法与结果
2.1　电泳条件 以 30 mmol· L-1的硼砂缓冲液(pH8.0)为介质 ,
未涂层石英毛细管柱(75 μm×50.2cm,有效长度为 40 cm,美国
BeckmanCoulter)为分离通道 , 柱温 25℃;压力进样(3.45 kPa)3
s;25kV恒压分离;214nm检测;正极进样 , 负极检测。
为了使毛细管内表面保持一致 , 每次实验前 , 分别用蒸馏水
(5 min)、0.1 mol/LNaOH(5 min)、蒸馏水(3 min)、缓冲溶液
(10min)依次冲洗毛细管。 两次运行之间 , 依次用蒸馏水(2
min)、0.1 mol/LNaOH(3 min)、蒸馏水(2 min)、缓冲溶液(5
min)冲洗毛细管 , 以提高迁移时间 、峰面积和峰高的重现性。进
样前所有溶液需经 0.45 μm微孔滤膜过滤 , 并超声脱气。实验
结束后将毛细管用超纯水冲洗 10 min储存 , 备用。
2.2　对照品溶液的配制 分别精密称取芦丁 、槲皮素 、甘草苷对
照品 , 用 50%乙醇溶解分别配制成 1 mg/ml对照品储备液 , 密闭
置于 4℃下避光保存 , 实验时用 50%乙醇稀释至所需浓度。
2.3　祈州漏芦药材溶液的制备 [ 5] 精密称取祈州漏芦根粗粉约
4.0 g,置索氏提取器中 , 70%乙醇提取 3次。第 1次 , 70%乙醇
40 ml,提取 1.5 h;第 2次 , 70%乙醇 30 ml提取 1.0 h;第 3次 ,
70%乙醇 20 ml提取 1.0 h。合并 3次提取液浓缩后 5 000 r/min
离心 5 min, 最终定容至 10 ml。
2.4　标准曲线的绘制 由对照品储备液配制成不同质量浓度
(10.0, 25.0, 50.0, 100.0, 200.0, 500 μg· ml-1)的系列混合液 ,
进行电泳分析。分别重复 3次 , 以峰面积平均值(Y)对质量浓度
(X, μg· ml-1)进行回归分析 ,得到芦丁 、槲皮素 、甘草苷 3种成
分的线性回归方程分别为:
Y= 1 514.57 +247.21X, r=0.998 8;Y= 3 748.03 +
731.42X, r=0.998 5;Y=4 598.26+199.97X, r=0.999 1。
结果表明 3种分析物在 10 ～ 500.0 μg· ml-1的浓度范围内
呈良好的线性关系;检测限分别为 1.86, 0.64, 1.80 μg· ml-1。
2.5　精密度实验 精密吸取对照品溶液 , 重复进样 6次 , 测定峰
面积。当对照品浓度分别为 5, 50, 100 μg· ml-1时 , 芦丁的 RSD
小于 1.86%;槲皮素的 RSD小于 2.35%;甘草苷的 RSD小于
2.87。表明仪器精密度良好。
2.6　加样回收率实验 取已知含量的祈州漏芦药材样品溶液 ,按
高 、中 、低 3个量度准确加入标准品溶液适量 , 按样品测定法测
定 , 计算回收率。结果见表 1。
表 1　加样回收率实验结果
分析物含量
/μg· ml-1
加标品量
/μg· ml-1
测得量
/μg· ml-1
平均回收率
(%)
RSD
(%)
芦丁(189.8) 10 200.30 102.33 2.99
50 239.90 100.13 0.51
200 389.67 99.98 0.10
槲皮素(30.4) 10 40.33 99.33 1.54
50 79.97 99.13 0.31
200 229.10 99.37 0.31
甘草苷(26.5) 10 36.03 95.33 2.18
50 75.83 98.67 1.04
200 225.23 99.37 0.08
　　n=3
2.7　实际样品测定结果 在相同测定条件下 , 测定了祈州漏芦中
芦丁 、槲皮素 、甘草苷 3种成分的含量。结果见表 2。标准品电
泳图谱见图 1, 3种分析物的质量浓度均为 200μg· ml-1;漏芦样
品电泳图谱见图 2。通过峰纯度鉴定 , 3种有效成分的测定均不
受其它复杂成分的干扰。
表 2　样品测定结果
分析物 样品含量 /㎎· g-1 RSD(%)
芦丁 0.475 2.58
槲皮素 0.076 1.97
甘草苷 0.066 2.46
　　n=3
1.甘草苷(liquiritin)　2.芦丁(rutin)　3.槲皮素(quercetin)
图 1　标准品电泳图谱
1.甘草苷(liquiritin)　2.芦丁(rutin)　3.槲皮素(quercetin)
图 2　漏芦样品电泳图谱
3　结论
本实验在 6 min内芦丁 、槲皮素 、甘草苷 3种成分就可以完
全基线分离;回收率在 95% ～ 103%之间 , RSD小于 3% 。说明
采用毛细管电泳法分离测定祈州漏芦中的有效成分 ,快速准确有
效 , 可以为祈州漏芦的质量控制提供理论依据。
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