全 文 :佛甲草化学药理及鉴定分析研究进展
乔 舒1,梅 青1,王璐瑶1,3,鲁蓝青1,赵喻丹1,郭泽森1,万定荣1,2*
(1.中南民族大学 药学院,湖北 武汉 430074;
2.武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,湖北 武汉 430074;
3.北京师范大学 -香港浸会大学联合国际学院 食品科学系,广东 珠海 519000)
摘 要:佛甲草(景天科植物佛甲草 Sedum lineare Thunb.的干燥全草)是一种广泛应用的中草药及多民
族用药。近几年来对佛甲草药用及应用基础研究方面的报道越来越多,说明对该植物药进行更深入研
究及开发应用大有前景。从化学成分、药理作用、鉴定分析等方面对佛甲草的研究进展进行综述,为其
进一步研究及开发应用提供参考。
关键词:佛甲草;化学成分;药理作用;药物鉴定;药物分析
中图分类号:R284. 2;R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2014)01-0044-03
收稿日期:2013-09-13
基金项目:国家科技支撑计划项目(2012BAI27B06);教育部大学生创新项目(302 - GCX12022)
作者简介:乔舒(1991—),女,中南民族大学在读学生,研究方向为化学生物学与药用植物资源。
通讯作者:万定荣(1958 -),男,博士,中南民族大学药学院教授,研究方向为中药民族药资源品质和应用基础。E-mail:wan-
dr666@ 163. com
Research Progress on Chemical Components,Pharmacological Actions and
Identification Analysis of Sedum lineare Thunb.
Qiao Shu1,Mei Qing1,Wang Luyao1,3,Lu Lanqing1,Zhao Yudan1,Guo Zesen1,Wan Dingrong1,2*
(1. Pharmacy college,South-Central University for Nationalities,Wuhan 430074,China;
2. Hubei provincial key laboratory for protection and application of special plants in
Wuling Area of China,Wuhan 430074,China;
3. Food Science college,BNU-HKBU United International College,Zhuhai 519000,China)
Abstract:Herba Sedi Linearis,originated from the whole herb of Sedum lineare Thunb. (Crassulaceae) ,is a kind of commonly used
herbal medicine and used as an ethnic drug in many minority areas of China. In recent years,there are more and more reports on the me-
dicinal research and application basis of Herba Sedi Linearis,which showed its nice medicinal potential. This paper summarized the re-
search progress of Sedum lineare Thunb. on chemical components,pharmacological action and identification analysis,and provided related
references for its further research,development and application.
Key Words:Sedum lineare Thunb.;Chemical Components;Pharmacological Action;Identification Analysis
佛甲草 Sedum lineare Thunb.为景天科(Crassulaceae)植
物,其新鲜或干燥全草是一种较常用的中药或民族民间药,
曾为《中国药典》(1977年版)收载[1]。本品味甘性寒,具有
清热、解毒、消肿等功效,主要用于治疗黄疸、迁延性肝炎、
咽喉肿痛、痢疾等病症[2]。湖北土家族常用于治疗多种癌
症。近几年,对佛甲草的药理化学、鉴定及质量分析等方面
进行研究,取得了丰硕的研究成果。现对佛甲草的化学成
分、药理作用、药材鉴定和质量分析等方面的研究情况作一
概述,以便更好地研究和开发利用这一重要的药用植物资
源。
1 化学成分
研究发现景天属(Sedum)的一些植物中含黄酮类成
分[3]。近年来,对景天属佛甲草的化学成分研究表明,其主
要成分也有黄酮类化合物,另外还含甾类及萜类等成分。
季尚晓等[4]从佛甲草的乙醇提取物中分出 5 个结晶,从其
石油醚提取物中分出 2 个结晶。经理化常数、光谱分析和
化学反应研究,证明它们是柯伊利素(chrysoeriol)、红车轴
草异黄酮(pratensein)、香碗豆醇-3-甲醚-7-O-β-D-葡萄糖
苷(3-O-methylorobol-7-O-β-D-glucoslde)、香碗豆苷(orobol-
side)、三十三烷(tritria contane)和 δ-谷甾醇(δ-Sitosterol) ,
—44—
另一种黄色针状结晶结构待鉴定。徐燃等[5]通过 HPLC 法
对佛甲草甲醇提取物中黄酮苷类成分的水解产物槲皮素检
出含量较高的槲皮素,而未经水解的甲醇提取物中几乎检
不出槲皮素,说明佛甲草含有较高含量的以槲皮素为苷元
的黄酮苷类成分。牛晓峰等[6]通过分离柱色谱、薄层色谱
及相关分离技术从佛甲草中分离出 6 种甾醇成分,分别为
豆甾-7-烯-3β-醇(stigmast-7-en-3β-ol)、豆甾-3β,5α,6β-三
醇(stigmast-3β,5α,6β-triol)、豆甾-5-烯-3β-醇-7-酮(stig-
mast-5-en-3β-ol-7-one)、豆甾-5-烯-3β,7α-二醇(stigmast-5-
en-3β,7α-diol)、豆甾-5-烯-3β,7β-二醇(stigmast-5-en-3β,7β
-diol)、β-谷甾醇(β-sitosterol)。另外,牛晓峰等[7]在佛甲草
的石油醚提取物中分离出化合物 13(18)-齐墩果烯-3,12,
19-三酮(olean-13(18)-ene-3,12,19-trione)及三萜类化合物
δ-白檀酮(δ-amyrone)和 δ-香树脂醇乙酸酯(δ-amyrine ace-
tate)。近年来,杨新洲、万定荣等从佛甲草的醇提取物中分
离得到多个黄酮类单体成分,包括利用 HPLC 技术,已分析
鉴定了异槲皮苷(isoquercitrin)、金丝桃苷(hyperoside)、甘
草苷(liquiritin)、黄芪苷及槲皮素(quercetin)、山柰素
(kaempferide)木犀草素(luteolin)、异鼠李素(isorhamnetin)
等黄酮类化合物。
2 药理作用
2. 1 抗炎作用
廖跃华等[8]采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠
腹腔毛细血管通透性增加、植入棉球致小鼠肉芽组织增生
等炎症模型,观察佛甲草的抗炎作用,测定小鼠胸腺、脾脏
指数,观察佛甲草对免疫器官重量的影响。结果表明佛甲
草可明显抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛
细血管通透性增加,能显著抑制小鼠肉芽组织增生,降低胸
腺指数,升高脾指数。说明佛甲草有明显的抗炎作用,其抗
炎机制可能与调节免疫功能有关。
2. 2 护肝作用
实验研究表明佛甲草具有显著的护肝作用。周青等[9]
发现佛甲草乙醇提取液能有效降低四氯化碳(CCl4)、α-萘
异硫氰酸酯(ANIT)所致急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶
(ALT)和总胆红素(TBil)含量,明显减轻肝脏病理变化,使
受损的肝细胞得以恢复,肝脏病理组织学检查表明佛甲草
能明显减轻肝细胞的变性和坏死。佛甲草乙醇提取液还能
显著降低 CCl4 所致急性肝损伤小鼠血清、肝组织丙二醛
(MDA)含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性和 NO-3 /
NO-2 水平,表明佛甲草对小鼠 CCl4 肝损伤的保护作用可能
与抗脂质过氧化、改善肝脏微循环及恢复肝脏功能的作用
有关。
2. 3 抗肿瘤作用
大量研究表明,黄酮类化合物具有广泛、肯定的抗肿瘤
活性。陈雨洁等[10]以人的肿瘤细胞为筛选模型,以体外肿
瘤活性为指标,研究了佛甲草抗肿瘤活性及有效部位。发
现佛甲草醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇萃取部位及佛甲草
总黄酮对体外培养的肝癌细胞 HepG2、食管癌细胞 EC109
及结肠癌细胞 SW480 均有显著的抑制作用。随着提取物
浓度的增加,其抑制率也增高,在测定浓度范围内呈现良好
的剂量依赖性抑制作用。佛甲草乙酸乙酯、正丁醇提取物
对肝癌细胞 HepG2 和食管癌细胞 EC109 的细胞毒作用较
强,而对结肠癌细胞 SW480 的细胞毒作用稍弱。佛甲草总
黄酮提取物对上述 3 种肿瘤细胞的抑制作用最强,乙酸乙
酯部位的抑制作用在大多数情况下强于正丁醇部位。就食
管癌细胞 EC109 而言,佛甲草各提取部位及总黄酮提取物
对该肿瘤细胞的抑制率均高于同属植物垂盆草、凹叶景天
各相应部位,即佛甲草的活性最强。
王璐瑶等[11]采用 MTT法对佛甲草和垂盆草的总黄酮、
佛甲草中 7种黄酮类单体化合物(黄芪苷、木犀草素、槲皮
素、化合物 2、化合物 4、化合物 8、化合物 11)以及各单体化
合物按其在佛甲草中大致比例的混合物进行了体外抗肿瘤
活性研究,通过琼脂糖凝胶电泳法检测了佛甲草中黄酮类
单体化合物槲皮素及化合物 4对 Topo I活性的抑制程度并
探讨了其作用机理,还进行了简单的分子对接实验,从分子
层面进一步验证了槲皮素的作用机制。MTT法体外抗肿瘤
活性研究结果显示,佛甲草中 7 种单体化合物(群)对体外
培养的人肺癌细胞 A549、人肝癌细胞 HepG2、人食管癌细
胞 EC109 及人口腔癌细胞 Accm 等 4 种肿瘤细胞以及正常
细胞均表现出不同程度的抑制作用。其中佛甲草中单体化
合物 2 对人肝癌细胞 HepG2 有非常强的体外抑制活性,且
对正常细胞 vero 的毒性很低;槲皮素对人食管癌细胞
EC109及人肺癌细胞 A549的抑制活性均很好;单体化合物
11 对人肺癌细胞 A549也有较强的抑制作用;化合物 4 对各
肿瘤细胞的抑制率虽不是最高的,但均有抑制活性。而佛
甲草总黄酮对各肿瘤细胞均表现出较强的抑制活性,其抑
制率普遍高于其他单体化合物。故初步认为佛甲草的抗肿
瘤活性为多种成分协同作用的结果。由于佛甲草中 7 种单
体化合物按其在植物药中大致比例混合的混合物对各肿瘤
细胞的抑制活性均不是特别强(明显弱于总黄酮) ,推断该
协同作用不是多种成分的简单组合而产生的。王璐瑶等抗
肿瘤作用机理的相关研究结果显示,佛甲草中黄酮类化合
物槲皮素及化合物 4 抑制 Topo I 的效果较好,两者均为拓
扑异构酶阻遏剂,但作用机理有所不同。槲皮素是通过先
与 Topo I结合,阻止了 Topo I 与底物 DNA 的正常结合,从
而发挥 Topo I 抑制作用;而化合物 4 可能既可与 Topo I 结
合又可与 DNA 结合来发挥抑制拓扑异构酶 I 的作用。此
外,采用简单的分子对接实验研究表明,槲皮素是通过先与
Topo I结合从而发挥 Topo I 抑制作用,并初步推测出了槲
皮素与 Topo I活性位点的结合方式。
2. 4 抗脂质过氧化、抗疲劳
许庆林等[12]通过检测小鼠血清、肝组织中丙二醛
(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并采用耐寒、耐
热及游泳试验来检测小鼠的抗应激作用。结果发现佛甲草
乙醇提取液可显著降低小鼠血清、肝组织 MDA 含量,升高
SOD活性,增强小鼠耐寒、耐热机能,延长小鼠游泳时间。表
明佛甲草乙醇提取液具有抗脂质过氧化和抗衰老作用。周
青等[13]观察了佛甲草乙醇提取液对小鼠综合体能及小鼠血
清、肝组织中 MDA、SOD 的影响,从而探讨该提取液的抗疲
—54—
劳作用,结果发现佛甲草组小鼠的综合体能强于空白对照组
的小鼠,且佛甲草组小鼠血清、肝组织中 MDA含量低于空白
对照组,SOD的活性高于空白对照组。表明佛甲草提取液具
有增强机体活力和适应能力及对抗机体疲劳的作用。
2. 5 对小鼠缺氧耐受性的影响
周青等采用对抗特异性心肌缺氧法、常压耐缺氧法、对
抗亚硝酸钠法及对抗脑缺血缺氧法来研究佛甲草的药理作
用,结果发现佛甲草提取液可有效延长小鼠在特异性心肌
缺氧、常压缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧及脑缺血缺氧条件下
的存活时间,显著提高缺氧小鼠的耐受性[14-15]。
3 鉴定与质量分析
3. 1 药材鉴别
在药材鉴定方面,《中国药典》(1977 年版)收载的佛甲
草仅有性状描述。此后,赵华英等[16]对佛甲草和来源于同
属的垂盆草的性状、显微结构进行了比较研究,并作了蛋白
电泳分析。两种药材的性状区别主要在于叶形不同;显微
特征的主要区别在于茎皮层中色素块的多少和维管束数目
的不同。蛋白电泳图谱表明,两种药材既有相同谱带,又有
显著差异。从谱带数量看,佛甲草和垂盆草 A 带和 B 带相
同,各为 3条和 5条,但 C带不同,佛甲草为 7 条,垂盆草为
8条;其次是 A带的宽度和分布不同,可作为鉴别特征。
近几年,万定荣等课题组成员对佛甲草及其同属近缘
植物药垂盆草、凹叶景天进行了系统的原植物形态、药材性
状、显微特征和红外光谱比较研究,以及景天属几个近缘种
的遗传多样性 RAPD分析研究。吴华杰等[17]采用 RAPD技
术研究发现佛甲草与垂盆草亲缘关系较近。万定荣等[18]
通过显微鉴定法研究两者茎的横切面及粉末的显微特征,
采用薄层色谱比较两者的异同。结果表明佛甲草与垂盆草
茎横切面组织特征十分相似,但在导管数目、髓部形状及含
紫红色物质的细胞数目等有显著差异。对 8 月份样品而
言,前者导管数多达 75 ~ 150 个,髓部呈“Y”形;后者一般
仅有 35 ~ 58 个,髓部多呈三角形。此外,不同采集期的样
品在含紫红色物质的细胞数目等显微特征上存在明显差
异。两者的薄层色谱在斑点的数目、位置、颜色上也不同。
王璐瑶、陈雨洁等[19]在景天属几种植物药叶表皮特征的比
较研究中发现,佛甲草叶与垂盆草叶片表皮显微特征较为
接近,主要区别是前者的上表皮叶缘细胞呈狭长方形、狭长
条形或长梭形,壁较直,而后者呈长椭圆形至长矩圆形,外
壁较平或略弯曲,内壁波状弯曲。胡婧等[20]对佛甲草及几
种同属近缘植物药进行薄层色谱鉴定。结果佛甲草和垂盆
草色谱中绝大部分色谱斑点一一对应,共有 9 个共性色谱
斑点。但它们也有各自的特征性斑点:佛甲草在 Rf 值约为
0. 24 和 0. 30 处有 2个荧光斑点,分别为淡红色、淡墨绿色;
垂盆草在 Rf值约为 0. 30 处则有 1个红色荧光斑点。徐燃、
万定荣等[21]研究了垂盆草与佛甲草的红外光谱特征,发现
二者的红外光谱图十分相近,在特征区(4 000cm-1 ~ 1
250cm-1)的所有峰,包括峰数、峰位、峰强度几乎一致,在指
纹区也有(830 ± 6)cm-1、(538 ± 18)cm-1等共有吸收峰,显示
了二者十分密切的亲缘关系。但二者仍有稳定的差异,如
全部垂盆草样品在(1 261 ± 6)cm-1有较明显的弱吸收峰,佛
甲草一般无此肩峰;垂盆草在(1 070 ± 6)cm-1峰左侧一般无
肩峰,而佛甲草在与该峰位相近的(1 079 ± 5)cm-1峰左侧有
2个(个别样品为 1个)肩峰。
3. 2 质量分析
在质量分析方面,由于佛甲草中的黄酮类成分主要以
苷的形式存在。王璐瑶等对佛甲草产自湖北黄梅不同采收
期的样品进行了槲皮素、山柰素含量的比较研究,结果表明
不同采收期佛甲草样品中水解产物的槲皮素、山柰素含量
及含量比差异较大。5 月初采集的佛甲草中槲皮素含量为
0. 559 5mg·g-1,山柰素含量为 0. 807 7mg·g-1;10月上旬采
收的佛甲草样品中槲皮素含量为 0. 154 7mg·g-1,山柰素含
量为 0. 054 2mg·g-1。即 5 月初采收的佛甲草中两种成分
的含量均高于 10月份样品。就两种成分含量的比较而言,
佛甲草 5 月初样品中的槲皮素含量较山柰素低,10 月份样
品含量较山柰素高。陈雨洁等[22]通过对景天属 3 种植物
药进行总黄酮含量测定,发现佛甲草总黄酮含量与采收期
存在显著相关性,佛甲草在 4月底采集的总黄酮含量最高,
其总黄酮含量为 1. 88%,6 月份采集的样品中总黄酮含量
为 0. 91%,10月份采集的总黄酮含量为 1. 44%。即 6 月份
时含量最低,入秋后又略有回升。如果以总黄酮成分作为
重要的活性物质来考虑,佛甲草以 4 月底至 5 月初盛花期
采收为宜。
4 结语
佛甲草为我国多民族用药及常用中草药,广泛用于急
性肝炎、咽喉、痈肿、肠炎痢疾、烧伤烫伤、跌打损伤、多种出
血、疔疮及多种癌症的治疗[23]。研究证实,佛甲草具有抗
炎、护肝、抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳等多种药理作用,其在医
疗及保健方面的价值巨大,有待进行深入研究与开发,特别
是在临床应用上有待于进一步研究与推广。
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—64—
中医药防治糖尿病认知功能障碍研究进展
毛黎黎 高晓斐 岳仁宋*
(成都中医药大学附属医院,四川 成都 610072)
摘 要:整理、归纳、总结近年来的相关文献,阐述中医药在防治糖尿病认知功能障碍方面的临床和实
验研究进展情况。目前临床防治糖尿病认知功能障碍的方法主要有单味中药提取物的研究、辨证施
治、中成药、复方等。中医药防治糖尿病认知功能障碍有较好效果,不良反应小,研究前景广阔。
关键词:糖尿病认知功能障碍;消渴;呆病;研究进展
中图分类号:R587. 1 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2014)01-0047-02
收稿日期:2013-11-19
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81072775)
作者简介:毛黎黎,女,硕士,研究方向为中医药防治内分泌代谢疾病。
通讯作者:岳仁宋,男,成都中医药大学附属医院教授,博士生导师,研究方向为中医药防治内分泌代谢疾病。
糖尿病认知功能障碍属中医学“呆病”、“健忘”等范
畴。近年来报道显示,中医辨病与辨证结合组方用药能提
高其疗效。在辨证论治研究方面,多依据本病本虚标实、虚
实夹杂的特点,运用补虚泻实、标本兼顾、益气补血、活血化
瘀等法;单味中药提取物的研究多以人参、黄芪等为主;许
多中成药和复方研究也证实中医治疗糖尿病痴呆有一定疗
效。
1 单味中药提取物研究
1. 1 人参皂苷 Rbl /Rgl
陈晓春[1]研究表明,在细胞模型中,Rg1 抑制 GSK-3β、
JNK /p38MAPK、p25 /CDK5三条信号通路的活化,明显减轻
凝聚态 Aβ(25-35)诱导的皮层和(或)海马神经元 Tau 蛋白
的过度磷酸化,维持神经元微管结构的稳定性。大鼠海马背
侧注射 Aβ(25-35)或冈田酸(OA)诱导 Tau蛋白过度磷酸化
的 AD动物模型研究也表明,Rbl /Rgl可通过抑制 GSK-3β的
活性、增强 PP-2A的活性来减轻 Tau蛋白过度磷酸化。人参
皂苷 Rbl /Rgl能从源头上阻止、延缓糖尿病痴呆的相关神经
病理进程,且具有高效性、低毒性及稳定性的优点。
1. 2 黄芪多糖 APS
金莉等[2]发现黄芪多糖(APS)不仅有调节血糖的作
用,还能通过多种途径影响脑神经的代谢和调亡。糖尿病
大鼠在运用中药黄芪治疗之后,血糖下降,海马 NT-3 阳性
神经元数目增加,因此可知黄芪对糖尿病大鼠海马神经元
的退变有一定的防治作用,并且能抑制糖尿病大鼠下丘脑
显示神经元活性的早期反应基因 c-fos的表达
。
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(责任编辑:余 婷)
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