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佛甲草抗疲劳作用的动物实验



全 文 :佛甲草抗疲劳作用的动物实验
周 青 !,刘建新 ,周 俐 !
·中医康复研究·
赣南医学院,!机能实验室,药理教研室,江西省赣州市 #$!%%%
周 青,女,!&’# 年生,江西省赣州市人,汉族,!&&% 年江西中医学院毕
业(实验师,主要从事生化药理学的研究。
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中图分类号 891: 文献标识码 8; 文章编号 8!’%%:?$<=%%&#=%#
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为血栓素 f,它的形成调节血小板的变形、粘附、聚集
和颗粒的分泌h!,j,同时还参与炎症反应、血管收缩、细
胞损伤、免疫调控等一系列的生物学效应。
本实验结果表明,小鼠外周血单核细胞经大肠杆
菌内毒素刺激后能合成血栓素 f,大肠杆菌内毒素维
持在 !% 70 @ D 以下时,其刺激小鼠外周血单核细胞合
成血栓素 f 水平呈剂量依赖关系,即随大肠杆菌内
毒素浓度增加,血栓素 f 合成水平亦升高,大肠杆菌
内毒素为 !% 70 @ D 时,刺激血栓素 f 合成速率达峰
值,当大肠杆菌内毒素浓度超过 !% 70 @ D时,血栓素 f
合成水平不再升高,而呈下降趋势。$个浓度玉竹提取
物 ; (:%% 70 @ D,! %%% 70 @ D, %%% 70 @ D,$ %%% 70 @ D)
均能显著抑制血栓素 f的分泌(# i %5%!)。
玉竹为百合科植物玉竹的根茎( 含有生物硷,强
心甙 >为铃兰甙 、铃兰苦甙等?,多糖类,粘液质,维生
素 ; 等物质。自古以来,民间用玉竹作食疗就十分普
遍,这些药膳中有的用于外感风热而发热咳嗽、咽痛
口渴或呼吸系统疾病如慢性支气管炎、慢性肺病、肺
结核等炎症,有的用于冠心病、血管硬化、高血脂、高
血压等疾病。以前的研究表明它有强心、扩张血管、降
血糖、降血脂、和抗肿瘤等作用h#=’j。本实验所采用的玉
竹提取物 ; 是玉竹的干燥根茎经水醇法(#% 7D @ D 乙
醇)提取而得。结果提示玉竹用于治疗冠心病、高血压、
血管硬化以及一些炎症性疾病,可能是通过降低血栓
素 f 分泌的机制发挥作用。结果还表明随着玉竹提
取物 ; 药物浓度的增大,其抑制作用并未增强。这提
示在此实验剂量内,抑制血栓素 f 分泌的作用无差
别,即应用小剂量即可达到疗效。本文对玉竹提取物 ;
的抗炎、降压、降血脂等作用机制只是做了一个初步的
探讨,其确切机制,有待进一步研究。
B 参考文献
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与血小板功能关系的探讨hSj5中国危重病急救医学,!&&<,&($):!’=1
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成的关系hSj5中华医学杂志,!&&:,<:(1):$<’=1
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江苏新医学院 5中药大词典(上册)hPj5上海:上海科学技术出版社,!&1::
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周青,刘建新,周俐 +佛甲草抗疲劳作用的动物实验 I)J+中国临床康复,<==>,@ABCDE
@FG> IKKK+L70:M6+:#/J
摘要
目的J观察佛甲草提取液对小鼠综合体能及其小鼠血清、肝组织丙二醛、
超氧化物歧化酶的影响,从而探讨该提取液的抗疲劳作用。
方法:$实验于 *--(’-, . -( 在赣南医学院机能实验室完成。选用昆明
种小鼠 $-- 只,雌雄不拘,体质量(*-0*)P。%观察佛甲草提取液(由佛
甲草提取所得)对小鼠耐寒能力的影响:取雄性小鼠 *- 只3随机分成 *
组:空白对照组和佛甲草实验组,每组 $- 只。空白对照组腹腔注射生理
盐水 $- 6U . RP;佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液 ( P . RP。给药后 $ N,
将小鼠置于’*- \+ 低温冰箱中,记录小鼠存活时间。&观察佛甲草提取
液对小鼠耐热能力的影响:取雌性小鼠 *- 只,随机分为 * 组,每组 $-
只。空白对照组腹腔注射空白对照 $- 6U . RP;佛甲草组腹腔注射佛甲草
提取液 ( P . RP。给药后 $ N,将小鼠置于 (- ]恒温箱中,记录小鼠存活
时间。!观察佛甲草提取液对小鼠负重游泳时间的影响:取雄性小鼠 *-
只,随机分为 * 组:空白对照组和佛甲草组,每组 $- 只。空白对照组腹
腔注射空白对照 $- 6U . RP;佛甲草组腹腔注射佛甲草提取液 ( P . RP。给
药后 $ N,小鼠按体质量的 (^尾根铜丝负重,置 *( ]恒温水箱中,记录
小鼠从入水至沉入水中不再浮出水面为止所需时间,即为小鼠游泳时
间。#观察佛甲草提取液对小鼠血清、肝组织丙二醛含量和超氧化物歧
化酶活性的影响:将其余 ,- 只小鼠随机分为 , 组:空白对照对照组、维
生素 W 对照组,佛甲草低剂量组和佛甲草高剂量组,每组 $- 只。空白对
照组小鼠灌胃空白对照 $- 6U .(RP·G);维生素 W 对照组灌胃维生素 W
*1( P .(RP·G);佛甲草低剂量组:灌胃佛甲草提取液 ( P .(RP·G);佛甲草
高剂量组:灌胃佛甲草提取液 $- P .(RP·G)3连续 $, G。末次给药后 * N,将
各组小鼠断头取血3$ (-- E .6783离心 ( 6783取血清;取适量肝组织3用冰冷
空白对照在冰浴中制成 $-^组织匀浆3, ]35 (-- E . 6783 离心 $- 6783取
上清液。均采用硫代巴比妥酸比色法和黄嘌呤氧化酶法分别测定血清、
肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶的活性。’组间计量资料差异比
较采用双侧 5 检验。
结果:小鼠 $-- 只均进入结果分析。$耐寒存活时间:佛甲草组明显长
于空白对照组S((T15-0%1TT),(,T1,-0&1)5)6783 5=*1)T$) ,6 > -1-$?。%
耐热存活时间:佛甲草组明显长于空白对照组 S(5(1%-0%15T),(**1T-
0%15-)678,5=,1(-&,6 > -1-$?。&负重游泳时间:佛甲草组明显长于空
白对照组S(&,1$-0$(1,&),(,51%-0$51%*)678,5=,1%&& ),6 > -1-$?。!血
清、肝组织丙二醛含量:佛甲草提取液低剂量和高剂量组明显低于空白
对照组S血清:(T1,$0$1,()3 (&1%(0$15*),($-1-(0$1())6DH . U;肝组织:
(55,1$*0(T1,T),(5$(1$50((1%(),(,-&1T*0%-1*)) 86DH . P,5=*1,$351%)* 5,
*1&&, T,51(&$ ),6 > -1-(_-1-$?;与维生素 W 的作用效果基本一致。#
血清、肝组织超氧化物歧化酶活性:佛甲草提取液低剂量和高剂量组明
显高于空白对照组 S血清:(*T&1%50*5155),45--1T%0*%15(2,(*%*1(*
0*)1,&)R#Y . UV 肝组织:4&T51()0*&1-&2,4T$-15-05T1&*2,4&,$1-,0,(1)*2
R#Y . P,5=*1$$*3 51-%& *3 *1(*5 &3 51%,& *3 6 > -1-(_-1-$? ;与维生素 W
的作用效果基本一致。
结论:佛甲草提取液具有增强机体活力和适应能力及对抗机体疲劳的
作用。
主题词:疲劳;佛甲草 .药理学V 超氧化物歧化酶 .血液;丙二醛 .血液
) 引言
随着人们生活节奏的加快和工作压力的增加,疲
劳现象越来越普遍,疲劳感严重影响了人们的生活质
量和工作效率。因此,减轻和消除疲劳是近年来卫生
保健人员和科学工作者关注的热点。大量的人体和动
物实验证明,长时间大强度运动可使机体内产生大量
的自由基,脂质过氧化程度增强,从而导致运动性疲劳
的产生或诱发某些疾病S$?。在寒冷的条件下,体内的丙
二醛等过氧化物含量增加,机体抵御能力下降S*35?。佛甲
草(<;G96 H78;FE; ‘N98L)为景天科植物佛甲草的全
草,性味甘寒,具有清热、解毒、消肿等功效 S,?。作者曾
报道佛甲草具有抗氧自由基的作用 S(?。本文通过对小
鼠力竭性运动能力和抗疲劳能力的影响,观察其抗疲
劳作用。
* 材料和方法
设计:完全随机分组设计,对照实验。
单位:赣南医学院机能实验室和药理教研室。
材料:实验于 *--(’-, . -( 在赣南医学院机能实
验室完成。选用昆明种小鼠 $-- 只 (合格证号:abB[
*--(-$)),雌雄不拘,体质量(*-0*)P,由赣南医学院动
物实验中心提供。常温常湿环境下饲养。
设计、实施、评估者:实验设计为第一作者,干预实施
及评估为全部作者,均受过专业培训,未采用盲法评估。
方法:
佛甲草提取液的制备J 佛甲草采自赣州3 夏天采
集,晒干后粉碎成粗粉,取适量蒸馏水加热提取 * 次3
每次 5- 6783过滤3合并 * 次滤液并浓缩至适量3加入相
当浓缩液 5 倍量的体积分数 -1)( 乙醇3放置冰箱 ,T N
后减压过滤3滤液回收乙醇至无醇味3用蒸馏水调整至
含 , P . 6U的生药液。
试剂:维生素 W,中国厦门鱼肝油厂;丙二醛、超氧
化物歧化酶、考马斯亮蓝测定试剂盒,南京建成生物工
程研究所提供。
仪器设备:&**#可见光分光光度计,上海精密科
学仪器有限公司;cA+[*-,% 低速冷冻离心机,合肥科
大创新股份有限公司中佳分公司。
观察佛甲草提取液对小鼠耐寒能力的影响:取雄
性小鼠 *-只,随机分成 *组:空白对照组和佛甲草组,
每组 $-只。空白对照组:腹腔注射空白对照 $- 6U . RP;
佛甲草组:腹腔注射佛甲草提取液 ( P . RP。给药后
$ N,将小鼠置于’*- ]低温冰箱中,记录小鼠存活时
间。
观察佛甲草提取液对小鼠耐热能力的影响:取雌
性小鼠 *-只,随机分成 *组:空白对照组和佛甲草组,
每组 $-只。空白对照组:腹腔注射空白对照 $- 6U . RP;
佛甲草组:腹腔注射佛甲草提取液 ( P . RP。给药后
$ N,将小鼠置于 (- ]恒温箱中,记录小鼠存活时间。
观察佛甲草提取液对小鼠负重游泳时间的影
响:取雄性小鼠 *- 只,随机分成 * 组:空白对照组和
佛甲草组,每组 $-只。空白对照组:腹腔注射空白对照
$- 6U . RP;佛甲草组:腹腔注射佛甲草提取液 ( P . RP。给
药后 $ N,小鼠按体质量的 (^尾根铜丝负重,置 *( ]恒
温水箱中,记录小鼠从入水至沉入水中不再浮出水面
@B
组别 剂量(! #!) 耐寒存活时间 耐热存活时间 游泳时间
空白对照组
佛甲草组
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表 0 佛甲草提取液对小鼠综合体能的影响 (!#,$%0’1234)
与空白对照组比较1.&5/&*%0 *6$&-)) *1 ’ 7 ’&’0

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江苏新医学院编& 中药在辞典8X:& 上册 &上海:上海科学技术出版社,0**’:
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周青,许庆林,周俐,等&佛甲草对四氯化碳中毒小鼠的抗脂质过氧化作用研
究89:&赣南医学院学报1/’’+1/+;/<=0/%>+’
刘协1李小宁1包六行1等& 葡萄籽提取物原花青素对小鼠负重游泳时间的影
响89:&中国临床康复1/’’,1* ;+<=/$,>)
嵇扬,王文俊,孙芳 & 枳蓂子水提取液对小鼠综合体能的影响 89:&中医药学
报1 /’’+1+0;+<=//>+
方玉珍1谢达莎 1隋艳华 1等 &圣愈汤免疫与抗氧化作用研究 89:& 中成药 1/’’/1
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周青,赵海燕,汪秀荣,等 &佛甲草对小鼠四氯化肝损伤的保护作用 89:&赣南
医学院学报1/’’/1//(+)://+>,
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为止所需时间,即为小鼠游泳时间。
观察佛甲草提取液对小鼠血清、肝组织丙二醛含
量和超氧化物歧化酶活性的影响:取小鼠 $’ 只,随机
分为 $ 组:空白对照组、维生素 ] 对照组、佛甲草低剂
量组、佛甲草高剂量组,每组 0’只。空白对照组:灌胃
生理盐水 0’ 2^ (#!·P);维生素 ] 对照组:灌胃维生
素 ] /&, ! (#!·P);佛甲草低剂量组:灌胃佛甲草提取
液 , ! (#!·P);佛甲草高剂量组:灌胃佛甲草提取液
0’ ! (#!·P)1连续 0$ P。末次给药后 / @,将各组小鼠
断头取血10 ,’’ D 2341离心 , 2341取血清;取适量肝组
织1用冰冷生理盐水在冰浴中制成 0’_组织匀浆1$ ‘1
+ ,’’ D 2341离心 0’ 2341取上清液。均采用硫代巴比
妥酸比色法和黄嘌呤氧化酶法分别测定血清、肝组织
丙二醛含量和超氧化物歧化酶的活性。
主要观察指标:佛甲草对小鼠耐寒,耐热存活时
间,游泳时间,血清和肝组织丙二醛含量及超氧化物
歧化酶活性的影响。
统计学分析:数据由第一作者采用 X3QDNFNOG ]aQIJ
/’’’ 完成统计处理。结果以 !# 表示;组间计量资料
差异比较采用双侧 &检验。
! 结果
/&0 实验动物数量分析 纳入小鼠 0’’ 只,均进入结
果分析,无脱失值。
/&/ 统计推断
/&/&0 佛甲草提取液对小鼠综合体能的影响 见表 0。
由表 0 可知,佛甲草组小鼠在>/’ ‘寒冷条件
下,,’ ‘高温条件下的存活时间和游泳时间均明显
长于空白对照组,分别延长了 /’&$,_1,-&0$_1-*&*,_
;’ 7 ’&’0<。提示佛甲草提取液能显著增强小鼠的综合
体能和抗御不良刺激的能力。
/&/&/ 佛甲草提取液对小鼠血清、肝组织丙二醛含量
和超氧化物歧化酶活性的影响 见表 /。
佛甲草低剂量组和佛甲草高剂量组小鼠血清、肝
组织丙二醛含量均明显低于空白对照组 (’ 7 ’&’,6
’&’0);超氧化物歧化酶活性均明显高于空白对照组(’
7 ’&’, ’&’0),与维生素 ] 的作用效果基本一致。提示
佛甲草提取液能显著抑制血清、肝组织丙二醛含量,
提高超氧化物歧化酶活性。
讨论
小鼠耐寒、耐热存活时间和游泳时间的长短,是机
体生理活力的综合反应,它是衡量疲劳的一个指标,间
接反应了机体组织、脏器的健康状况和疲劳程度8-:。持
续寒冷导致神经内分泌系统衰竭,体温随环境温度降
低,体内氧化还原酶系活性减弱,动物因脑和心脏等重
要器官氧化供能不足而死亡。环境高温则使动物体内
代谢异常旺盛,造成动物体温持续升高S当动物体温待
续升高至 $, ‘时,体内各种酶变性失活,脏器功能衰
蝎,动物呼吸循环功能停止而死亡。佛甲草提取液显著
提高小鼠耐寒、耐热能力,延长存活时间,表明该药具
有较好增强抗应激能力8):。
自由基在疲劳过程中起着重要的作用,机体代谢
过程中,自由基不断生成,但又迅速清除,两者处于平
衡状态8%:。若此动态平衡受到破坏,自由基在体内生成
过多或清除过慢,则过剩的自由基可对机体的生物大
分子进行破坏,导致组织器官功能紊乱,由此诱发多种
疾病。脂质过氧化即发生在不饱和脂肪酸共价键上的
一系列自由基反应,就是自由基毒性的具体表现。丙二
醛是不饱和脂肪酸过氧化作用终产物,它在血清组织
中的含量,间接反映了自由基反应时组织的破坏程度。
体内自由基清除有赖于灭活自由基有关的酶类,超氧
化物歧化酶是超氧化物自由基强有力的清除剂,为体
内惟一能直接淬灭自由基的酶,在抗自由基损伤中起
着重要作用。
本文实验结果表明,佛甲草能够显著提高小鼠运
动耐力,说明佛甲草具有延缓疲劳的作用。游泳运动、
寒冷、高温刺激均可使机体血清、组织丙二醛含量有所
增高,同时可使超氧化物歧化酶活性降低,提示机体脂
质过氧化能力增强,抵御能力下降。脂质过氧化多为自
由基攻击生物膜造成的后果。佛甲草能显著降低血、肝
组织丙二醛含量、提高超氧化物歧化酶的活性,说明其
有抗氧化作用8,:。作者前期研究表明,佛甲草提取液能
够减轻脂质过氧化物损伤并稳定细胞质膜,改善细胞
能量代谢和 VMb酶活性8*:。这些说明增强机体抗氧化
能力,也许是佛甲草抗疲劳的重要途径之一。
# 参考文献血清
空白对照组
维生素 ]对照组
佛甲草低剂量组
佛甲草高剂量组
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表 / 佛甲草提取液对小鼠血清、肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶
活性的影响 (!#,$%0’)
与生理盐水比较,.&5/&00/ ’6/&))$ %1’ 7 ’&’,Sc&5+&’-) /6+&-*/ +1 ’ 7 ’&’0

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组别 丙二醛
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剂量
(! #!) 超氧化物歧
化酶;#Zd ^<
丙二醛
(42NJ !)
超氧化物歧
化酶;#Zd !<
肝组织
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