全 文 ：第 23 卷第 2 期 赣南医学院学报 Vol.23 No.2
2003年 4 月 JOURNAL OF GANNAN MEDICAL COLLEGE APR.2003
佛甲草对四氯化碳中毒小鼠的抗脂质过氧化作用研究
周　青1 ,许庆林2 ,周　俐1 ,连其深1 ,张晓英1 ,曾爱萍1 ,刘建新1
(1.赣南医学院;2.赣南医学院附属医院 ,江西 赣州　341000)
摘　要:目的:探讨佛甲草提取液对四氯化碳中毒小鼠肝损伤的保护作用机制。方法:采用四氯化
碳致小鼠肝损伤 ,测定小鼠血清 、肝组织中 MDA 含量及 SOD活性。结果:四氯化碳可使小鼠血
清 、肝组织 MDA 含量升高 , SOD活性下降;佛甲草提取液明显降低四氯化碳中毒小鼠血清 、肝组织
M DA 含量(P<0.01)及升高 SOD的活性(P<0.01)。结论:佛甲草提取液对四氯化碳中毒小鼠肝
损伤的保护作用与其抗脂质过氧化有关。
关键词:佛甲草;四氯化碳;MDA;SOD
中图分类号:R965　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-5779(2003)02-0128-03
　　佛甲草 Sedum Iineare Thunb 为景天科
植物佛甲草的全草 ,性味甘寒 ,具有清热 、解
毒 、消肿等功效 ,民间用于治疗黄疸 、迁延性
肝炎 、咽喉肿痛 、痢疾等症[ 1] 。我们曾报道
佛甲草提取液对四氯化碳(CCl4)导致的小鼠
急性肝损伤有明显的保护作用[ 2] ,本文进一
步研究了其保肝作用机制 ,现将实验结果总
结如下。
1　材料
1.1　药品与试剂
1.1.1　佛甲草提取液的制备　佛甲草采自
赣州 ,夏天采集 ,晒干后粉碎成粗粉 ,取适量
蒸馏水加热提取 2次 ,每次 30分钟 ,过滤 ,合
并 2次滤液并浓缩至适量 ,加入相当于浓缩
液三倍量的 95%乙醇 ,放置冰箱 48h 后减压
过滤 ,滤液回收乙醇至无醇味 ,用生理盐水调
整至含 4g/ml的生药液 ,供实验用 。
1.1.2　试剂　维生素 E(100mg/粒)(厦门
鱼肝油厂);四氯化碳(分析纯)(上海长江化
工厂),试验时用食用花生油配成 0.1%四氯
化碳溶液;MDA 、SOD测定试剂盒(南京建成
生物工程研究所),采用硫代巴比妥酸(TBA)
比色法测定 MDA 含量;采用黄嘌呤氧化酶
法测定 SOD 活性 ,单位为 NU/ml 、NU/mg
蛋白数(每 ml反应液中或每 mg 组织蛋白在
1ml反应液中 SOD 抑制率达 50%时所对应
的SOD量为一个亚硝酸盐单位 NU)。操作
均按试剂盒说明书要求进行。
1.1.3　肝组织匀浆的制备　用生理盐水充
分洗去小鼠肝脏表面残血 ,滤纸吸干。取适
量肝组织称重 ,置玻璃匀浆器中 , 加冰冷的
0.86%NaCl溶液制成 10%肝匀浆。
1.2　仪器　721型分光光度计(上海精密科
学仪器有限公司);TGL -16C 型高速离心
机 、TDL-4型低速离心机(上海安亭科学仪
器厂);电热恒温水温箱(上海医疗器械七
厂)。
1.3　动物　昆明种小鼠 ,体重 20±2g ,雌雄
各半 ,由本院实验动物中心提供。
1.4　统计学处理　所有数据均以 χ±s 表
示 ,采用双侧 t检验进行统计处理 。
2　方法与结果
2.1　佛甲草提取液对 CCl4 中毒小鼠血清 、
肝组织 MDA含量的影响
—128—
作者简介:周青(1963 年—),女 , 大专 ,实验师。研究方向:药理学实验教学工作。
将小鼠随机分为 5组 ,每组 10只 ,生理
盐水对照组和肝损伤模型组 ig10ml/kg 生理
盐水 ,阳性药对照组 ig VE2.5g/kg ,实验给药
组分别 ig 佛甲草提取液 4g/kg 、5g/kg ,每天
一次 ,连续给药 14d。末次给药后 2h ,生理盐
水对照组 ip 等容量花生油 ,其余各组均 ip
0.1%CCl4 花生油溶液 10ml/kg ,禁食 ,自由
饮水。16h 后将小鼠断头取血 ,以 16 000r/
min离心 5min分离血清;取肝脏制备10%肝
匀浆 ,采用 721 分光光度计比色测 OD值后
计算出血清 、肝组织中 MDA 含量。结果见
表 1。
表 1　佛甲草提取液对 CCl4中毒小鼠体内 MDA 含量的影响(χ±s)
组别 剂量(g·kg-1·d-1)
动物数
(只)
血清
(nmol/ ml)
肝脏
(nmol/g)
生理盐水对照组 — 10 8.55±1.03　 407.82±60.29　
CCl4 肝损伤组　 — 10 12.29±1.37■ 560.75±65.57■
V E+CCl4 组　　 2.5 10 　 8.98±1.97＊＊＊ 422.44±91.90＊＊
佛甲草+CCl4组 I 4 10 　8.5±2.89＊＊ 426.67±96.76＊＊
佛甲草+CCl4 组Ⅱ 5 10 　9.03±2.97＊＊ 461.94±97.67＊
　　　　与生理盐水组比较:■P<0.001;
　　与 CCl4 肝损伤组比较:＊＊＊P<0.001 , ＊＊P<0.1 , ＊P<0.05
　　由表 1可知 ,用 CCl4 处理导致肝损伤的
小鼠 ,其血清 、肝组织中 MDA含量明显高于
生理盐水对照组(P<0.001);用佛甲草提取
液防治的小鼠 ,其血清 、肝组织 MDA 含量明
显低于 CCl4 肝损伤模型组(P <0.01 、
0.05),提示佛甲草提取液对 CCl4 中毒引起
的小鼠血清 、肝组织 MDA 含量升高具有明
显的抑制作用。
2.2　佛甲草提取液对 CCl4 中毒小鼠血清 、
肝组织 SOD活性的影响
小鼠 50只 ,分组 、用药及中毒处理均同
前。小鼠中毒后 16h 断头取血 ,以 16000r/
min离心 5min分离血清;取肝脏制备10%肝
匀浆 ,采用 721 分光光度计比色测 OD值后
计算出血清 、肝组织中 SOD含量 。结果见表
2。
表 2　佛甲草提取液对 CCl4中毒小鼠体内 SOD活性的影响(χ±s)
组别 剂量(g·kg-1·d-1)
动物数
(只)
血清
(NU/ ml)
肝脏
(NU/ mg蛋白)
生理盐水对照组 — 10 　262.52±29.47　 　675.87±24.67　
CCl4 肝损伤组　　 — 10 213.67±20.70■ 549.65±35.99■
V E+CCl4 组　　 2.5 10 249.95±27.14＊＊ 　646.08±55.56＊＊＊
佛甲草+CCl4 组Ⅰ 4 10 252.92±33.15＊＊ 　610.86±42.26＊＊　
佛甲草+CCl4 组Ⅱ 5 10 242.89±25.08＊　 　594.30±41.27＊　
　　　　与生理盐水对照比较:■P<0.001;
　　与 CCl4 肝损伤组比较:＊＊＊P<0.001 , ＊＊P<0.01 , ＊P<0.05
　　由表 2可知 ,用 CCl4 处理导致肝损伤的
小鼠 ,其血清 、肝组织 SOD 活性明显低于生
理盐水对照组(P <0.001);用佛甲草提取液
防治的小鼠 ,其血清 、肝组织 SOD活性明显
高于 CCl4 肝损伤模型组(P <0.01 、0.05)。
提示佛甲草提取液 4g/kg 、5g/kg 均能显著提
高 CCl4中毒小鼠血清 、肝组织 SOD的活性 。
—129—
2期　　　　周　青 ,等　佛甲草对四氯化碳中毒小鼠的抗脂质过氧化作用研究　　　　　　
3　讨论
CCl4 是一种常用的肝毒剂 ,用CCl4 诱导
小鼠肝损伤 ,其中毒机制[ 3]是 CCl4 经肝微粒
体细胞色素 P450代谢生成自由基(·CCl3),
攻击肝细胞膜上磷脂分子引起脂质过氧化 ,
从而导致肝损伤 ,表现为小鼠血清 ALT 显著
升高 ,肝细胞严重空泡变性 、嗜酸性变 ,坏死
和炎症细胞浸润[ 2] 。血清 、肝脏脂质过氧化
的程度可通过测定脂质过氧化物等来评价。
MDA是不饱和脂肪酸氧化作用的终产物 ,它
在血清及组织中的含量 ,间接反映了自由基
反应时组织的破坏程度。SOD 是动物机体
内的抗氧化酶 ,其作用是清除自由基 ,防止自
由基对细胞结构的损伤。体内 SOD活性愈
高 ,自由基清除速度愈快[ 4] 。
本研究探讨了佛甲草提取液对 CCl4 诱
导的小鼠脂质过氧化作用的影响 ,发现小鼠
ipCCl4 后其血清 、肝组织中 MDA含量升高 ,
SOD活性降低(P <0.001)从而导致肝损伤。
预先多次体内给予佛甲草提取液 ,随后用
CCl4 中毒 ,可明显防止 MDA 含量的升高以
及SOD活性的降低 ,表明佛甲草提取液可显
著对抗 CCl4 通过自由基反应所导致的小鼠
血清 、肝组织中 MDA 含量的增高。总之佛
甲草提取液对小鼠四氯化碳肝损伤的保护作
用机制与其具有较强的清除自由基产物和抗
氧化损伤能力有关 。
参考文献:
[ 1] 　江苏新医学院编.中药大辞典[ M] .上册.上
海:上海科学技术出版社 , 1990 , 1142.
[ 2] 　周青 ,赵海燕 , 汪秀荣 , 等.佛甲草对小鼠四氯
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2002 , 22(3):223-224.
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损伤保护作用机制[ J] .中国药理学通报 ,
1999 , 15(2):176-178.
[ 4] 　王艳林 , 韩钰 ,钱京萍.枳木具子抗脂质过氧化
作用的实验研究[ J] .中草药 , 1994 , 25(6):306
-307、316.
(收稿日期::2002-11-13)
The Effects of Sedum Iineare Thunb on Anti-Iipid Peroxidation
Induced by CCl4 in Mice
ZHUO Qi1 ,XU Qing-lin2 ,ZHOU Ii1 , et al
(Gannan Medical College , 1.Gannan Medical College Affiliated Hospital , Jiangxi Ganzhou 341000 , China)
Abstract:objective:The mechanism of ex tractive isolated from sedum lineare thunb was observed on the pre-
venting from hepatic injury induced by CCl4 in mice.Method:The content of MDA and activity of SOD in mice
serum and in liver tissue were assessed respectively.Result:I t was showed that the ex tractive could marked inhibit
the increasing of content of MDA and increase activities o f SOD(P <0.01), respectiv ely induced by CCl4 in mice
serum and in liver tissue.Conclusion:The ex tractiv e of sedum lineare thunb preventing from hepa tic injury induced
by CCl4 is due to anti-lipid perox idation.
Key word:Sedum Lineare Thunb;CCl4;MDA;SOD
—130—
　　　　　　　　　　　　　　　赣 南 医 学 院 学 报　　　　　　　　　　　2003年