全 文 ：天然产物研究与开发 Nat Prod Ｒes Dev 2015，27:1362-1364
文章编号:1001-6880(2015)8-1362-03
收稿日期:2015-04-23 接受日期:2015-07-03
基金项目:天津市高等学校科技发展基金计划(20130202);国家科技
重大专项“重大新药创新与发展”(2015ZX09J 15102-
004-004)
* 通讯作者 Tel:86-158-2282-9059;E-mail:miaomiaojiang@ 126． com
紫叶李果实的化学成分研究
李晓男1，2，陈燕燕1，2，周江韬1，2，王跃飞1，姜苗苗1*
1天津市现代中药重点实验室天津中医药大学，天津 300193;
2中药新药研发中心天津国际生物医药联合研究院，天津 300457
摘 要:采用硅胶、ODS和 Sephadex LH-20 柱色谱等方法对紫叶李果实 95%乙醇提取物进行提取分离纯化，运
用 IＲ、UV、1H NMＲ、13C NMＲ、HMBC、HSQC 等波谱学技术鉴定 5 个化合物:3-O-乙酰基原儿茶酸(1)、2(Ｒ)-羟
基丁二酸-1-甲酯(2)、3，3，4，4-四羟基联苯(3)、β-胡萝卜苷(4)和槲皮素(5)。化合物 1 ～ 4 是首次从该植物
中分离得到，其中化合物 1 为新天然产物，并且首次报道化合物 1 的1H NMＲ，13 C NMＲ 数据。对已分离的 5 个
化合物进行了 DPPH自由基清除实验，结果显示化合物 3、5 具有潜在的抗氧化活性。
关键词:紫叶李;化学成分;3-O-乙酰基原儿茶酸;抗氧化
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A DOI:10． 16333 / j． 1001-6880． 2015． 08． 008
Chemical Constituents of the Fruits of Pranus cerasifera
LI Xiao-nan1，2，CHEN Yan-yan1，2，ZHOU Jiang-tao1，2，WANG Yue-fei1，JIANG Miao-miao1*
1Tianjin State Key Laboratory of Modern Chinese Medicine，Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，
Tianjin 300193，China;2Ｒesearch and Development Center of Traditional Chinese Medicine，
Tianjin International Joint Academy of Biotechnology and Medicine，Tianjin 300457，China
Abstract:Five compounds were isolated and purified from the fresh fruits of Pranus cerasifera Ehrh f． by column chroma-
tography on silica gel，ODS and Sephadex LH-20． Their structures were elucidated by IＲ，UV，1H NMＲ，13C NMＲ，HM-
BC，HSQC spectral analyses． They were identified as 3-O-acetyl-protocatechuic acid (1)，2(Ｒ)-hydroxybutanedioic
acid-1-methyl ester (2) ，3 3，4，4-Tetrahydroxybiphenyl (3) ，β-daucosterol (4)and Quercetin (5)． Compounds 1-4
were isolated from this species for the first time and 1 was a new natural product． The 1H and 13C NMＲ data of com-
pound 1 were reported as well． All the isolated compounds were evaluated for their in vitro antioxidant activities using 2，2-di-
phenyl-1-picryhydrazyl (DPPH)radical scavenging assays． Compounds 3 and 5 showed potential antioxidant activities．
Key words:Pranus cerasifera;chemical constituents;3-O-acetyl-protocatechuic acid;antioxidant activity
紫叶李(Pranus cerasifera Ehrh f ．)又名红叶李，
樱桃李，蔷薇科(Ｒosaceae)李属植物。紫叶李是落
叶小乔木，叶常年紫色，著名观叶树种。原种产于亚
洲西南部，具有耐湿，耐寒和一定的耐碱能力，因我
国天津市滨海新区冬季寒冷干燥，夏季酷热潮湿，土
壤盐分高，易旱，所以紫叶李在滨海新区得以广泛种
植［1］。国内外学者对紫叶李同属植物的化学成分
进行了报道，从它们的叶子、果实、种子等部位分离
得到黄酮类、花色素类、香豆素类、新木脂素类等成
分［2-5］。现在，随着对紫叶李的不断研究，已有文献
报道紫叶李的叶子具有抗氧化活性［6］，但是对紫叶
李果实的化学成分研究甚少。
本文对紫叶李的新鲜果实进行化学成分研究，
分离得到 5 种化合物，分别为 3-O-乙酰基原儿茶酸
(1)、2(Ｒ)-羟基丁二酸-1-甲酯(2)、3，3，4，4-四羟
基联苯(3)、β-胡萝卜苷(4)和槲皮素(5)。化合物 1 ～
4为首次从该植物中分离得到，其中，1为新天然产物。
1 仪器与材料
Bruker PLUS 400 MHz核磁共振波谱仪;Bruker
AVANCE Ⅲ 600 MHz核磁共振波谱仪;Waters TQ-S
质谱仪，Waters Xevo G2-S Q-TOF MS 质谱仪;旋转
蒸发仪 ＲE-52A(上海亚荣生化仪器厂);薄层层析
硅胶 GF-254、柱层析硅胶 200 ～ 300 目(青岛海洋化
工厂)，ODS-A-HG 5 ～ 50 μm (日本 YMC 公司)，
Sephadex LH-20 凝胶(瑞士 GE Healthcare 公司)，
DPPH (2，2-二苯基-苦肼基，Sigma公司 )，维生素 C
(天津市北方天医化学试剂厂)，96 微孔板(美国
Corning公司);所用试剂均为分析纯(天津康科德试
剂公司)。
紫叶李果实，2013 年 9 月采集于天津市滨海新
区，由天津中医药大学吴红华博士鉴定为蔷薇科李
属植物紫叶李(Pranus cerasifera Ehrh f．)的新鲜果
实。标本(B41320090001)存放于天津中医药大学
中药新药研发中心化学与分析部。
2 提取与分离
将紫叶李果实在 60 ℃恒温干燥箱中干燥，称重
得 2． 0 kg，粉碎。用 10 倍量的 95%乙醇冷浸两次，
每次 7 d，将所得提取液合并过滤，减压浓缩至无醇
味，得乙醇提取物 800 g。将乙醇提取物用蒸馏水混
悬均匀后依次用等体积乙酸乙酯，萃取 3 次，合并萃
取液，得到乙酸乙酯部位 85 g。将乙酸乙酯部位经
硅胶柱，以二氯甲烷-甲醇(v /v，二氯甲烷，100 ∶ 2，
100∶ 3，100∶ 6，100∶ 10，100∶ 25，100∶ 50，甲醇)梯度洗
脱得到 8 个馏份(Fr． 1 ～ 8)。Fr． 2 经硅胶柱，得到
亚馏分 Fr． 2． 1 和 Fr． 2． 2。Fr． 2． 1 经 Sephadex LH-
20(二氯甲烷∶甲醇 = 1∶ 1，v /v)纯化，得到化合物 2
(5 mg)、3(10 mg)。Fr． 2． 2 经硅胶柱色谱以二氯甲
烷-甲醇(100∶ 3，v /v)洗脱得到 Fr． 2． 2． 1，经 Sepha-
dex LH-20(甲醇∶水 = 1∶ 1，v /v)反复纯化，得到化合
物 5(3 mg)。Fr． 3 经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇
(100∶ 2，v /v)洗脱，得到 Fr． 3． 1，再经硅胶柱色谱，
以二氯甲烷-甲醇(100∶ 5，v /v)洗脱，再经 Sephadex
LH-20(甲醇∶水 = 1∶ 1，v /v)纯化，得到化合物 1(25
mg)。Fr． 4 经硅胶柱色谱和 ODS 纯化，得到化合物
4(20 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 黄色针状晶体(甲醇);ESI-MS m/z:
374［2M-H2O］
+，195［M-H］-，ESI-MS2 给出离子峰
［M-H-60］-，中性失去 60，提示结构中存在一分子乙
酰 氧 基;HＲ-ESI-MS m/z:195． 0294 ［M-H］-
(C9H7O5，计算值为 195． 0293)，确定其分子式为
C9H8O5，不饱和度为 5;UV (MeOH)λmax(log ε):
292(0． 29)nm;IＲ (KBr)νmax 3210，2654，1697，
1603，1528，1297，1098，943，766，640 cm–1;在1H
NMＲ (CD3OD，400 MHz)中，由 δ 7． 43 (over-
lapped)，δ 7． 41 (1H，d，J = 2． 1Hz，H-2)和 δ 6． 80
(1H，d，J = 8． 5Hz，H-5)提示化合物 1 中存在一个
1，3，4-三取代苯环，δ 2． 56 (3H，s，-CH3)提示化合
物 1 存在-CH3。在
13 C NMＲ (CD3OD，100 MHz)中
显示 9 个碳原子信号，其中 δ 176． 0，δ 169． 1 为羰基
碳原子信号，δ 150． 5、δ 144． 0、δ 122． 7、δ 121． 8、δ
116． 3、δ 114． 7 为芳香区碳原子信号，δ 29． 8 为-CH3
中碳原子信号。从 HMBC 图谱中可以看到-CH3(δ
2． 56)与 C-1 (δ 176． 0)相关，提示结构中含有一个
乙酰基;另外 δ 7． 43 (overlapped)、δ 7． 41(H-2)与 δ
169． 1(C-7)相关，说明苯环上 H-1 位置被羧基取
代;通过对比化合物 1 和原儿茶酸标准品的1H NMＲ
和13C NMＲ数据，发现 C-3 化学位移存在差异，化合
物 1 的 C-3 的比原儿茶酸的 C-3 向高场移动 δ 2． 1，
提示乙酰基将原儿茶酸中的 C-3 位的酚羟基乙酰
化，得到的乙酰化产物为化合物 1，其结构与文献［7］
一致，即化合物 1 为 3-O-乙酰基原儿茶酸(3-O-ace-
tyl-protocatechuic acid)。1H NMＲ (CD3OD，400
MHz)δ:7． 43 (overlapped)，7． 41 (1H，d，J = 2. 1Hz，
H-2) ，6． 80 (1H，d，J = 8． 5Hz，H-5) ，2． 56 (3H，s，-
CH3);
13 C NMＲ (CD3OD，100 MHz)δ:176． 0 (C-
1)，169． 1 (C-7) ，150． 5 (C-4) ，144． 0 (C-3) ，
122. 7 (C-6) ，121． 8 (C-1) ，116． 3 (C-2) ，114． 7 (C-
5) ，29． 8 (C-2)。其化学结构见图 1。
图 1 化合物 1 的化学结构和 HMBC相关
Fig. 1 Chemical structure and key HMBC correlations of
compound 1
化合物 2 无色结晶(甲醇);分子式 C5H8O5;
ESI-MS m/z:149［M + H］+，147［M-H］-;在1H NMＲ
(CD3OD，600 MHz)中由 δ 4. 50 (1H，dd，J = 7. 3，
4. 7 Hz)上偶合常数判断为叔碳上的质子信号。δ
3. 74 (3H，s)为-OCH3 上的质子信号，δ 2. 67 (1H，
dd，J = 16. 2，7. 3 Hz)，δ 2. 78 (1H，dd，J = 16. 2，
4. 6 Hz)则为-CH2 信号。
13 C NMＲ (CD3OD，100
MHz)显示 6 个碳原子信号，其中 δ 175. 1、δ 174. 1
为两个羰基碳原子信号;δ 68. 5、δ 39. 8 由化学位移
判断为相连的叔碳和仲碳原子信号;δ 52. 6 则为-
OCH3 上碳原子信号。
1H NMＲ (CD3OD，600 MHz)δ
4. 50 (1H，dd，J = 7. 3，4. 7 Hz)，3. 74 (3H，s，-
3631Vol. 27 李晓男等:紫叶李果实的化学成分研究
OCH3)，2. 78 (1H，dd，J = 16. 2，4. 6 Hz) ，2. 67
(1H，dd，J = 16. 2，7. 3 Hz) ;13 C NMＲ (CD3OD，100
MHz)δ:175. 1 (C-1)，174. 1 (C-4) ，68. 5 (C-2) ，
52. 6 (-OCH3)，39. 8 (C-3)。以上数据与文献
［8］报
道基本一致，故化合物 2 鉴定为 2(Ｒ)-羟基丁二酸-1-
甲酯(2(Ｒ)-hydroxybutanedioic acid -1-methyl ester )。
化合物 3 白色粉末(甲醇);分子式 C7H6O4;
ESI-MS m/z:435［2M-H］-，217［M-H］-;1H NMＲ
(CD3OD，400 MHz)δ:6. 97 (1H，d，J = 2. 0Hz，H-
2)，6. 86 (1H，dd，J = 2. 0，8. 4Hz，H-6) ，6. 79 (1H，
d，J = 8. 4，H-5) ;13 C NMＲ (CD3OD，100 MHz)δ:
146. 3 (C-4，4)，145. 2 (C-3，3) ，134. 8 (C-1，1) ，
118. 9 (C-6，6) ，116. 5 (C-5，5) ，114. 6 (C-2，2)。
以上数据与文献［9］报道基本一致，故化合物 3 鉴定
为 3，3，4，4-四羟基联苯(3，3，4，4-Tetrahydroxybi-
phenyl)。
化合物 4 白色粉末(甲醇);分子式 C35H60O6;
10%硫酸乙醇溶液显紫红色;其1H NMＲ和13C NMＲ
谱与胡萝卜苷标准谱一致，故化合物 4 鉴定为 β-胡
萝卜苷(β-daucosterol)。
化合物 5 黄色针状晶体(甲醇);分子式为 C15
H10O7;ESI-MS m/z:303［M + H］
+，301［M-H］-;1H
NMＲ (CD3OD，400 MHz)δ:7. 72 (1H，d，J = 2. 0
Hz，H-2)，7. 61 (1H，dd，J = 2. 0，8. 4 Hz，H-6) ，
6. 86 (1H，d，J = 8. 4 Hz，H-5) ，6. 37 (1H，d，J = 2. 0
Hz，H-8) ，6. 16 (1H，d，J = 2. 0 Hz，H-6) ;13 C NMＲ
(CD3OD，100 MHz)δ:177. 4 (C-4)，165. 7 (C-7) ，
162. 6 (C-5) ，158. 2 (C-9) ，148. 8 (C-2) ，148. 0 (C-
4) ，146. 3 (C-3) ，137. 3 (C-3) ，124. 2 (C-1) ，
121. 7 (C-6) ，116. 3 (C-5) ，116. 0 (C-2) ，104. 5
(C-10) ，99. 3 (C-6) ，99. 4 (C-8)。以上数据与文
献［10］报道基本一致，故化合物 5 鉴定为槲皮素
(Quercetin)。
4 抗氧化活性测定
待测的 5 个化合物对 DPPH 自由基的清除作
用，按文献［11］方法测定。待测化合物清除 DPPH 自
由基的 IC50值如下表 1 所示。结果显示化合物 3、5
清除 DPPH自由基的能力与 Vc相当，与它们的化学
结构中含有较多的酚羟基数目有关。
表 1 待测化合物清除 DPPH自由基的 IC50值
Table 1 IC50 of DPPH scavenging of the isolated compounds
Compounds Ｒ-1 Ｒ-2 Ｒ-3 Ｒ-4 Ｒ-5 Vc
DPPH IC50(μM)a 320. 39 ± 5. 5 ＞ 500b 130. 29 ± 3. 9 ＞ 500b 84. 08 ± 2. 3 88. 6 ± 1. 9
aData were represented as mean ± SD. b The IC50 value of sample was higher than 500 μM.
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