全 文 ：收稿日期:2014-06-25 接受日期:2014-11-19
基金项目:“重大新药创制”科技重大专项项目(2010ZX09401-306-
3-15)
* 通讯作者 Tel:86-23-89029068;E-mail:yangrp@ cqacmm． com
天然产物研究与开发 Nat Prod Ｒes Dev 2015，27:67-72，49
文章编号:1001-6880(2015)1-0067-07
LC-ESI-MS /MS鉴定菥蓂中芥子油苷及有机酸类成分
于金英1，2，王云红2，刘国强3，王宾豪3，潘 正4，杨荣平1，2*
1成都中医药大学，成都 611137;2 重庆市中药研究院，重庆 400065;3Thermo Fisher Scientific
上海示范中心，上海 201200;4 重庆邮电大学生物信息学院，重庆 400065
摘 要:本文利用高效液相色谱-电喷雾质谱(LC-ESI-MS /MS)联用技术，对菥蓂中的主要化学成分进行了鉴定。
采用 Thermo Scientific Syncronis C18(150 × 2． 1 mm，3 μm)色谱柱，以 0． 1%甲酸水(A)-乙睛(B)为流动相梯度洗
脱，流速 0． 35 mL /min，检测波长为 254 nm;电喷雾质谱在线检测，正离子和负离子模式下采集数据。共分析鉴
定 10 个芥子油苷类成分和 11 种有机酸类成分，其中有 6 对同分异构体，9 个芥子油苷类成分为该植物中首次
发现。本方法准确、快速、有效，为菥蓂的后续研究奠定了基础。
关键词:菥蓂;LC-ESI-MS /MS;芥子油苷;有机酸
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标识码:A DOI:10． 16333 / j． 1001-6880． 2015． 01． 014
Identification of Glucosinolates and Organic Acids in
Thlaspi arvense L． by LC-ESI-MS /MS
YU Jin-ying1，2，WANG Yun-hong2，LIU Guo-qiang3，WANG Bin-hao3，PAN Zheng4，YANG Ｒong-ping1，2*
1Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (TCM) ，Chengdu 611137，China;2Chongqing Academy of Chinese
Materia Medica，Chongqing 400065，China;3Thermo Fisher Scientific Shanghai Demonstration Center，Shanghai 201200，China;
4College of Bio-Information，Chongqing University of Posts and Telecommunications，Chongqing 400065，China
Abstract:The objective of this study was to identify the main components of Thlaspi arvense L． by LC-ESI-MS /MS． The
separation was performed on Thermo Scientific Syncronis C18 column (150mm × 2． 1mm，3 μm) ，with a mobile phase
consisting of 0． 1% formic acid in water (A)and acetonitrile (B)for gradient elution． The analysis was performed in
positive and negative ion mode using full scan mode with ESI source． Ten glucosinolates and eleven organic acids were
well separated and identified from the extracts of T． arvense． 9 glucosinolates were identified for the first time from T． ar-
vense including six pairs of structural isomers． The new method was accurate，rapid and effective． It laid the foundation for
further research of T． arvense．
Key words:Thlaspi arvense L．;LC-ESI-MS /MS;glucosinolates;organic acids
菥蓂 Thlaspi arvense L．为十字花科菥蓂属 Thla-
spi L． 一年生草本植物，我国大部分地区均有分
布［1］，尤以川藏地区资源最为丰富［2］。菥蓂始载于
《神农本草经》，列为上品，历代本草多有记载。菥
蓂味辛、微温、无毒，入肝、脾、肾三经，其全草和种子
均可入药，全草清热解毒、消肿排脓;种子利肝明目;
嫩苗和中益气、利肝明目。另有文献报道菥蓂具有
抗毒素、抗菌的作用［6］。
目前国内外针对菥蓂展开的系统研究较少，已
知菥蓂全草主要含有黑芥子苷、芥子酶、吲哚等成
分，种子中黑芥子苷含量较高，脂肪油的含量大于
34%，是一种潜在的油料作物［2，3］。近期有研究证
实菥蓂中还含有黄酮及有机酸类成分［4，5］等。前期
研究表明，菥蓂提取物有较好的抗痛风作用，但物质
基础不明确。因此，本实验采用高效液相色谱-电喷
雾质谱(LC-ESI-MS /MS)联用技术，快速简洁的鉴定
了菥蓂提取物中的 10 个芥子苷油类成分及 11 个有
机酸类成分，为中药菥蓂药效物质基础和作用机制
研究奠定了基础。
1 仪器与材料
1． 1 仪器
Thermo Q-Exactive 四级杆-静电场轨道阱高分
辨质谱仪(美国 Thermo Fisher Scientific 公司) ，戴安
高效液相色谱仪(Dionex ULtiMate 3000，美国) ，Mil-
lipore Milli-Q纯水器(美国 Millipore 公司) ，AB204-
N电子天平(美国 Mettler Toledo公司)。
1． 2 材料与试剂
黑芥子苷对照品(美国 SIGMA 公司，批号为
101016464) ;菥蓂提取物:菥蓂全草水提醇沉处理，
由重庆市中药研究院中药制剂所提供。水为超纯
水，乙腈为色谱纯，其他试剂皆为分析纯。
2 实验方法
2． 1 液相色谱条件
色谱柱:Thermo Scientific Syncronis C18(150 ×
2． 1 mm，3 μm) ，流动相:0． 1% 甲酸水(A)/乙睛
(B) ;梯度洗脱程序如下:0 ～ 28 min，95% ～ 40% A;
28 ～ 40 min，40% ～10%A;40 ～ 45 min，10% A;45 ～
45． 1 min，10% ～ 95% A;45． 1 ～ 50 min，95% A。流
速 0． 35 mL /min，进样量:5 μL，检测波长为 254 nm，
柱温为 30 ℃。
2． 2 质谱条件
离子源:ESI，喷雾电压:+ 3． 0KV /-2． 8KV(正负
切换同时扫描) ;鞘气压力:40 arb;辅助气压力:10
arb;离子传输管温度:300 ℃;加热器温度:350 ℃;
扫描模式:Full MS(分辨率 70，000)和 dd-MS2(分辨
率 17，500，NCE35，Stepped NCE50%) ;扫描范围:
m/z 100 ～ 1000。正离子模式每月用正丁胺(n-Bu-
tylamine)、咖啡因(Caffeine)、MＲFA 和 Ultramark
1621 混合溶液进行校正，负离子模式每月用十二烷
基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate)、牛黄胆酸钠(So-
dium taurocholate)和 Ultramark 1621 混合溶液进行
校正，结束后质量偏差均小于 1 ppm。
2． 3 对照品溶液的制备
精密称取经五氧化二磷减压干燥 24 h 的黑芥
子苷对照品 10． 32 mg，置 25 mL 量瓶中，加甲醇溶
解并稀释至刻度，摇匀，即得每 1 mL 含 0． 4128 mg
的溶液。
2． 4 样品处理
称取菥蓂药材 100 g，以 15 倍量水加热回流提
取 3 次，每次 1 h，提取液过滤合并，浓缩至 1 g /mL，
放置至室温，50%乙醇除杂，冷藏静置，过滤得上清
液，减压回收溶剂得浸膏，浸膏用 100 mL 甲醇超声
溶解，作为供试品溶液。
2． 5 测定方法
取对照品及供试品溶液，按照上述液相和质谱
条件分别进行 LC-MS分析，记录总离子流色谱图。
3 结果与分析
采用 LC-MS技术，可以获得每一个色谱峰所对
应化合物在正负离了模式下的质谱信息，以 C、H、
O、N和 S在 1 ppm 偏差范围内，利用软件 Xcalibur
从一级质谱图拟合元素组成可获知该化合物的相对
分子质量信息，接着对各准分子离子进行 MS2 裂解
分析，再结合网络数据库 Chemspider，利用 Mass
Frontier7． 0 软件，分析质谱裂解规律，可推测出各化
合物的结构，本研究共分析鉴定了菥蓂水提醇沉液
中的 21 个化学成分。
3． 1 对照品质谱行为分析
黑芥子苷是芥子油苷类化合物，芥子油苷由一
个 β-D-硫代葡萄糖基、一个磺酸肟基和一个侧链 Ｒ
图 1 黑芥子苷的负离子质谱
Fig. 1 Negative ion MS spectra of sinigrin
86 天然产物研究与开发 Vol. 27
基团组成，不同的 Ｒ基团侧链形成不同种类的芥子
油苷。在碰撞能的作用下，芥子油苷发生裂解得到
碎片离子。目前正离子电喷雾模式是分析芥子油苷
的常用手段，本实验在负离子模式下分析芥子油苷
的质谱特征。黑芥子苷质谱图及低质量端的质谱放
大图如图 1 所示。
由图可以看出，负离子模式下可见［M-H］-m/z
358． 02734，对其进行 MS /MS裂解分析，得到 6 个主
要碎片离子 m/z 259． 01239、195． 03311、96． 96005、
95． 95228、79． 95735 及 74． 99092，通过 Mass Fron-
tier7． 0 软件对黑芥子苷的二级质谱图进行质谱断
裂规律分析，这 6 个主要碎片离子分别对应［M-H-
C4H6NS］
-、［M-H-C4H5O4NS］
-、［M-H-C4H5O4NS-
C6H10O］
-、［M-H-C4H5O4NS-C6H10O-H］
-和磺酸肟基
裂解碎片。其 MS2 裂解特征如图 2 所示。
图 2 黑芥子苷负离子模式下质谱裂解特征
Fig. 2 MS2 fragmentation characteristics of sinigrin under negative ion mode
3． 2 样品中化学成分的质谱行为分析
对菥蓂提取物按照上述液相色谱和质谱条件进
行 LC-MS分析，得到菥蓂提取物在 254 nm 检测波
长下的液相色谱图，及正负离子模式下的质谱总离
流色谱图(TIC) ，见图 3。可知样品中的化学成分在
ESI正负离子模式条件下均具有较好的响应。表 1
列出了各化合物的 MS2 碎片离子。
图 3 菥蓂提取物 HPLC色谱图及总离子流图
Fig. 3 HPLC and total ion current chromatograms of T． arvense
表 1 菥蓂提取物的化学成分鉴定结果
Table 1 Identification of chemical constituents from T． arvense
编号
No．
保留时间
ＲT
［M-H］-
(m/z)
［M + NH4］+
(m/z)
［M + H］+
(m/z)
质谱碎片
MS2(m/z)
分子式
Formula
化合物
Compound
1 1． 15 358． 02734 259，195，96，95，79，74 C10H17O9NS2 1-Propenyl glucosinolate
96Vol. 27 于金英等:LC-ESI-MS /MS鉴定菥蓂中芥子油苷及有机酸类成分
2 1． 75 358． 02734 259，195，96，95，79，74 C10H17O9NS2 Sinigrin
3 3． 15 372． 01972 259，195，96，95，79，74 C11H19O9NS2 4-Butenyl glucosinolate
4 4． 22 374． 01866 259，195，96，95，79，74 C11H21O9NS2 n-Butyl glucosinolate
5 4． 98 374． 01866 259，195，96，95，79，74 C11H21O9NS2 Isobutyl glucosinolate
6 8． 12 400． 04964 259，195，96，95，79，74 C12H19O10NS2 2-keto-4-Pentenyl glucosinolate
7 8． 45 408． 04324 259，195，96，95，79，74 C14H19O9NS2 Benzyl-glucosinolate
8 9． 37 388． 08624 259，195，96，95，79，74 C12H23O9NS2 n-Pentyl glucosinolate
9 9． 77 388． 08624 259，195，96，95，79，74 C12H23O9NS2 2-Methyl butyl glucosinolate
10 10． 17 388． 08624 259，195，96，95，79，74 C12H23O9NS2 Isopentyl glucosinolate
11 1． 15 133． 01428 115，72，71 C4H6O5 D-(+)-Malic acid
12 1． 61 133． 01428 115，72，71 C4H6O5 L-(-)-Malic acid
13 1． 23 191． 01978 129，111，87，85 C6H8O7 Citric acid
14 1． 68 191． 01978 129，111，87，85 C6H8O7 Isocitric acid
15 21． 25 348． 27396 295，277，173，109，67 C18H34O5 Pinellic acid
16 24． 12 309． 20526 291，273，189，119，81 C18H28O4 Ostopanic acid
17 25． 97 307． 18976 289，271，189，159，125，79 C18H26O4
9，16-Dioxo-10，12，
14-octadecatrienoic acid
18 26． 28 313． 23691 295，277，259，135，107，81 C18H32O4 9-Octadecenedioic acid
19 28． 37 315． 25259 297，279，261，109，95，81 C18H34O4 Octadecanedioic Acid
20 33． 73 295． 22635 277，295，241，151 C18H30O3
9-oxo-10，12-
Octadecadienoic acid
21 34． 38 295． 22635 277，295，241，151 C18H30O3
13-oxo-9，11-
Octadecadienoic acid
3． 3 芥子油苷类成分结构鉴定
峰 1 和峰 2 保留时间分别为 1． 15 min 和 1． 75
min，正离子模式下未见准分子离子峰，负离子模式
下均可见［M-H］-m/z 358． 02734，二者为一对异构
体。由一级质谱图拟合元素组成，得分子式为 C10
H17O9NS2。对［M-H］
-m/z 358． 02734 进行 MS /MS
裂解分析，得到 6 个主要碎片离子 m/z 259． 01239、
195． 03311、96． 96005、95． 95228、79． 95735 及
74. 99092，通过 Mass Frontier7． 0 软件对 1、2 号峰的
二级质谱图进行质谱断裂规律分析，这 6 个主要碎
片 离 子 分 别 对 应 ［M-H-C4H6NS］
-、［M-H-
C4H5O4NS］
-、［M-H-C4H5O4NS-C6H10 O］
-、［M-H-
C4H5O4NS-C6H10O-H］
-和磺酸肟基裂解碎片。通过
与对照品的保留时间和离子峰质谱图进行对比分
析，并结合参考文献［7，8］及网络数据库 Chemspider，
确定峰 1 和峰 2 分别为芥子油苷类化合物为 1-pro-
penyl glucosinolate和黑介子苷(Sinigrin)。
峰 3 ～峰 10 保留时间分别为 3． 15、4． 22、4． 98、
8． 12、9． 37、9． 77、10． 17 min，在负离子模式下，由一
级质谱图拟合元素组成，得这些化合物的分子式分
别为 C11 H19 O9NS2、C11 H21 O9NS2、C11 H21 O9NS2、C12
H19 O10 NS2、C12 H23 O9NS2、C12 H23 O9NS2、C12 H23
O9NS2。其中化合物 4 与 5 为一对异构体，8、9 和 10
为同分异构体。峰 3 ～峰 10 的 MS2 均给出与峰 1
和峰 2 相同的碎片离子 m/z 259． 01239、195． 03311、
96． 96005、95． 95228、79． 95735 及 74． 99092，利用
Mass Frontier7． 0 软件对 3 ～ 10 号峰的二级质谱图进
行质谱断裂规律分析，这些碎片离子分别对应［M-
H-C4H6NS］
-、［M-H-C4H5O4NS］
-、［M-H-C4H5O4NS-
C6H10O］
-、［M-H-C4H5O4NS-C6H10O-H］
-和磺酸肟基
裂解碎片。通过与对照品的离子峰质谱图进行对比
分析，并结合参考文献［7，8］及网络数据库 Chemspi-
der，确定这 7 个峰分别为 4-butenyl glucosinolate，n-
butyl glucosinolate，isobutyl glucosinolate，2-keto-4-
pentenyl glucosinolate，benzyl-glucosinolate，n-pentyl
glucosinolate，2-methyl butyl glucosinolate，isopentyl
glucosinolate。各化合物的结构式及如表 2 所示。
07 天然产物研究与开发 Vol. 27
表 2 芥子油苷类成分化学结构
Table 2 Chemical structure of glucosinolate
化合物
Compound
芥子油苷类成分化学结构
General chemical structure of glucosinolate
Ｒ侧链
Ｒ side-chain structure
1-Propenyl glucosinolate
Sinigrin
4-Butenyl glucosinolate
n-Butyl glucosinolate
Isobutyl glucosinolate
2-keto-4-Pentenyl glucosinolate
Benzyl-glucosinolate
n-Pentyl glucosinolate
2-Methyl butyl glucosinolate
Isopentyl glucosinolate
丙烯基
烯丙基
烯丁基
丁基
2-丁基
2-酮基-4-戊烯基
苯甲基
戊基
2-甲基丁基
异戊基
3． 4 有机酸类成分结构鉴定
峰 11 和 12 的保留时间分别为 1． 15 min 和
1. 61 min，负 离 子 模 式 下 均 给 出［M-H］-m/z
133. 01428，二者为一对异构体。由一级质谱图拟合
元素组成，可得分子式为 C4H6O5。对［M-H］
-m/z
133. 01408 进行 MS /MS 裂解分析，得到 3 个主要碎
片离子 m/z 115. 00362、72. 99298 及 71. 01369，通过
Mass Frontier7. 0 软件对 26、27 号峰的二级质谱图进
行质谱断裂规律分析，这 3 个碎片离子分别对应
［M-H-H2O］
-、［M-H-C2H4O2］
-及［M-H-H2O-CO2］
-。
结合网络数据库 Chemspider，确定峰 11 和峰 12 分
别为 D-(+)-苹果酸［D-(+)-Malic acid］和 L-(-)-
苹果酸［L-(-)-Malic acid］。
峰 13 和 14 的保留时间分别为 1. 23 min 和
1. 68min，负 离 子 模 式 下 均 给 出 ［M-H］-m/z
191. 01978，二者为一对异构体。由一级质谱图拟合
元素组成，可得分子式为 C6H8O7。对［M-H］
-m/z
191. 01978 进行 MS /MS 裂解分析，得到 4 个主要碎
片离子 m/z 129. 01936、111. 00872、87. 00872 及
85. 02947，通过 Mass Frontier7. 0 软件分别对 13、14
号峰的二级质谱图进行质谱断裂规律分析，这 4 个
碎片离子分别对应［M-H-H2O-CO2］
-、［M-H-H2O-
CO2-H2O］
-及裂解碎片。结合网络数据库 Chemspi-
der，确定二者分别为柠檬酸(Citric acid)和异柠檬
酸(Isocitric acid)。
峰 15 的保留时间为 21. 25 min，正离子模式下
可见［M + NH4］
+ m/z 348. 27396。由一级质谱图拟
合元素组成，可得分子式 C18H34O5。对［M + NH4］
+
m/z 348. 27396 进行 MS /MS 裂解分析，得到 5 个主
要 的 碎 片 离 子 m/z 295. 22650、277. 21625、
173. 11734、109. 10124 及 67. 05436，通过 Mass Fron-
tier7. 0 软件对 15 号峰的二级质谱图进行质谱断裂
规律分析，这 5 个碎片离子分别对应［M + NH4-NH3-
2H2O］
+、［M + NH4-NH3-3H2O］
+及长链裂解碎片。
结合网络数据库 Chemspider，，可知此峰为半夏酸
(Pinellic acid)。
峰 16 的保留时间为 24. 12 min，正离子模式下
可见［M + H］+ m/z 309. 20526，［M + H-H2O］
+ m/z
291. 19537，和［M + Na］+ m/z 331. 18729。由一级
质谱图拟合元素组成，可得分子式为 C18H28 O4。对
［M + H］+ m/z 309. 20526 进行 MS /MS 裂解分析，
得到 5 个主要碎片离子 m/z 291. 19537、273. 18478、
189. 11226、119. 08559 及 81. 06992，通过 Mass Fron-
tier7. 0 软件，对 16 号峰的二级质谱图进行质谱断裂
规律分析，分别对应［M + H-H2O］
+、［M + H-
2H2O］
+及长链裂解碎片。结合网络数据库 Chems-
pider，可知此峰为 Ostopanic acid。
峰 17 的保留时间为 25. 97 min，正离子模式下
可见［M + H］+ m/z 307. 18976，［M + H-H2O］
+ m/z
289. 17929，和［M + Na］+ m/z 329. 17178。由一级
质谱图拟合元素组成，可得分子式为 C18H26 O4。对
［M + H］+ m/z 307. 18976 进行 MS /MS 裂解分析，
得到 6 个主要碎片离子 m/z 289. 18002、271. 16949、
189. 11243、159. 08057、125. 09622 及 79. 05431。通
过 Mass Frontier7. 0 软件，对 17 号峰的二级质谱图
进行质谱断裂规律分析，这 6 个碎片离子分别对应
［M + H-H2O］
+，［M + H-2H2O］
+及长链裂解碎片。
结合网络数据库 Chemspider，可知此峰为 9，16-Di-
oxo-10，12，14-octadecatrienoic acid。
化合物 18 的保留时间为 26. 28 min，正离子模
式下可见［M + H］+ m/z 313. 23691，［M + H-H2O］+
m/z 295. 22705 和［M + Na］+ m/z 335. 21893。由一
17Vol. 27 于金英等:LC-ESI-MS /MS鉴定菥蓂中芥子油苷及有机酸类成分
级质谱图拟合元素组成，可得分子式为 C18 H32 O4。
对［M + H］+ m/z 313. 23691 进行 MS /MS 裂解分
析，得到 6 个主要碎片离子 m/z 295. 22705、
277. 21619、259. 20554、135. 11687、107. 08559 及
81. 06993，通过 Mass Frontier7. 0 软件，对 18 号峰的
二级质谱图进行质谱断裂规律分析，这 6 个碎片离
子分别对应［M + H-H2O］
+、［M + H-2H2O］
+及长链
裂解碎片。结合网络数据库 Chemspider，可知此峰
为 9-十八烯二酸(9-Octadecenedioic acid)。
化合物 19 的保留时间为 28. 37 min，正离子模
式下可见［M + H］+ m/z 315. 25259，［M + H-H2O］
+
m/z 297. 20584，和［M + Na］+ m/z 337. 23456。由
一级质谱图拟合元素组成，可得分子式为 C18H34O4。
对［M + H］+ m/z 315. 25259 进行 MS /MS 裂解分
析，得到 7 个主要碎片离子 m/z 297. 24188、
279. 23172、 261. 22174、 135. 11697、 109. 10129、
95. 08560 及 81. 06995，通过 Mass Frontier7. 0 软件，
对 19 号峰的二级质谱图进行质谱断裂规律分析，这
7 个碎片离子分别对应［M + H-H2O］
+、［M + H-
2H2O］
+、［M + H-3H2O］
+ 及长链裂解碎片。结合
网络数据库 Chemspider，可知此峰为十八烷二酸
(Octadecanedioic acid)。
峰 20 和 21 的保留时间分别为 33. 73 min 和
34. 38 min，正离子模式下均可见［M + H］+ m/z
295. 22635，［M + H-H2O］
+ m/z 277. 21582 和［M +
Na］+ m/z 317. 20828，二者为一对异构体。由一级
质谱图拟合元素组成，可得分子式为 C18H30 O3。对
［M + H］+ m/z 295. 22635 进行 MS /MS 裂解分析，
分别得到 5 个主要碎片离子 m/z 277. 21616、
259. 205 87、241. 19485、99. 08047 及 71. 08560，m/z
277. 21616、259. 205 87、241. 19485、95. 04914 及
81. 03352，通过 Mass Frontier7. 0 软件，对 20、21 号
峰的二级质谱图进行质谱断裂规律分析，这 5 个碎
片离子分别对应［M + H-H2O］
+、［M + H-2H2O］
+、
［M + H-3H2O］
+及长链裂解碎片。结合网络数据库
Chemspider，可知分别为 9-oxo-10，12-octadecadienoic
acid和 13-oxo-9，11-octadecadienoic acid。
4 讨论
天然产物成分复杂，传统的分离分析方法步骤
繁琐且耗时费力，液质联用技术将液相色谱的高效
分离性能和质谱的强大定性功能相结合，通过 LC-
MS分析给出准分子离子峰，得到化合物相应的相对
分子质量信息。ESI-MSn 能够得到化合物的多级裂
解质谱，为化合物的结构解析提供丰富的信息。台
式 Orbitrap高分辨质谱 Q-Exactive 与其它常见的液
相高分辨质谱联用仪相比，分辨率更高，质量稳定性
更好，在复杂基质的分析中灵敏度更高，速度更快，
在缺少标准品的情况下也可进行方法优化与成分分
析，非常适合于对未知物的扫描和定量，对菥蓂未知
成分的研究奠定了基础。
藏药菥蓂药用价值高，应用广泛，对其化学成分
的研究也有一定的进展，但液质联用分析领域仍为
空白。因此，在前人研究的基础上，本实验首次采用
液质联用技术，对菥蓂提取物的化学成分进行分析
研究。利用 Q-Exaetiv 四极杆静电场轨道阱高分辨
质谱，探讨样品在电喷雾电离模式下的裂解情况，并
对所得碎片数据进行结构解析，共鉴定出了 10 种芥
子油苷类成分和 11 种有机酸类成分。芥子油苷类
化合物除黑芥子苷外，其他成分均为首次从该植物
中分析鉴定出。
本研究建立了菥蓂提取物中复杂成分的快速、
准确的 LC-MSn 分析方法，能够同时实现多组分的
良好分离并提供各峰的组成和结构信息，在菥蓂药
效物质基础研究及其作用机制研究方面具有非常广
阔的应用前景。首次阐明了菥蓂提取物中的主要芥
子油苷类及有机酸类成分的结构，为菥蓂的药效物
质基础研究提供了科学依据。
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27 天然产物研究与开发 Vol. 27
药中应用比例最大、功用最广泛的药物，被称之蒙
药之王。诃子提取物含药血清对 H2O2 损伤心肌细
胞具有保护作用，其机制可能与稳定细胞膜和抗氧
化有关;麝香提取物对脂多糖所致神经细胞炎性损
伤具有显著的保护作用。麝香能明显缩小水肿区移
行带，有利于三羧酸循环进行和膜结构的稳定;吴启
端等通过实验研究发现石菖蒲具有兴奋 CNS，抗缺
氧，清除自由基，抑制脑神经细胞凋亡作用，并有防
止脑组织萎缩的作用，从而有效地延缓脑组织的衰
老和改善小鼠学习记忆功能。石菖蒲对神经元的保
护作用可能是防止神经元变性或延缓神经元结构的
改变。因此，我们推测二十五味珊瑚丸对神经元细
胞有一定的保护作用。
实验结果显示:与对照组相比，模型组大鼠海马
CA3 区的锥体细胞层排列层次紊乱，数量减少，细胞
萎缩和核固缩，海马齿状回 DG 区 NSE 表达的细胞
数较多，胞体和突起较肥大，海马 NSE 蛋白表达增
多，提示 D-半乳糖大鼠的海马神经元变性、受损。
与模型组相比，二十五味珊瑚丸组大鼠 CA3 区的锥
体细胞层排列层次整齐，数量较多，细胞萎缩和核固
缩减轻，齿状回 DG区的 NSE表达的细胞数较少，胞
体和突起较小，海马 NSE 蛋白表达下降，说明二十
五味珊瑚丸能抑制 D-半乳糖诱导的神经元变性，从
而减轻神经元的损伤。本实验也说明藏药在治疗
AD在实验研究方面，可以通过减低炎症反应、抑制
凋亡、增强神经生长、提高抗氧化能力等环节，改善
模型动物学习记忆功能，体现了中医多途径、多环
节、多靶点的优势。随着对中医药治疗 AD 机制的
深入研究，探索 AD 中医病理与西医病理之间的交
叉点，发现两者之间的内在联系，可成为筛选有效治
疗 AD药物的途径。这些结果为拓展二十五味珊瑚
丸药效和深入洞察其药理作用提供了实验资料。但
对于二十五味珊瑚丸的哪些有效成分，以及通过何
种途径抑制神经元变性，还有待深入研究。
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