全 文 ：·贮藏保鲜加工· 北方园艺２０１４（１０）：１３０～１３２
第一作者简介：王亚红（１９７０－），女，硕士，教授，现主要从事天然药
物的研究与开发工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｙａｈｏｎｇ９９９９９＠１６３．ｃｏｍ．
基金项目：吉林省教育厅重点计划资助项目（吉教科合字２０１３第
３１６号）。
收稿日期：２０１３－１２－１０
瓦松总黄酮的索氏提取工艺研究
王 亚 红１，王 亚 丽２，祝 波１
（１．吉林化工学院 化学与制药工程学院，吉林 吉林１３２０２２；２．长春１２０急救中心，吉林 长春１３００００）
摘 要：以市售瓦松为试材，采用索氏提取法，利用单因素试验和正交实验，考察了料液比、
提取时间、药粉目数、乙醇浓度４个因素对其总黄酮提取率的影响，并优化了提取工艺。结果表
明：索氏提取法提取瓦松总黄酮的最佳工艺条件为料液比１∶１５ｇ／ｍＬ、提取时间３ｈ，目数１００
目，乙醇浓度７５％，在此条件下提取率为０．６３％。该方法提取量稳定、操作简单、可行。
关键词：瓦松；总黄酮；索氏提取法；正交实验
中图分类号：Ｑ ９４９．７５１．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１４）１０－０１３０－０３
瓦松（Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｆｉｍｂｒｉａｔｕｓ）为景天科瓦松的全草。
全国各地均有分布，生于屋顶瓦缝中或岩石上，又被誉
为“房上仙子”［１］。传统医学认为瓦松性甘、平，味酸；具
有养心安神、补肾健骨、养阴明目、补血调经、止血收敛
等功效。可用于治疗各类出血、月经不调、头晕目眩、骨
蒸劳热、肺热咳嗽等症。李丽［２］研究证明，瓦松有抗菌
消炎、抗癌、强心、提高免疫活性的作用。瓦松中含有多
种黄酮化合物［３－４］，黄酮类物质是一种生理活性物质，具
有降低血压、防止动脉硬化和抗衰老等作用［５］。该试验利
用索氏提取器提取瓦松总黄酮，采用正交实验设计法优化
提取工艺，以期为瓦松总黄酮提取工业化奠定一定基础。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试瓦松购自吉林市江城大药房。
芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所；无水乙
醇、甲醇、无水三氯化铝、醋酸钠、冰醋酸均为分析纯。
紫外可见分光光度计（７５２Ｎ，上海精密科学仪器有
限公司），旋转蒸发仪（ＲＥ－５２Ａ，上海亚荣生化仪器厂），
电热恒温鼓风干燥箱（ＤＮＧ－９０７６Ａ，上海精宏实验设备
有限公司），数显恒温水浴锅（ＨＨ－２，国华电器有限公
司），电子分析天平（ＦＡ２００４Ｎ，上海精密科学仪器有限公
司）。
１．２ 试验方法
１．２．１ 总黄酮的提取 称取一定目数的瓦松药粉５．００ｇ
用滤纸包好，置于索氏提取器中，加入一定量不同浓度
的乙醇，按照一定时间回流提取２次，合并２次提取液用
减压旋转蒸发仪浓缩。将浓缩液置于坩埚中，用恒温水
Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｐｕｒｐｌｅ Ｃａｂｂａｇｅ Ｐｉｇｍｅｎｔ
ＷＥＮ Ｙｕｅ－ｂｉｎｇ１，ＺＯＵ Ｙｕ１，ＨＵ Ｌｉ－ｍｉｎｇ２，ＴＩＡＮ Ｍｉ－ｘｉａ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｄａｌｉａｎ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ １１６６００；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｑｕａｒｔｅｒｍａｓｔｅｒ，Ａｉｒ Ｆｏｒｃｅ Ｌｏｇｉｓｔｉｃｓ
Ｃｏｌｅｇｅ，Ｘｕｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ ２２１００６）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｐｕｒｐｌｅ ｃａｂｂａｇｅ ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｕｒｐｌｅ ｃａｂｂａｇｅ ｐｉｇｍｅｎｔ ａｎｄ ｅｆｅｃｔ ｏｆ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｌｉｇｈｔ，ｍｅｔａｌ ｉｏｎｓ ａｎｄ ｆｏｏｄ ａｄｄｉｔｉｖｅｓ ｏｎ ｐｉｇｍｅｎｔ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｓ ｆｏｌｏｗｓ：ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ，３０％ｅｔｈａｎｏｌ；ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｅ，２５∶１ｍＬ／ｇ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，３０℃；
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ，４０ｍｉｎ．Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ ｌａｒｇｅｓｔ ｃｏｌｏｒ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｐｉｇｍｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ８．４Ｕ／ｍＬ．Ｈｅａｔ ａｎｄ
ｌｉｇｈｔ ｃｏｕｌｄ ｒｅｄｕｃｅ ｔｈｅ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｐｕｒｐｌｅ ｃａｂｂａｇｅ ｐｉｇｍｅｎｔ．Ｓｏｍｅ ｍｅｔａｌ ｉｏｎｓ ｓｕｃｈ ａｓ Ｃｕ２＋，Ｆｅ２＋ａｎｄ Ｆｅ３＋ｃｏｕｌｄ ｃｈａｎｇｅ ｉｔｓ
ｃｏｌｏｒ．Ｔｈｅ ｐｉｇｍｅｎｔ ｗａｓ ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｓｔａｂｌｅ ｕｎｄｅｒ ｇｌｕｃｏｓｅ，ｓｕｃｒｏｓｅ，ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｓｏｒｂａｔｅ ａｎｄ ｓｏｄｉｕｍ ｂｅｎｚｏａｔｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，ｂｕｔ ｔｈｅ
ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ｍｉｇｈｔ ｌｅａｄ ｔｏ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｉｎ ｉｔｓ ｃｏｌｏｒ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｐｕｒｐｌｅ ｃａｂｂａｇｅ；ｐｉｇｍｅｎｔ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ；ｓｔａｂｉｌｉｔｙ
０３１
北方园艺２０１４（１０）：１３０～１３２ ·贮藏保鲜加工·
浴加热制成湿浸膏，在６０℃的电热鼓风干燥箱中干燥至
恒重，称重得干浸膏质量。
１．２．２ 总黄酮提取率计算 称取０．０３ｇ干浸膏用６０％
乙醇溶解定容至５０ｍＬ容量瓶中，移取２ｍＬ于１０ｍＬ
容量瓶中用６０％乙醇定容得供试品溶液，测定吸光度，
依据标准曲线计算总黄酮提取率［６］，公式如下：
Ｗ％＝
（ｙ－０．３９８９）
８５．００２ ×
１０
２×５０×
ｍ２
０．０３×
１
ｍ１
。
其中，Ｗ％：瓦松总黄酮提取率；ｙ：吸光度；ｍ２：所得干浸
膏质量；ｍ１：称取瓦松的质量。
１．２．３ 单因素试验 料液比对总黄酮提取率的影响：称
取５份５．００ｇ瓦松生药粉末，设定目数８０目，提取时间
４ｈ，乙醇浓度７５％，分别按１∶１５、１∶２０、１∶２５、１∶３０、
１∶３５ｇ／ｍＬ的料液比提取，考察料液比对总黄酮提取
率的影响；提取时间对总黄酮提取率的影响：称取５份
５．００ｇ瓦松生药粉末，设定料液比１∶２０ｇ／ｍＬ，乙醇浓
度７５％，目数８０目，分别按２．０、２．５、３．０、３．５、４．０ｈ提
取，考察提取时间对总黄酮提取率的影响；目数对总黄
酮提取率的影响：称取５份５．００ｇ瓦松生药粉末，设定
乙醇浓度７５％，料液比１∶２０ｇ／ｍＬ，提取时间３．５ｈ，分
别按５０、６５、８０、１００、１２０目提取，考察目数对总黄酮提
取率的影响；乙醇浓度对总黄酮提取率的影响：称取５
份５．００ｇ瓦松生药粉末，设定提取时间３．５ｈ，料液比
１∶２０ｇ／ｍＬ，目数１００目，分别按７０％、７５％、８０％、８５％、
９０％的乙醇浓度提取，考察乙醇浓度对总黄酮提取率的
影响。
１．２．４ 正交实验 在单因素试验基础上，以瓦松中总黄
酮提取率作为考察指标，选择料液比 （Ａ）、提取时间
（Ｂ）、目数（Ｃ）、乙醇浓度（Ｄ）作为考察因素，进行Ｌ９（３４）
正交实验，因素与水平见表１。
表１ 正交实验因素与水平
因素
水平
Ａ料液比／ｇ·ｍＬ－１ Ｂ提取时间／ｈ Ｃ目数／目 Ｄ乙醇浓度／％
１ １∶１５ ３ ８０ ７５
２ １∶２０ ３．５ １００ ８０
３ １∶２５ ４ １２０ ８５
２ 结果与分析
２．１ 单因素试验
２．１．１ 料液比对总黄酮提取率的影响 由表２可知，料
液比为１∶２０ｇ／ｍＬ时，提取率达到最大值，随着料液比
的减小，总黄酮提取率呈下降趋势。所以选择１∶１５、
１∶２０、１∶２５ｇ／ｍＬ进行正交实验。
２．１．２ 提取时间对总黄酮提取率的影响 从表３可以
看出，随着提取时间增加，提取率先增大后减小，３．５ｈ
表２ 不同料液比下的提取率值
料液比／ｇ·ｍＬ－１ １∶１０ １∶１５ １∶２０ １∶２５ １∶３０
浸膏质量／ｇ ０．５１３２ ０．６５６１ ０．６２１３ ０．６２００ ０．６３３９
吸光度 ０．５２００ ０．５５７０ ０．５７１０ ０．５０８０ ０．４０６０
提取率／％ ０．３５１０ ０．４９００ ０．４９６０ ０．４３６０ ０．３４３０
表３ 不同提取时间下提取率值
提取时间／ｈ ２．０ ２．５ ３．０ ３．５ ４．０
浸膏质量／ｇ ０．５２４４ ０．６４００ ０．６１４０ ０．５９８５ ０．５９５９
吸光度 ０．５１７０ ０．５７３０ ０．６０００ ０．６３１０ ０．５５９０
提取率／％ ０．３９４０ ０．５３７０ ０．５４４０ ０．５６００ ０．４８８０
时提取率最大，所以选择３．０、３．５、４．０ｈ进行正交实验。
２．１．３ 目数对总黄酮提取率的影响 由表４可知，随着
目数增加，提取率呈现先增大后减小趋势，是因为目数
达到一定程度后药粉颗粒过于细小，互相粘接，从而影
响总黄酮从细胞中溶出。１００目时，提取率达到峰值，所
以选择８０、１００、１２０目进行正交实验。
表４ 不同提取目数下提取率值
目数／目 ５０ ６５ ８０ １００ １２０
浸膏质量／ｇ ０．５９７６ ０．５７９７ ０．６１１０ ０．５６７７ ０．５２０４
吸光度 ０．４２２０ ０．４３９０ ０．４５３０ ０．５４３０ ０．４６７０
提取率／％ ０．３５８０ ０．３６３０ ０．３９７０ ０．４５４０ ０．３５４０
２．１．４ 乙醇浓度对总黄酮提取率的影响 由表５可知，
随着乙醇浓度增大，提取率逐渐增大，这可能是因为瓦
松中黄酮类化合物种类多，结合状态和极性也不同，提
取溶媒的浓度主要是根据被提物的性质和伴随的杂质
来选择。乙醇浓度为８０％时，提取率最大，所以选择
７５％、８０％、８５％进行正交实验。
表５ 不同乙醇浓度下的提取率值
乙醇浓度／％ ７０ ７５ ８０ ８５ ９０
浸膏质量／ｇ ０．４５２８ ０．４５５０ ０．６５９６ ０．４８６０ ０．４７０７
吸光度 ０．４１４０ ０．４３００ ０．４５７０ ０．４３２０ ０．４２９０
提取率／％ ０．２６４０ ０．２７６０ ０．４４６０ ０．２９６０ ０．２８５０
２．２ 正交实验
表６极差分析表明，最佳工艺条件组合为Ａ１Ｂ２Ｃ２Ｄ１，
各因素影响大小顺序为目数＞乙醇浓度＞料液比＞提
取时间。由于极差分析不能区分正交实验中试验条件
改变引起的数据波动和试验误差引起的数据波动，并且
无法估计试验误差大小，所以再进行方差分析。由表７
可知，目数和乙醇浓度对总黄酮提取有显著性影响，提
取时间和料液比对总黄酮提取没有显著性影响，为了降
低生产成本，提取时间（Ｂ）选择３ｈ。综上最佳提取工艺
条件为Ａ１Ｂ１Ｃ２Ｄ１，即料液比１∶１５ｇ／ｍＬ，提取时间３ｈ，
目数１００，乙醇浓度为７５％。
１３１
·贮藏保鲜加工· 北方园艺２０１４（１０）：１３０～１３２
表６ 正交实验结果
正交
实验
Ａ料液比
／ｇ·ｍＬ－１
Ｂ提取时间
／ｈ
Ｃ目数
／目
Ｄ乙醇浓度
／％
吸光度
浓度
／ｍｇ·ｍＬ－１
提取量
／ｍｇ
提取率
／％
１ １∶１５ ３．０ ８０ ７５ ０．５４６ ０．０１９１８ ２４．８３ ０．５０
２ １∶１５ ３．５ １００ ８０ ０．５９４ ０．０２１０５ ３１．５０ ０．６３
３ １∶１５ ４．０ １２０ ８５ ０．４６４ ０．０１５９９ １９．５８ ０．３２
４ １∶２０ ３．０ １００ ８５ ０．４８９ ０．０１６９６ ２１．３４ ０．４３
５ １∶２０ ３．５ １２０ ７５ ０．５６１ ０．０１９７６ ２２．９１ ０．４６
６ １∶２０ ４．０ ８０ ８０ ０．４８５ ０．０１６８０ １７．６０ ０．３５
７ １∶２５ ３．０ １２０ ８０ ０．５６３ ０．０１９８４ ２２．７４ ０．４５
８ １∶２５ ３．５ ８０ ８５ ０．４１１ ０．０１３９２ １７．１０ ０．３４
９ １∶２５ ４．０ １００ ７５ ０．６０８ ０．０２１５９ ２６．５３ ０．５３
Ｋ１ｊ １．５２ １．３８ １．１９ １．４９
Ｋ２ｊ １．２４ １．４３ １．５９ １．４３
Ｋ３ｊ １．３２ １．２７ １．３０ １．１６
极差Ｒ ０．３２ ０．１６ ０．４０ ０．３３
优水平 Ａ１ Ｂ２ Ｃ２ Ｄ１
表７ 方差分析
因素 偏差平方和 自由度 Ｆ比 Ｆ临界值 显著性
Ａ ０．０１４ ２ １３．９０ １９．００
Ｂ（误差项） ０．００１ ２ １．００ １９．００
Ｃ ０．０２９ ２ ２８．５０ １９．００ ＊
Ｄ ０．０２１ ２ ２０．６０ １９．００ ＊
２．３ 工艺验证试验
为进一步考察上述最佳工艺条件的稳定性和合理
性，按该工艺条件进行４次重复性试验。由表８可知，求
得提取率的平均值为０．６３％，ＲＳＤ＝１．６１％。说明在此
条件下提取，重复性好，可行性强。
表８ 验证性试验结果
试验序号 １ ２ ３ ４
浸膏质量／ｇ ０．６１７１ ０．５９７６ ０．６２０５ ０．６０１２
吸光度 ０．６８５ ０．７１１ ０．６８８ ０．６９７
提取率／％ ０．６２ ０．６２ ０．６４ ０．６２
３ 结论
该试验通过单因素试验和正交实验对瓦松总黄酮
的索氏提取工艺条件进行了优化。影响瓦松总黄酮提
取的主次因素依次为目数＞乙醇浓度＞料液比＞提取
时间，其中目数及乙醇浓度对提取率的影响有显著性差
异，综合各种因素，选定瓦松总黄酮提取的最佳方案为
Ａ１Ｂ１Ｃ２Ｄ１，即１００目瓦松药粉、料液比１∶１５ｇ／ｍＬ ７５％
乙醇索氏提取３ｈ，在该条件下提取率为０．６３％。该提
取工艺设备简单、稳定、可行，适于工业化生产，将为瓦
松的研究开发提供一定的依据。
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ＷＡＮＧ Ｙａ－ｈｏｎｇ１，ＷＡＮＧ Ｙａ－ｌｉ ２，ＺＨＵ Ｂｏ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｊｉｌｉｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｊｉｌｉｎ，Ｊｉｌｉｎ １３２０２２；２．Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ Ｅｍｅｒｇｅｎｃｙ
Ｃｅｎｔｅｒ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ，Ｊｉｌｉｎ １３００００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ａｎｄ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍＯｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｆｉｍｂｒｉａｔｕｓ（ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｙ
ａｖａｉｌａｂｌｅ），ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗｅｒｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｆａｃｔｏｒｓ ｌｉｋｅ
ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｄｉｏ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ，ｐｏｗｄｅｒ ｍｅｓｈ ａｎｄ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ ｕｐｏｎ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｂｙ Ｓｏｘｈｌｅｔ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ １∶１５ｇ／ｍＬ ｏｆ ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ，３ｈｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ，１００ｍｅｓｈｅｓ ｏｆ Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓｆｉｍｂｒｉａｔｕｓｐｏｗｄｅｒ，７５％ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｉｎ ｔｈｉｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗａｓ ０．６３％．Ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｓｔａｂｌｅ ａｎｄ ｅｆｉｃｉｅｎｔ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｆｉｍｂｒｉａｔｕｓ；ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；Ｓｏｘｈｌｅｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
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