全 文 ：3O 药物分析杂志
m e t ho d ha s h ig h s en s i t i v i ty
,
g o o d r e a p p e a r a n e e a n d t h e a v e r a g e r e e l a m a t io n r a t e 15 1 0 2
·
2 7 %
( n = 6 )
,
R S D = 3
.
1 9%
.
I t h a s b e e n a p P l i e d t o d e t e C t t h e p r o e e s s e d C i n n a b a r u s e d b y s e v e r a l f a e
-
t o r ie s a n d h o s p i t a l s o f G u i z h o u
,
H u n a n a n d eB iii
n g
,
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.
T h e r e s u l t s h o w s t h a t t h e d is s o l u b le
m e r e u r y s a l t i n p r o e e s s e d e i n n a b a r d i s s o l v e s m a i n l y in t h e a r t i f i e ia l g a s t r ie ju i e e w h i l e v e r y ! i t t le
i n t h e a r t i f i e i a l i n t e s t i n a l i u i e e
.
A n d i t a l s o s h o w s t h a t t h e w a y s o f p r o e e s s i n g e in n a b a r a r e d i f
-
f e r e n t
,
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t h e e o n t e n t o f t h e d i s s o l u b le m e r e u r y s a l t a r e d i f f e r e n t
.
A n d w e e a n g e t d is s o l u b l e
m e r e u r y s a l t w i t h h i g h e o n t e n t w i t h t h e b a l l m i l l m e t h o d w h i l e w i t h t h e r e f i n i n g d r u g
s w i t h w a
-
t e r w e e a n g e t i t w i t h lo w e o n t e n t
.
K e y w o r d s
: a t o m i e a b s o r p t i o n s P e e t r o m e t r y (A A S )
,
p r o e e s s e d e i n n a b a r
,
d i s s o l u b l e m e r e u r y
s a l t
,
a r t i f i e i a l g a s t r i e ju i e e
,
a r t i f i e i a l i n t e s t i n a l iu ie e
薄层荧光色谱内标法测定湖北山植中
熊果酸的含量
张立群
(湖北省药品检验所
何
武汉 4 3 0 0 6 4 )
本文采用薄层荧光色谱内标法测定湖北山檀 C ar at e g .vu 从功 e h 。 : 5 15 S a r g . 中熊果酸的含量 , 以
人参二醇作内标物 . 甲苯 一醋酸乙酷一醋酸 ( 1 2 , 5 , .0 6) 作展开剂 , 喷以 10 % 硫酸乙醇溶液 , 在激发
波长 3 6 5 n m 处 , 用单波长荧光反射法进行线性扫描测定 。 回收率为 10 . 76 % , R s D 一 2 . 14 % (n 一 3 ) 。
该方法灵敏 、 准确 。
关健词 ; 湖北山植 熊果酸 薄层荧光扫描
湖北山檀为蔷薇科植物湖北 山植 C r a t ae -
g u : h uP he en is
、
s a gr
. 的干燥成熟果实 , 其主
要化学成分为三枯酸 、 有机酸及黄酮类 , 在民
间广泛作为山植药用 。 本文用薄层荧光色谱内
标法测定了湖北山植中主要化学成分熊果酸
的含量 , 并与北山植 、 南山植进行了比较 , 为
该品种的质量评价及药用价值提供实验依据 。
实验部分
1 仪器与药品
c s
一
9 30 双波长薄层扫描仪 (岛津 ) , 薄层
自动涂铺器 (C A M A G 、 瑞士 ) , S P U 一 1 薄层 自
动喷雾器 (岛津 ) , 微量定量毛细管 ( D ur m -
m o n d 美国 ) 。
对照品熊果酸 ( u r s o l i e a e id ) 、 内标物人参
二醇 ( p a n a x ad io l) 均 由中国药品生物制品检
定所提供 , 所用试剂 、 试药均为分析纯 。
北山植 ( c r a t a e g u s P i ,: n a t if d a B g e · v a r ·
m
aojr
N
.
E
.
Br
.
) 为武汉市售品 ; 南山植
( cr
a t a e g u : : u n e a t a S i e占. e t Z u c c ) 购 自湖北省
随 州 市 ; 湖北 山植 ( C ar t a e g u s h uP e h e n s i s
S a gr
.
) 购自湖北宜昌县 、 兴山县及湖北省中
药材公司 。 以上药材样品均经本所中药室鉴
定 。
2 实验条件
2
.
1 薄层板的制备 取硅胶 G (青岛海洋化
工厂 ) , 加人 0 . 2 %梭甲基纤维素钠溶液 ( :l
, 同济医科大学药学系 8 级毕业生
DOI : 10. 16155 /j . 0254 -1793. 1995. 01. 008
1 5 ( 1 )
,
1 9 9 5
3) 调匀 , 自动薄层铺板器制板 , 薄层厚度
0
.
3m m
, 室温干燥后 , 10 5 C 活化 hl , 贮存于
干燥器中备用 。
2
.
2 展开剂的选择 经选用 甲苯一醋酸乙酷 -
醋酸 (1 2 , 4 , 0 · 5 ) 、 石油醚一氯仿一醋酸 (1 O ,
1 0 , 2 )
、 石油醚 一苯一醋酸乙醋一醋酸 ( 10 : 20 :
7 , 0
.
5)
、 环己烷 一氯仿 一醋酸乙醋 (2 o , 5 , 8)
等溶剂系统 , 结果以甲苯 一醋酸乙醋一醋酸 ( 12
: 4 : 0
.
5) 分离效果较好 。 取该系统进行正交
试验设计 , 确定本文 以甲苯一醋酸乙醋一醋酸
(1 2
: 5 : 0
.
6) 为展开系统为宜 , 其可使斑点
圆整 、 R f 值适中 、 对照品与内标物完全分离 、
供试品色谱中内标物处无杂质斑点干扰 。
2
.
3 显色剂的选择 分别选用 10 %磷钥酸
无水 乙醇溶液及 10 %硫 酸无 水 乙醇溶 液显
色 , 且均进行可见光区 、 紫外光区扫描测定及
汞灯数条强发射谱线的光谱测定 。 结果 10 %
硫酸无水 乙醇溶液喷雾后 1 05 ` C加热至斑点
明显 , 放冷后进行荧光扫描测定 , 对照品与内
标物在 3 6 5n m 波长处均产生强烈的黄绿色至
淡蓝绿色荧光 , 检出灵敏度高 、 荧光色泽稳定 ,
见图 1 。
5 0 8 0 1 1 0 n l . 1
图 1 供试液薄层 扫描 图谱
1
. 熊果酸 2 . 人参二醇
(纵坐标 : 荧光强度 )
4 内标物的选择 经选用甘草次酸 、 去氧
胆酸 、 人参二醇等三菇类物质 , 结果人参二醇
与对照品分离度好 、 荧光色泽基本一致 、 供试
品中无其他成分干扰 。
2
.
5 仪器参数 单波长荧光反射法线性扫
描 , 激发波长 久s 一 3 6 5n m , 滤光片 3 号 , 狭缝
Z X 7m m
, 峰检出信号 : 峰高 , 漂移线 .0 03 、 步
进距离 .0 05 、 背景补偿及线性化器 : 关 。
.2 6 含内标物的对照品溶液的制备 分别用
无水乙醇制得 1 . 20 m g /m l 熊果酸对照品溶液
及 1 · Om g / m l人参二醇内标物溶液 。 另精密吸
取对照品溶液 0 · 6 、 0 . 8 、 1 . 0 、 1 . 2 、 1 . 4 m l , 分
别精密加人内标物溶液 1 . o m l , 再分别精密加
无水乙醇至 2 . sm l , 即得 (每 l m l 中各含熊果
酸 对 照 品 0 . 2 8 8 、 0 . 3 8 4 、 0 . 4 8 0 、 0 . 5 7 6 、
0
.
6 7 2 m g
, 各含人参二醇内标物 o · 4 m g ) 。
3 稳定性试验
取 .0 4 8 om g / m l 的含内标物 的对照品溶
液 2川 , 点于薄层板上 , 展开 , 喷雾 , 加热后
放冷 , 每隔 Zo m in 扫描测定 1 次 , 以对照品与
内标物的峰高比值为纵坐标 , 时间为横坐标 ,
绘制稳定性曲线 。 结果表明斑点荧光约 s om in
后稳定 , 稳定时间约 h2 , 完全满足实验要求 。
4 线性范围测定
取含内标物的对照品溶液各 2川 , 分别点
于同一块薄层板上 , 照上述实验条件测定 , 展
距 1c4 m , 以对照品与内标物浓度比值为横坐
标 , 对照品与内标物峰高比值为纵坐标 , 绘制
标准曲线 。 对照品与 内标物浓度比值在 .0 72
一 L 68 范围内 , 线性关系良好 。 回归方程为 :
y = O
·
9 9 5 x 一 0 . 0 7 4 7 r = 0 . 9 9 9 4
5 校正因子的测定及精密度试验
取 3 个不同浓度的含内标物的对照品溶
液各 2川 , 分别点于 3 块薄层板上 , 每块板点
相 同浓度的 5一 10 个点 , 照上述实验条件测
定 , 计算校正因子 , 见表 1 。
测定结果表明 , 用不同浓度的含 内标物的
对 照品溶液测定的校正因子相近 (平均值为
l
·
18
,
R S D 为 3 · 2 3% , n = 2 0 ) 板 内及板 f’ul 差
异较小 , 结果较稳定 。
药物分析杂志
表 1 校正因子的测定 (n 一 5)
板 号 对照品浓度
( m g / m l )
平均值 RS D
( % )
1 0
.
38 4 1
.
1 8 3
.
0 0
2 0
.
4 8 0 1
.
2 0 3
.
0 6
3 0
.
5 7 6 1
.
1 8
“
3
.
5 6
. n = 10
6 回收率侧定
取湖北山植 、 粉碎成细粉 , 过 80 目筛 , 精
密称取约 0 . 5 9 , 共取 3 份 , 各精密加人熊果酸
对照品一定量 , 另取上述湖北山植粉末约 19 ,
精密称定 , 分别置索氏提取器中 , 照样品测定
项下的方法制成供试液 , 测定含量 , 计算回收
率 , 见表 2 。
表 2 回收率测定 (n ~ 3)
样品含量 加样量 测得量 回收率
( m g ) ( m g ) ( m g ) ( % )
2
.
5 5 0 1
.
0 4 7 3
.
6 53 1 0 1
.
5 6
2
.
5 5 9 2
.
0 94 4
.
5 5 1 9 7
.
8 1
2
.
5 8 4 3
.
1 4 1 5
.
8 9 0 1 02
.
8 8
7 样品测定
取 山植细粉 (过 80 目筛 ) 约 19 , 精密称
定 , 置索氏提取器中 , 加乙醚 1 0 m l , 回流提
取 4h , 提取液回收乙醚 , 残渣用石油醚 ( 30 ~
60 C ) 浸泡 2 次 , 每次 15 m l , 弃去石油醚 , 残
留物加无水乙醇一氯仿 ( 3 , 2) 适量使溶解 , 定
量移至 l o m l 容量瓶中 , 精密加人 1 . o m g /m l
的人参二醇内标物溶液 4 . o m l , 用无水乙醇 -
氯仿 (3 : 2) 稀释至刻度 , 摇匀 , 作为供试品
溶液 。吸取供试品溶液与含内标物的对照品溶
液各 2川 , 分别点于同一块薄层板上 , 以甲苯
一醋酸乙醋一醋酸 l( 2 : 5 : 0 . 6) 为展开剂 , 展
开约 4I c m , 取出 , 晾干 , 喷以 10 %硫酸无水
乙醇溶液 , 10 5℃加热至斑点明显 , 室温放置
80 m in
, 进行荧光扫描测定 。 测定校正因子 , 计
算含量 。 购自湖北省中药材公司 、 宜昌县 、 兴
山县 的湖北山植含量 ( % ) 分别为 0 . 3 6 9 、
0
.
4 3 4
、
0
.
4 7 6
, n = 2 ;南山植 、 北山植含量 (% )
分别为 0 . 4 3 2 、 0 · 5 1 8 , n = 2 。
结果与讨论
l 本文结果表明 , 购自省中药材公司的湖北
山植 (产地不明 ) 含量较低 , 购自宜昌县 、 兴
山县的山植与南山植含量相近 ,北山植含量较
高。
2 本文采用与对照品结构相类似的三枯类化
合物作内标物 , 使薄层展开后 R f 值适当接近
且完全分开 , 喷雾加热后二者荧光色泽相近 ,
用内标荧光法测定 , 减少了点样误差 , 提高了
检测的灵敏度及精密度 。
3 喷雾加热后 ,对照品即产生较稳定的荧光 ,
内标物荧光约 h1 后稳定 ,荧光稳定后测定 , 误
差较小 。
4 本文校正因子的测定主要是考察方法的精
密度 , 测定样品时 , 应将含内标物的对照品溶
液与样品溶液点于同一块薄层板上 , 用同一块
薄层板含内标物的对照品溶液的校正因子计
算含量 , 可以减少因板间差异及喷雾 、 加热等
实验操作的不平行而引起的实验误差 ,较大地
提高了测定结果的准确性 。
参考文献
何心亮 . 北 山植与南山植化学成分的比较 . 中草药 ,
19 9 0
,
2 1 ( 4 )
: 4
中国医学科学院药物研究所 . 中药志 . 第三册 . 人民卫
生出版社 , 1 98 4 . 1 4 6
( 本文于 1 9 9 3 年 2 月 2 4 日收到 )
1 5 ( l)
,
1 9 9 5
T L C D e t e r m i n a t i o n o f U r s o l i c A e id i n
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e h e n s i s S a 塔 , h a s b e e n d e t e r m i n e d b y T L C 一 f l u -
o r e s e e n e e s e a n n in g
.
U s in g p a n a x a d i o l a s in t e r n a l s t a n d a r d
,
t h e s a m p l e w e r e d e v e l o p e d w it h
t o l u e m e
一 e t h y l a e e t a t e
一 a e e t ic a e id ( 1 2
: 5 : 0
.
6 ) a n d s p r a y e d w i t h 1 0 % s u l f u r i 。 a e id in e t h a n o l
,
t h e p la t e w a s s e a n n e d a t 3 6 5 n m i n t h e f l u o r e s e e n e e l i n e a r s e a n m o d e
.
T h e a v e r a g e r e e o v e r y w a s
1 0 0
.
8 %
,
R S D = 2
.
1 4 % ( n = 3 )
.
T h e m e t h o d 15 s e n s i t i v e a n d a e e u r a t e
.
K e y w o r d s : C ar t a e g u s h uP
e h e n s i s S a 塔 , U r s o l ie a e id , T L C 一 f l u o r e s e e n e e s e a n n i n g
北五味子及其制剂三等丹胶囊中五味子乙素的
薄层光密度法测定
赵 恒 徐景仁 刘瑞玲
(北京市药物分析研究所 1 0 0 0 3 5 )
本文报道了用薄层光密度法测定北五味子及其制剂三荃丹胶囊中五味子 乙素的含量 。 样品用乙醚
回流提取 2h , 过中性氧化铝柱后用硅胶 G F 25 。板 , 以石油醚 ( 30 ~ 60 C ) 一 甲酸乙酷一 甲酸 ( 1 5 , 5 , l)
为展开剂进行薄层层析 ; 耘~ 2 54n m 、 入, 一 4 o on m 进行反射法锯齿扫描 。 本法灵敏度高 , 重现性好 。
关键词 : 三荃丹 五味子 五味子乙素 薄层光密度法
三荃丹系由北五味子 、 黄蔑 、 虎杖等 2 味
药材制成的复方制剂 , 用于治疗慢性迁延性 、
活动性肝炎 , 北五味子是其中君药之一 。 关于
北五味子药材中五味子乙素的含量测定 ,有高
效液相色谱法 〔`〕及薄层光密度法 〔 2〕 。 本文针对
三荃丹胶囊剂型和药味的特点 ,采用薄层光密
度法 , 测定 了三 荃丹胶囊及北 五味子药材
( S e 人i s a n d ar 。 h i n e n 。 15 ( T u r e : ) B a i l l . ) 中五味
子乙素的含量 。
实验部分
1 仪器 、 试样
日本岛津 C S 一 9 10 型双波长薄层扫描仪 。
五味子乙素 : 中国药品生物制品检定所提
供 。三荃丹胶囊 : 北京生化免疫制剂中心提供 。
北五味子 : 北京生化免疫制剂中心提供 , 由本
文作者鉴定 。
试剂 : 石油醚 ( 30 一 60 C ) 、 甲酸乙酷 、 甲
酸 、 甲醇 , 均为分析纯 。
硅胶 G F 25 ; : 青岛海洋化工厂 。 中性氧化
铝 ( 1 0 一 1 20 目 ) : 上海五四农场化学试剂厂 。
2 薄层色谱条件
2
.
1 薄层 板 制备 取硅 胶 G F 2 5; 与 0 . 5%
C M C
一
N a 溶液按 1 , 3 ( g / m l) 混合 , 研磨后用
自动铺板器制成厚 .0 3 m m 的 10 x 20 c m 薄层