全 文 ：现代医药卫生 2012年9月15日 第28卷第17期 J Mod Med Health，September 15，2012，Vol.28，No.17
表 1 因素水平表
水平
1
2
3
70
80
90
各种因素
A（温度，℃） B（乙醇，%） C（料液比，∶）
60
70
80
1 ∶ 20
1 ∶ 30
1 ∶ 40
凹叶景天（sedum emarginatum migo）为景天科景天属植物，性
味平，味微酸，具有清热、解毒、利尿、平肝的功效，用于治疗痢疾、
肝炎、疮毒、跌打损伤、血崩、吐血、便血、月经过多、创伤出血、带
状疱疹等症 [1]，广泛分布于陕西、甘肃、河南、安徽等省区，民间应
用广泛，野生资源十分丰富。有关凹叶景天组织结构特征 [2]、生理
活性成分 [3]、生药鉴定 [4]、含量测定 [5]等已有报道。但未见凹叶景天
总黄酮提取工艺研究的报道。为进一步利用该药物资源，本研究
对其黄酮类成分进行提取工艺的优化，为该品种的深入研究、开
发及推广应用提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料 仪器为 TU-1900 双光束紫外可见分光光度计 （北京
普析通用仪器有限公司）、电子天平（北京赛多利天平有限公司）、
RE52-98 型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器）等。凹叶景天采自杭
州天目山，经浙江中医药大学姚振生教授鉴定；芦丁对照品购自
中国药品生物制品检定所（批号为 100080-200707）；试剂均为分
析纯。
1.2 方法
1.2.1 总黄酮含量测定 [6] 精密称取 105 ℃干燥恒质量的芦丁对
照品 10.9 mg，加 50%乙醇溶解定容于 50 mL 容量瓶，得浓度为
0.218 mg/mL 对照品溶液。精密吸取对照品溶液 1.0、2.0、3.0、4.0、
5.0、6.0 mL，分别置 25 mL 容量瓶中，各加水至 6 mL；加 5%亚硝
酸钠（NaNO2）1.0 mL，摇匀，放置 6 min后加 10%氢氧化铝[Al（OH）3]
1.0 mL，摇匀，放置 6 min 后再加 10%氢氧化钠（NaOH）10 mL，加
50%乙醇稀释至 25 mL，混匀，静置 15 min，同行试剂作空白，于
510 nm 处测定吸光度值，以吸光度值为纵坐标，以芦丁浓度为横
坐标，绘制标准曲线。
1.2.2 凹叶景天总黄酮的提取工艺 取凹叶景天全草 5 g，根据
表 1 进行试验，见表 1。取 L9（34）正交设计进行浸提 2 次，每次 1 h，
提取后合并醇提液过滤，减压回收乙醇，趁热过滤，加 50%乙醇
定容至 250 mL，摇匀，作为供试品溶液。精密移取 0.3 mL 供试品
溶液，测定总黄酮含量，计算总黄酮提取得率。
2 结 果
2.1 回归方程 Y=0.6479X-0.0477，r=0.9993。表明芦丁在 0.218~
1.308 mg 范围内线性关系良好。
2.2 总黄酮提取 见表 2、3。
通讯作者：陈京（E-mail：cj00123@zjtcm.net）。
正交试验优选凹叶景天中黄酮的提取工艺
马若寒，陈 京（浙江中医药大学生物工程学院，浙江 杭州 310053）
【摘 要】 目的 优化凹叶景天中黄酮的提取工艺。 方法 以总黄酮含量为考察指标，采用正交实验法考察提取
温度、料液比、乙醇浓度 3 个因素对提取工艺的影响。 结果 凹叶景天的最佳提取工艺为加 20 倍量 70%乙醇，于 90 ℃浸
提 2 次，每次 1 h，在此条件下，总黄酮提取率为 14.1%。 结论 该提取工艺简单、操作简便、重复性好，可用于凹叶景天中
总黄酮的提取。
【关键词】 景天科； 正交试验； 黄酮； 工艺学； 制药； 凹叶景天
文章编号： 1009-5519（2012）17-2656-02 中图法分类号： R284.2 文献标识码： B
表 2 正交试验结果
组别
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
R
1
1
1
2
2
2
3
3
3
8.457
11.867
13.300
4.843
A
1
2
3
1
2
3
1
2
3
10.110
12.260
11.253
2.150
B
1
2
3
2
3
1
3
1
2
10.810
11.193
11.620
0.810
C
6.730
9.580
9.060
10.900
13.100
11.600
12.700
14.100
13.100
提取率（%）
-
注：-表示无数据。
[2] 马绪荣，苏德模. 药品微生物学检验手册[M]. 北京：科学出版社，2000：
89-90.
[3] 中国药品生物制品检定所 . 中国药品检验标准操作规范[M]. 北京：
中医药科技出版社，2010：351-407.
[4] 高雷，孟祥云，陈进. 乳疾 2 号微生物限度检查方法学验证[J]. 中医
药临床杂志，2011，23（3）：261-262.
[5] 汤慧 . 益母草化瘀颗粒微生物限度检查方法学验证 [J]. 安徽医药，
2009，13（9）：1040-1041.
[6] 陈德坚，黄春新，陈萍，等. 新磺棕小儿止咳合剂微生物限度检查方
法的研究[J]. 海南医学，2010，38（2）：8-10.
[7] 郭朝晖，何晓英，欧阳晓玫. 当归腹宁滴丸微生物限度检查法的建立[J].
中国药房，2009，20（3）：213-214 .
[8] 高雷，张平，程钢，等. 黄蜀葵花口腔溃疡膜微生物限度检查方法学
验证[J]. 中国药房，2009，20（15）：1177-1179.
[9] 任永红，冯邵华. 龟鹿二胶丸微生物限度检查方法学验证[J]. 现代医
药卫生，2009，25（2）：199-201.
[10] 寻纠纠. 病毒消口服液微生物限度检查方法验证[J]. 现代医药卫生，
2006，22（17）：2687-2688.
（收稿日期：2012-05-09）
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现代医药卫生 2012年9月15日 第28卷第17期 J Mod Med Health，September 15，2012，Vol.28，No.17
3 讨 论
根据正交实验，从方差分析结果得出，凹叶景天中黄酮提取
含量的影响因素主次顺序依次为浸提温度、乙醇浓度、液料比。分
析结果并结合生产实际，确定最佳提取工艺为 A3B2C1，即优化后
的生产工艺条件为加 20 倍量 70%乙醇，在 90 ℃浸提 2 次，每次
1 h，在该条件下，总黄酮提取率为 14.1%。
凹叶景天具有清热、解毒、利尿、平肝的功效，在中国土家族
地区广泛用于肝炎的治疗，而同属植物药垂盆草为治疗肝炎要
药 [7-8]，国外也有不少研究与应用报道 [9-10]。故有理由推断，凹叶景
天治疗肝炎等作用有深入研究及推广应用的重要价值，值得进一
步研究。
参考文献
[1] 万定荣． 垂盆草及其同属（景天属）药用种的民族医疗应用[J]． 时珍
国医国药，2007，18（8）：1853-1855．
[2] 程艳芹，梁东升，詹亚华 ． 凹叶景天组织结构特征研究[J]． 时珍国医
国药，2000，11（4）：314-315．
[3] 乔剑峰，胡伟，李祖光，等． 凹叶景天的生理活性成分研究[J]． 浙江科
技学院学报，2003，15（S1）：26-28．
[4] 徐燃，万定荣，赵莉，等． 凹叶景天的生药鉴定研究[J]． 中药材，2008，
31（5）：660-662．
[5] 吕飞，翁德会，吴士筠，等． HPLC 法测定凹叶景天中槲皮素和异鼠李
素含量[J]． 化学与生物工程，2009，26（8）：91-94．
[6] 严云良，吕佩惠，余陈欢． 响应面分析法优化小鱼仙草总黄酮的提取
工艺研究[J]． 数理医药学杂志，2010，23（2）：194-197．
[7] 徐立群，徐晓燕，徐华庆． 垂盆草冲剂治疗慢性乙型病毒性肝炎疗效
观察[J]． 现代医药卫生，2002，18（11）：1009．
[8] 潘金火，潘萍． 垂盆草总黄酮的保肝降酶作用及其化学成分的鉴别
研究[J]． 时珍国医国药，2010，21（8）：1930-1934．
[9] Kang TH，Pae HO，Yoo JC，et al. Antiproliferative effects of alkaloids
from Sedum sarmentosum on murine and human hepatoma cell lines[J].
J thnopharmacol，2000，70（2）：177-182．
[10] Ninomiya K，Morikawa T，Zhang Y，et al. Bioactive constituents from
Chinese natural medicines，育 ，Absolute structures of new megastig-
mane glycosides，sedumosides A（4），A（5），A（6），H and I， and hepato-
protective megastigmanes from Sedum sarmentosum[J]. Chem Phram Bull，
2007，55（8）：1185-1191．
（收稿日期：2012-05-16）
表 3 方差分析
方差来源
A
B
C
37.140
6.943
0.985
离差平方和
2
2
2
自由度
150.976
28.224
4.004
方差
<0.05
<0.05
P
复方银杏通脉胶囊是由银杏叶、三七、川芎等药物组成的复
方制剂，其中银杏叶为该方的君药，其来源为银杏科植物银杏的
干燥叶，主要有效成分为黄酮类和萜内酯类等化合物，具有扩张
血管，降低阻力，增加血流量，防止缺血、缺氧及脑水肿，促进脑细
胞功能恢复，减少血栓性脑缺血面积，改善梗死和血栓性脑缺血
所致行为障碍等功能 [1]。本研究采用高效液相色谱法（HPLC）对复
方银杏通脉胶囊中总黄酮醇苷含量进行测定，结果表明该法灵
敏、快速、简便、准确、重现性好，可用于该制剂的质量控制。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药 Agilent-1100高效液相色谱仪 （美国安捷伦公
司， 包括 Agilent-1100 系列四元泵、VWD 检测器、Chemstation 色
谱工作站）；槲皮素对照品（批号：100081-200406）、山柰素对照品
（批号：110861-200002）、异鼠李素对照品（批号：0860-200103，中
国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯，水为重
蒸馏水；复方银杏通脉胶囊为河南省漯河市第二人民医院自制。
1.2 方法
1.2.1 色谱条件 色谱柱为 Agilent Eclipse XDB-C18 （4.6 mm×
150mm，5μm）柱，流动相为甲醇 ∶ 0.4％磷酸（65 ∶ 35），柱温30℃，
流速 1.0 mL/min，检测波长 360 nm，进样量 10 μL。
1.2.2 对照品溶液的配制 分别精密称取槲皮素、山柰素、异鼠
李素对照品适量，加甲醇溶解配制成每毫升分别含 0.10、0.08、
0.04 mg 的混合溶液，摇匀，用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，取滤液，作
为对照品溶液。
1.2.3 供试品溶液的制备 取装量差异项下的样品内容物，混合
均匀，称取适量（约相当于由银杏叶提取物 35 mg），精密称定，加
甲醇 ∶ 25％盐酸（4 ∶ 1）溶液 25 mL，水浴加热回流 30 min，迅速冷
却至室温，以甲醇定量转移至 50 mL 量瓶中并稀释至刻度，摇匀，
用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
1.2.4 阴性供试品溶液的制备 按处方比例及工艺制备不含银
杏叶的阴性样品，混合均匀，精密称取适量（与供试品称取质量相
同）照“1.3.2”项下方法制备阴性对照溶液。
高效液相色谱法测定复方银杏通脉胶囊中总黄酮醇苷的含量
于耀杰 1，王卫峰 2，郭跃来 2（1. 漯河市第二人民医院，河南 漯河 462000；2. 漯河市万祥街社区卫生服务
站，河南 漯河 462000）
【摘 要】 目的 建立复方银杏通脉胶囊中总黄酮醇苷含量的测定方法，为制剂质量控制提供依据。 方法 采用
高效液相色谱法（HPLC），选用 Agilent Eclipse XDB-C18柱，以甲醇 ∶ 0.4％磷酸（65 ∶ 35）为流动相，柱温 30 ℃，流速 1.0 mL/
min，检测波长 360 nm。 结果 槲皮素、山柰素、异鼠李素分别在 8.0～96.0 μg/mL、7.7～92.6 μg/mL、5.6～69.4 μg/mL 内峰面
积与浓度呈良好的线性关系， 所测定 3 个批号的复方银杏通脉胶囊中总黄酮醇苷平均含量为 10.76 mg/g。 结论 该法
快速、准确、重复性好，适用于复方银杏通脉胶囊的质量控制。
【关键词】 复方； 活血祛瘀剂/分析； 胶囊； 银杏； 色谱法，高压液相； 槲皮素； 山柰素； 异鼠李素
文章编号： 1009-5519（2012）17-2657-02 中图法分类号： R284.2 文献标识码： B
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