全 文 ：江西农业学报　2008, 20(4):26 ～ 29ActaAgriculturaeJiangxi
福建山樱花试管苗生根条件的优化
邹娜 1 ,徐楠 1 ,曹光球2 ,林思祖2＊ ,林庆良 3
　 　收稿日期:2007-12-26
基金项目:福建省科技厅重大专项前期研究项目(2005NZ1020)。
作者简介:邹娜(1982-),女 ,河南南阳人 ,在读硕士,从事园林植物生物技术研究。 ＊通讯作者:林思祖。
(1.福建农林大学园林学院 ,福建福州 350002;2.福建农林大学 林学院 ,福建福州 350002;
3.福建农林大学 园艺学院 ,福建 福州 350002)
摘　要:采用 L
8
(4×24)正交设计 ,分析 IBA、基本培养基 、蔗糖 、活性炭 4个因素以及暗培养对福建山樱花试管苗生根的
影响。结果表明 IBA、基本培养基 、活性炭及暗培养是影响试管苗生根的主要因素 ,福建山樱花试管苗较佳生根条件为 1/2MS
+IBA0.6 mg/L十蔗糖 15 g/L,暗培养 4d。
关键词:福建山樱花;试管苗;组织培养;生根;正交设计;暗培养
中图分类号:Q949.751.8　文献标识码:A　文章编号:1001-8581(2008)04-0026-04
OptimizationofRootingConditionofPrunuscampanulataCuvetePlantlet
ZOUNa1 , XUNan1 , CAOGuang-qiu2 , LINSi-zu2＊ , LINQing-liang3
(1.ColegeofLandscape, FujianAgriculturalandForestryUniversity, Fuzhou350002, China;
2.CollegeofForestry, FujianAgriculturalandForestryUniversity, Fuzhou350002, China;
3.CollegeofHorticulture, FujianAgriculturalandForestryUniversity, Fuzhou350002, China)
Abstract:TheorthogonaldesignL8(4 ×24)wasusedtoanalyzetheefectsofIBA, basalmedium, sucrose, ACandthedark-nesscultureonrootingofPrunuscampanulatacuvetteplantlet.TheresultsshowedthatIBA, basalmedium, ACanddarknessculture
werethemaininfluentialfactorsonrooting.TheoptimalconditionforrootingofPrunuscampanulatacuveteplantletwas1 / 2 MS+
0.6 mg/LIBA+15 g/Lsugarinthedarknessfor4 days.
Keywords:Prunuscampanulata;Cuvetteplantlet;Rooting;Orthogonaldesign;Darknessculture
　　福建山樱花(Prunuscampanulata)属蔷薇科樱属落
叶乔木 , 冬末春初开花 ,先花后叶 ,花色浓艳且呈钟状下
垂性开展 ,观赏价值极高 。随着园林化城市的建设 ,作为
我国冬、春季重要观赏花木 ,樱花越来越受到园林工作者
的青睐 。但由于福建山樱花种子具有深度休眠特性且收
集贮藏困难以及扦插繁殖技术不成熟[ 1] ,各种规格的苗
木生产远不能满足市场需求 ,因此采用组织培养技术快
速繁殖福建山樱花就成为重要的良种繁育途径 。福建山
樱花属于离体生根困难植物 ,培养基中高浓度 NAA或
NAA和 IBA的配合使用易使基部愈伤化严重 ,影响生根
质量和新梢的正常生长 ,已成为工厂化育苗的瓶颈。尽
管福建山樱花离体快繁已有少量报道[ 2 , 3] ,一般是利用
传统方法进行激素种类和浓度的配比试验 ,工作量相当
大且繁殖效果不理想。有鉴于此 ,本文采用正交设计 ,以
IBA作为生根促进剂 ,对福建山樱花试管苗生根培养基
中各成分(基本培养基、IBA、蔗糖 、活性炭)及用量进行
筛选 ,在此基础上 ,研究不同暗培养天数对组培苗生根的
作用效果 ,旨在为优化福建山樱花试管苗生根条件 ,从而
为微繁的推广应用提供根据。
1　材料与方法
1.1　试验材料　2006年 8月 ,从福州桐口林场福建山樱
花种质资源库采集当年生生长健壮、无病虫害的夏梢茎
段作为外植体 ,培养室内进行腋芽的诱导并不断增殖。
生根试验以继代 10次(F10)的福建山樱花试管苗 ,选择
生长健壮、高度大于 1.0 cm的顶梢为试验材料。
1.2　研究方法
1.2.1　福建山樱花试管苗生根培养基的筛选　采用
L8(4 ×24)正交试验设计 ,研究 IBA、蔗糖、基本培养基、
活性炭 4个因子对福建山樱花试管苗生根的影响。 IBA
取 4个水平 ,其他 3因素各取 2个水平 ,共 8个处理 ,每
个处理 2次重复 ,各因子及水平安排见表 1。接种后第
20 d统计生根率、平均根数、平均根长等指标 ,在综合评
价的基础上 ,筛选出福建山樱花试管苗较佳生根配方。
表 1　福建山樱花试管苗生根配方的正交设计
处理 IBA(mg/L)
基本培
养基
蔗糖
(g/L)
活性炭
(g/L) 空白
1 0.2 MS 15 0 1
2 0.2 1 /2MS 30 0.5 2
3 0.6 MS 30 0.5 1
4 0.6 1 /2MS 15 0 2
5 1 MS 15 0.5 2
6 1 1 /2MS 30 0 1
7 1.4 MS 30 0 2
8 1.4 1 /2MS 15 0.5 1
1.2.2　暗处理时间的筛选　以正交设计筛选出的较好
配方为福建山樱花试管苗生根培养基 ,采用单因素试验
设计 ,研究不同暗培养时间(0、4、7、10 d)对生根的影响 ,
共 4个处理 ,每处理 3次重复。经过初期不同天数的暗
培养之后 ,再转入光周期为 12 h/d,光强 2000 lx的光照
条件下培养。在第 20 d进行各指标的统计 。
2　结果与分析
接种在生根培养基上的福建山樱花试管苗 ,在第 7d
开始有根的分化 。在第 20 d,对试管苗在 8种培养基上
的生根情况进行统计分析 ,见表 2。
表 2　福建山樱花试管苗生根正交试验结果的极差分析
处理 IBA(mg/L)
基本培
养基
蔗糖
(g/L)
活性炭
(g/L)
A生根率 (%)
Ⅰ Ⅱ
B平均主根数 (条 /株)
Ⅰ Ⅱ
C平均主根长(cm)
Ⅰ Ⅱ
1 0.2 MS 15 0 9.09 14.29 1 3.86 1.5 2
2 0.2 1 /2MS 30 0.5 10.53 16.67 1.5 2.5 0.7 0.78
3 0.6 MS 30 0.5 25 20 2.33 1.5 3.83 2
4 0.6 1 /2MS 15 0 61.11 81.25 3.55 4.62 2 1.3
5 1 MS 15 0.5 16.67 18.75 2 3.33 1.33 1
6 1 1 /2MS 30 0 62.5 58.82 9.5 4.9 2.5 1.15
7 1.4 MS 30 0 46.67 50 10.3 10.8 1 1.1
8 1.4 1 /2MS 15 0.5 50 21.43 2.4 2.67 1.4 1.44
KA1 50.58 236.73 280.41 348.48 TA=562.78;RA排序:活性炭>IBA>基本培养基>蔗糖
KA2 187.36 333.70 290.02 221.95
KA3 156.74
KA4 168.1
kA1 12.65 29.59 35.05 43.56
kA2 46.84 41.71 36.25 27.74
kA3 39.19
kA4 42.03
RA 34.20 12.12 1.20 15.82
RA 21.76 17.21 1.71 22.46
KB1 8.86 35.12 23.43 48.53 TB=66.76;RB排序:活性炭>蔗糖 >IBA>基本培养基
KB2 12 31.64 43.33 18.23
KB3 19.73
KB4 26.17
kB1 2.22 4.39 2.93 6.07
kB2 3 3.96 5.42 2.28
kB3 4.93
kB4 6.54
RB 4.34 0.44 2.49 3.79
RB 2.75 0.62 3.53 5.38
KC1 4.98 13.76 11.97 12.55 TC=25.03;RC排序:IBA>基本培养基 >蔗糖>活性炭
KC2 9.13 11.27 13.06 12.48
KC3 5.98
KC4 4.94
kC1 1.25 1.72 1.50 1.57
kC2 2.28 1.41 1.63 1.56
kC3 1.50
kC4 1.24
RC 1.05 0.31 0.14 0.01
RC 0.67 0.44 0.19 0.01
　注:A、B、C分别为生根率 、平均主根数 、平均主根长 , T为各指标总和 , k为各因素水平平均值 , R为各因素水平极差 , R为调整后的极差。
2.1　不同因素水平对福建山樱花试管苗生根的影响　
不同因素水平对福建山樱花试管苗生根率 、平均主根数 、
平均主根长的影响不同(表 2)。就生根率指标而言 ,处
理 4的福建山樱花平均生根率最高(71.18%),分别比处
理 3、处理 7提高 216.36%、47.26%。根据极差 RA值判
断不同因素对福建山樱花试管苗生根率的影响重要顺序
为:活性炭 >IBA>基本培养基 >蔗糖。从各因素不同
水平处理来看 ,以不加活性炭的 1/2MS培养基附加 0.6
mg/LIBA的配方对提高福建山樱花生根率有较好的效
果。其中 ,不加活性炭的培养基比黑色培养基平均生根
率提高 57.03%, 1/2MS比 MS基本培养基提高生根率
40.96%, 0.6 mg/LIBA分别比 1.4、1.0、0.2 mg/L的
IBA处理提高生根率 7.24%、13.31%、101.87%,但不同
蔗糖浓度水平对生根率影响较小 ,培养基中蔗糖用量提
27　4期　　　　　　　　　　　　　　邹娜等:福建山樱花试管苗生根条件的优化
高 1倍生根率仅提高 3.42%。
从平均主根数这一指标来看 ,极差 RB值表明活性
炭对福建山樱花平均根数的影响最大 ,蔗糖和 IBA次
之 ,基本培养基的作用最小。就不同因素水平的作用而
言 ,以不加活性炭的培养基可比黑色培养基平均根数提
高 166.23%,培养基中蔗糖用量提高 1倍可使平均根数
提高 84.98%,平均根数随着IBA浓度的增大而增多 ,
1.4 mg/LIBA分别比 0.2、0.6、1.0 mg/LIBA处理时平
均根数提高 194.59%、118.00%、32.66%, MS比 1/2MS
提高平均根数 10.86%。综合各因素最优水平 ,获得福
建山樱花较多平均根数的培养基组合为 MS十 IBA1.4
mg/L+蔗糖 30g/L,即处理 7,其平均主根数多达 10.55
条 /株 ,分别比处理 3、处理 4提高 550.91%、158.26%。
从平均主根长来看 ,处理 3中的福建山樱花平均主
根长最长 (2.9 2cm), 分别比处理 7 、处理 4提高
177.62%、76.67%。根据极差 RC值可知不同因素对主
根长的影响次序为:IBA>基本培养基 >蔗糖 >活性炭 。
就单因素水平而言 , IBA为 0.6 mg/L时的平均主根长为
2.28cm,分别比 1.4、0.2、1.0mg/L的 IBA提高根长
83.87%、82.4%、52%, MS比 1 /2MS提高生根率
22.09%,蔗糖用量减半可使主根长提高 9.11%,活性炭
对根长的影响很小 ,不加活性炭仅比黑色培养基提高
0.56%。
上述分析结果表明 ,活性炭对福建山樱花试管苗生根
起抑制作用;培养基中营养元素减半有利于刺激试管苗生
根 ,提高福建山樱花生根率 ,这与王光萍[ 2]的研究结果一
致;蔗糖对福建山樱花生根效果影响不大 ,其用量加大 1
倍生根率仅提高 3.42%,且增大蔗糖用量对根长生长有
抑制作用。培养基中添加 0.6 mg/LIBA不仅有利于提
高试管苗的生根率 ,对根的生长也有较好的促进作用。
2.2　不同因素水平对生根影响的差异显著性检验　本
试验所选的 4个因素水平中 ,除蔗糖对生根率的影响不
显著外 ,其他 3因素 IBA、基本培养基、活性炭对生根率
的影响差异都达到极显著水平(表 3)。进一步对 IBA不
同浓度水平进行多重比较 ,结果表明 0.6、1.0、1.4 mg/L
IBA处理与 0.2 mg/LIBA处理对生根率的影响差异极
显著 , 0.6、1.0、1.4 mg/LIBA处理间差异不显著。就不
同因素对福建山樱花平均根数的影响而言 ,活性炭达到
极显著水平 ,蔗糖和 IBA分别达到显著水平 , IBA的多重
比较表明 1.4mg/LIBA处理与 0.2 mg/LIBA处理对根
数的影响差异极显著 。不同因素水平对福建山樱花试管
苗平均根长的影响均不显著 。
表 3　福建山樱花试管苗生根的方差分析
变差
来源
生根率(%)
平方和 自由度 均方 F值
根数(条 /株)
平方和 自由度 均方 F值
根长(cm)
平方和 自由度 均方 F值
IBA 1144.46 3 381.49 10.78＊＊ 45.6 3 15.2 5.71＊ 2.92 3 0.97 1.53
基本培养基 587.7 1 587.7 16.61＊＊ 0.76 1 0.76 0.28 0.39 1 0.39 0.61
蔗糖 5.77 1 5.77 0.16 24.75 1 24.75 9.3＊ 0.07 1 0.07 0.12
活性炭 1000.62 1 1000.6 28.28＊＊ 57.38 1 57.38 21.57＊＊ 0.00031 1 0.00031 0.00048
误差 318.44 9 35.38 23.94 9 2.66 2.73 9 2.73
总和 3057 15 152.43 15 6.1103 15
　注:＊表示 0.05水平显著 , ＊＊表示 0.01水平显著。 F0.01(3, 9)=6.99, F0.05(3, 9)= 3.86, F0.01(1, 9)=10.6, F0.05(1, 9)=5.12。
　　以生根率作为主要参考指标 ,在综合评价平均根数
及平均主根长的基础上 ,本试验认为福建山樱花较佳生
根配方为 1/2MS+IBA0.6 mg/L十蔗糖 15 g/L,并以此
作为生根培养基进行下一步的试验。
2.3　不同黑暗培养时间对生根率的影响　由表 4可知 ,
暗培养对诱导福建山樱花生根具有显著的影响 。经过适
当天数的暗培养可明显提高试管苗的生根率和生根质
量 ,但随着暗培养天数的增加 ,生根率及生根质量呈下降
趋势。多重比较结果表明 ,在诱导福建山樱花生根率及
平均主根数方面 ,暗培养 4 d、暗培养 7 d均极显著优于
对照 ,暗培养 10d显著高于对照 。但不同暗培养天数对
平均主根长影响差异不显著。暗培养不同天数中以 4 d
效果最好 ,生根率分别比对照、暗培养 7 d、暗培养 10 d
提高 16.23%、8.25%、2.07%;平均主根数比对照、暗培
养 7 d、暗培养 10d分别提高 57.96%、7.13%、0.57%;平
均主根长分别比对照 、暗培养 7d、暗培养 10d提高
4.09%、3.49%、41.27%。
表 4　不同黑暗培养对福建山樱花试管苗生根的影响
暗培养时间
(d)
平均生根率
(%)
平均主根数
(条 /株)
平均主根长
(cm)
4 92.34Aa 5.26Aa 1.78Aa
7 90.46Aa 5.23Aa 1.72Aa
10 85.3ABa 4.91ABa 1.46Aa
0(对照) 79.44Bb 3.33Bb 1.71Aa
　注:不同大写字母表示差异达极显著水平,不同小写字母表示差异
达显著水平。
福建山樱花试管苗不经过暗培养或黑暗处理时间
过长都对生根不利。一直处于光照条件下生根率低且平
均主根数少 ,暗处理超过 10 d不仅生根时间延长 、生根
率下降 ,且茎基部愈伤化 ,形成的根多粗短疏松 ,质量较
差。因此 ,本试验认为 ,福建山樱花试管苗生根初期的暗
培养是必要的 ,时间以 4 d较佳。
3　小结
试验结果表明:除蔗糖外 ,其他 3因素 IBA、基本培养
基、活性炭对生根都有十分明显的影响。其中 ,基本培养
28 江　西　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　 　　　　　　20卷
基 1/2MS优于 MS;在 IBA的 4个浓度水平中 ,以 0.6mg/L
效果最好;不加活性炭比添加活性炭好 ,蔗糖以 15 g/L较
好。正交试验筛选出的较佳生根配方组合为:1/2MS+
IBA0.6 mg/L十蔗糖 15g/L。经该配方处理 ,福建山樱花
试管苗不定根从嫩梢基部切口直接产生 ,质量较好 ,而前
人在福建山樱花生根配方研究中 ,使用较高浓度的生长
素 ,如王光萍[ 2]等和吕月良[ 3]等分别采用 1/2MS+NAA
1.0 mg/L+IBA1.0mg/L+BA0.75mg/L(蔗糖 15g/L)
和 1/2MS+NAA1.0 mg/L+IBA0.2 mg/L(蔗糖 30 g/
L),试验过程中发现很容易导致愈伤组织生根 ,虽然不
影响生根率但影响生根质量 ,从愈伤组织分化出的根粗
短 、疏松 ,与试管苗的主茎没有维管联系 ,易脱落 。
此外 ,黑暗处理对许多木本植物生根是有益的 ,暗
培养有利于促进生根的现象在苹果、核桃 、樱桃、枣 、扁桃
等树种试管苗中也得到证实[ 4～ 9] 。其作用可能是由于在
根诱导阶段暗培养可增加过氧化物酶活性和降低酚类化
合物含量 ,改变内源激素含量并调节 IAA和 ABA的平
衡 ,进而诱导不定根的发生。在观赏樱花离体培养过程
中 ,以往尚未有人开展暗处理与生根关系的探索。本试
验通过对福建山樱花试管苗进行不同天数的暗处理 ,结
果表明 ,暗培养对生根具有明显的促进作用 ,暗处理时间
以 4 d较好 ,此时试管苗生根率、根数 、根长分别比对照
提高 16.23%、57.96%、4.09%。
综合以上分析 ,福建山樱花试管苗较佳生根条件
为:1/2MS+IBA0.6 mg/L+蔗糖 15 g/L,暗处理 4 d。
在该培养条件下 ,福建山樱花试管苗第 20 d的生根率 、
根数、根长分别为 92.34%、5.26条 /株 、1.78 cm,与前人
的研究结果[ 3]相比 ,在不降低试管苗生根率的前提下 ,生
根周期缩短 15 d,且根数增加 5.2%。生根周期减少可
缩短整个育苗周期;根系多有利于提高试管苗移栽时吸
收营养的能力 ,提高移栽成活率 。因此 ,通过试验优化了
试管苗生根的一系列性状 ,可为生产提供大量均匀一致
的优良试管苗。
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(上接第 25页)
表明:85%开烤与 70%开烤差异达极显著水平 ,与 100%
开烤达显著水平 ,说明佳禾早占的最佳烤田期以田间分
蘖达有效穗的 85%,即每株达 10本左右为宜 。
5　小结
狠抓培育壮秧。应全面推广抛秧 、旱育秧 。在落实
苗床消毒 ,提高发芽整齐度 ,降低空穴率 ,防止串根等技
术环节的同时 ,突出做好壮秧剂和拌种剂的应用。壮秧
剂旱育秧以 100g/m2、抛秧以 15 g/盘的用量为宜。
推广少本密植 。大力推广适行窄株(13.2 cm×23
cm),密植规格每公顷丛数达 30万最佳 ,佳禾早占等常
规品种丛插 3 ～ 4粒谷 ,新香优 80等早杂组合丛插不超 2
粒谷 ,较有利培育高产群体。
调整施肥量和施肥方法 。重点改施 N量过多和“攻
头 ”施肥法为适量和增加中后期施肥比例 。土壤肥力中
等以上的田块 ,化肥施纯 N量在 150 kg/hm2以内 ,土壤
肥力差的用有机肥弥补 。施氮肥方法以基肥为主 ,不施
或少施分蘖肥 ,注重施用穗、粒肥。其基∶蘖∶穗∶粒比例
为6∶0∶2.5∶1.5为宜。
提早烤田 ,多次轻烤。在栽培措施上除实行减少前
期“攻头肥”外 ,提早烤田 ,茎蘖数达预期穗数的 85%左
右开始烤田 ,并轻烤 ,分多次烤 ,烤至田面呈鸡爪型微裂 ,
脚踩略陷为宜。
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29　4期　　　　　　　　　　　　　　邹娜等:福建山樱花试管苗生根条件的优化