全 文 ：肝损伤的作用研究［J］． 今日药学，2013，23(10):650
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(收稿日期:2016 － 08 － 31)
中图分类号:Q945 文献标识码:A 文章编号:1673 － 7830(2016)05 － 0229 － 03 ·实验研究·
白子菜提取物对小鼠刀豆蛋白 A尾静脉注射所致肝损伤的作用研究
朱红霞 翁立冬 陈育尧 张璐 陈活记 刘强
【摘要】 目的 探讨白子菜提取物对刀豆蛋白 A(Concanavalin A，ConA)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法
采用 ConA制备小鼠急性化学性肝损伤模型，72 只小鼠随机分成正常对照组、ConA 模型组及白子菜低、中、高三个不
同浓度剂量组，各给药组连续给药 7 d，测定小鼠体重变化以及血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶的含量。结果 白子菜高剂
量组能降低血清谷丙、谷草转氨酶的活性，减轻肝细胞变性、坏死。结论 白子菜高剂量组对小鼠 ConA尾静脉注射所致
肝损伤有一定的降酶护肝作用。
【关键词】 白子菜;刀豆蛋白 A;肝损伤;降酶护肝
Protective effect of Gynura divaricata (L．)DC． extract on liver
injury induced by Concanavalin A(Con A)in mice
ZHU Hong-xia，WONG Li-dong，CHEN Yu-yao，ZHANG Lu，CHEN Huo-ji，LIU Qiang
(Traditional Chinese Medicine College of Southern Medical University，Guangzhou Guangdong 510515，China)
【Abstract】 Objective To study the protective effect of gynura divaricata (L．)DC． extract on liver injury induced by
Con A in mice． Methods The acute chemical liver injury model was established by Con A and 72 mice were divided into 6
groups at random，the control group，biphenyl dimethyl dicarboxylate control group，the Con A model group，high dose group，
middle dose group and low dose group． The changes of the mice body weight and the contents of alanin aminotransferase(ALT)
and aspartate aminotransferase(AST)in the serum were measured after successive administration for 7 d． Ｒesults High dose
group of gynura divaricata extract could inhibit the activities of AST and ALT in mice serum and could effectively inhibit
lipoperxidation and necrosis in mice liver． Conclusion High dose group of gynura divaricata extract had the effect of protecting
hepar and decreasing enzyme to a certain extent．
【Keywords】 Gynura divaricata (L．)DC．;Concanavalin A;Liver injury;Protecting hepar and decreasing enzyme
作者单位:510515，广州，南方医科大学中医药学院
白子菜(Gynura divaricata (L．)DC．)，别名接骨
丹、白背三七、百子菜、富贵菜、菊三七、鸡菜、白背菜
等，以全草入药。味甘、淡，寒。可用于清热解毒，舒筋
接骨，凉血止血。用于支气管肺炎，小儿高热，百日咳，
目赤肿痛，风湿关节痛，崩漏;外用治跌打损伤，骨折，
外伤出血，乳腺炎，疮疡疔肿，烧烫伤［1］。民间以白背
三七地上部分作为食药两用，广泛用于治疗高血压病、
高脂血症及糖尿病等，有“神仙草”之称［2，3］。被卫生
部列为新资源食品。化学研究表明白子菜具有生物
碱、黄酮、三萜、甾醇、核苷类化学成分。药理研究表明
具有降血糖、降血压、降血脂等作用。童娟等［4］研究
表明其对对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤有保护作
用。2013 年研究了白子菜提取物刀豆蛋白 A
(Concanavalin A，ConA)尾静脉注射所致小鼠肝损伤
的影响，以进一步探讨其护肝作用机理。
1 实验材料
1. 1 实验动物 NIH 小鼠，SPF 级，72 只，雄性，体重
·922·首都公共卫生 2016 年 10 月第 10 卷第 5 期 Capital Journal of Public Health，Oct． 2016 Vol. 10 No. 5
DOI:10.16760/j.cnki.sdggws.2016.05.014
18 ～ 22 g，由南方医科大学动物实验中心提供。实验
动物质量合格证号:4402101394;SPF 级实验动物环境
条件合格证号:2006B023;SPF级实验动物生产许可证
号:SCXK粤 2011 － 0015。实验期间的颗粒饲料和垫
料由南方医科大学实验动物中心提供。实验环境:动
物房保持通风、干燥、室温 22 ～ 25 ℃，湿度 50% ～
70%，自由饮水，鼠料定量饲养。适应性饲养 2 d 后再
行实验。
1. 2 药物 白子菜提取物由南方医科大学中医药学
院中药制剂教研室提供，提取方法如下:取白子菜，加
入 10 倍量水，煎煮两次，每次 1. 5 h，合并煎液，滤过，
滤液浓缩至相对密度为 1∶ 1、2∶ 1和 3∶ 1(即每 1 mL 相
当于 1 g、2 g和 3 g原药材)。
1. 3 实验试剂 丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂
盒，中生北控生物科技股份有限公司，批号:121881;天
门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒，中生北控生
物科技股分有限公司，批号:120921;Con-A，美国
Sigma公司，进口分装，批号:24H10131;苏木色精，生
物染色素，批号 060408，北京鼎国生物技术有限责任
公司 Fluka 进口分装;曙红 Y，生物染色素，批号
20050912，中国华东师范大学化工厂;CX9 全自动生化
分析仪，美国 Beckman coulter 公司生产;OLYMPUS
BH-2 荧光显微镜，日本 OLYMPUS 公司生产;LEICA
ＲM2135 型切片机，德国 LEICA公司生产。
1. 4 仪器 ECHO LCD 生化仪由意大利爱康公司生
产;OLYMPUS AU5421 型全自动生化分析仪，日本
OLYMPUS公司生产;OLYMPUS BH-2 荧光显微镜，
日本 OLYMPUS 公司生产;BECKMANTM30 型低温离
心机，美国 BACKMAN公司生产;LEICA ＲM2135 型切
片机，德国 LEICA 公司生产;SAＲTOＲIUS 电子天平，
德国 SAＲTOＲIUS公司生产。
2 实验方法
2. 1 分组与给药 动物分为正常对照组、模型组、白
子菜高剂量组(1. 12 g /kg)、白子菜中剂量组(0. 56 g /
kg)、白子菜低剂量组(0. 28 g /kg)。每组 12 只动物。
连续灌胃给药 7 d，每天 1 次。正常对照组及模型组灌
胃同体积的自来水。灌胃容积为 0. 25 mL /10 g 小鼠，
自由摄食。末次灌胃在 1 h 后尾静脉注射 ConA
(1. 5 mg /mL)0. 1 mL /10 g小鼠体重，相当于 15 mg /kg
(无菌生理盐水配制)，同时禁食不禁水，8 h 后摘眼球
取血，离心取血清，检测谷丙转氨酶及谷草转氨酶
含量［2］。
2. 2 检测指标 肝脏病理学检查:取肝脏左叶用中性
福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋切片(4 μm)，HE
染色，光学显微镜下观察肝组织病理学变化。将肝组
织损伤程度分为 4 级:0 级(－)，肝组织结构正常，无
明显变性、坏死及炎症细胞浸润;Ⅰ级(+)，肝小叶结
构尚正常，可见部分肝细胞混浊肿胀，气球样变或脂肪
变性，散在点状坏死;Ⅱ级(+ +)，肝小叶结构不清，可
见明显的灶状坏死，伴有炎症细胞浸润;Ⅲ级(+ + +)，
肝小叶结构不清、可见明显的片状坏死，伴有炎症细胞
浸润。
2. 3 统计学方法 实验数据用 珋x ± s 及等级 /频数表
资料表示，采用 SPSS 8. 0 统计软件 One-Way ANOVA
LSD或 DunnettT3 法及 Nonparametric Test 2 Independent
Samples Tests法进行数据处理。
3 实验结果
3. 1 小鼠体重变化 各组小鼠体重无明显差异
(表 1)。
表 1 各实验组小鼠体重变化情况(珋x ± s，n = 12)
组别 第 1 天体重 / g 第 7 天体重 / g 第 8 天空腹体重 / g
正常组 20. 35 ± 1. 63 28. 37 ± 1. 85 26. 75 ± 1. 26
模型组 21. 51 ± 1. 58 27. 62 ± 1. 63 25. 42 ± 1. 41
白子菜高剂量组 21. 67 ± 2. 62 27. 34 ± 1. 67 25. 04 ± 1. 93
白子菜中剂量组 20. 63 ± 1. 74 27. 42 ± 1. 82 25. 44 ± 1. 72
白子菜低剂量组 20. 32 ± 1. 81 28. 86 ± 2. 14 26. 79 ± 1. 38
3. 2 肝功能检查 与正常组比较，模型组血清谷丙、
谷草转氨酶均明显升高(P ＜ 0. 01);白子菜高、中、低
剂量组亦均有有一定的降酶作用，尤以高剂量组效果
好(P ＜ 0. 01，表 2)。
表 2 各实验组小鼠血清谷丙、谷草转氨酶
检测结果(珋x ± s，n = 12)
组别
剂量 /
g·kg －1
谷丙转氨酶 /
U·L －1
谷草转氨酶 /
U·L －1
正常组 － 44 ± 13＊＊ 113 ± 17＊＊
模型组 － 443 ± 96 496 ± 85
白子菜高剂量组 1. 12 76 ± 25＊＊ 176 ± 74＊＊
白子菜中剂量组 0. 56 87 ± 33＊＊ 336 ± 68*
白子菜低剂量组 0. 28 115 ± 36* 362 ± 90*
注:* 与模型对照组比较，＊＊与模型对照组比较，P ＜ 0. 01。
3. 3 白子菜对急性肝损伤小鼠肝组织病理学损伤的
影响 病理切片结果表明，正常对照组小鼠肝组织结
构正常，肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列，肝细
胞索、肝血窦排列规则，肝小叶结构完整，可见部分动
物肝细胞轻度肿胀、点坏死等病理变化。模型组小鼠
·032· 首都公共卫生 2016 年 10 月第 10 卷第 5 期 Capital Journal of Public Health，Oct． 2016 Vol. 10 No. 5
可见多数肝细胞中度肿胀、灶状及片状坏死。白子菜
组能明显减轻肝细胞坏死(P ＜ 0. 05)。表明白子菜对
ConA尾静脉注射所致肝细胞损伤有保护作用(表 3 和
图 1 － 3)。
表 3 各实验组小鼠对 CCl4 所致急性肝损伤组织病理学的影响
组别
肝细胞变性
－ + + + + + +
P值
肝细胞坏死
－ + + + + + +
P值
正常组 6 6 0 0 0. 005 5 6 1 0 0. 000
模型组 0 5 7 0 － 0 3 4 5 －
白子菜高组 1 8 3 0 0. 557 2 7 3 0 0. 015
白子菜中组 1 7 4 0 0. 456 2 5 5 0 0. 721
白子菜低组 1 8 3 0 0. 497 3 4 2 1 0. 330
注:P值为各组与模型比较的结果。
图 1 正常组小鼠肝脏 HE染色 (HE，× 200)
图 2 模型组小鼠肝脏 HE染色(HE，× 200)
4 讨论
急性肝损伤模型是研究肝细胞损伤机制的重要载
体，是研究肝脏炎症坏死机制及肝脏保护药物药效的
重要手段。腹腔注射 CCl4 致肝损伤动物模型是研究
护肝药最常用的模型［3］。童娟等［4］采用 CCl4 致肝损
伤的造模方法来探讨白子菜不同浓度提取物对小鼠急
性化学性肝损伤的保护作用，实验结果显示，对于
CCl4 所致小鼠急性肝损伤，白子菜高剂量组有一定的
图 3 白子菜高剂量组小鼠肝脏 HE染色(HE，× 200)
降酶护肝作用。在此基础上，本文进一步研究了白子
菜提取物对 ConA 致小鼠急性肝损伤的影响。ConA
是一种具有强促有丝分裂作用的植物凝集素。植物凝
集素的本质是一种蛋白，它与各种细胞表面的糖链残
基相结合。其生物学特性表现为细菌、植物、哺乳动物
细胞的凝集;促进 T 淋巴细胞的有丝分裂及淋巴细
胞、巨噬细胞细胞毒性的诱导。ConA诱导的急性肝损
伤模型则是一种经典的辅助性 T 细胞介导的肝细胞
损伤性模型，其较好地模拟了自身免疫性肝炎
(autoim-mune hepatitis，AIH)的发病机制及病理变化，
是迄今为止研究 AIH的经典实验模型之一［5，6］。本文
研究结果表明白子菜提取物对小鼠尾静脉注射 ConA
所致小鼠急性肝损伤也有较强的保护作用，为拓宽白
子菜的临床应用及基础研究范围提供了实验依据。
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(收稿日期:2016 － 08 － 31)
·132·首都公共卫生 2016 年 10 月第 10 卷第 5 期 Capital Journal of Public Health，Oct． 2016 Vol. 10 No. 5