全 文 ：中国药业 !#$% &%’(%)*+,#)%-. ·!·
!#年第 $%卷第 !期 药物鉴定
薄层扫描法测定毛大丁草中熊果苷含量
唐新雯，刘廷江
（贵阳中医学院第二附属医院，贵州 贵阳 ##$$$%）
摘要：目的 建立毛大丁草中熊果苷的含量测定方法。方法 采用双波长薄层扫描法，测定波长 !& ’ %!$ ()，!* ’ +$$ ()，展开剂为乙酸乙
酯 ,丁酮 ,甲酸 ,水（-$ . - . - . -）。结果 熊果苷点样量在 -/ $$# 0 1/ $%$ !2 范围内与斑点峰面积线性关系良好，平均加样回收率为
-$!/ #$3，!# ’ -/ 43 5 $ ’ # 6。结论 该方法简便快速，可用于毛大丁草的质量控制。
关键词：毛大丁草；熊果苷；薄层扫描法
中图分类号：!#$% &；!#% ’& 文献标识码：( 文章编号：&))* + $,-& .)), /) + )), + )&
图 - 毛大丁草中熊果苷的
薄层色谱图
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图 ! 毛大丁草中熊果苷的
薄层扫描图
位置 8 ))
表 - 熊果苷加样回收试验结果 5 $ ’ # 6
样品含量（)2）
/ +-1
/ +-7
/ +!$
/ +-7
/ +-1
加入量（)2）
/ +
/ +
/ +
/ +
/ +
测得量（)2）
-/ 1-$
-/ %7#
-/ 7+$
-/ %+$
-/ +$
回收率（3）
-$%/ $%
-$$/ #-
-$!/ #+
-$$/ #7
-$%/ 1%
% 53）
-$!/ #$
!#（3）
-/ 4
毛大丁草为菊科毛大丁草属植物毛大丁草 &’()’(* +,-./’--.,0’/
9:&&/ 的全草，广泛分布于我国西南部地区。毛大丁草具有利水止咳、
活血行气的功效 ;- <，主要有效成分熊果苷具有镇咳、抗炎作用 ;- <。本
试验建立了双波长薄层扫描法用于测定熊果苷的含量，旨在为控
制药材的质量提供参考。
& 仪器与试药
9= , 4$->9型双波长薄层扫描仪（日本岛津）；9? , !#$ 型超
声波清洗剂（北京医疗设备二厂）；@A!%$ 型双量程分析天平（日
本）；BC(D):E # 型点样仪（瑞士卡玛公司）；硅胶 F7$ 薄层板（青岛海
洋化工集团，批号为 !$$#-$4-，规格 -$$ )) G -$$ ))）。熊果苷对
照品（自制，经光谱鉴定，纯度达 3以上）；毛大丁草（采集于贵阳
近郊，经鉴定为毛大丁草 &’()’(* 1,-./’--.,0’/ 9:&& 6。所用试剂均为
分析纯。
方法和结果
! # 薄层色谱分析条件
硅胶 F薄层板点状点样，点样量为 ! !B；展开剂为乙酸乙酯 ,
丁酮 ,甲酸 ,水（-$ . - . - . -），展距为 1/ $ H)；喷以 -$3的硫酸乙
醇溶液，于 -$# I烘烤 4 )C( 定位，斑点呈棕褐色。采用反射法双
波长锯齿扫描，锯齿尺寸为 1 )) G $/ $# ))，狭缝为 $/ % )) G
$/ % ))；!& ’ %!$ ()，!* ’ +$$ ()。
! ! 供试品溶液制备及色谱扫描
取毛大丁草粗粉 !/ $$ 2，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加
入甲醇 %$ )B，称定质量，超声处理 4$ )C(，放至室温后，称重，用甲
醇补足减失的质量，滤过，弃去初滤液，收集续滤液，精密量取续滤
液 -$ )B，水浴蒸干，残渣用甲醇转移，定容于 # )B量瓶中，作为供
试品溶液。在拟订的薄层色谱分析条件下，对毛大丁草进行薄层色
谱分离，喷以 -$3的硫酸乙醇溶液烘
烤定位。色谱图见图 -，熊果苷的 !J值
为 $/ 44。于 !& ’ %!$ ()及 !* ’ +$$ ()
波长下扫描，毛大丁草中熊果苷在薄
层色谱扫描图上的位置见图 !。
! $ 方法学考察
线性关系考察：精密称取熊果苷
品 !/ $- )2，加甲醇定容至 ! )B，配制
成质量浓度为 -/ $$# )2 8 )B的对照品溶液。用半自动点样仪点熊
果苷对照品溶液 -/ $，!/ $，4/ $，%/ $，#/ $，7/ $，+/ $，1/ $ !B，按拟订的
薄层色谱分析条件进行薄层色谱分离和薄层扫描，以点样量为横坐
标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程 2 ’ 7!#/ 7+ % K
!$$/ %+，( ’ $/ 7 5 $ ’ 1 6。结果表明熊果苷点样量在 -/ $$# 0
1/ $%$ !2范围内与斑点峰面积线性关系良好。
稳定性试验：将供试品溶液点于硅胶 F 薄层板上，每点点样
! !B，展开定位后放置，每隔 4$ )C(扫描一次，共测定 !/ # L。结果熊
果苷峰面积积分值的 !# ’
$/ 7!3 5 $ ’ #6，表明熊果苷斑点
在 !/ # L内稳定。
精密度试验：将供试品溶液
点于硅胶 F薄层板上，共点 # 个
点，点样量均为 ! !B，展开定位。
按薄层色谱扫描条件先对同一
斑点重复扫描 # 次，考察扫描仪
的测量精密度，结果平均峰面积
为 ! #4+/ -1% 7M !# ’ $/ $13
5 $ ’ #6。再对同样点样量的 # 个
斑点各扫描 - 次，考察同板精密
度，结果平均峰面积为 4 $%#/ 7!7 %，!# ’ 4/ %3 5 $ ’ # 6。
加样回收试验：精密称取已知含量（-/ %4! # )2 8 2）的同一批
样品，分别加入熊果苷对照品，按供试品溶液的制备方法制备待测
溶液，在拟定的薄层色谱分析条件下测定含量，计算回收率。结果
见表 -。
! % 样品含量测定
按拟订条件和测定方法测定贵阳产毛大丁草样品，计算含量。
含量（)2 8 2）’ 3 G # G %$ G -$4 N 4 5 67 5 8 G -$4，其中 3 为测量
值（!2），4 为点样体积（!B），8 为称样量（2）。结果 4 批样品中熊
果苷含量分别为 !$/ !4M -1/ 7%M -/ 4% )2 8 2M平均 -/ %$ )2 8 2。
- 讨论
试验中选择了多种展开系统，展开剂中的少量酸对熊果苷在
硅胶 F板上的分离有一定的影响，在不加酸的展开系统中斑点拖
尾，加入 -3的甲酸后斑点集中且不拖尾，分离良好。由于熊果苷属
于酚苷，故选择了 43的三氯化铁试剂、#3的磷钼酸试剂等显色
剂，但有的显色后斑点褪色而不稳定，有的背景过深而不利于薄层
扫描，这两种显色剂都不适用。最后采用喷以 -$3硫酸乙醇溶液、
烘烤的方法显色，熊果苷呈棕褐色斑点。试验中一定要严格控制烘
烤的温度和时间，保证烘烤均匀，才能获得较好的定位效果。
参考文献：
; - < 江苏新医学院 / 中药大辞典（上册）;O < / 上海：上海科学技术出版社，
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