全 文 ：2015年第 28卷第 7期
中国科技 核心期刊
3 讨论
根据相关文献[4-5]，流动相比例为甲醇-0.04％
磷酸溶液（10∶90）能保证没食子酸峰与杂质峰的
分离度、理论板数较好；在274nm处有较高的吸
收。对于红景天中没食子酸的提取溶剂选择，比较
了甲醇，70%甲醇，50%甲醇，30%甲醇，乙醇，70%乙
醇，50%乙醇，30%乙醇，其中同浓度的红景天药材
中，30%乙醇作为溶剂时没食子酸的峰面积最大，
故以30%乙醇作溶剂进行提取。本研究采用HPLC
法对青藏高原不同种红景天中没食子酸进行了含
量测定，方法精密度好，测定结果准确。从测定结
果看，青藏高原不同种红景天中没食子酸含量分
别为大花红景天 0.29~6.6 mg/g，圣地红景天
0.10~2.9 mg/g，卵萼红景天1.0~1.6 mg/g，长鞭
红景天0.10 mg/g，狭叶红景天0.28 mg/g。从采
集的20个样品看，传统、市场都可以作为红景天
原药材使用，但就没食子酸含量差异的原因，主要
是品种差异，其生长环境不同（如沙地、草地、岩
石、溪流河畔等），还有采收时间、加工方法、贮藏
条件等。
参考文献
[1] 宋月英,韩慧文,郝素云,等.红景天研究进展[J].武警医学
院学报[J],2004,13（1）:66-68.
[2] 尼玛次仁,刘青,多杰仁青,等.青藏高原红景天研究进展及
存在问题[J].中华中医药杂志.2013,28(9):2675-2678.
[3] 李肖玲,崔岚,祝德秋.没食子酸生物学作用的研究进展[J].
中国药师,2004,7(10):767-769.
[4] 章娟,段虎成,毕开顺.HPLC法同时测定大花红景天中的4
个酚类成分的含量[J].北方药学,2011,8(7):13-14.
[5] 顿珠,刘青,索朗其美,等.HPLC法测定藏药余甘子膏中没食
子酸的含量[J].中草药,2010,41(9):1477-1478.
收稿日期：2014-10-25
*基金项目：973计划前期研究专项（编号 2012CB722905）。
作者简介：刘青（1976—），男，讲师，在读博士研究生。研究方
向：中药（藏药）新型与技术。
△通讯作者：杜守颖（1960—），女，博士学位，教授，博士研
究生导师。研究方向：中药新剂型与制剂关键技术的研究。
方 药·质量分析
剪刀股(Ixeris debilis A.Gray)是菊科苦荬菜
属植物剪刀股全草，别名鸭舌草、鹅公英，具有清
热凉血、利尿消肿之功效。用于肺热咳嗽、喉痛、口
腔溃疡、急性结膜炎、阑尾炎、水肿、小便不利；外
剪刀股总黄酮的提取与含量测定 *
马金萍 1，杨 辉 2△
1沙岭子医院药剂科，河北 张家口075000，2 河北北方学院药学系
［摘 要]目的：建立剪刀股总黄酮的提取与含量测定方法。方法：通过正交试验优化剪刀股总黄酮最优提
取条件，采用分光光度法对剪刀股总黄酮的含量进行测定。结果：剪刀股总黄酮含量为3.16%，样品平均回收率
为97.5%,RSD为3.86%。结论：分光光度法测定剪刀股总黄酮含量，方法简便、准确、重现性好。
［关键词]剪刀股；正交试验；总黄酮；含量测定
［中图分类号］R657.3［文献标识码］A ［文章编号］1004-6852(2015)07-0027-03
ExtractionandContentDeterminationofTotalFlavonoidsinJia D oGu
MA Jinping1, YANG Hui2△
1 Pharmacy Department of Shalingzi Hospital, Zhangjiakou 075000, China;
2 College of Pharmacy of Hebei North University
AbstractObjective: To establish the extraction methods and content determination of total flavonoids in Jian－
DaoGu (Ixeris japonica). Methods: The extraction conditions of total flavonoids in JianDaoGu were optimized by or-
thogonal design, and the contents of total flavonoids in JianDaoGu were detected by spectrophotometric method. Re-
sults: The contents of total flavonoids in JianDaoGu occupied 3.16%, average recovery rate of the samples were 97.5%,
RSD was 3.86%. Conclusion: Determination method of total flavonoids in JianDaoGu by spectrophotometric method is
simple, accurate and reproducible.
KeywordsJianDaoGu; orthogonal design; total flavonoids; content determination
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Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2015 Vol.28 No.7
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用治乳腺炎、疮疖肿毒、皮肤瘙痒等[1]。相关文献[2 ]
报道剪刀股提取物可对抗烟碱引起的致癌作用。
目前，对剪刀股化学成分的研究报道较少。本研究
对剪刀股总黄酮的提取及含量测定方法进行探
讨，以期为剪刀股药用价值的开发利用提供实验
依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器剪刀股采自河北省张家口市，
芦丁标准品由中国药品生物制品检定所提供，其
他试剂均为国产分析纯，试验用水为蒸馏水。KQ-
2500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公
司）；RE 52CS型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器
厂）；UV759紫外-可见分光光度计（上海精科）；
DZF-688 型真空干燥箱（宁波江南仪器厂）；
SF-400 型电子天平（赛多利斯科学仪器有限公
司）。
1.2 方法
1.2.1 标准曲线的制备[3 ] 精密称取120℃干燥
3 小时至恒重的芦丁对照品 13.4 mg，置 50 mL
量瓶中，加70％乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，
加70％乙醇至刻度，摇匀，即得浓度为0.268 mg/mL
的对照品溶液。精密吸取对照品溶液0，1.0，2.0，
3.0，4.0，5.0 mL，分别置 25 mL 量瓶中，加水至
6mL，加5％亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6分钟，
加 10％硝酸铝溶液 1 mL，摇匀，放置 6分钟，加
4％氢氧化钠溶液10 mL，再加水至刻度，摇匀，放
置15分钟；在波长510 nm处测定吸光度，以芦丁
浓度(C)对吸光度(A)绘制标准曲线。
1.2.2 正交试验设计在预试验的基础上，选取
料液比、提取时间、乙醇浓度3个因素，并各设置
三个水平，以总黄酮含量为测定指标，采用L9(34)
正交试验设计，优化总黄酮提取工艺，见表1。
将剪刀股洗净，待控干水分后，于45℃恒温
干燥箱烘干至质量恒定，粉碎为粗粉。准确称取剪
刀股粗粉9份，各5g，按照正交设计方案的条件
进行超声波提取，同法再超声提取2次，合并滤液
浓缩至干，用70%乙醇转移至50 mL容量瓶中，定
容，摇匀，过滤，取续滤液2mL，用70%乙醇定容于
25 mL容量瓶中作为供试品溶液。取供试品溶液
2mL分别置25mL量瓶中，照“1.2.1”项下方法操
作，在波长510nm处测定吸光度。
1.2.3 稳定性试验精密吸取相同供试品溶液5
份，每份 2 mL，分别于室温放置 0、15、30、45、
60 min后，依法测定吸光度。
1.2.4 重现性试验同一批样品5份，每份5g，
精密称定，按供试品溶液制备方法制备溶液，精密
吸取2mL，依法测定并计算含量。
1.2.5 精密度试验精密吸取相同供试品溶液
2 mL，加水至 6 mL，按“1.2.1”项下方法操作，于
510nm波长处连续5次测定吸光度。
1.2.6 加样回收试验取重现性试验所用的同
批样品（已知含量3.16％）约5g，共5份，精密称
定，加入适量的芦丁对照品，按供试溶液制备方法
制备溶液，依法测定吸光度。
1.2.7 含量测定称取剪刀股粗粉3份，各5g，
依据所选最佳条件，提取总黄酮并进行含量测
定。
2 结果
2.1 标准曲线的绘制以芦丁浓度(C)对吸光度
(A)绘制标准曲线。得到回归方程为：A=12.996C+
0.0018（r=0.999 6）。结果表明，当芦丁质量浓度
为0.0000~0.0536 mg/L时，其质量浓度与吸光度
呈良好的线性关系。
2.2 正交试验结果超声提取剪刀股总黄酮的
最佳工艺条件为A2B2C3，即料液比为1∶20，乙醇浓
度为70%，提取120 min。结果表明，从剪刀股提取
总黄酮以液料比影响最大，其次为提取时间，乙醇
浓度影响最小，见表2-3。
表2 正交试验结果
名称
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
Ra
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
2.748
2.877
2.861
0.129
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
2.802
2.857
2.826
0.055
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
2.788
2.837
2.859
0.071
D
1
2
3
3
1
2
2
3
1
2.815
2.824
2.846
0.031
A
2.6677
2.7814
2.7934
2.8765
2.9237
2.8307
2.8612
2.8671
2.8537
表1 正交试验影响因素与水平
水平
1
2
3
A料液比
因素
1∶10
1∶20
1∶30
B乙醇浓度/% C提取时间/min D空白
60
70
80
30
60
120
—
—
—
方 药·质量分析
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2.3 稳定性试验平均吸光度为0.266，RSD=3.23％
(n=5)，表明供试品溶液在1小时内稳定。
2.4 重现性试验平均含量为3.18％，RSD=2.38％
(n=5)，表明方法重现性好。
2.5 精密度试验平均吸光度为0.263，RSD=0.15％
(n=5)，表明仪器精密度良好。
2.6 加样回收试验平均回收率为97.5％，RSD
=3.86％，表明方法具有良好的加样回收率。
2.7 含量测定含量测定结果见表4。
3 讨论
通过正交试验，优选了剪刀股总黄酮的提取
工艺，正交试验结果直观分析表明剪刀股总黄酮
最佳提取工艺条件为料液比为1∶20，乙醇浓度为
70%，提取120分钟。3种因素对黄酮提取率的影
响顺序为A＞C＞B，在该最佳提取工艺条件下，总
黄酮提取率达到2.9237%。
黄酮类化合物含量测定方法有比色法[4 ]、分
光光度法[5-6 ]等。本研究选用分光光度法并以Al
(N03)-NaN02- a0H系统为显色剂测定剪刀股中黄
酮的含量。通过方法学验证试验，此法操作简单，
并具有良好的稳定性、重复性和准确度等优点。可
用于中药或天然产物中黄酮含量的测定。
参考文献
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：
上海科学技术出版社，1999:881.
[2] 蒲明秋,毛飞鹏.蚕豆根尖细胞微核试验-剪刀股对抗烟碱
引起遗传物质损伤的诱变效应[J].中国慢性病预防与控制,
1995,3(2):89.
[3] 张军武,赵琦,王昌利.不同生长年限黄芪中黄芪甲黄的含
量考察[J].西部中医药,2012,25(3):30-31.
[4] 郭亚健,范莉,王晓强,等.关于NaNO2-AI(NO3)3-NaOH比色法
测定总黄酮方法的探讨[J].药物分析杂志,2002,22(2):97-
99.
[5] 秦民坚,吉文亮,王峥涛.鸢尾不同产地、采收期总黄酮的含
量测定[J].现代中药研究与实践,2004,18(4):23-25.
[6] 方圆,王雪彦,晁若冰.土茯苓药材中落新妇苷和总黄酮的
含量测定方法研究[J].药物分析杂志,2010,30(9):1738-
1741.
收稿日期：2014-10-25
* 基金项目：河北省高等学校科学技术研究项目（编号 Z
2013006）。
作者简介：马金萍（1970—），女，主管药师。研究方向：中药临
床研究。
△通讯作者：杨辉（1972—），男，副主任药师。研究方向：中药
化学研究。
表3 方差分析
因素
料液比
乙醇浓度
提取时间
误差
偏差平方和
0.030
0.005
0.008
0.00
自由度
2
2
2
F比
30.000
5.000
8.000
F临界值
19.000
19.000
19.000
P
＜0.05
表4 含量测定
试验号
1
2
3
含量(%)
3.12
3.15
3.21
平均含量(%)
3.16
RSD(%)
1.02
方 药·质量分析
医学名词术语的使用
1.冠以外国人名的体征、病名、试验、综合征、方法、手术等，人名可以译成汉语，但人名后
不加“氏”字；也可以用外文，但人名后不加“s”。例如：Babinski征，可以写成巴宾斯基征，不
写成Babinskis征，也不写成巴宾斯基氏征。若为单字名则仍保留“氏”字。例如：福氏杆菌，克
氏针。
2.名词术语一般应用全称，若全称较长且反复使用，可以使用缩略语或简称，但在摘要和
正文中第一次出现时，均应分别注明全称和简称。例如：流行性脑脊髓膜炎（流脑），阻塞性睡
眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome，OSAS）。西文缩略语不宜拆开转行。
不要使用临床口头简称（例如将“人工流产”简称“人流”）。凡已被公知公认的缩略语可以不加
注释直接使用。例如：DNA、RNA、HBsAg、HBsAb、PCR、CT、DIC等。









































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