全 文 ：雪莲花类药材为菊科凤毛菊属植物天山雪莲花
Saussurea involucrata（Kar.et Kir.） Sch.Bip 的地上部
分，是西藏、新疆、青海、甘肃、云南和四川等高原
寒带地区的常用民族药和民间药，具有温肾助阳、祛
风除湿及通经活血等功效[1～2]。研究发现，雪莲花提
取物以黄酮类芦丁、内酯类雪莲内酯、氨基酸和糖苷
为主。实验表明，雪莲花提取物具有清除自由基、抗
氧化、抗炎、防皱、抵御紫外线照射以及预防皮肤老
化等美容功效，是现代化妆品的理想天然原料[3]。目
前，已有很多关于雪莲花黄酮类物质的研究报道，但
是以化妆品作为研究对象的报道较少。如果能够对化
妆品中雪莲花提取物主要功效物质的存在和性质进行
科学的检测和分析，就可以用来有效评价中药化妆品
的内在质量。本文采用加热回流法研制了雪莲花提取
液，并用HPLC法定性检测了其在化妆品中的存在性。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
Agilent1200型高效液相色谱仪配二极管阵列检
测器；超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；
电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）；高
速中药粉碎机 （天津市泰斯特仪器有限公司）；
RE-3000B 型旋转蒸发仪 （上海亚荣生化仪器厂）；
三用紫外分析仪（海市安亭电子仪器厂）；TDL-5-A
型低速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；PHS-3C
型 pH计 （上海精密科学仪器有限公司）；BSA224S
型电子天平（赛多利斯科学仪器（北京） 有限公司）；
岛津6300型原子吸收光谱仪；海尔冰箱；WAY-2S
型数字阿贝折射仪（上海精密科学仪器有限公司）。
1.2 试剂
雪莲花（购自广东紫云轩药业有限公司） 经鉴定
为菊科凤毛菊属植物天山雪莲花Saussureainvolucrata
（Kar.etKir） Sch.Bip.的地上部分；芦丁和绿原酸（均
购自中国药品生物制品检定所）；精华霜（由作者公
司同事提供）。
乙醇、硅藻土、丁二醇、活性炭、尼泊金甲酯、
尼泊金丙酯、咪唑烷基脲、甲醇（色谱纯）、D101大
孔树脂、乙酸乙酯、丁酮、甲酸、亚硝酸钠和磷酸。
2 方法与结果
2.1 雪莲花提取液的制备及质量检测
2.1.1 雪莲花提取液的制备
将干燥的雪莲花制成粉末，过80目筛，将雪莲
花粉末放入圆底烧瓶中。每克雪莲花粉末加入15mL
质量分数为70%的乙醇溶液，然后在80℃条件下加
热浸泡提取2次，每次提取1h，合并2次提取液，
得到粗提取液。将雪莲花粗提取液减压浓缩回收乙
醇，得到悬浊液。将悬浊液低温（4℃）静置 16 h，
离心 （3 000r/min） 15min，上清液以硅藻土作助
滤剂，用布氏漏斗抽滤。向离心和过滤后所得雪莲花
提取液水溶液中缓慢加入等体积的丁二醇，同时进行
搅拌，充分搅匀后加入1%活性炭，搅拌30min，用
砂芯漏斗抽滤，得到棕色澄清透明液体。向其中加入
适量尼泊金甲酯、尼泊金丙酯和咪唑烷基脲，充分溶
解，搅拌均匀，即得雪莲花提取液。
2.1.2 雪莲花提取液的质量检测
用密度瓶法测定雪莲花提取液的密度[4]。用阿贝
折光仪法测定雪莲花提取液的折光率[5]。雪莲花提取
雪莲花提取液的制备和检测方法研究
孟祥艳，孙 永，张 凯，李火云，胡兴国
（广州环亚化妆品科技有限公司，广东 广州 510663）
摘要：对雪莲花药材用质量分数为70%的乙醇加热回流提取，提取液经浓缩和过滤后，以丁二醇作溶剂稀
释制得雪莲花提取液。制订了雪莲花提取液的质量指标，并按指标进行了检测。将雪莲花提取液添加到化
妆品中，采用ODS柱为分析柱，以芦丁为对照品，甲醇∶0.4％磷酸=38∶62为流动相，在340nm条件下，
用HPLC法定性检出化妆品中的雪莲花成分。
关键词：化妆品；雪莲花提取液；检测
中图分类号：TQ658 文献标识码：A 文章编号：1006-7264（2012）12-0025-04
收稿日期：2012－10－11
作者简介：孟祥艳（1982-），女，湖北人，硕士。
日用化学品科学
DETERGENT ＆ COSMETICS
第 35卷第 12期
2012年 12月
Vol．35 No．12
Dec. 2012
·25·
DOI:10.13222/j.cnki.dc.2012.12.012
日用化学品科学 第 35卷
液中芦丁和绿原酸的薄层用色谱法定性分析[6]。取芦
丁对照品和绿原酸对照品，加甲醇制成每 1 mL 各
含5 mg和2mg的溶液，作为对照品溶液。取雪莲花
提取液30mL，用蒸馏水稀释10倍，过D101大孔树
脂，依次用水和质量分数为50%的乙醇洗脱至洗脱
液无色，收集并浓缩蒸干质量分数为50%的乙醇洗
脱部分，然后用少量甲醇溶解，用0.45μm有机滤膜
过滤后作为雪莲花提取液的供试样品。另取雪莲花粉
末0.5 g加甲醇20mL，超声处理10min，过滤，蒸
干滤液，加1mL甲醇使残渣溶解，作为雪莲花对照
药材。吸取上述4种溶液各3μL～5μL，分别点于
同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶
水 =10∶6∶1∶2 的上层溶液为展开剂，展开，取
出，晾干，再喷以质量分数为1％亚硝酸钠和质量分
数为1％甲醇溶液，加热至斑点显色清晰。
用干燥失重法测定雪莲花提取液中的干物质含
量[6]。用 pH 计测定雪莲花提取液的 pH 值[7]。微
生物和有毒物质限量的检测参考《化妆品卫生规范》
（2007版）[8]中的方法。
2.2 雪莲花提取液在化妆品中的 HPLC定性检测
2.2.1 HPLC色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇:
0.4％磷酸 =38∶62为流动相，检测波长为340nm，
柱温40℃，流速1.0mL/min，进样量10μL。
2.2.2 对照品溶液和供试品溶液的制备
芦丁对照品溶液的配制：取芦丁对照品0.3mg，
用甲醇定容至10mL容量瓶中即得。
雪莲花对照药材的制备：精确称取雪莲花粉末
1 g（过80目筛），置具塞锥形瓶中，加入质量分数
为 50％的甲醇 50 mL，称重。超声处理 10 min，冷
却，再称重。用质量分数为50％的甲醇补足减失的
重量，摇匀，过滤，取滤液，用0.45μm有机滤膜过
滤，即得雪莲花对照药材。
雪莲花提取液样品的制备：取4mL雪莲花提取
液，用甲醇定容至10mL容量瓶中，用0.45μm有机
滤膜过滤，即得雪莲花提取液样品。
精华霜样品的制备。将雪莲花提取液按重量比
0.4%加入未添加任何提取物的精华霜中，搅拌均匀
后加入质量分数为 5%的 NaCl 和 3 倍重量的乙醇，
超声提取30min，离心。取乙醇溶液部分，减压浓缩
至干，用少量甲醇溶解并放置约10min，会看到有白
色膏体析出，过滤，得到甲醇澄清滤液约10mL。采
用 25 mm×500 mm 层析柱，D101 填料，保留体积
100mL，流速8mL/min，水-醇体系进行纯化，除
去油脂和乳化剂等杂质。洗脱梯度：水，50%乙醇，
收集 50%乙醇组分，浓缩干，用甲醇定容至 5 mL。
用0.45μm有机滤膜过滤，即得精华霜样品。
2.3 雪莲花提取液的质量检验结果
根据《中国药典》（2005版） 和化妆品理化指标
的国标检测方法，对所研制的雪莲花提取液进行感
观、理化和卫生指标的测试，结果见表1以及图1～
图3。
从表1可以看出，本文方法所制得的雪莲花提取
液，其各项质量指标均符合企业内控标准。图1～图
3的薄层色谱试验结果显示，雪莲花提取液样品与雪
莲花对照药材、芦丁和绿原酸对照品相应的位置上，
显相同颜色的斑点，说明雪莲花提取液含有与雪莲花
药材相同的成分即芦丁和绿原酸，该提取液的功效成
分是可控的。
2.4 雪莲花提取液在化妆品中的HPLC定性检测结果
通过HPLC法对芦丁对照品、雪莲花对照药材、
雪莲花提取液和添加了雪莲花提取液的精华霜进行了
定性检测，对应的色谱图见图4～图7。
可见，芦丁对照品、雪莲花对照药材、雪莲花提
表 1 雪莲花提取液感观、理化、卫生测试指标
Tab.1 Sense，physicochemical and sanitary testing index of
saussurea involucrata extract
项 目 企业内控标准 实测指标
感官指标 外观性状 棕黄色透明液体 棕黄色透明液体
气味 特征气味 特征气味
理化指标 密度（d20/20） 1.010～ 5 1.044
折光率/nD20 1.380～1.410 1.388
芦丁、绿原酸 薄层色谱可检出 检出
干物质/% 1.5～2.5 2.0
pH 4.5～7.5 6.4
微生物指标 细菌总数/CFU·g-1 ≤50 未检出
霉菌和酵母菌
总数/CFU·g-1
≤10 未检出
大肠杆菌 不得检出 未检出
金黄色葡萄球菌 不得检出 未检出
绿脓杆菌 不得检出 未检出
有毒物质限量 铅/mg·kg-1 ≤10 ＜0.10
汞/mg·kg-1 ≤1 ＜0.01
砷/mg·kg-1 ≤5 ＜0.20
科技广场
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第 12期
图 7 精华霜样品的色谱图
Fig.7 HPLC spectra of essence cream
取液和添加了雪莲花提取液的精华霜四者的特征峰保
留时间非常接近，分别为 11.950 min、11.648 min、
11.628 min 和 11.217 min。 另外，通过 Agilent1200
化学工作站的紫外吸收光谱图发现，这4个峰的吸收
光谱图形状一致，且均在 340 nm左右有最大吸收。
故依上述两点判断，在0.4%的添加量下，自制雪莲
花提取液在精华霜中是可定性检出的。
3 结论
3.1 雪莲花提取液的研制及质量检测
中药活性成分的提取分离是中药化妆品开发的关
键环节之一，中药提取液的制作工艺将直接影响化妆
品的功效性和稳定性。本文对雪莲花药材用质量分数
图 1 254 nm下显色
Fig.1 TLC at 254 nm
图 2 365 nm下显色
Fig.2 TLC at 365 nm
图 3 1％亚硝酸钠的 1％甲醇溶液显色
Fig.3 TLC with 1% sodium nitrite 1% methanol solution
注：1为芦丁对照品；2为雪莲花提取液样品；3为绿原
酸对照品；4为雪莲花对照药材。
图 4 芦丁对照品的色谱图
Fig.4 HPLC spectra of rutin reference substance
图 5 雪莲花的色谱图
Fig.5 HPLC spectra of saussurea involucrata
图 6 雪莲花提取液的色谱图
Fig.6 HPLC spectra of saussurea involucrata extract
t / min
t / min
t / min
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科技广场孟祥艳，孙 永，张 凯，李火云，胡兴国：雪莲花提取液的制备和检测方法研究
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日用化学品科学 第 35卷
（上接第 24页）
3 结论
本研究对洗洁精的微生物指标检测方法进行了
初步验证，得出以下结论：① 采用国标法进行洗
洁精菌落总数检测时，对金黄色葡糖球菌的回收率
非常低。要得到较高的回收率，需将样品稀释至
10 000 倍，在实际操作中不可行；② 对国标法进
行改进，用中和剂替代生理盐水后，对金黄色葡糖
球菌的回收率可达到 98%，采用中和法更加准确
和可靠，因此在实际操作中，应根据防腐剂类型和
含量筛选合适的中和剂，采用中和法进行菌落总数
检测。
参考文献：
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典 [M]. 二部 2010 版（附录）. 北京: 中国医药科技出版社,
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[3]中华人民共和国卫生部.化妆品卫生规范（2007版） [S].北
京:军事医学科学出版社,2010:265－280.
Application of neutralization method in detergent microbiology test
JIANG Dan, ZHONG Mei，LIU Chi, ZHANG Li-ping
（Guangzhou Liby Enterprise Group Co., Ltd., Guangzhou, Guangdong 510170, China）
Abstract: The neutralization method was used to inhibit the residual antimaicrobial activity of antiseptic in detergent to improve the microbial
testmethodfordetergent.Theantimicrobialactivityofantisepticin detergentwaseliminated effectivelyand therecoveryofbacterium improved
inthismethod.Itisaccurateandreliable.
Key words: detergent;microbialtest;neutralizationmethod
为 70%的乙醇加热回流提取，以丁二醇作为溶剂，
加入适量的化妆品常用防腐剂尼泊金甲酯、尼泊金
丙酯和咪唑烷基脲，该法制得的雪莲花提取液质量
稳定，成分可控。
3.2 雪莲花提取液在化妆品中的定性检测
中草药成分繁多，结构复杂，对中药化妆品中
功效性成分的分析与检测，有助于中药提取液在化
妆品中应用的功效和剂量评价。本文采用ODS柱为
分析柱，以芦丁为对照品，甲醇∶0.4％磷酸=38∶
62为流动相，在340nm条件下定性检测发现添加了
雪莲花提取液的精华霜样品的保留时间和光谱形状
均与对照样品一致，因而，该HPLC法可以用于雪莲
花提取液在化妆品中的定性检测。
参考文献：
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[8]中华人民共和国卫生部. 化妆品卫生规范 [M]. 2007 版. 北
京：军事医学科学出版社，2007：161-179.
Research on preparation and detection of saussurea involucrata extract
MENG Xiang-yan, SUN Yong, ZHANG Kai，LI Huo-yun，HU Xing-guo
（Guangzhou Huanya Cosmetics Technology Co., Ltd., Guangzhou, Guangdong 510663, China）
Abstract: Thepreparationmethodofsaussureainvolucrataextractwasasfollows:thesaussureainvolucratawasextracted with 70%ethanolby
heating reflux method, the extracted solution was concentrated and filtered, then diluted with butanediol as solvent. The quality standard was
establishedandsaussureainvolucrataextract,samplewasdetectedbasedoneachiteminspecification.TheODScolumnwasusedasanalytical
column, themobilephaseconsisted of methanol-0.4% H3PO4（38∶62） with UV detection at 340 nm using rutin as comparison sample. The
compositionofsaussureainvolucratacanqualitativelydetectedincosmeticbythisHPLCmethod.
Key words:cosmetic;saussureainvolucrataextract;detection
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
科技广场
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