全 文 ： ·732· Chin JMAP, 2011August, Vol.28 No.8 中国现代应用药学 2011 年 8 月第 28 卷第 8 期
西红花苷的最佳工艺：乙醇浓度为 52%，提取时
间为 30 min，提取温度为 30 ℃。
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收稿日期：2010-10-14



蒙药材飞廉的定性及定量研究

温爱平，杨来秀，王玉华(内蒙古医学院药学院，呼和浩特 010059)

摘要：目的 建立飞廉药材的定性及定量方法。方法 分别采用化学法和薄层色谱法对飞廉药材中的黄酮类成分和绿原
酸进行定性鉴别，并采用高效液相色谱法测定绿原酸的含量。色谱柱为 Hypersil ODS2 柱(4.6 mm×250 mm，5 µm)；流动
相为甲醇-0.5%醋酸(15 85)∶ ；流速为 1.0 mL·min−1；柱温为 25 ℃；检测波长为 325 nm。结果 定性鉴别试验特征明显，
绿原酸在 0.088~1.76 µg 内呈良好的线性关系，平均回收率为 100.3%(RSD 为 1.52%)。结论 该方法简便、快速，重复性
好，准确度高，可有效控制飞廉药材的质量。
关键词：飞廉；绿原酸；薄层色谱法；高效液相色谱法
中图分类号：R282.71 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2011)08-0732-03

Qualitative and Quantitative Study of Mongolian Medicine Carduus Crispus

WEN Aiping, YANG Laixiu, WANG Yuhua(Department of Pharmacy, Inner Mongolia Medical College, Huhhot 010059,
China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To establish a method for the qualitative and quantitative determination of Carduus crispus.
METHODS Flavonoids and chlorogenic acid were identified by chemical method and TCL respectively, and the chlorogenic
acid was determined by HPLC. The analysis of chlorogenic acid was carried on a Hypersil ODS2 column(4.6 mm×250 mm,
5 µm) using methanol-0.5% acetic acid(15 85)∶ as mobile phase at a flow rate of 1.0 mL·min−1. The column temperature was set
at 25 , and detecting wavelength was 325 nm. ℃ RESULTS The obvious characteristics were observed in qualitative
identification test. There was a good linear relationship over the range of 0.088−1.76 µg for chlorogenic acid. The average
recovery was 100.3% with RSD of 1.52%. CONCLUSION The developed method is simple, rapid, reproducible and accurate.
It can be used for the quality control of Carduus crispus.
KEY WORDS: Carduus crispus; chlorogenic acid; TLC; HPLC

飞廉为菊科植物飞廉 Carduus crispus L.的干
燥地上部分，全草入中药，地上部分入蒙药，蒙
药名为哈日-侵瓦音一乌日格斯，具有催吐巴达干、
制伏痈疽、消肿的功能，主治消化不良、剑突巴
达干、痈疽等症[1]。飞廉中的化学成分研究报道较
少，茎部含有降压生物碱飞廉碱(acanthoidine，
ruscopine)和去氢飞廉碱(acanthoine，ruscopeine)[2]；
文献[3]报道有香树脂醇棕榈酸酯、樨草素葡萄糖
苷等化学成分；而藏药标准[4]中对飞廉中的绿原酸
和芦丁进行薄层鉴别，本试验分别采用化学法和
薄层色谱法对飞廉中的黄酮类成分和绿原酸进行
定性鉴别，并采用高效液相色谱法对绿原酸进行定
量测定，为控制蒙药材飞廉的质量提供科学依据。
1 仪器与试药
Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公
司)；JL 型超声波清洗器(上海杰理科技有限公司)。
基金项目：内蒙古自治区蒙药现代化研究项目-蒙药材质量标准研究(MX2005ZB019)
作者简介：温爱平，女，教授 Tel: (0471)6653151 E-mail: aiping221@126.com
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2011.08.006
中国现代应用药学 2011 年 8 月第 28 卷第 8 期 Chin JMAP, 2011 August, Vol.28 No.8 ·733·
绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号：
110753-200212，供含量测定用)；飞廉药材(样品 1
采自大青山三岔口，样品 2 采自锡盟赛罕乌拉，
样品 3 采自呼和浩特市土左旗，样品 4 采自呼和
浩特市武川县黑大门，样品 5 采自大青山林场)；甲
醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为纯化水。
2 定性鉴别
2.1 盐酸-镁粉反应
取本品粉末 0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶
中，精密加 80%乙醇 25 mL，超声处理 1 h，滤过，
取滤液作为供试品溶液。
取供试液 1 mL 两份，置两支试管中，其中一
支加入少量镁粉，并滴加盐酸数滴，同置于水浴
上加热 1 min 后，取出观察，不加盐酸镁粉的溶液
为橙黄色，加盐酸镁粉变为红棕色。
2.2 三氯化铝反应
取供试液 1 mL 两份，置两支试管中，其中一
支加入少量 1%三氯化铝溶液，不加三氯化铝溶液
为黄色，加三氯化铝溶液呈黄绿色荧光。
2.3 氨水反应
取供试液 1 mL 两份，置两支试管中，其中一
支加少量氨水，不加氨水溶液为橙黄色，加氨水
溶液为黄绿色荧光。
2.4 薄层色谱
取本品粉末 2 g，加 50%甲醇 50 mL，超声处
理 60 min，滤过，滤液蒸干，残渣加 2 mL 甲醇溶
解，作为供试品溶液。取绿原酸对照品，用 50%
甲醇制成 1 mg·mL−1 的溶液作为对照品溶液。分别
吸取供试品溶液和对照品溶液各 5 µL，点于同一
硅胶 G 薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(2 1 1)∶ ∶
的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。置紫
外光灯(365 nm)下观察，供试品色谱中，在与对照
品色谱相应位置上显相同的蓝色荧光斑点。结果
见图 1。
3 绿原酸的含量测定
3.1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：Hypersil ODS2 柱(4.6 mm×250 mm，
5 µm)；流动相：甲醇-0.5%醋酸(15 85)∶ ；检测波
长：325 nm；柱温：25 ℃；流速：1 mL·min−1。
在上述色谱条件下，绿原酸与其他成分色谱
峰分离完全，与相邻峰的分离度大于 1.5，理论板
数按绿原酸峰计算在 3 000 以上。色谱图见图 2。

图 1 飞廉中绿原酸的 TLC 图
1，2，3，5，6−样品；4−绿原酸对照品
Fig 1 TLC chromatogram of chlorogenic acid in Carduus
crispus
1, 2, 3, 5, 6-sample; 4-control of chlorogenic acid

图 2 高效液相色谱图
A−绿原酸对照品；B−样品；1−绿原酸
Fig 2 HPLC chromatograms
A-control of chlorogenic acid; B-sample; 1-chlorogenic acid
3.2 供试品溶液的制备
取本品 2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精
密加入 50%甲醇 25 mL，称重，超声处理 60 min，
取出，放冷，再次称重，用 50%甲醇补足减失的
重量，滤过，即得。
3.3 标准曲线制备
精密称取绿原酸对照品适量，加 50%甲醇制
成 0.088 mg·mL−1 的溶液，作为对照品溶液。分别
精密吸取对照品溶液 1，2，5，10，15，20 µL 注
入液相色谱仪，记录峰面积。以峰面积为纵坐标，
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进样量(µg)为横坐标，进行线性回归，得回归方程
为 Y=1 546.02X+3.52，r=0.999 8。结果表明：绿原
酸在 0.088~1.76 µg 内，其峰面积与进样量呈良好
的线性关系。
3.4 仪器精密度试验
精密吸取对照品溶液 5 µL，在上述色谱条件
下重复进样 6 次，测得绿原酸峰面积的 RSD 为
0.41%，表明仪器精密度良好。
3.5 稳定性试验
取赛罕乌拉(编号 2)样品，按“3.2”项下方法
处理，分别在 0，2，4，6，8 h 进样测定。色谱峰
面积 RSD 为 0.52%，表明供试品溶液放置 8 h 稳定。
3.6 重复性试验
取同一样品(编号 2)6 份，按“3.2”项下方法
处理，进样测定，绿原酸含量的 RSD 为 0.71%，
表明该方法重复性良好。
3.7 回收率试验
采用加样回收法，取已知绿原酸含量(0.769
mg·g−1)的 2 号样品 6 份，每份各 1 g，精密称定，
分别精密加入绿原酸对照品溶液适量，置水浴上
蒸干后，按“3.2”项下方法处理，进样测定，记
录峰面积，计算回收率。结果见表 1，其平均回收
率为 100.3%，RSD 为 1.52%。
表 1 加样回收率试验结果(n=6)
Tab 1 Results of recovery test(n=6)
取样量/
g
含有量/
mg
加入量/
mg
测得量/
mg
回收率/
%
平均回
收率/%
RSD/
%
1.011 7 0.778 0.825 1.611 101.0
1.044 2 0.803 0.825 1.635 100.8
1.066 3 0.802 0.825 1.648 102.5 100.3 1.52
1.010 4 0.777 0.825 1.585 97.9
1.014 3 0.780 0.825 1.602 99.6
1.010 8 0.785 0.825 1.612 100.2
3.8 样品测定
精密称取绿原酸对照品适量，加 50%甲醇制
成 40 µg·mL−1 的溶液，作为对照品溶液。精密吸
取供试品溶液和对照品溶液各 10 µL，分别注入液
相色谱仪，记录峰面积，按外标法计算含量。5 批
药材中绿原酸含量(按干燥品计算)测定结果见表 2。
表 2 样品含量测定结果(n=4)
Tab 2 Content determination results of sample(n=4)
样品编号 含量/% RSD/%
1 0.022 1 0.59
2 0.083 4 0.32
3 0.022 3 1.03
4 0.028 1 0.87
5 0.013 4 1.12
4 讨论
在供试品溶液的制备时，曾对不同的提取溶
剂(甲醇和 50%甲醇)和不同提取时间(30，60，90
min)分别进行了考察。结果表明：以 50%的甲醇
作溶剂、超声处理 60 min 时，供试品溶液中绿原
酸的含量最高。
据文献[5-6]报道，采用高效液相色谱法测定绿
原酸的含量时，常用甲醇和弱酸(醋酸或磷酸)为流动
相，可较好地将绿原酸与其他成分分开，笔者试验
了 3 种不同配比的系统：甲醇-0.1%磷酸(25 75)∶ 、
甲醇-0.4%磷酸(30 70)∶ 、甲醇-0.5%醋酸(15 85)∶ 。
结果表明：甲醇-0.5%醋酸(15 85)∶ 系统分离效果较
其他系统好，且保留时间适宜(约 12 min)。
定性试验中的化学反应表明：飞廉药材中含
有黄酮类成分，但薄层色谱和高效液相色谱经反
复试验均未检出芦丁成分。
样品测定结果表明：不同产地的飞廉药材中
绿原酸含量差异较大，其中样 2 中绿原酸的含量
最高，故本法可有效控制飞廉药材药材的质量。
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收稿日期：2010-08-19