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复方田基黄胶囊的薄层鉴别研究



全 文 :收稿日期:2011 - 11 - 26
基金项目:中山市医学科研资助项目(J2011077)
作者简介:曾聪彦(1975 -) ,男,主任中药师,硕士研究生导师,学
士,研究方向:医院中药制剂研究。
综上所述,成熟骨组织主要靠骨重建进行持续的、循环
性的破骨和成骨过程,由破骨细胞和成骨细胞协同完成。
本研究的结果表明高血糖状态下,破骨 /成骨活性的平衡被
破坏,导致糖尿病骨质疏松的发生,而葛根素的治疗可恢复
上述平衡,从而维持正常骨量和骨的生物学质量,为临床葛
根素治疗糖尿病性骨质疏松症提供了一定的理论和实验依
据。
参考文献
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中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
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复方田基黄胶囊的薄层鉴别研究
曾聪彦,卓斌,刁军飞,郑雪青
(广州中医药大学附属中山中医院,广东 中山 528400)
摘 要:目的:建立复方田基黄胶囊的薄层鉴别方法,为其质量标准的制定提供依据。方法:采用薄层色谱法
鉴别复方田基黄胶囊中的田基黄、虎杖、黄芪。结果:复方田基黄胶囊中的田基黄、虎杖、黄芪和对照药材薄层色
谱主斑点位置一致;且定性鉴别斑点圆整,分离度好,易于区别。结论:所建立的方法简便、灵敏、准确、专属性强,
可作为复方田基黄胶囊的质量控制方法之一。
关键词:复方田基黄胶囊;田基黄;虎杖;黄芪;薄层色谱法;鉴别
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1673 - 7717(2012)04 - 0850 - 02
Study on TLC of Compound Tianhuangji Capsules
ZENG Cong-yan,ZHUO Bin,DIAO Jun-fei,ZHENG Xue-qing
(Zhongshan Hospital,Guangzhou University of TCM,Zhongshan 528400,Guangdong,China)
Abstract:Objective:To establish a TLC identification method for Compound Tianhuangji Capsules and to provide ba-
sis for the establishment of its quality standard. Methods:Hypericum japonicm Thunb,Polygonum cuspidatum and Radix
Astragalus in Compound Tianhuangji Capsules were identified by TLC. Results:The obtained TLC spots of Hypericum ja-
ponicm Thunb,Polygonum cuspidatum,Radix Astragalus in Compound Tianhuangji Capsules occurred at the corresponding
positions compared to the controls. The studies showed that spot of naringoside on TLC. Conclusion:The method is proved to
be simple,sensitive,precise and reproducible and can be used for the quality control of Compound Tianhuangji Capsules.
Key words:Compound Tianhuangji Capsules;Hypericum japonicm Thunb;Polygonum cuspidatum;Radix Astragalus;
TLC;identification
复方田基黄胶囊是广州中医药大学附属中山中医院的
常用制剂,该制剂由田基黄、虎杖、黄芪、重楼、桑寄生等 9
味药材组成,有补益肝肾,清热利湿的功效,临床主要用于
急慢性肝炎,有人用本品治疗慢性乙型肝炎取得良好效
果[1]。为控制该制剂产品质量,我们对其进行了系统的薄
层色谱鉴别研究,建立了田基黄、虎杖、黄芪薄层色谱鉴别
方法,为该制剂的质量控制提供了依据。
1 仪器与试药
1. 1 仪器
医用超声波清洗器:KQ3200E(昆山市超声仪器有限公
司) ;薄层色谱摄影仪:Good see -Ⅰ(上海科哲生化科技有
限公司) ;电子天平:JA1203(上海天平仪器厂) ;电热恒温
水浴锅:(上海衡平仪器仪表厂) ;硅胶 G 薄层板: (青岛海
洋化工厂分厂)。
058
DOI:10.13193/j.archtcm.2012.04.180.zengcy.054
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1. 2 试药
虎杖:中国药品生物制品鉴定所,批号 980 - 9301;田基
黄:中国药品生物制品鉴定所,批号 952 -9302;黄芪:中国药
品生物制品鉴定所,批号 974 - 9302;大青叶:中国药品生物
制品鉴定所,批号 747 - 200005;大黄素:中国药品生物制品
鉴定所,批号 0756 -9707;大黄素甲醚:中国药品生物制品鉴
定所,批号 758 -9402;槲皮素:中国药品生物制品鉴定所,批
号 821 - 9401;黄芪甲苷:中国药品生物制品鉴定所,批号
110781 -200512;甲醇、三氯甲烷、硫酸、石油醚、甲酸乙酯、甲
酸、丙酮、冰醋酸、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、醋酐、三氯化铝均
为分析纯;复方田基黄胶囊由本院制剂室提供。
2 方法与结果
2. 1 处方与工艺
本处方由田基黄、虎杖、黄芪、重楼、桑寄生、白矾、鹿茸
等 9 味中药材组成,方中白矾、鹿茸、部分黄芪药材粉碎成
细粉,备用;其余田基黄等六味及剩余黄芪加水煎煮两次,
第 1 次 2h,第 2 次 1h,滤过,合并滤液,浓缩至稠膏状,与上
述细粉混匀,干燥,粉碎,分装,制成 1000g,即得。
2. 2 薄层色谱鉴别
2. 2. 1 田基黄的鉴别 取复方田基黄胶囊 5 粒,加甲醇
10mL,加热回流提取 3h,滤液浓缩至 1mL,作为供试品溶液;
取田基黄对照药材 2g,加甲醇 30mL 同法制成对照药材溶
液;取缺田基黄药材的制剂粉末 2g,同法制成阴性对照品溶
液;另取槲皮素对照品适量,加甲醇制成每 1mL各含 1mg的
溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国
药典》1部附录ⅥB)试验,吸取对照品溶液、对照药材溶液、
供试品溶液和阴性对照品溶液各 2μL,分别点于同一硅胶 G
薄层板上,以甲苯 -甲酸乙酯 -甲酸(3 ∶ 3 ∶ 1)为展开剂,展
开,取出,晾干。喷以 5%三氯化铝乙醇溶液,110℃加热至斑
点显色清晰,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品溶液与对
照药材溶液、对照品溶液相应位置上,显示相同颜色的荧光
斑点,阴性对照无此荧光斑点。见插页Ⅳ图 1。
2. 2. 2 虎杖的鉴别 取复方田基黄胶囊 5 粒,内容物加
甲醇 10mL,超声处理 15min,滤过,滤液蒸干,残渣加2. 5
mol /L硫酸溶液 5mL,水浴加热 30min,放冷,用三氯甲烷提
取 2 次,每次 5mL,合并三氯甲烷液,蒸干,残渣加三氯甲烷
1mL 使溶解,作为供试品溶液;取虎杖对照药材 0. 1g,同法
制成虎杖对照药材溶液;取缺虎杖的制剂粉末 2g,同法制
成阴性对照品溶液;另取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品
适量,加甲醇制成每 1mL 各含 1mg 的溶液,作为对照品溶
液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验,吸取上述对照品溶
液、对照药材溶液各、供试品溶液和阴性对照品溶液各
2μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以石油醚(30 ~ 60℃)
-甲酸乙酯 -甲酸(14 ∶ 5 ∶ 2)的上层溶液为展开剂,展开,
取出,喷 10%硫酸乙醇溶液,在 105℃下烤 5min,放凉,置紫
外光灯(365nm)下检视。供试品溶液与对照品溶液、对照
药材溶液在相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性对
照色谱无此荧光斑点。见插页Ⅳ图 2。
2. 2. 3 黄芪的鉴别 取复方田基黄胶囊 5 粒,加甲醇
25mL,加热回流 1h,滤过,滤液蒸干,残渣加水 10mL,微热
使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取 2 次,每次 20mL,合并
正丁醇提取液,用氨试液洗涤 2 次,每次 20mL,再用水洗涤
2 次,每次 20mL,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇 0. 5mL 使溶
解,作为供试品溶液;取黄芪对照药材 0. 5g 同法制成对照
药材溶液;取缺黄芪的制剂粉末 2g,同法制成阴性对照溶
液;另取黄芪苷适量加甲醇制成每 1mL 含 1mg 的溶液,作
为对照品溶液。照薄层色谱法(附录 VI B)试验,吸取对照
品溶液、对照药材溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各
2μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以三氯甲烷 -甲醇 -
水(13 ∶ 6 ∶ 1)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取
出,晾干,喷以 10%硫酸乙醇溶液,在 105℃加热至斑点显
色清晰,分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视,供试品色
谱中,在与对照品色谱相应的位置上,日光下显相同颜色的
斑点,紫外光下显相同颜色的荧光斑点,阴性对照色谱无此
荧光斑点。见插页Ⅳ图 3 ~ 4。
3 讨 论
本制剂是由 9 味中药组成的复方制剂,成分较为复杂,
薄层鉴别过程中对提取方法及展开剂的选择有较高要求。
笔者所采用的实验方法经多次试验,结果稳定,且方法简便
易行,斑点分离清晰,阴性对照无干扰,可作为复方田基黄
胶囊质量控制的方法。
根据田基黄的主要化学成分槲皮素,本实验参考《广
东省中药材标准》中田基黄药材的薄层色谱鉴别方法[2],
但《广东省中药材标准》中的展开剂为甲酸乙酯 -丙酮 -
水 -冰醋酸(5 ∶ 4 ∶ 1 ∶ 0. 5) ,由于展开剂极性过大,斑点分
离不清且与溶剂前重叠,结果表明该展开剂并不适合该制
剂的薄层鉴别,经过多次反复实验最终采用甲苯 -甲酸乙
酯 -甲酸(3 ∶ 3 ∶ 1)为展开剂,结果斑点分离清晰,与溶剂
前沿重叠现象消失;根据虎杖的主要成分为蒽醌类,且以大
黄素、大黄素甲醚的含量为主,本实验对比了中山市中医院
原质量标准的鉴别方法和参考《中华人民共和国药典》
2010 版中虎杖的鉴别方法,发现原质量标准中方法尽管较
为简便,但分离效果较差,斑点不够清晰,拖尾现象严重,较
本实验采用的《中华人民共和国药典》2010 版虎杖鉴别方
法的分离效果有较大的差别;根据黄芪的主要成分为黄芪
苷,参考《中华人民共和国药典》中“参芪五味子片”中黄芪
的薄层色谱鉴别方法[3],结果得到的薄层色谱图斑点清
晰,分离效果好。结果表明,本实验采用的虎杖、田基黄、黄
芪三味药材的实验方法获得的薄层色谱图斑点清晰,斑点
分离效果好,阴性无干扰,专属性较强;但方中重楼、连翘两
味药材薄层色谱图斑点分离效果不明显,阴性干扰较大,专
属性不强,鉴别效果不理想。方中田基黄、虎杖、黄芪均为
方中代表性药材,且实验建立的针对这三味药材的薄层鉴
别方法简便、快捷、准确,因此,可以作为复方田基黄胶囊质
量标准的定性鉴别方法。
参考文献
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