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白子菜总黄酮对实验性高脂血症大鼠血脂及肝脏的影响作用研究



全 文 :中图分类号:Q945 文献标识码:A 文章编号:1673 - 7830(2016)05 - 0226 - 04 ·实验研究·
白子菜总黄酮对实验性高脂血症大鼠血脂及肝脏的影响作用研究
翁立冬 陈育尧 张璐 陈活记 刘强
【摘要】 目的 探讨白子菜总黄酮对高血脂模型大鼠血脂及肝脏的影响。方法 采用高脂饲料喂养建立高血脂
大鼠模型,以白子菜总黄酮低、中、高三个剂量组灌胃,测定大鼠体重和血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋
白胆固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,通过病理切片观察其对肝脏的影响。结果 给予高脂饲
料后大鼠血脂显著升高,而白子菜总黄酮高剂量组可以显著降低甘油三酯(TG),减轻模型动物脂肪病变。结论 白子
菜总黄酮对高脂血症大鼠具有降血脂及抗脂肪肝的作用。
【关键词】 白子菜总黄酮;降血脂;脂肪肝;大鼠
Effect of total flavonoids in gynura divaricata(L.)DC. on
blood lipid and liver of rats with hyperlipidemia
WONG Li-dong,CHEN Yu-yao,ZHANG Lu,CHEN Huo-ji,LIU Qiang
(Traditional Chinese Medicine College of Southern Medical University,Guangzhou Guangdong 510515 ,China)
【Abstract】 Objective To investigate the effect of total flavonoids in gynura divaricata(Linn.)DC. on blood lipid and
liver of rats with hyperlipidemia. Methods The hyperlipidemia rat model was established by feeding with high-fat diet. Rats
were fed with Low-,moderate-and high-dose of total flavonoids in gynura divaricata(Linn.)DC. body weight,serum contents of
total cholesterol(TC),triglyceride(TG) ,high density lipoprotein cholesterol(HDL-C)and low density lipoprotein cholesterol
(LDL-C)were measured,and the pathological sections of liver were observed at the end of the experiment. Results After
feeding with high-fat diet,the rats were developed into hyperlipidemia with high serum lipid level. Total flavonoids in gynura
divaricata(Linn.)DC had obvious effects on reducing the contents of TG and the model animal fat lesions. Conclusion Total
flavonoids in gynura divaricata(L.)DC has the therapeutic effects on experimental hyperlipidemia and fatty liver in rats.
【Keywords】 Total flavonoids in gynura divaricata(L.)DC.;Decreasing blood lipid;Fatty liver;Rats
作者单位:510515,广州,南方医科大学中医药学院
白子菜(Gynura divaricata (L.)DC.)别名接骨
丹、白背三七、百子菜、富贵菜、菊三七、鸡菜、白背菜
等,以全草入药。夏秋采集,洗净切片,鲜用或晒干。
味甘、淡,寒。可用于清热解毒,舒筋接骨,凉血止血。
用于支气管肺炎,小儿高热,百日咳,目赤肿痛,风湿关
节痛,崩漏;外用治跌打损伤,骨折,外伤出血,乳腺炎,
疮疡疔肿,烧烫伤。民间以白子菜地上部分作为食药
两用,广泛用于治疗高血压病、高脂血症及糖尿病等,
有“神仙草”之称[1]。被卫生部列为新资源食品。化
学研究表明白子菜具有生物碱、黄酮、多糖、三萜、甾
醇、核苷类化学成分。药理研究表明具有降血糖、降血
压、降血脂等作用。童娟等[2]研究表明其对对四氯化
碳所致小鼠急性肝损伤有保护作用,对高脂血症大鼠
具有降血脂的作用[3],与药用部位有关的报道较多的
是白子菜的黄酮及多糖部位。为拓宽白子菜的应用范
围,2013 年研究了白子菜总黄酮对高血脂症大鼠血脂
及肝脏的影响。
1 材料与方法
1. 1 实验动物 SD 大鼠,SPF 级,雄性,体重 180 ~
220 g,购于南方医科大学动物实验中心。实验动物质
量合格证号:2006A051;SPF级实验动物环境条件合格
证号:2006B023;SPF级实验动物生产许可证号:SCXK
粤 2011-0015。
1. 2 药物及试剂 白子菜采自广州番禺莲花山下农
田,经南方医科大学中药鉴定学教研室陈兴兴教授鉴定
为菊科土三七属植物白子菜 Gynura divaricata (L.)
DC.[Gynura ovalis DC.]的地上部分,晒干备用。白子
菜总黄酮的制备方法如下:参照文献[4]采用最佳提取
工艺提取白子菜总黄酮,即:乙醇浓度为 60%,料液比
1∶ 40,温度为 60 ℃,超声时间 15 min,超声功率500 W,
超声提取 2次。加蒸馏水配制成白子菜总黄酮低中高
·622· 首都公共卫生 2016 年 10 月第 10 卷第 5 期 Capital Journal of Public Health,Oct. 2016 Vol. 10 No. 5
DOI:10.16760/j.cnki.sdggws.2016.05.010
剂量,分别为 100、200 和 400 mg /kg,4 ℃保存备用。总
胆固醇(TC)试剂盒、甘油三酯(TG)试剂盒、高密度脂
蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇
(LDL-C)试剂盒购于南京建成生物工程研究所。
1. 3 高脂饲料 猪油 12%(自制);胆固醇 2%(广州
市齐云生物技术有限公司,批号:201112);丙硫氧嘧
啶 0. 2% (广东华南药业集团有限公司,批号:
110901);3 号胆盐 0. 5%(广州市齐云生物技术有限
公司,批号:201112);普通混合饲料粉 85. 3%(南方医
科大学动物实验中心提供),将以上各物先人工充分
混匀,再用机器搅拌,压成圆条状颗粒置冰柜冷冻备用
(高脂饲料在南方医科大学实验动物中心制作)。
1. 4 仪器 OLYMPUS AU5421 型全自动生化分析
仪,日本 OLYMPUS 公司生产;BECKMANTM30 型低温
离心机,美国 BACKMAN 公司生产;SARTORIUS 电子
天平,德国 SARTORIUS公司生产。
1. 5 方法
1. 5. 1 动物分组及饲养:动物分为模型组、白子菜总
黄酮高剂量组(400 mg /kg)、白子菜总黄酮中剂量组
(200 mg /kg)、白子菜总黄酮低剂量组(100 g /kg)、正常
对照组。每组 6只动物,雄性。除正常对照组外,其余
各组动物均以上述高脂饲料替代普通饲料投喂,平均每
天每只约 20 g左右。正常对照组及模型对照组灌胃自
来水,其它各给药组每日上午灌胃 1 次,灌胃容积为
1 mL/100 g大鼠。以上动物自造模开始,连续灌胃 21 d。
1. 5. 2 白子菜总黄酮对大鼠体重的影响:每周称重一
次,根据体重观察样品对大鼠体重的影响。
1. 5. 3 白子菜总黄酮对血脂含量的影响:实验结束前
1 天晚上给最后 1 次药并禁食,不禁水,次日上午麻醉
后,腹主动脉采血,用全自动生化仪检测血脂五项。
1. 5. 4 白子菜总黄酮对动物肝脏的影响:实验结束后
取肝脏,在离肝右叶离边缘 1 cm 处,横切一块肝组织
用中性福尔马林固定,常规脱水,HE染色。
1. 6 统计学方法 实验数据用 珋x ± s 及等级 /频数表
资料表示,采用 SPSS 8. 0 统计软件 One-Way ANOVA
LSD 法及 Nonparametric Test 2 Independent Samples
Tests法进行数据处理。
2 结果
2. 1 白子菜总黄酮对大鼠体重的影响 实验前各组
大鼠的体重较均衡,组间差异无统计学意义(P >
0. 05)。实验过程中模型组与正常组比较,大鼠第 15
天、21 天体重非常显著低于正常组(P < 0. 01);与各
给药组比较,无显明差异。白子菜总黄酮高剂量组、中
剂量组、低剂量组与模型组比较,体重增加百分率明显
减少(P < 0. 05,表 1)。
表 1 白子菜总黄酮对大鼠体重的影响(珋x ± s,n = 6)
组别
第 1 天
体重 /g
第 8 天
体重 /g
第 15 天
体重 /g
第 21 天
体重 /g
体重增加
百分率 /%
正常组 229 ± 12 285 ± 15 306 ± 13** 300 ± 18** 31. 00*
模型组 226 ± 10 266 ± 19 275 ± 23 265 ± 18 17. 25
白子菜总黄酮高剂量组 227 ± 7 269 ± 13 270 ± 20 263 ± 41 15. 85*
白子菜总黄酮中剂量组 221 ± 13 253 ± 15 269 ± 32 258 ± 39 16. 74*
白子菜总黄酮低剂量组 219 ± 21 258 ± 16 263 ± 24 254 ± 28 15. 98*
注:与模型组比较,* P <0. 05;与模型组比较,** P < 0. 01;体重增加百分
率 =(第 21 天体重 -第 1 天体重) ÷ 第 1 天体重 ×100。
2. 2 白子菜总黄酮对大鼠饲料消耗量的影响 由表
2可见,平均每只大鼠饲料消耗量,正常组最多(499 g),
白子菜总黄酮低剂量组次之(381 g)。增加 1 g 体重
消耗饲料量以白子菜总黄酮中剂量组最小(6. 7 g)。
表 2 白子菜总黄酮对大鼠饲料消耗量的影响
组别
动物
例数 /只
饲料消耗
总量 /g
平均每只大鼠
饲料消耗量 /g
增加 1 g体重
消耗饲料量 /g
正常组 6 2 996 499 7. 0
模型组 6 2 318 386 9. 8
白子菜总黄酮高剂量组 6 2 532 422 8. 3
白子菜总黄酮中剂量组 6 2 386 398 6. 7
白子菜总黄酮低剂量组 6 2 286 381 6. 8
2. 3 白子菜总黄酮对大鼠血脂的影响 由表 3 可见,
模型组与正常组比较,血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆
固醇明显升高(P < 0. 01);高总比明显减少(P <
0. 05)。白子菜总黄酮高剂量组可以显著降低甘油三
酯(P < 0. 01)。白子菜总黄酮高、中、低均不能降低血
清胆固醇含量。
表 3 白子菜总黄酮对大鼠血脂的影响(珋x ± s)
组别 动物例数 /只 甘油三酯 /mmol·L -1 总胆固醇 /mmol·L -1 高密度脂蛋白 /mmol·L -1 低密度脂蛋白 /mmol·L -1 高总比 /%
正常组 6 0. 22 ± 0. 03 2. 06 ± 0. 23** 1. 55 ± 0. 17 0. 62 ± 0. 12** 76
模型组 6 0. 25 ± 0. 09 3. 06 ± 0. 51 2. 06 ± 0. 34 1. 31 ± 0. 25 67
白子菜总黄酮高剂量组 6 0. 15 ± 0. 06** 2. 98 ± 1. 02 1. 98 ± 0. 71 1. 28 ± 0. 56 67
白子菜总黄酮中剂量组 6 0. 19 ± 0. 04 3. 14 ± 0. 99 1. 99 ± 0. 93 1. 33 ± 0. 34 63
白子菜总黄酮低剂量组 6 0. 23 ± 0. 0 2. 79 ± 1. 38 2. 06 ± 0. 85 1. 25 ± 0. 60 74
注:与模型组比较,* P < 0. 05;与模型组比较,**P < 0. 01;高总比(H/T)=高密度脂蛋白胆固醇 /总胆固醇 × 100%;总胆固醇 =高密度脂蛋白
(胆固醇)+低密度脂蛋白。
·722·首都公共卫生 2016 年 10 月第 10 卷第 5 期 Capital Journal of Public Health,Oct. 2016 Vol. 10 No. 5
2. 4 白子菜总黄酮对动物肝脏的影响 模型组脂肪
肝变化较正常组重(P < 0. 01,表 4);与模型组比较,白
子菜总黄酮高剂量组大鼠肝脂肪变明显减轻(P <
0. 05);其他给药组也有不同程度的减轻,但与模型组
比较,差异无统计学意义(图 1)。
表 4 各实验组大鼠肝脏病理组织学检查结果
组别
正常肝组
织(-)/

基本正常肝
组织(±)/

轻度脂肪
肝(+)/

中度脂肪
肝(+ +)/

P值
正常组 3 3 0 0 0. 003
模型组 0 0 3 3 -
白子菜总黄酮高剂量组 2 1 2 1 0. 012
白子菜总黄酮中剂量组 1 2 3 0 0. 075
白子菜总黄酮低剂量组 2 1 1 2 0. 203
注:脂肪肝分级标准,正常肝组织(-):肝小叶结构正常,肝索排列规则,肝
细胞大小均匀一致,胞核呈圆形,形态规则,多数肝细胞见一个细胞核,部分可见
双核。枯否氏细胞无明显增生。汇管区无炎症细胞浸润及纤维组织增生,肝窦清
晰可见;轻度脂肪肝(+):肝小叶结构尚存,肝组织结构大致正常,部分肝细胞索
排列紊乱,肝窦变狭,肝细胞轻度肿胀、空泡变;中度脂肪肝(+ +):肝小叶结构
模糊不清,部分肝细胞索结构消失,肝细胞排列紊乱,大部分肝细胞肿胀、空泡变
或气球样变;基本正常肝组织(±):介于正常及轻度脂肪肝之间。即肝细胞部分
正常,部分轻度肿胀。
图 1 各组实验动物病理切片图(HE,× 200)
3 讨论
白子菜还是一种野菜,嫩茎、叶可以食用[5]。广
西民间以白子菜为食用野菜,广泛用于防治高血压病、
高血脂症及癌症等。研究表明,白子菜含有黄酮类、生
物碱类、多糖类、甾体及三萜类、长链脂肪族及长链烷
基类、挥发油类、氨基酸及矿物质等多种化学成分。黄
酮类化合物是白子菜的主要活性成分之一,主要含有
槲皮素及其糖苷类成分。王津江等[4]对白子菜中总
黄酮的提取工艺进行了研究,结果发现总黄酮含量茎
(6. 97‰)>叶(6. 27‰)>根(3. 19‰)。林荣华等[6]
研究表明在 70 ℃下用 20 倍体积的 45%乙醇,提取时
间 3 h为最佳提取条件,此条件下测得白子菜全株总
黄酮质量分数为 1. 56%。
本研究针对其总黄酮进行药理学研究,采用高脂
饲料制备大鼠高脂血症模型,并用白子菜总黄酮进行
干预。结果表明白子菜总黄酮可降低血清甘油三酯及
减轻模型动物脂肪病变。本文实验结果为白子菜的综
合开发利用提供了理论依据。
参考文献
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(收稿日期:2016 - 08 - 31)
中图分类号:Q945 文献标识码:A 文章编号:1673 - 7830(2016)05 - 0229 - 03 ·实验研究·
白子菜提取物对小鼠刀豆蛋白 A尾静脉注射所致肝损伤的作用研究
朱红霞 翁立冬 陈育尧 张璐 陈活记 刘强
【摘要】 目的 探讨白子菜提取物对刀豆蛋白 A(Concanavalin A,ConA)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法
采用 ConA制备小鼠急性化学性肝损伤模型,72 只小鼠随机分成正常对照组、ConA 模型组及白子菜低、中、高三个不
同浓度剂量组,各给药组连续给药 7 d,测定小鼠体重变化以及血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶的含量。结果 白子菜高剂
量组能降低血清谷丙、谷草转氨酶的活性,减轻肝细胞变性、坏死。结论 白子菜高剂量组对小鼠 ConA尾静脉注射所致
肝损伤有一定的降酶护肝作用。
【关键词】 白子菜;刀豆蛋白 A;肝损伤;降酶护肝
Protective effect of Gynura divaricata (L.)DC. extract on liver
injury induced by Concanavalin A(Con A)in mice
ZHU Hong-xia,WONG Li-dong,CHEN Yu-yao,ZHANG Lu,CHEN Huo-ji,LIU Qiang
(Traditional Chinese Medicine College of Southern Medical University,Guangzhou Guangdong 510515,China)
【Abstract】 Objective To study the protective effect of gynura divaricata (L.)DC. extract on liver injury induced by
Con A in mice. Methods The acute chemical liver injury model was established by Con A and 72 mice were divided into 6
groups at random,the control group,biphenyl dimethyl dicarboxylate control group,the Con A model group,high dose group,
middle dose group and low dose group. The changes of the mice body weight and the contents of alanin aminotransferase(ALT)
and aspartate aminotransferase(AST)in the serum were measured after successive administration for 7 d. Results High dose
group of gynura divaricata extract could inhibit the activities of AST and ALT in mice serum and could effectively inhibit
lipoperxidation and necrosis in mice liver. Conclusion High dose group of gynura divaricata extract had the effect of protecting
hepar and decreasing enzyme to a certain extent.
【Keywords】 Gynura divaricata (L.)DC.;Concanavalin A;Liver injury;Protecting hepar and decreasing enzyme
作者单位:510515,广州,南方医科大学中医药学院
白子菜(Gynura divaricata (L.)DC.),别名接骨
丹、白背三七、百子菜、富贵菜、菊三七、鸡菜、白背菜
等,以全草入药。味甘、淡,寒。可用于清热解毒,舒筋
接骨,凉血止血。用于支气管肺炎,小儿高热,百日咳,
目赤肿痛,风湿关节痛,崩漏;外用治跌打损伤,骨折,
外伤出血,乳腺炎,疮疡疔肿,烧烫伤[1]。民间以白背
三七地上部分作为食药两用,广泛用于治疗高血压病、
高脂血症及糖尿病等,有“神仙草”之称[2,3]。被卫生
部列为新资源食品。化学研究表明白子菜具有生物
碱、黄酮、三萜、甾醇、核苷类化学成分。药理研究表明
具有降血糖、降血压、降血脂等作用。童娟等[4]研究
表明其对对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤有保护作
用。2013 年研究了白子菜提取物刀豆蛋白 A
(Concanavalin A,ConA)尾静脉注射所致小鼠肝损伤
的影响,以进一步探讨其护肝作用机理。
1 实验材料
1. 1 实验动物 NIH 小鼠,SPF 级,72 只,雄性,体重
·922·首都公共卫生 2016 年 10 月第 10 卷第 5 期 Capital Journal of Public Health,Oct. 2016 Vol. 10 No. 5
DOI:10.16760/j.cnki.sdggws.2016.05.014