全 文 :China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 39 中国药房 2011年第22卷第39期
Δ中山市华南现代中药城(健康医药产业基地)专项发展基金项
目(2007J007)
*实验师,硕士研究生。研究方向:中药药理学。E-mail:
cefeng2006@126.com
#通讯作者:副教授,硕士研究生导师。研究方向:中药资源鉴定
与中药质量标准。 E-mail :jian139@tom.com
金钮扣,别名一面针、刺茄、山颠茄、金钮头或小登茄 [1]。
来源于茄科植物水茄 Solanum torvum Swartz.的干燥茎和根,
有活血、散瘀、消肿、通经、止咳、止痛之功效,味辛、微苦,微
凉,有小毒[2]。前人对金钮扣的研究主要集中在果实和叶的化
学成分上。本课题组前期研究发现,金钮扣醇提取物对止咳、
化痰有一定疗效,现对醇提取物作进一步的提取分离,寻找止
咳和化痰作用的有效部位,以期为临床应用与合理开发利用
药材资源提供理论依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
YLS-8A型多功能诱咳引喘仪(山东省医学科学院设备
站);UV1102型紫外分光光度计(上海天美科学仪器有限公
司)。
1.2 试药
金钮扣由广东益和堂提供,经广东药学院中山校区实验
中心田素英副教授鉴定为真品;氢溴酸右美沙芬片(广州白云
山光华制药股份有限公司,批号:20100620);氯化铵(呼和浩
特制药厂,批号:20100112);其他试剂均为分析纯。
1.3 动物
KM种小鼠80只,♀♂兼半,体重18~22 g;豚鼠80只,♀
♂兼半,体重 150~200 g,均由南方医科大学实验动物中心提
供(动物生产许可证号:SCXK(粤)2006-0015)。由广州中医
金钮扣不同提取物止咳化痰作用研究Δ
冯承恩 1*,黄庆芳 1,房志坚 1 #,梅全喜 2(1.广东药学院中山校区,中山市 528458;2.广州中医药大学附属中山医
院,中山市 528400)
中图分类号 R285;R965 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2011)39-3656-03
摘 要 目的:研究金钮扣不同提取物的止咳、化痰作用。方法:金钮扣用95%乙醇回流提取得到醇提取物,加水溶解后依次用
石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,浓缩得相应的萃取物和水相溶解部位。采用豚鼠枸橼酸引咳法、小鼠气管酚红法,观察金钮
扣不同提取物的止咳、化痰作用。结果:金钮扣醇提取物组、乙酸乙酯组、正丁醇组和空白对照组的咳嗽潜伏期分别为 133.5、
138.4、137.1、87.8 s,咳嗽次数分别为7、8、8和16次,酚红分泌量分别为1.031、1.014、1.262、0.656 μg;醇提取物组、乙酸乙酯组和正
丁醇组的咳嗽潜伏期延长、咳嗽次数减少、酚红分泌量增加,与空白对照组比较均具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。石油醚
组、氯仿组和水溶部分组的咳嗽潜伏期、咳嗽次数及酚红分泌量,与空白对照组比较均无显著性差异。结论:金钮扣醇提取物止咳
和化痰作用的有效成分主要集中在乙酸乙酯和正丁醇萃取部位。
关键词 金钮扣;止咳;化痰
Study on the Effects of Different Extracts of Spilanthes paniculata on Relieving Cough and Reducing
Phlegm
FENG Cheng-en,HUANG Qing-fang,FANG Zhi-jian(Zhongshan Campus,Guangdong Pharmaceutical Col-
lege,Zhongshan 528458,China)
MEI Quan-xi(Zhongshan Hospital Affiliated to Guangzhou University of TCM,Zhongshan 528400,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To observe the effects of different extracts of Spilanthes paniculata on relieving cough and reducing
phlegm. METHODS:S. paniculata was extracted by 95% alcohol and dissolved in water,and then extracted by petroleum ether,
chloroform,ethyl acetate,n-butanol,respectively. Corresponding extracts and aqueous solution parts were obtained. Citric acid-in-
duced cough in guinea pig method and phenol red excretion of mice trachea were use to observe the effects of S. paniculata on re-
lieving cough and reducing phlegm. RESULTS:The cough incubation periods of S. paniculataal acohol extract group,ethyl acetate
group,n-butanol group and blank group were 133.5 s,138.4 s,137.1 s and 87.8 s,respectively. Cough frequency in those groups
were 7 times,8 times,8 times and 16 times;phenol red secretion were 1.031 μg,1.014 μg,1.262 μg and 0.656 μg,respectively;
In alcohol extract group,ethyl acetate group and n-butanol group,cough incubation period could be extended to reduce cough fre-
quency and increase phenol red secretion. Compared with blank group,there were significant differences(P<0.01 or P<0.05). In
petroleum ether groups,chloroform group and water soluble part group,latency of cough,cough frequency and the amount of phe-
nol red secretion,compared with blank group,had no significant difference. CONCLUSION:The active ingredients of alcohol ex-
tract of S. paniculata on relieving cough and reducing phlegm mainly concentrate in parts of ethyl acetate and n-butanol.
KEY WORDS Spilanthes paniculata;Relieving cough;Reducing phlegm
··3656
中国药房 2011年第22卷第39期 China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 39
药大学附属中山医院动物实验室饲养,室内温度控制在(20±
2)℃,湿度为60%。
2 方法与结果
2.1 金纽扣提取物的制备
按常规回流提取法,用95%乙醇回流提取金钮扣茎部,浓
缩得醇提取物浸膏151.5 g。取95.5 g醇提取浸膏,加水溶解后
依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,萃取至萃取液无
色为止,浓缩分别得石油醚浸膏 6.2 g、氯仿浸膏 9.8 g、乙酸乙
酯浸膏 5.5 g、正丁醇浸膏 14.0 g和水溶部分浸膏 15.1 g。4℃
贮藏,备用。
2.2 金纽扣提取物对豚鼠枸橼酸引咳的影响[3]
筛选豚鼠:取豚鼠置于诱咳引喘仪中,17.5%枸橼酸喷雾
1 min,以豚鼠出现响亮的咳嗽声为标准,记录5 min内豚鼠的
咳嗽次数,次数多于10次的豚鼠为合格动物,用于实验。
取豚鼠80只,随机均分为8组,即空白对照、阳性对照、金
钮扣醇提取物和金纽扣石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水溶
性部分组。实验前禁食不禁水 12 h,金纽扣各提取物组按
17.12 g·kg-1 ig给药,每天1次,连续3 d;阳性对照组于金纽扣
各提取物组 ig给药第 2天按 0.3 g·kg-1 ig 给予氢溴酸右美沙
芬,每天 1次,连续 2 d;空白对照组 ig等体积生理盐水。末次
给药后 1 h,将豚鼠放入诱咳引喘仪中,并使豚鼠接受恒压
17.5%枸橼酸刺激至预定时间引咳,喷雾刺激时间为1 min,记
录豚鼠的咳嗽潜伏期以及在5 min内咳嗽次数。
2.3 金纽扣提取物对小鼠气管酚红分泌的影响[3]
以 5%NaHCO3作为溶剂,测定浓度为 0.25、0.50、0.75、
1.00、1.50、2.00、2.50、3.00 μg·mL-1酚红的吸光度(OD)值,通过
酚红浓度和OD值计算出回归方程,再根据回归方程计算出各
小鼠的气管酚红的排泄量。
取小鼠80只,分组同“2.2”项下方法。实验前禁食不禁水
12 h,金纽扣各提取物组按17.12 g·kg-1 ig给药,每天1次,连续
7 d;阳性对照组于金钮扣各提取物组 ig给药第6天按1 g·kg-1
ig给予氯化铵,每天 1次,连续 2 d;空白对照组给予等体积生
理盐水。末次给药后 30 min,ip2.5%酚红生理盐水溶液 0.5
mL/只,注射30 min后,颈椎脱臼处死小鼠,钝性分离甲状软骨
至气管分支处段气管,用5%NaHCO3溶液反复抽洗气管3次,
每次 0.5 mL,合并洗出液,装入试管中,1 500 r·min-1离心 10
min,取上清液,用分光光度计测 546 nm波长处OD值。根据
回归方程计算出酚红的分泌量,根据酚红分泌量和动物体重
计算出酚红校正量。
2.4 统计学方法
实验数据以x±s表示,应用SPSS 13.0统计软件分析,计量
资料组间采用ANVON检验。P<0.05表示差异有显著性。
3 结果
3.1 金纽扣提取物对枸橼酸所致豚鼠咳嗽的影响
与空白对照组比较,金钮扣乙酸乙酯、正丁醇、醇提物组
咳嗽潜伏期显著延长(P<0.05),咳嗽次数显著减少(P<
0.05);金纽扣石油醚、氯仿、水溶部分组咳嗽潜伏期和咳嗽次
数均有改善趋势,但无显著性差异。金纽扣提取物对枸橼酸
所致豚鼠咳嗽的影响见表1。
3.2 金纽扣提取物对小鼠气管酚红分泌量的影响
与空白对照组比较,金钮扣乙酸乙酯、正丁醇、醇提物组
的酚红分泌量显著增加(P<0.05),酚红校正值也相应显著增
加(P<0.01);金纽扣石油醚、氯仿、水溶部分组酚红分泌量、酚
红校正值有改善趋势,但无显著性差异。金纽扣提取物对小
鼠气管酚红分泌量的影响见表2。
表2 金纽扣提取物对小鼠气管酚红分泌量的影响(x±s,n=
10)
Tab 2 Effects of extraction of S. paniculata on phenol red
secretion in mice(x±s,n=10)
组别
空白对照组
阳性对照组
金纽扣石油醚组
金纽扣氯仿组
金纽扣乙酸乙脂组
金纽扣正丁醇组
金纽扣水溶部分组
金纽扣醇提取物组
剂量/g·kg-1
-
1.00
17.12
17.12
17.12
17.12
17.12
17.12
酚红分泌量/μg
0.656±0.086
1.338±0.024**
0.655±0.087
0.623±0.099
1.014±0.023*
1.262±0.021*
0.563±0.058
1.031±0.069*
酚红校正值/μg·g-1
0.026±0.004
0.055±0.016**
0.027±0.012
0.023±0.002
0.045±0.012**
0.053±0.024**
0.018±0.014
0.045±0.020**
与空白对照组比较:*P<0.05,**P<0.01
vs. blank control group:*P<0.05,**P<0.01
4 讨论
金钮扣为茄属植物,茄属植物具有降压等多种功效[4],而
金钮扣则有散瘀、通经、消肿、止痛、止咳之功效,是中华老字
号广东益和堂生产的传统名药沙溪凉茶的主要成分之一 [5]。
本课题组前期的研究已发现金钮扣水提取物和醇提取物具有
止咳和化痰的功效,但以醇提取物的疗效更佳。根据溶剂极
性大小,笔者对醇提取物进一步萃取分离,探究金钮扣止咳、
化痰有效成分的部位。结果显示,止咳化痰的有效成分主要
集中在乙酸乙酯和正丁醇萃取部分,极性较小的石油醚、氯仿
和极性较大的水溶性部分未明显显示其止咳、化痰的功效。
谢纲等[6]研究发现,金钮扣主要成分为生物碱类、黄酮及
苷类、甾类、挥发油、有机酸及其衍生物等。最近,陆园园等[7]
在金钮扣中发现甾体、生物碱、皂苷、芦丁、山柰酚和槲皮素
等。另外,舒伟虎等[8]在金钮扣95%醇提取物的乙酸乙酯部位
分离出酰胺类、甾体、苷类、黄酮和有机酸等 11种成分。笔者
前期研究发现,金钮扣中的有效成分为生物碱、挥发油、黄酮
类和三萜类等 [9],生物碱、皂苷类往往具有止咳、化痰作用[10]。
笔者推测金钮扣醇提取物不同萃取物中具有止咳、化痰作用
的有效成分可能与生物碱及皂苷类的成分有关,此为其药理
作用的化学基础,下一步将对其药理活性进行研究。
表1 金纽扣提取物对枸橼酸所致豚鼠咳嗽的影响(x±s,n=
10)
Tab 1 Effects of extraction of S. paniculata on citric acid-in-
duced cough in guinea pigs(x±s,n=10)
组别
空白对照组
阳性对照组
金纽扣石油醚组
金纽扣氯仿组
金纽扣乙酸乙酯组
金纽扣正丁醇组
金纽扣水溶部分组
金纽扣醇提取物组
剂量/g·kg-1
-
0.30
17.12
17.12
17.12
17.12
17.12
17.12
咳嗽潜伏期/s
87.8±21.89
152.8±16.60**
78.6±19.45
101.3±20.16
138.4±18.94*
137.1±24.57*
76.9±11.23
133.5±19.70*
咳嗽次数/次
16.0±2.8
5.0±1.5**
13.0±2.2
9.0±1.9
8.0±2.0*
8.0±2.6*
13.0±3.8
7.0±2.9*
与空白对照组比较:*P<0.05,**P<0.01
vs. blank control group:*P<0.05,**P<0.01
··3657
China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 39 中国药房 2011年第22卷第39期
参考文献
[ 1 ] 江苏新医学院.中药大辞典(上册)[M].上海:上海科学技
术出版社,2001:718.
[ 2 ] 梅全喜主编.广东地产药材研究[M].广州:广东科技出版
社,2011:430.
[ 3 ] 徐叔云,卞如濂,谢强敏.药理实验方法学(第 3版)[M].
北京:人民卫生出版社,2001:1 359.
[ 4 ] 汤丹灵.乌点规醇溶性成分降压作用研究[J].中国药房,
2008,19(9):659.
[ 5 ] 房志坚,刘基柱主编.药用植物学野外实习手册[M].广
州:羊城晚报出版社,2007:121.
[ 6 ] 谢 纲,李 冲.茄属植物化学成分和生物活性[J].国外
医药植物药分册,2006,21(2):63.
[ 7 ] 陆园园,罗建光,孔令义.水茄的化学成分[J].中国天然药
物,2011,9(1):30.
[ 8 ] 舒伟虎,周光雄,叶文才.水茄的化学成分研究[J].中草
药,2011,42(13):424.
[ 9 ] 吴冬凡,房志坚.金钮扣根化学成分研究[J].广东药学院
学报,2008,24(2):139.
[10] 沈映君,陈长勋.中药药理学[M].上海:上海科学技术出
版社,2008:160.
(收稿日期:2011-01-13 修回日期:2011-05-27)
痛经康口服液镇痛、抗炎和急性毒性作用研究Δ
李运景*,赵伟国,陈钧茂,周 俊(中山大学附属中山医院,中山市 528400)
中图分类号 R285;R97 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2011)39-3658-03
摘 要 目的:研究痛经康口服液的镇痛、抗炎和急性毒性作用。方法:采用醋酸扭体法和热板法观察镇痛作用;采用小鼠耳廓
肿胀、毛细血管通透性法观察抗炎作用,采用最大给药量实验研究痛经康口服液对小鼠的急性毒性。结果:痛经康口服液能显著
减少小鼠的扭体次数,抑制由二甲苯致小鼠廓肿胀和降低小鼠腹腔毛细血管的通透性,但对热刺激所致小鼠的痛阈值未见明显影
响;痛经康口服液在剂量为261 g·kg-1时未发现毒性反应。结论:痛经康口服液较为安全且具有明显的镇痛、抗炎作用。
关键词 痛经康口服液;镇痛;抗炎;急性毒性
Study on Analgesic Anti-inflammatory and Acute Toxicity Effects of Tongjingkang Oral Liquid
LI Yun-jing,ZHAO Wei-guo,CHEN Jun-mao,ZHOU Jun(The Affiliated Zhongshan Hospital of Sun Yat-sen
University,Zhongshan 528400,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study on analgesic anti-inflammatory and acute toxicity effects of Tongjingkang oral liquid. METH-
ODS:The analgesic effect of Tongjingkang oral liquid in mice was observed in acetic acid-induced writhing and hot-plate test,and
the anti-inflammatory effect was observed in test of mice ear swelling and capillary permeability. The acute toxicity was studied in
maximum drug dose test. RESULTS:Tongjingkang oral liquid could obviously decrease the number of writhe induced by acetic ac-
id,and apparently inhibit auricle swelling induced by xylene in mice and permeability of abdominal capillary. But oral liquid had
no obvious effect on the pain threshold of temperature stimulation in mice;No toxicity effect was observed at dose of 261 g·kg-1.
CONCLUSION:Tongjingkang oral liquid has both obvious analgesic and anti-inflammatory effects.
KEY WORDS Tongjingkang oral liquid;Analgesic;Anti-inflammatory;Acute toxicity
Δ中山市科技计划项目(20082A068)
*主任药师,教授。研究方向:临床药学、药理学。电话:
0760-89880361。E-mail:zspylyj@163.com
痛经康口服液(以下简称痛经康)是由元胡、当归、川芎、
香附等13味中药组成的纯中药复方制剂,来源于临床经验方,
是中山大学附属中山医院制剂室开发的新的中药复方制剂,
具有理气活血、通络止痛的功效,主要用于治疗多种原因引起
的痛经、月经不调等症。为了进一步研究其药理作用和毒性
反应,笔者采用醋酸扭体法和热板法观察痛经康的镇痛作用;
采用小鼠耳廓肿胀、毛细血管通透性法观察痛经康的抗炎作
用;采用最大给药量法观察其急性毒性反应。
1 仪器与材料
1.1 仪器
BS-3000A型电子分析天平(上海友声衡器有限公司);
BS224S型电子分析天平(德国Sartorius公司);YLS-6B型智能
热板仪(淮北正华生物仪器设备有限公司);UV-1200型可见分
光光度计(上海美谱达仪器有限公司)。
1.2 试药
罗通定(四川金药师制药有限公司,批号:100301);醋酸
地塞米松(浙江仙琚制药股份有限公司,批号:090830);痛经
康(中山大学附属中山医院制剂科,批号:20101101,含量:
1.45 g(生药)/mL);实验所用试剂均为分析纯。
1.3 动物
SPF级NIH小鼠 250只,♀♂兼用,体重 15~18 g,由广东
省医学实验动物中心提供(实验动物使用许可证号:SYXK(粤)
··3658