全 文 ：Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｊｕｎ．２０１５ Ｖｏｌ．３８Ｎｏ．２
［收稿日期］ ２０１５－０５－１１
［作者简介］ 黄曦漫（１９９１—），女（朝鲜族），硕士研究生，研
究方向为药物质量标准．
［通信作者］ 姜英子，Ｅｍａｉｌ：ｙｚｊｉａｎｇ＠ｙｂｕ．ｅｄｕ．ｃｎ．
关苍术粗粉、超微粉及水煎剂对小鼠的急性毒性
黄曦漫１，张松瑶１，耿聪２，姜英子１
（１．延边大学药学院，吉林 延吉１３３００２；２．大连医科大学附属第二医院 检验科，辽宁 大连１１６０２３）
［摘要］ ［目的］评价关苍术粗粉、超微粉及水煎剂对小鼠的急性毒性．［方法］采用改良寇氏法测定关
苍术粗粉及超微粉半数致死量；采用最大给药量法测定关苍术水煎剂最大给药量，并对关苍术进行毒理
学评价．［结果］小鼠关苍术粗粉急性经口ＬＤ５０为２４．９１ｇ／ｋｇ；关苍术超微粉急性经口ＬＤ５０为２８．５３
ｇ／ｋｇ；关苍术水煎剂最大给药量为生药４９５ｇ／ｋｇ（生药量），相当于关苍术成人（体质量以６０ｋｇ计）每日
口服剂量以１０～３０ｇ计算，小鼠最大耐受量是人用药剂量的约９９０～２ ９７０倍．［结论］关苍术水煎剂为
无毒药物．
［关键词］ 关苍术；急性毒性；小鼠
ＤＯＩ：１０．１６０６８／ｊ．１０００－１８２４．２０１５．０２．０１０
［中图分类号］ Ｒ ２８５ ［文献标志码］ Ａ ［文章编号］ １０００－１８２４（２０１５）０２－０１１２－０３
Ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｃｏａｒｓｅ ｐｏｗｄｅｒ，ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ ａｎｄ ｗａｔｅｒ ａｐｏｚｅｎ ｏｆ
ｔｈｅ ｒｈｉｚｏｍａ ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ ｊａｐｏｎｉｃａｅ ｆｏｒ ｍｉｃｅ
ＨＵＡＮＧ Ｘｉｍａｎ１，ＺＨＡＮＧ Ｓｏｎｇｙａｏ１，ＧＥＮＧ Ｃｏｎｇ２，ＪＩＡＮＧ Ｙｉｎｇｚｉ １
（１．Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｙａｎｊｉ １３３００２，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ
ｏｆ Ｄａｌｉａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ １１６０２３，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｃｏａｒｓｅ ｐｏｗｄｅｒ，ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ ａｎｄ ｗａｔｅｒ
ａｐｏｚｅｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｈｉｚｏｍａ ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｓ ｊａｐｏｎｉｃａｅ（Ａ．Ｊ）ｆｏｒ ｍｉｃｅ．ＭＥＴＨＯＤＳＴｈｅ ｍｅｄｉａｎ ｌｅｔｈａｌ ｄｏｓｅ（ＬＤ５０）
ｏｆ ｃｏａｒｓｅ ａｎｄ ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ ｏｆ ｔｈｅ Ａ．Ｊ ｉｎ ｍｉｃｅ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｋａｂｅｒ ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｗａ－
ｔｅｒ ａｐｏｚｅｎ ｏｆ Ａ．Ｊ ｗｅｒｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｔｏｌｅｒａｔｅｄ ｄｏｓａｇｅ（ＭＴＤ）ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ
ｏｆ Ａ．Ｊ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ｍｅｄｉａｎ ｌｅｔｈａｌ ｄｏｓｅ ｏｆ Ａ．Ｊ ｃｏａｒｓｅ ｐｏｗｄｅｒ ｗａｓ ２４．９１ｇ／ｋｇ，ｏｎｅ ｏｆ Ａ．Ｊ ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ ｐｏｗｄｅｒ
ｗａｓ ２８．５３ｇ／ｋｇ，ａｎｄ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｄｏｓａｇｅ ｗａｓ ４９５ｇ ｏｆ Ａ．Ｊ，ａｎｄ ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ａｐｏｚｅｎ ｏｆ Ａ．Ｊ
ｇｉｖｅｎ ｔｏ ｍｉｃｅ ｐｅｒ ｋｇ ｔｈａｔ ｉｓ ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ｔｏ ｔｈｅ ｍｅｎ ｗｉｔｈ ６０ｋｇ ｗｈｏｓｅ ｄａｉｌｙ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｄｏｓａｇｅ（１０～３０ｇ）
ｂｙ ９９０～２ ９７０ｔｉｍｅｓ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＷａｔｅｒ ａｐｏｚｅｎ ｏｆ ｔｈｅ Ａ．Ｊ ｗａｓ ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ ａｓ ａ ｎｏｎ－ｔｏｘｉｃ ｍｅｄｉｃｉｎｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｒｈｉｚｏｍａ Ａｅｔｒａｃｔｙｃｏｄｅｓ ｊａｐｏｎｌｃａ；ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ；ｍｉｃｅ
关 苍 术 为 菊 科 植 物 关 苍 术 （Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ
Ｊａｐｏｎｉｃａ Ｋｏｉｄｚ ｅｘ Ｋｉｔａｍ）的干燥根茎，又名枪头
菜，性味辛、苦、温，主要产于我国东北地区．关苍术
作为朝鲜族传统习用药材，在多部朝鲜族民族药古
书籍文献中有记载［１］．目前，国内外对关苍术的研究
多限于物质基础［２］与质量控制方面［３－５］，而深层开发
利用方面研究尚较少见．本实验观察了关苍术粗粉、
超微粉及水煎剂的急性毒性，旨在为关苍术临床用
药安全提供依据．
１ 材料与方法
１．１ 材料 选择昆明种小鼠，由延边大学实验动物
中心提供，许可证号为ＳＣＫＸ（吉）２０１１－０００７，体质
量为２０～２２ｇ，雌雄各半．于恒温２５℃、湿度５０％的
环境中适应性饲养，采用立体笼式饲养方式，给予标
准饲料，自由饮水．实验前饲养７ｄ，观察健康状况，
选用健康、营养状况良好的小鼠．关苍术采集于汪清
县塔子沟，经延边大学药学院生药学教研部吕惠子
·２１１·
延边大学医学学报 ２０１５年６月 第３８卷 第２期
副教授鉴定为菊科植物关苍术根茎，样品保存于延
边大学药学院生药学实验室．水煎剂浸膏：１ｇ浸膏
相当于４．６７ｇ生药．
１．２ 方法
１．２．１ 超微粉的制备 将关苍术干燥根茎粗粉用
超微粉碎机进行超微粉碎，用乙醇润湿后，加入适量
蒸馏水，在确定的室温条件下超声３ｍｉｎ后立即使
用全自动激光粒度测试仪进行检测［６］．
１．２．２ 关苍术粗粉的经口急性毒性实验 在预实
验的基础上［７］，取健康昆明种小鼠８０只，雌雄各半，
随机分为８个组，每组各为１０只．小鼠在给药前禁
食１２ｈ不禁水，给药组以全致死量（Ｄｍ）为最高剂
量，组间剂量比为１∶０．８５，按照最大给药量０．０４
Ｌ／ｋｇ，２４ｈ内给小鼠灌胃给药，对照组给予等体积
溶媒．给药后常规饲养观察１４ｄ，记录动物体质量变
化、采食、饮水、外观、行为、分泌物、排泄物及中毒反
应情况，中毒反应出现时详细记录小鼠出现毒性反
应的时间、持续时间、恢复及死亡时间、死亡情况、中
毒症状等，并对死亡小鼠进行解剖，记录病变情况．
第１４ｄ，将所有存活小鼠称取质量后处死，行解剖，
肉眼观察小鼠腹腔内液体状况及实质性器官心、肝、
脾、肾的病理变化［８］．
１．２．３ 关苍术超微粉的经口急性毒性实验 在预
实验的基础上［７］，取健康昆明种小鼠９０只，雌雄各
半，随机分为９个组，每组各为１０只．小鼠在给药前
禁食１２ｈ不禁水，按照１．２．２项下方法进行操作．
１．２．４ 关苍术水煎剂的经口急性毒性实验 在预
实验未测出ＬＤ５０的基础上，改操作最大给药量实
验［９］．取健康昆明种小鼠２０只，雌雄各半，随机分为
关苍术水煎剂组及空白对照组，每组各为１０只．小
鼠在给药前禁食１２ｈ不禁水，给药组以最大容积４０
ｍＬ／ｋｇ和最大质量分数１６５ｇ／ｋｇ在１ｄ内早、中、
晚３次灌胃给予关苍术水提取物；空白对照组给予
等剂量生理盐水．观察两组小鼠外观、行为、活动、精
神活动、食欲、大小便及其颜色、皮毛、呼吸情况，观
察鼻、眼、口腔有无异常分泌物及体质量变化、死亡
情况．
１．２．５ 统计学分析 采用 Ｇｒａｐｈ Ｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ｐｒｏ－
ｇｒａｍ（ＵＳＡ）软件进行数据分析．实验数据以均数±
标准偏差（珚ｘ±ＳＤ）表示，多组均数比较采用单因素
方差分析，其样本均数之间的两两比较采用 Ｔｕｒ－
ｋｅｙ’ｓ法，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义．
２ 结果
２．１ 关苍术超微粉粉体粒度检测 样品的粒度分
布中心 Ｄ５０为１６．６９μｍ，关苍术粗粉的粒径为
４０．７５μｍ．见图１、图２及表１．
Ｄ１０＝１１．４５μｍ（表示粒度≤１１．４５μｍ的粉体累积占
总粉体的１０％，下同）；Ｄ２０＝２０．２３μｍ；Ｄ５０＝４３．９４
μｍ；Ｄ７０＝６４．５３μｍ；Ｄ９０＝７９．７２μｍ．
图１ 关苍术粗粉粒径分布图
Ｄ１０＝３．６５μｍ（表示粒度≤３．６５μｍ的粉体累积占总
粉体的１０％，下同）；Ｄ２０＝７．７３μｍ；Ｄ５０＝１６．６９μｍ；
Ｄ７０＝２０．６６μｍ；Ｄ９０＝３６．０１μｍ．
图２ 关苍术超微粉粒径分布图
表１ 关苍术粗粉与超微粉比较
批号 研磨时间／ｈ 平均粒径／μｍ Ｄ５０／μｍ
粗粉 ０ ４０．７５ ４３．９４
超微粉 １ １５．９７ １６．６９
２．２ 关苍术粗粉及超微粉经口急性毒性实验
２．２．１ 关苍术粗粉及超微粉对小鼠的ＬＤ５０ 大剂
量组在给药后３０ｍｉｎ内出现精神沉郁、双目紧闭、
喜卧、不愿自主活动症状，最后在安静状态下死亡．
根据改良寇氏法计算得出关苍术粗粉ＬＤ５０为２４．９１
ｇ／ｋｇ，ＬＤ５０的９５％可信限为２２．４７～２７．６１ｇ／ｋｇ，见
表２；关苍术超微粉ＬＤ５０为２８．５３ｇ／ｋｇ，ＬＤ５０的
９５％可信限为２５．７２～３１．６４ｇ／ｋｇ，见表３．
２．２．２ 小鼠解剖学观察结果 小鼠濒临死亡时发
生腹部剧烈收缩抽搐，死亡小鼠解剖观察结果显示，
腹腔内药物残渣较多，部分附着于肠及肠系膜上．尸
·３１１·
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｊｕｎ．２０１５ Ｖｏｌ．３８Ｎｏ．２
体外观无明显眼观变化，心、肝、脾、肺、肾等实质性
器官亦无明显眼观变化．分析原因认为药液黏稠度
较大而使胃及肺的运动受限引起死亡，并非药物毒
性所致．
表２ 关苍术粗粉对小鼠急性毒性测定
组
别
剂量
／（ｇ／ｋｇ） ｎ
死亡数
／只
死亡率
／Ｐ
ＬＤ５０
／（ｇ／ｋｇ）
ＬＤ５０的９５％
可信限／（ｇ／ｋｇ）
１ ４４．００ １０ １０ １．０
２ ３７．４０ １０ １０ １．０
３ ３１．７９ １０ ８ ０．８
４ ２７．０２ １０ ４ ０．４ ２４．９１ ２２．４７～２７．６１
５ ２２．９７ １０ ３ ０．３
６ １９．５２ １０ ４ ０．４
７ １６．５９ １０ １ ０．１
８ １４．１１ １０ ０ ０．０
表３ 关苍术超微粉对小鼠急性毒性测定
组
别
剂量
／（ｇ／ｋｇ） ｎ
死亡数
／只
死亡率
／Ｐ
ＬＤ５０
／（ｇ／ｋｇ）
ＬＤ５０的９５％
可信限／（ｇ／ｋｇ）
１ ４８．００ １０ １０ １．０
２ ４０．８０ １０ ９ ０．９
３ ３４．６８ １０ ８ ０．８
４ ２９．４８ １０ ４ ０．４ ２８．５３ ２５．７２～３１．６４
５ ２５．０６ １０ ３ ０．３
６ ２１．３０ １０ ２ ０．２
７ １８．１０ １０ １ ０．１
８ １５．３９ １０ ０ ０．０
２．３ 关苍术水煎剂经口急性毒性实验
２．３．１ 小鼠一般状态观察 给药后观察动物１４ｄ，
结果见，小鼠活动自如，无惊厥、运动失调、流涎、流
泪、流鼻涕、呼吸困难、腹泻、便秘、肠胀气等现象发
生，动物皮毛光泽，给药后１４ｄ内无１只死亡．第
１４ｄ动物全部行脱颈椎处死，逐只做尸体检查，肉眼
观察小鼠各内脏，结果示，肝脏、肾脏、脾脏等脏器组
织无肿胀、萎缩、出血、颜色异常、黏连、硬化等异常
改变．
２．３．２ 小鼠体质量变化 与空白对照组比较，关苍
术水煎剂组体质量无明显改变（Ｐ＞０．０５），见表４．
表４ 关苍术水煎剂对小鼠体质量的影响（ｇ，珚ｘ±ＳＤ）
组别 ０ｄ ３ｄ ７ｄ １０ｄ １４ｄ
体质量增长
百分率／％
空白对照组２４．２８±１．８６ ２６．５０±１．８３ ３０．３１±３．０４ ３２．４６±３．５８ ３５．３２±４．１８ ４５．４７
关苍术
水煎剂组 ２４．９８±１．６９ ２６．５９±１．６２ ３０．０９±２．４６ ３１．３０±２．９５ ３３．５５±３．５２ ３４．３１
２．３．３ 小鼠脏器指数变化 与空白对照组比较，关
苍术水煎剂组脏器指数差异无统计学意义（Ｐ＞
０．０５），见表５．由此可测得该药物最大给药量为生
药４９５ｇ／ｋｇ，相当于关苍术成人（体质量以６０ｋｇ
计）每日口服剂量以传统朝医方入药规定１０～３０ｇ
计算，小鼠最大耐受量是人用药剂量的约９９０～
２ ９７０倍．
表５ 各组小鼠脏器指数变化（％，珚ｘ±ＳＤ）
组别 肝脏指数 肾脏指数 脾脏指数
空白对照组 ５．２２±３．５０ １．３８±０．１８ ０．８３±０．３２
关苍术
水煎剂组 ５．３２±０．９１ １．４０±０．１５ ０．５７±０．１５
３ 讨论
本实验结果表明，关苍术粗粉及超微粉的ＬＤ５０
分别为２４．９１，２８．５３ｇ／ｋｇ；灌胃给予小鼠关苍术水
煎剂无急性毒性作用，最大给药量为生药４９５ｇ／ｋｇ
（生药量），相当于关苍术成人（体质量以６０ｋｇ计）
每日口服剂量以传统朝医方入药规定１０～３０ｇ计
算，小鼠最大耐受量是人用药剂量的约９９０～２ ９７０
倍，属于无毒药物．总之，关苍术水煎剂在常用剂量
范围内安全，可应用于临床治疗．
［参 考 文 献］
［１］ 吉林省中医中药研究所．长白山植物药志［Ｍ］．长春：
吉林人民出版社，２００２：５０．
［２］ 李英姬，朴惠善，宋成岩，等．毛细管气相色谱／质谱法
测定关苍术中的挥发油成分［Ｊ］．中国野生植物资源，
２００２，２１（３）：５０－５１．
［３］ 李英姬，朴惠善．高效液相色谱法测定关苍术中苍术烯
内酯Ⅲ的含量［Ｊ］．延边大学医学学报，２００２，２５（４）：
２５２－２５４．
［４］ 段国峰，欧阳臻，余伯阳，等．茅苍术多糖的含量分析
［Ｊ］．南京中医药大学学报，２００８，２４（４）：２５１－２５３．
［５］ 屈爱桃，孙超，李乐娟，等．苍术药材薄层色谱指纹图谱
的研究［Ｊ］．内蒙古医学院学报，２００８，３０（６）：４０３－４０６，
４０９．
［６］ 杨粉荣，文洪杰，钟勤．几种粒度测定方法的比较［Ｊ］．
物理测试，２００５，２３（５）：３６－３９．
［７］ 国家食品药品监督管理局．药物研究技术指导原则
［Ｍ］．北京：中国医药科技出版社，２００５：２１０－２１１．
［８］ 覃容贵，吴建伟，国果，等．蝇蛆壳聚糖急性毒性实验
［Ｊ］．时珍国医国药，２００９，２０（３）：５５５－５５６．
［９］ 陈奇．中药药理研究方法学［Ｍ］．北京：人民卫生出版
社，１９９３：４３．?
·４１１·