全 文 ：作者简介 朱丹(1972-),女,吉林九台人,硕士,讲师,从事植物生物学
方面的教学与科研工作。
收稿日期 2006!11!18
刺儿菜[Cirsiumsetosum(Wild.)MB.]别名刺刺菜、野红
花、小刺盖等,属菊科多年生草本植物[1]。据报道,刺儿菜主
要含有黄酮类、有机酸类以及甾醇类化合物,其中,刺儿菜
中的黄酮类化合物具有降压以及血小板解聚等作用[2]。因此,
笔者用乙醇溶剂提取法对刺儿菜中黄酮类化合物的提取工
艺进行了研究,旨在提高刺儿菜中黄酮类化合物的得率,为
刺儿菜的开发利用提供科学的依据。
1 材料与方法
1.1 材料 刺儿菜,采自黑龙江省大庆市市郊;芦丁为生
化试剂,石油醚、乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为
国产分析纯;756型紫外可见分光光度计,电热恒温水浴
锅,SHZ!IIB型循环水式多用真空泵,圆筒式过滤器等。
1.2 方法
1.2.1 样品处理。选取新鲜刺儿菜优良的茎叶,清水洗净,
于50℃在烘干箱内烘干,粉碎后过 40目筛,装入塑料袋内
封口,放入干燥器内保存,备用。
1.2.2 提取方法。将干燥的生药粉末100g装入1000ml圆
底烧瓶中,加入乙醇溶液,加热回流,过滤,弃去滤渣,保留
乙醇提取液。将乙醇提取液浓缩至有沉淀析出,将析出物烘
干。加入石油醚进行提取,弃去石油醚提取液,得棕黄色块
状物,加入甲醇溶液进行溶解,利用甲醇溶液对棕黄色块状
物进行回流精制,得米黄色粉末,再用吡啶∶水(1∶1)重结晶,
得到结晶物。
1.2.3 工作曲线的建立。精密称取芦丁对照品200mg,用体
积分数为70%的乙醇溶解,定容至100ml容量瓶中摇匀。
精密移取10ml芦丁液于25ml容量瓶中,用蒸馏水定容,
得到浓度为0.8mg/ml标准溶液。精密吸取标准溶液0、0.2、
0.4、0.6、0.8、1.0ml分别置于10ml容量瓶中,加质量分数为5%
的 NaNO20.4ml,放置 6min,加质量分数 10%硝酸铝 0.4
ml,放置6min,再加质量分数为4.3%的NaOH4ml,加蒸馏
水至刻度,摇匀,放置 15min,进行全波长扫描,在 510nm
处有最大吸收波长。以测定结果得芦丁浓度与吸收度的标
准曲线:A=10.35C+0.0028(C为浓度,g/L;A为吸收值),R=
0.9999。
1.2.4 样品含量的测量。将干燥的生药 1g装入圆底烧瓶
中,加入乙醇溶液,加热回流,过滤,弃去滤渣,保留乙醇提
取液。精密吸取提取液 1.0ml,置于 10ml容量瓶中,加入
0.4ml浓度为5%的NaNO2,然后按与标准曲线相同的方法
显色,测定黄酮得率。
黄酮得率=(提取液浓度×稀释倍数×体积)/样品重×100%
1.2.5 单因素试验。按照“1.2.2”的方法对刺儿菜中黄酮类
化合物进行提取,并分别考察温度、提取时间、料液比、乙醇
体积分数等因素对黄酮类化合物得率的影响。
(1)在提取时间为 30min,料液比为 1g∶10ml,乙醇体
积分数为 60%的条件下,考察温度(分别为 30、40、50、60、
70、80℃)对黄酮类化合物的影响。
(2)在温度为 60℃,料液比为 1g∶10ml,乙醇体积分数
为60%的条件下,考察提取时间(分别为 10、20、30、40、50、
60min)对黄酮类化合物的影响。
(3)在温度为60℃,料液比为1g∶10ml,提取时间为 20
min的条件下,考察不同浓度的乙醇溶液(分别为60%、70%、
80%、90%)对提取黄酮的影响。
(4)在温度为60℃,乙醇体积分数为70%,提取时间为
20min的条件下,考察不同的料液比(分别为 1∶10、1∶20、1∶
30、1∶40)对刺儿菜中黄酮类化合物的提取量的影响。
1.2.6 正交试验。在单因素试验的基础上,以温度(A)、提取
时间(B)、料液比(C)、乙醇体积分数(D)为考察因素,以
测得的刺儿菜中黄酮类物质得率为考察指标,选用正交表
L9(34)进行试验,对刺儿菜中的黄酮类物质的提取工艺进行
研究[3-4]。
2 结果与分析
2.1温度对黄酮类化合物提取的影响(图 1) 从图 1可以
看出,温度升高有利于提取,但是温度过高,提取液中的有
效成分容易遭到破坏,使黄酮类化合物的得率下降。
2.2 提取时间对刺菜中黄酮类化合物提取的影响(图2) 从
图 2可以看出,提取时间在 30min左右效果最好,时间过
长,得率呈下降趋势。
刺儿菜中黄酮类化合物提取工艺的研究
朱丹,张家伟 (黑龙江八一农垦大学生命学院,黑龙江大庆 163319)
摘要 在单因素试验的基础上,用正交试验对刺儿菜中的黄酮类化合物的提取工艺进行了优选,研究了浸提温度、提取时间、乙醇体
积分数、料液比对刺儿菜黄酮得率的影响。结果表明,刺儿菜中黄酮的最佳提取工艺条件为:提取温度为60℃,提取时间为30min,料
液比为1g∶10ml,乙醇浓度为70%。在此条件下,黄酮得率为3.573%。
关键词 刺儿菜;黄酮类化合物;提取工艺
中图分类号 Q5-33 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2007)05-01262-02
StudyonExtractionTechnologyofFlavonoidsinHerbaCirsi
ZHUDanetal(HeilongjiangAugustFirstLandReclamationUniversity,Daqing,Heilongjiang163319)
Abstract SolventextractionmethodwasusedtoextractflavonoidsinHerbaCirsi.Theoptimalextractionprocesswasstudiedbyorthogonal
testonthebasisofsinglefactorexperiment.Byinvestigatingtheinfluenceofextractiontemperature,extractiontime,ethanolconcentrationand
theratioofmaterialtosolventonHerbaCirsi,optimalextractionconditionsweredetermined,whichwasextractiontemperature60℃,extraction
time30min,materialtosolvent1g:10ml,ethanolconcentration70%.Theyieldofextractswas3.573%inoptimalconditions.
Keywords HerbaCirsi;Flavonoids;Extractiontechnology
安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2007,35(5):1262-1263 责任编辑 姜 丽 责任校对 左 佳
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2007.05.003
效果的影响不同。经极差分析可知,D>A>C>B,即4种因素
对总黄酮得率的影响依次为乙醇浓度>温度>料液比>提
取时间,可见,乙醇浓度对黄酮得率的影响最大。由表1得
出的最佳提取条件为 A2B3C1D2,即最优组合是:提取温度为
60℃,提取时间为 30min,料液比为 1g∶10ml,乙醇浓度为
70%。在此条件下,黄酮得率为3.573%。
3 结论与讨论
乙醇浸提方法操作简单,所需仪器较少,反应速度快。
乙醇浸提刺儿菜中黄酮类化合物的最佳提取工艺条件是:
提取温度为 60℃,提取时间为 30min,乙醇的体积分数为
70%,料液比为1g∶10ml。在此条件下,刺儿菜的黄酮类化
合物的得率为3.573%。
参考文献
[1]杨星昊,丁安伟,崔敬浩,等.小蓟药用原植物种辨析和商榷[J].时
珍国医国药,2006,17(3):333-334.
[2]陈毓,丁安伟,杨星吴,等.小蓟化学成分药理作用及临床应用研究
述要[J].中医药学刊,2005,23(4):614-615.
[3]蔡健,华景清,王薇,等.黄酮提取工艺研究进展[J].淮阴工学院学
报,2003,12(5):82-85.
[4]黄泽元,王海滨,刘志伟.芝麻叶中总黄酮的最佳提取工艺研究[J].
农业工程学报,2004,20(6):201-204.
表1 正交试验设计及结果分析
序号
温度(A)
℃
时间(B)
min
料液比(C)
g/ml
乙醇浓度(D)
%
提取量
mg/g
1 50 10 1∶10 60 2.843
2 50 20 1∶20 70 3.121
3 50 30 1∶30 80 2.752
4 60 10 1∶20 80 2.453
5 60 20 1∶30 60 2.937
6 60 30 1∶10 70 3.573
7 70 10 1∶30 70 2.928
8 70 20 1∶10 80 2.613
9 70 30 1∶20 60 2.745
R 0.226 0.163 0.213 0.601
2.3 不同浓度乙醇对刺菜中黄酮类化合物提取的影响(图
3) 从图3可以看出,随着乙醇体积分数的增大,黄酮类化
合物的溶解量增大,提取量增高,当乙醇体积分数达到70%
时产生峰值,达最大提取量;之后,随着乙醇体积分数的继
续增大,黄酮类化合物的溶解量反而变小,提取量减少。
2.4 料液比对刺菜中黄酮类化合物提取的影响(图4) 从
图4可以看出,黄酮类化合物的提取量随着料液比的增大
而增大,但是当超过1g∶20ml时,又呈下降趋势。由此可见,
乙醇浸提黄酮类化合物的最佳料液比为1g∶20ml。
2.5 正交试验结果 从表 1可以看出,各种单因素对提取
2.5
3.0
3.5
4.0
2.0
7030 605040 80
温度∥℃
得
率
∥
m
g/
g
图1 不同温度对黄酮得率的影响
2.5
3.0
3.5
4.0
2.0
5010 403020 60
时间∥℃
得
率
∥
m
g/
g
图2 不同提取时间对黄酮得率的影响
朱 丹等 刺儿菜中黄酮类化合物提取工艺的研究35卷5期
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GB/T7714-2005
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