全 文 ：泥胡菜（Hemisteptia lyrata Bunge）为菊科泥胡
菜属植物，广泛分布于我国各地，具有清热解毒、
消肿祛瘀的作用，临床用于治疗痔漏、痈肿、疔疮、
外伤出血和骨折等 ［1］。据文献［2－3］报道，泥胡菜中分
离得到的化学成分主要为黄酮、 甾醇和木脂素等
化合物。 目前未见有关泥胡菜总黄酮的提取工艺
的研究，我们以泥胡菜总黄酮得率为评价指标，对
泥胡菜的最佳提取工艺进行研究， 为开发利用泥
胡菜提供实验依据。
1 材料和仪器
1.1 药材 泥胡菜采自福建省永春县，经福建中
医药大学药学院杨成梓副教授鉴定为菊科泥胡菜
属泥胡菜（Hemisteptia lyrata Bunge）的全草。
1.2 试剂 芦丁对照品（自备，纯度＞98%）；其它
试剂为分析纯。
1.3 仪器 UV-1800 紫外分光光度计（日本岛津
公司）；SHB-Ш 循环水式多用真空泵、RZ01C 旋转
蒸发器、HH-S 恒温水浴锅（郑州长城科技工贸有
限公司）；SFG-02B 电热恒温鼓风干燥箱（黄石市
恒丰医疗器械有限公司）；KQ-500E 超声波清洗器
（昆山市超声仪器有限公司 ）；AR2130 电子天平
［奥豪斯仪器（上海）有限公司］；CP225D 电子天平
（德国赛多利斯公司）；Elix5 纯水制备系统 （厦门
精艺兴业科技有限公司）。
2 方法与结果
2.1.1 对照品溶液的制备 称取 105℃干燥至恒
重的芦丁对照品 10 mg，置 50 mL 瓶中，乙醇溶解
并定容至刻度，配制成 0.2 mg ／mL 对照品溶液。
2.1.2 供试品溶液的制备 称取 60℃恒温干燥
的泥胡菜细粉 4 g，加 10 倍量的 95%乙醇，回流提
取 2 次，每次 2 h，过滤，合并过滤液 ，定容至 50
mL 瓶中。
2.2 含量测定
2.2.1 测定波长的确定 吸取芦丁对照品溶液、
供试品提取液各 1 mL 于 25 mL 瓶中，加 5%亚硝
酸钠试液 0.75 mL，摇匀，放置 5 min；加 10%硝酸
铝试液 0.75 mL，摇匀，放置 5 min；加 1 mol ／ L 氢
氧化钠试液 10 mL，加水至刻度 ，摇匀 ，放置 10
min。 以相应试剂作空白对照，在 400～600 nm 波
长处扫描，以确定最大吸收波长。 结果显示芦丁、
泥胡菜总黄酮在 510 nm 波长处有最大吸收值。
2.2.2 标准曲线绘制 分别吸取芦丁对照品溶液
1、2、4、6、8 mL 于 25 mL 瓶中，用 60%乙醇溶液补
充至 12.5 mL，按照 2.2.1 项下的方法进行显色，以
60%乙醇溶液为空白，在 510 nm 波长处测定吸光
度，得回归方程：
A＝11.88027C－0.0257 r＝0.9998
结果表明芦丁在 0.008～0.064 mg/mL 线性关
系良好。
2.2.3 总黄酮含量测定 按 2.1.2 项制备供试品
溶液，取样品 1 mL 于 25 mL 瓶中，按2.2.2 项标准
曲线的方法测其吸光度，计算总黄酮含量，按下式
计算总黄酮得率：
总黄酮得率＝总黄酮的含量 ／药材的质量×
泥胡菜总黄酮的最佳提取工艺
林 珊 1，刘仁根 2，曾建伟 1，邹秀红 3，吴锦忠 1，2
（1. 福建中医药大学中西医结合研究院，福建 福州 350122；2. 福建中医药大学药学院，福建 福州 350122；
3. 永春县林业局，福建 永春 362600）
摘要： 目的 确定泥胡菜中总黄酮的最佳提取工艺。 方法 选取料液比、提取时间、乙醇提
取浓度为考察因素，以泥胡菜总黄酮得率为评价指标，用正交试验对其提取工艺进行优选。 结果
泥胡菜总黄酮最佳提取工艺为用 10 倍量的 50%乙醇，回流提取 2 次，每次 1.5 h。 结论 本优选方
法简单快速，方法稳定、可行。
关键词：泥胡菜；总黄酮；正交试验；提取工艺
中图分类号：R284.2 文献标志码：B 文章编号：1004-5627（2013）01-0026－02
收稿日期：2012-11-13
基金项目：福建省自然科学基金资助课题（2010J01198），福建省重点高校服务海西项目之五
作者简介：林珊（1981—），女，医学硕士，主要从事中药化学成分提取分离及活性筛选研究。
Journal of Fujian University of TCM February 2013，23（1）
福建中医药大学学报 2013 年 2 月 第 23 卷 第 1 期
26
DOI:10.13261/j.cnki.jfutcm.002755
表 1 泥胡菜总黄酮提取工艺加样回收率试验
取药量 ／ g
1.002
1.008
1.001
1.003
1.003
1.006
加入量 ／mg
12.02
12.02
12.02
12.02
12.02
12.02
测得量 ／mg
22.46
23.69
21.76
22.74
22.55
22.94
回收率 ／%
95.01
102.02
95.73
98.23
96.91
99.99
表 2 正交试验因素水平表
水平
1
2
3
乙醇浓度
（A） ／%
20
50
80
提取时间
（B） ／ h
0.5
1.5
2.5
料液比
（C） ／ （g ／mL）
1∶10
1∶20
1∶40
提取次数
（D） ／次
1
2
3
试验因素
表 3 正交试验结果
实验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
X1
X2
X3
R
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
5.463
9.037
7.373
3.574
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
5.300
9.133
7.440
3.833
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
7.810
7.320
6.743
1.067
D
1
2
3
3
1
2
2
3
1
4.570
8.577
8.727
4.157
总黄酮得率 ／%
0.127
0.862
0.65
0.851
0.761
1.099
0.612
1.117
0.483
表 4 方差分析结果
试验因素
A
B
C
D
误差
偏差平方和
11.983
22.141
01.710
33.354
01.710
自由度
2
2
2
2
2
F 值
11.218
12.948
01.000
19.505
F 临界值
19.0
19.0
19.0
19.0
P 值
＞0.05
＞0.05
＞0.05
＜0.05
100%
2.2.4 精密度试验 取对照品溶液 2 mL（0.032
mg ／mL），按 2.2.2项方法测定吸光度，RSD为 0.38%，
表明精密度良好。
2.2.5 稳定性试验 取供试品溶液 1 mL，分别于
0、2、4、6、8 h，按 2.2.2 项方法测定吸光度，RSD 为
1.67%，表明供试品溶液中总黄酮含量在 8 h 内保
持稳定。
2.2.6 重复性试验 按 2.1.2 项方法制备 6 份供
试品溶液 ， 按 2.2.2 项方法测定吸光度 ，RSD 为
2.83%，表明重复性良好。
2.2.7 回收率试验 精密称取泥胡菜 6 份， 每份
1 g， 分别加入芦丁对照品溶液 2 mL （6.01 mg ／
mL），按 2.1.2 项方法制备供试品溶液，按 2.2.2 项
测定， 结果见表 1。 加样回收率平均值为 97.98%，
RSD为 2.72%。
2.3 正交试验 选取乙醇浓度、提取时间、乙醇
用量、提取次数 4 个因素，每个因素取 3 个水平，
以 L9（34）设计正交试验因素水平，结果见表 2。 对
结果进行方差分析，结果见表 3、表 4。
从表 3 的直观分析和表 4 的方差分析结果可
知，乙醇回流提取时，4 个因素对泥胡菜提取的影
响不同，其中提取次数影响最大，有显著差异，具
有统计学意义。 各因素影响程度依次为 D＞B＞
A＞C，所以，最佳工艺为 A2B2C1D3。 综合直观分析
和方差分析的结果，结合生产中的实际情况，考虑
省时、节约能源、降低成本等因素，泥胡菜总黄酮
的最佳提取工艺是 A2B2C1D2，即用 10 倍量的 50%
乙醇，回流提取 2 次，每次 1.5 h。
2.4 验证试验 称取泥胡菜 4 g， 按上述最佳提
取工艺进行 3 次验证试验， 泥胡菜总黄酮平均得
率为 1.221%，RSD 为 1.94%，表明重复性好，提取
工艺稳定可行。
3 结 论
研究结果表明， 乙醇水溶液可以将泥胡菜中
总黄酮的有效成分提取出来， 总黄酮的最佳提取
工艺是用 10 倍量的 50%乙醇， 回流提取 2 次，每
次 1.5 h。 通过实验验证，结果表明最佳提取工艺
重复性好，方法稳定、可行，为泥胡菜总黄酮含量
的测定提供了定量的检测方法。
参考文献：
［1］ 江苏新医学院 . 中药大辞典 ［M］. 上海 ：上海人民出版社 ，
1985：3038.
［2］ 隆雪明，游思湘，刘湘新，等. 泥胡菜水提物的体外抗菌作用
试验［J］. 动物医学进展，2007，28（11）：37-40.
［3］ 董政起，李琳琳，徐珍，等. 泥胡菜属植物化学成分与药理作
用研究［J］. 长春中医药大学学报，2012，28（2）：353-355.
［4］ 张妙玲，巢峰敬，马麟 . 淫羊藿叶总黄酮提取工艺研究 ［J］.
福建中医学院学报，2009，19（6）：30-31.
第 1期 林 珊等：泥胡菜总黄酮的最佳提取工艺 27