全 文 ：朱 月，田海晨，毕晓丹． 翠菊花叶多糖对羟自由基的清除作用［J］． 江苏农业科学，2012，40(3) :302 － 303．
翠菊花叶多糖对羟自由基的清除作用
朱 月，田海晨，毕晓丹
(赤峰学院生命科学学院，内蒙古赤峰 024000)
摘要:在对翠菊花、叶多糖提取分离纯化的基础上，采用邻二氮菲 － Fe2 +氧化法研究了翠菊花、叶多糖对羟自由
基的清除作用。结果表明，翠菊花、叶多糖均对羟自由基有清除作用，翠菊花、叶多糖溶液浓度与羟自由基清除率呈极
显著正相关。当羟自由基清除率为 10%时所需翠菊花、叶多糖溶液浓度分别为 0． 058 3、0． 003 5 mg /mL，翠菊叶多糖
对羟自由基清除能力相对较强。
关键词:翠菊;多糖;羟自由基;清除作用
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2012)03 － 0302 － 01
收稿日期:2011 － 06 － 20
作者简介:朱 月(1947—) ，女，辽宁黑山人，教授，主要从事生物化
学教学与多糖的研究。E － mail:cfzy212@ 126． com。
翠菊(Callistephus chinensis)亦称一年生紫菀，为菊科、翠
菊属植物，主要作为庭园观赏花卉。翠菊花可入药，治目赤肿
痛、昏花不明，蒙药治瘟疫、流感、头痛、疔疮、毒热、猩红热等
症。目前关于翠菊花、叶多糖对羟自由基(·OH)清除作用的
研究尚未见报道。本研究通过分离纯化获取翠菊花、叶器官
的多糖，采用邻二氮菲 － Fe2 +氧化体系，研究翠菊花、叶多糖
对体系中羟自由基的清除作用，旨在为翠菊的进一步开发利
用提供参考。
1 材料与方法
1． 1 材料与仪器
翠菊采自内蒙古赤峰市赤峰学院。试验所用试剂均为分
析纯。试验所用仪器包括:DZK － 4 恒温水浴锅，分析天平，
TD低速离心机，UV －9100 型紫外分光光度计，Milli － Q 超纯
水纯化系统。
1． 2 方法
1． 2． 1 多糖提取和纯化［1］ 取适量过 100 目筛的翠菊花、叶
粉末，按料液比为 1 ∶ 20 加入去离子水，于 85 ℃恒温水浴中
浸提 2h，离心并收集上清液。采用同样方法对浸提后的固体
物再次浸提，合并 2 次上清液，将其浓缩定容。通过醇析、脱
蛋白、透析除其杂质，获取翠菊花、叶多糖。
1． 2． 2 多糖含量测定 采用苯酚 －硫酸法制备葡萄糖标准
曲线［2］。y = 0． 006 3x + 0． 012 2，r = 0． 998 1。线性范围是
10 ～ 140 μg /mL。向苯酚 －硫酸法的反应体系中加入等体积
翠菊花、叶多糖样品稀释液，分别测定其吸光度值。根据葡萄
糖标准曲线计算样品稀释液的多糖含量，结合多糖液体积、稀
释倍数等计算翠菊花、叶多糖含量。
1． 2． 3 翠菊花、叶多糖对羟自由基清除作用的计算方法［3 － 4］
配制不同浓度的翠菊花、叶多糖溶液(表 1)。按照表 2 在
试管中加入各试剂，用于研究翠菊花、叶多糖对羟自由基的清
除作用。每个处理重复 3 次。
将加样后的试管在 37 ℃恒温水浴 1 h，分别以空白管和
表 1 翠菊花、叶多糖溶液
器官
多糖溶液浓度(mg /mL)
梯度 1 梯度 2 梯度 3 梯度 4
翠菊花 0． 110 6 0． 221 2 0． 442 5 0． 885 0
翠菊叶 0． 022 5 0． 045 0 0． 090 0 0． 180 0
表 2 翠菊花、叶多糖对羟自由基清除作用试验 mL
试剂 空白管
未损
伤管
损伤管
样品
空白管
加样管
0． 2 mol /L磷酸缓冲液 2． 0 2． 0 2． 0 2． 0 2． 0
5． 0 mmol /L邻二氮菲 — 1． 6 1． 6 — 1． 6
7． 5 mmol /L FeSO4 — 1． 0 1． 0 — 1． 0
蒸馏水 8． 0 5． 4 4． 4 7． 0 3． 4
0． 1% H2O2 — — 1． 0 — 1． 0
各处理多糖溶液 — — — 1． 0 1． 0
样品空白管调零，在 536 nm 波长处测定未损伤管、损伤管和
各处理翠菊花、叶多糖加样管的吸光度值，依据以下公式计算
翠菊花、叶多糖对羟自由基的清除率。
羟自由基清除率 =［(A3 － A2)/(A1 － A2) ］× 100%
式中:A1、A2 分别为未损伤管和损伤管的吸光度;A3 为各处理
翠菊花、叶多糖溶液加样管的吸光度。
2 结果与分析
翠菊花、叶多糖对羟自由基的清除率见图 1 和图 2。随
着翠菊花、叶多糖溶液浓度增加，羟自由基的清除率也不断提
高。翠菊花、叶多糖溶液浓度与羟自由基清除率有极显著相
(下转第 303 页)
—203— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 3 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2012.03.042
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(上接第 302 页)
关性(表 3)。翠菊花、叶多糖溶液浓度与羟自由基清除率的
回归方程分别为:Y1 = 16． 597X1 － 0． 867 2 和 Y2 = 114． 99X2 －
0． 307 4。式中:Y1 和 Y2 分别为翠菊花、叶多糖对羟自由基的
清除率;X1 和 X2 分别为翠菊花、叶多糖溶液浓度。
以羟自由基清除率为 10%为标准，根据回归方程计算出
所需翠菊花、叶多糖浓度约为 0． 058 3、0． 003 5 mg /mL。表明
翠菊叶多糖对羟自由基的清除能力相对较强。
3 结论
翠菊花、叶多糖对羟自由基均有一定清除作用，且随着翠
表 3 翠菊花、叶多糖溶液浓度与羟自由基清除率的相关分析
器官 多糖浓度与清除率的相关系数
翠菊花 1． 000＊＊
翠菊叶 0． 997＊＊
注:“＊＊”表示在 0． 01 水平上显著相关。
菊花、叶多糖溶液浓度增加对羟自由基的清除能力增强。翠
菊花、叶多糖溶液浓度与羟自由基清除率有极显著相关性。
翠菊叶多糖对羟自由基的清除能力相对较强。翠菊花、叶多
糖对羟自由基所表现的清除能力，表明翠菊具有一定的抗氧
化作用，在药用、医疗保健等领域具有很好的开发利用前景。
参考文献:
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用［J］． 成都大学学报:自然科学版，2006，25(1) :35 － 38．
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清除作用［J］． 安徽农业科学，2010，38(8) :4053 － 4055．
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学，2010，38(30) :16853 － 16854，16857．
刁传芸，常有宏． 梨中啶虫脒、烯唑醇、阿维菌素残留动态分析［J］． 江苏农业科学，2012，40(3) :303 － 305．
梨中啶虫脒、烯唑醇、阿维菌素残留动态分析
刁传芸1，常有宏2
(1．江苏省阜宁县林桑果技术指导服务站，江苏阜宁 224400;2．江苏省农业科学院，江苏南京 210014)
摘要:残留动态试验结果表明，啶虫脒、烯唑醇与阿维菌素在梨中降解比较快，残留量随间隔时间的变化均符合
一级反应动力学方程 Ct = C0·e
－ kt，且相关性很好，均达到极显著水平。按推荐用药量分别稀释 2 000、1 000、3 000 倍
施用时，对于梨果是安全的。
关键词:啶虫脒;烯唑醇;阿维菌素;梨;残留动态
中图分类号:S481 + ． 8 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2012)03 － 0303 － 03
收稿日期:2011 － 04 － 16
作者简介:刁传芸(1982—) ，女，山东临沂人，硕士，主要从事园艺作
物研究。Tel:(0515)82096508;E － mail:dcylymy@ 163． com。
梨在早期易发生锈病、白粉病等病害和蚜虫、螨虫等虫
害，在生产上主要用三唑酮、蚜螨克星等常规农药来防治。最
近几年出现了很多新型农药，果农为了达到更好的防治效果，
纷纷大量、广泛使用。在梨前期病虫害防治中，新型农药如啶
虫脒、烯唑醇、阿维菌素等逐渐代替常规用药，导致这些新型
农药残留量普遍偏高。建立有效的检测分析方法和残留动态
分析方法，可以指导果农在生产中合理、有效使用新型农药。
国内已有对啶虫脒［1］、烯唑醇［2］、阿维菌素［3 － 4］残留分析检测
方法的报道，但目前只有对蔬菜和水果中简单的种类进行残
留分析的方法，对基质较复杂的梨并没有报道。本试验借鉴
啶虫脒［5］、烯唑醇［6 － 7］、阿维菌素［8 － 10］的有关残留分析检测
方法对它们在梨中的残留量进行检测，研究它们在梨中的残
留动态。
1 材料与方法
1． 1 田间试验
田间试验于 2010 年 4—5 月进行。试验安排在江苏省阜
宁县杨寨镇果林村梨园。试验农药为 5%啶虫脒粉剂(西安
常隆正华作物保护公司)、50%烯唑醇超微可湿性粉剂(山东
金盾生物工程科技有限公司)、2． 0%阿维菌素乳油(湖南农
大海特农化有限公司) ，供试作物为翠冠梨，树龄 4 年。(1)
最终残留试验:按推荐使用剂量即 5%啶虫脒粉剂 2 000 倍、
50%烯唑醇超微可湿性粉剂 1 000 倍、2． 0%阿维菌素乳油
3 000倍水稀释液喷雾施药，第 1 次施药在落花后、果实刚刚
长成，第 2 次施药在第 1 次施药后的 16 d，第 2 次施药后的
41 d分别取上、中、下及里、外 5 点的梨样品进行检测。(2)降
解动态试验:上述 3 种农药按推荐使用剂量各施药 1 次，每个
处理 3 次重复，每小区 3 株。施药后当天(施药后 2 h)及间
隔一定的时间(1、5、11、19、21、25、31、41 d)分别取上、中、下
—303—江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 3 期