全 文 ：第19卷第7期 2010年7月
Vol.19 No.7 Jul. 2010
武警医学院学报
Acta Academiae Medicinae CPAF
［收稿日期］2009-11-23；［修回日期］2010-03-12
［作者简介］王燕（1968-），女，籍贯陕西西安，专科，主管药师，主要
从事药物分析研究。
［通讯作者］孙文基（1948-），男，籍贯陕西西安，博士生导师，主要从
事天然药物有效成分的研究。
气相色谱内标法同时测定土木香中土木香内酯、异土木香内酯
的含量
王 燕1，王 芸2，孙文基1
（1.西北大学陕西省生物医药重点实验室，陕西 西安 710069；2.西安陆军学院门诊部，陕西 西安 710108 ）
摘 要：【目的】建立内标法测定土木香药材中土木香内酯、异土木香内酯的含量。【方法】SE-30毛细管柱（30 m×0.32 mm×
0.25 μm）；FID检测器温度为260℃；进样口温度240℃程序升温：初始温度50℃，以20℃/min的速率升温至170℃，保持28
min，再以25℃/min的速率升温至250℃，保持1 min；以尼泊金丁酯为内标物定量。【结果】土木香内酯与异土木香内酯分离良
好，在0.6～4.2 mg/ml范围内，呈良好的线性关系（r = 0.9999，n = 5）。【结论】本法简便、灵敏、专属性强、重复性好，可用于土木
香药材的含量测定，控制其质量。
关键词：土木香；气相色谱法；内标法；土木香内酯；异土木香内酯
【文章编号】1008-5041(2010)07-0527-03 【中图分类号】TQ460.72 【文献标识码】A
Gas chromatographic internal standard method for the determination of alantolactone and
isoalantolactone in Radix Inulae Heleni
WANG Yan，WANG Yun , SUN Wen-ji（Biomedicine Key Laboratory of Northwest University,Xi’an 710069, China）
Abstract：【Objective】To establish a capillary GC method for the determination of alantoctone and isoalantoctone in Radix Inulae
Heleni.【Methed】The analytical column was SE-30 capillary column（30 m×0.32 mm×0.25 μm）with an FID detector . The injector
temperature was 240 ℃. The detector temperature was set at 260 ℃. The column temperature was programmed from 50 ℃ at a rate of
20 ℃/min to 170 ℃(holding 28 min), then raised to 250 ℃ at 25 ℃/min. The final temperature was maintained for 1 min.【Results】
The linear ranges of alantoctone and isoalantoctone were 0.6 ～4.2 mg/ml（r = 0.9999），which showed good linearity.【Conclutions】
The methed is simple, specificity, accurate and reliable, and can be used for quality control of Tumuxiang.
Key words: Radix Inulae Heleni；Tumuxiang；Gas chromatography；Alantolactone；Isoalantoctone
土木香为菊科植物总状土木香 Inula helenium L
的干燥根。具有健脾和胃，调气解郁，止痛安胎作
用，用于治疗胸肋、脘腹胀痛，呕吐泄痢，胸肋挫伤，
岔气作痛，胎动不安［1］。文献报道，利用气相色谱法
单独测定土木香中土木香内酯或异土木香内酯的
含量［2-4］，而对气相色谱内标法同时测定土木香内
酯、异土木香内酯含量的分析法报道较少。本实验
建立以尼泊金丁酯为内标，同时测定土木香中土木
香内酯和异土木香内酯含量的毛细管气相色谱法。
1 仪器与试剂
HITACHI G-3900气相色谱仪，Anaster色谱工
作站；SPH-3全自动空气源（北京中惠普分析技术
研究所）；SPH-200全自动氢气发生器（北京中惠
普分析技术研究所）；高纯氮：99.999%（西安钢厂）；
乙酸乙酯（分析纯）；土木香内酯、异土木香内酯对
照品自制，纯度99.1%（中国药品生物制品检定所认
定）；尼泊金丁酯为化学纯；土木香六批均由河北药
检所提供。
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论 著
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第19卷第7期 2010年7月
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Acta Academiae Medicinae CPAF
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 内标溶液：精密称取尼泊金丁酯适量，加乙
酸乙酯制成6 mg/ml的溶液，作为内标溶液。
2.1.2 混合对照品溶液：取土木香内酯、异土木香
内酯对照品20 mg，精密称定，置10 ml量瓶中，精密
加入内标溶液5 ml，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀。
2.1.3 供试品溶液：取本品粗粉（过3号筛）0.8 g，精
密称定，置烧瓶中，按挥发油测定法［1］，加水150 ml，
玻璃珠数粒，连接挥发油测定器连接回流冷凝管。
自冷凝管上端加水使充满挥发油测定器的刻度部
分，在挥发油测定器的刻度部分加乙酸乙酯2 ml。
置电热套中缓缓加热至沸，并保持微沸5 h后，关闭
电源，放置至室温。开启测定器下端的活塞，将水
缓缓放出，将乙酸乙酯层转移至10 ml量瓶中，用少
量乙酸乙酯洗涤测定器，洗液并入量瓶，精密加入
内标溶液5 ml，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2 色谱条件
SE-30 弹性石英毛细管柱（柱长 30 m×0.32
mm×0.25 μm）；检测器：FID检测器；程序升温：初
始温度50℃，以20℃/min的速率升温至170℃，保持
28 min，再以25℃/min的速率升温至250℃，保持1
min；分流进样，分流比1︰10；进样口温度240℃；检
测器温度为260℃。
2.3 系统适用性试验
分别取混合对照品溶液、供试品溶液各1μl注
入气相色谱仪，记录色谱图。溶剂峰、内标峰、土木
香内酯与异土木香内酯均达到完全分离，理论板数
按土木香内酯峰计算应不低于40 000。见图1。
A
B
C
D
A:对照品；B:样品；C:内标；D:空白；1:内标；2：土木香内酯；3：异土木香内酯
图1 土木香气相色谱图
2.4 标准曲线的制备和线性范围
精密称取土木香内酯、异土木香内酯适量，制
成6 mg/ml、6 mg/ml的对照品混合溶液；分别精密吸
取此对照品混合溶液0.1、0.2、0.3、0.5、0.7 ml至2 ml
量瓶，各精密加入内标溶液0.5 ml，加乙酸乙酯定
容，进样2 μl，在“2.2”项色谱条件下，记录色谱图。
分别以土木香内酯溶液浓度、异土木香内酯溶液浓
度为横坐标，对照品溶液峰面积与内标溶液峰面积
之比为纵坐标，进行线性回归。结果表明：土木香
内酯、异土木香内酯在0.6 ～4.2 mg/ml范围内，呈良
好的线性关系。线性回归方程为：y 土 木 香 内 酯 =
0.9061x － 0.0175，r=0.9999（n = 5）；y 异 土 木 香 内 酯 =
0.9641x－0.0425，r=0.9999（n = 5）。
2.5 精密度试验
精密量取“2.1.2”项对照品溶液1μl，在“2.2”
项色谱条件下，连续进样6次，记录色谱图，测定土
木香内酯溶液峰面积与内标峰面积比值的RSD为
1.9%，异土木香内酯溶液峰面积与内标峰面积比值
的RSD为1.8%。
2.6 重复性试验
按“2.1.3”项下方法平行制备6份供试品溶液，
在“2.2”项色谱条件下，进样1 μl，记录色谱图。结
果样品中土木香内酯、异土木香内酯供试品溶液峰
面积与内标峰面积之比，RSD分别为2.7%、1.6%。
2.7 稳定性试验
取同一供试品溶液1μl，分别在0、2、6、8、12、
5 25 45 （min）
5 25 45 （min）
5 25 45 （min）
5 25 45 （min）
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24 h在“2.2”项色谱条件下，测定。根据样品中土木
香内酯、异土木香内酯峰面积与内标峰面积的比值
计算，RSD分别为2.0%、1.8%。
2.8 加样回收率试验
精密称取已知含量土木香内酯、异土木香内酯
的1号供试品药材0.4 g共 6份，每份分别加入土木
香内酯、异土木香内酯对照品2.1 mg，按“2.1.3”项下
制得的溶液，在“2.2”项色谱条件下，进样1μl，测定
计算土木香内酯平均回收率为98.2%（n = 6），RSD
为 3.3%，结果见表 1；异土木香内酯平均回收率
98.7%（n = 6），RSD为2.6%，结果见表2。
表1 土木香内酯回收率（n = 6）
称样量(g)
0.304
0.289
0.309
0.284
0.306
0.311
样品量
(mg)
4.86
4.62
4.94
4.54
4.90
4.98
土木香内酯
加入量(mg)
5.63
5.63
5.63
5.63
5.63
5.63
测得
量(mg)
10.28
9.99
10.59
9.90
10.40
10.86
回收率
(%)
96.3
95.4
100.4
95.2
97.7
104.4
平均值
（%）
98.2
RSD
(%)
3.3
表2 异土木香内酯回收率（n = 6）
称样量
(g)
0.304
0.289
0.309
0.284
0.306
0.311
样品量
(mg)
3.95
3.76
4.02
3.69
3.98
4.04
异土木香内
酯加入量(mg)
6.01
6.01
6.01
6.01
6.01
6.01
测得量
(mg)
9.92
9.95
10.07
9.56
9.70
9.98
回收率
(%)
99.3
103.0
100.7
97.7
95.2
98.8
平均值
（%）
98.7
RSD
(%)
2.6
2.9 样品的测定
取6批土木香药材，按“2.1.3”项制备，在“2.2”
项色谱条件下，取供试品溶液1μl 进样，记录色谱
图，本品以内标法计算土木香内酯、异土木香内酯
的含量。结果见表3。
表3 各批次土木香样品中土木香内酯、异土木香内酯含量
的测定结果（%）
样品编号
1
2
3
4
5
6
供样来源
河北药检所
河北药检所
河北药检所
河北药检所
河北药检所
河北药检所
土木香内酯的
含量（%）
1.7
2.2
1.7
2.0
1.6
2.3
异土木香内酯的
含量（%）
1.5
1.6
1.3
1.8
1.6
1.7
3 讨 论
3.1 色谱柱的选择
我们比较了两种常用的PEG-20M和SE-30毛
细管色谱柱，SE-30色谱柱分离度好于PEG-20M色
谱柱，因此选用SE-30毛细管色谱柱。
3.2 色谱柱温度的选择
在其他色谱条件固定的条件下，对9种不同的
升温程序进行了选择，包括初始温度、升温速率及
末温进行了选择，经试验比较，考虑分离度、分析时
间长短及高沸点杂质的影响，选择初始温度50℃，
以 20℃/min升至170℃，保持28 min，再以 25℃/min
升至250℃，作为程序升温色谱条件较为合适。
3.3 内标物的选择
为消除手动进样量不准确等因素造成的系统误
差，选择内标法进行含量测定，并对内标物质进行了
筛选。将尼泊金乙酯和尼泊金丁酯作了对比，它们是
原样品中不含有的组分，但尼泊金丁酯距离土木香内
酯、异土木香内酯色谱峰更接近，并且不干扰样品溶
液色谱峰，因此将尼泊金丁酯作为内标物更适合。
经过本法对方法学的考察，证明该法具有良好
的线性、精密度和回收率，方法简便、灵敏、专属性
强、重复性好，可用于土木香药材的质量控制。
【参考文献】
[1] 中华人民共和国药典[M].北京：化学工业出版社，2005.13.
[2] 张永萍，徐国钧，金蓉鸾，等. 气相色谱法测定土木香药
材中土木香内酯和异土木香内酯的含量[J].中国药科大
学学报，1993，24（4）：248-250.
[3] 王秀丽，栾杨,刘拥军，等.气相色谱法测定土木香中土木香内酯
含量[J].山东中医药大学学报, 2005，29（4）：322-323.
[4] 邵彩云，刘永喜.气相色谱法测定土木香中土木香内酯的
含量[J]. 中国民族医药杂志，2003，9（1）：37.
（责任编辑：段姚尧）
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