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蒌蒿叶的化学成分研究



全 文 :葵禽叶的化学成分研究
张健 ,孔令义 开 (中国药科大学天然药物化学教研室 ,江苏 南京 21 03 8)
摘要 : 目的 为阐明婆茜的有效成分 , 对其叶进行 了系统的化学成分研究 。 方法 乙 醇提取 、 石 油醚脱脂 、 大孔树脂 、 硅胶柱
层析 。 结果 分离得到 6 个化合物 , 经光谱方法鉴定分别为木犀草素4’ , 7 一二甲醚 (4 ` , 7一 id me t ll y llut eol in ) ( 工 ) , l ! , 13 一 id h yd。 -
m a t ir c面 n ( 1 ) ,柯伊利素一 7一 。 一尽D 一葡萄糖普 ( e助拟犯 d d一 7一 。 一月一 D 一gh cl , i de ) ( m ) , 木犀草素一4 `一 o 一召一 D 一葡萄糖替 ( lu l洲j in 一4 ,一 。 一口-
D

gl cu os ide ) (W )
,概皮素一3 一口书一 D 一木糖普 ( que o iet -n -3 o 一浮D 一 xy ! co is de ) ( V ) , 胡萝 卜普 ( dau co s e[ olr ) ( VI ) 。 结论 除胡萝 卜普
( da uc , e[ m! ) ( Vl )外 , 以 上化合物均为首次从该植物中分 离得到 ; 其中化合物 1 1 , 13一 id 场d找 〕am 示~ n ( 1 ) 在 10 一 s mol
·
L
一 ’ 时对
佳 16 细胞 (小鼠黑色素瘤细胞 )和 H L 印 细胞 (人原髓细胞白血病细胞 )有显著的抑制活性 ,抑制率分 别为 93 ` 42 % 和 叩 .印% ;
随着样品浓度的递减 ,抑制作用也逐渐减弱 。
关健词 : 姜高;化学成分
中图分类号 : R2 84 2 文献标识码 : A 文章编号 : 10 1 一抖叫 (2X() 5 ) 23 一 1778 一 03
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e o is de ( m )
,
lu tieol
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,一
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一月一 D 一 gl u e诫 de ( VI ) , 畔二e it n 一3 一 o 一户 D 一恻 Ie o s id e ( V ) and dau c os et 拍1 ( VI ) . 0 田吸工US K洲 F ive e o m -
卯哪15 * , iosl at de fm m iht s lPant ofr 山
e e l l a一 ht e e o n e en l r a t l o n Of 10 一 s m o l
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13

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o n w e陀 93 . 42 % 田】d卯 .印%
i汕山 1翻 het , ,Wt h of 压 16 ce U an d HL印
,既 l欢石v e ly , 助 d het i汕曲 iit on e fe e t。 de -
(飞扮 a刚刘 w iht th e e o n c e n t ar l io n .
K E Y W《) lR万 : A州沁n l钻证 肥细理群璐站 r l、此 2 . ; c h e l币 c al co n拓 ut .enL
篓篙 ( A咖 is 么 se le nge o is Tb托 2 . )为菊科篙属植物 ,分布于东北经华北至华东等省区 。 全草人药 ,有
止血 , 消炎 ,镇痛 ,化痰之效 ,近年来发现用于治疗肝
炎良好 , 四川民间作 “ 刘寄奴 ” 代用品 。 胡金峰等对
萎篙的地上部分进行了研究 , 从中分离得到 art se -
le in n
,州 s e le on id ,二十九烷醇 ,二十九烷基正丁醋 , 6 、
7
一二 一经基香豆素 , 东蓑若素 , 月一谷街醇 , 胡萝 卜素等
十二个化合物川 。 药理实验表明 ,篓篙能非常显著
3 讨 论
神经干细胞已成为近期研究的热点 。 体外神经
干细胞培养是研究天然产物对神经系统药理作用的
一种较好的方法 。 神经干细胞硫代硫酸钠损伤模型
能够较好模拟体外整体动物的脑缺氧状态 , 便于分
析研究细胞损伤后 的恢复过程及药物的保护作用 。
RR I ,
~
1对神经干细胞硫代硫酸钠损伤的保护作用 ,
推测与其具有较强的抗氧化作用有关 。
细胞膜通透性的改变是细胞损伤的一个共同特
征 。 DL H 广泛存在于神经细胞胞浆内。 正常情况
下 , DL H 漏出很少 , 损伤时其漏出增加 。 通过测定
培养液中 LDH 含量变化 , 可间接反映损伤时神经细
胞的损伤程度 。
刺梨多糖 刊圈 T ~ 1相对分子质量只有 3 2以) ,相对
于 目前文献报道的多糖 , 要小很多 ,这在已报道的多
糖中并不常见 ,这也有利于它在体内的吸收和利用。
参考文献
〔1〕 王薇 ,夏炳南 . 刺梨的研究进展【J」. 中国药学杂志 , 1性污巧 , 31
( 1 1 )
: 翻 3 .
厂Z J 陈代雄 ,姜东 ,张永华 ,等 . 刺梨多糖对动物免疫功能的影响
〔J〕. 遵义 医学院学报 , l男 l , 14 ( 1 ) : 1 .
「31 路筱涛 , 鲍淑娟 . 刺梨多糖对小鼠抗应激性功能和免疫功能
的影响 〔J] . 广州中医药大学学报 , 2仪刀 , 19 ( 2) : 卫41 .
(收稿 日期 : Z IX峙. 11切 )
作者简介 : 张健 , 女 ,博士 ,讲师 ’ 通讯作者:孔令义 ,男 , 教授 , 博士生导师
@ jl耐 in e . 。 ,
·
17 7 8
·
hC认 尸爪弓m正 J, 2叹戈砚, 凸戮如反 r , Vol .勿 No .打
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(上 5 ) 85 39 128 9 F ax : (吸5 ) 85 30 15 28 -E m画】: I业“ , g
中国药学杂志 2众b 年 抢 月第 40 卷第 23 期
地延长小鼠耐缺氧时间和提高小鼠抗疲劳能力 ;能
显著地增强小鼠耐高温和耐低温能力及 R ES系统
的吞噬功能[ ] z。 萎篙对痢疾杆菌 、大肠杆菌 ,巨大芽
抱杆菌和真菌中的面包酵母有良好的抑制作用〔’ 」。
为了进一步开发利用萎篙天然资源 , 阐明其有
效成分 , 笔者对萎篙叶进行了系统的化学成分研究 ,
从中分离得到 6 个化合物 , 经光谱方法鉴定分别为
木犀草素一 , , 7 一二甲醚 ( 4 , , 7 一d ime th y l l u teo li n ) ( I ) ,
1 1
,
13

d ihdy
anmr
tir e丽n ( 1 ) ,柯伊利素一 7 一 o 一月刁 一葡
萄糖昔 ( c ha soe ir d一 7 一 O 一月一 D 一 gl cu os ide ) ( 1 ) , 木犀草
素一4’ 一 口召一 D 一葡萄糖昔 ( lut eol in 才 一 o 一口一 D 一gl uc os ide )
(W )
, 撇皮素一3一 o 一卢一 D 一木糖昔 ( qu e er et in 一3一 o 一月一 D -
汀 le o s id e ) ( V ) , 胡萝 卜昔 ( dau e o s et or l ) ( VI ) 。 除胡萝
卜昔 ( d au e o s t e olr ) (砚 ) 外 , 以上化合物均为首次从
该植物中分离得到 ;用标准 M T I,法测定了各化合物
对 SMM (C 人肝癌细胞 ) , B一 16 (小鼠黑色素瘤细胞 )
和 HL 印 (人原髓细胞白血病细胞 )的活性 。 其中 ,
化合物 1 1 , 13一 d i ll y d or m a t r i c而 n ( 1 ) 在 10 一 5 m o l · L 一 ’
时对 B一 16 细胞 (小鼠黑色素瘤细胞 )和 H L 60 细胞
(人原髓细胞白血病细胞 )有显著的抑制活性 ,抑制
率分别为 93 . 42 % 和 90 . 60 % ; 随着样 品浓度的递
减 ,抑制作用也逐渐减弱 。
1 仪器与材料
熔点使用 X4 型显微熔点测定仪 (温度计未校
正 ) ;紫外光谱使用 2 0 5 1型紫外 一可见分光光度仪测
定 ;红外光谱使用 iN c o le t l l n p a C t4 10 型红外光谱仪测
定 ; IE 一 M S 用 I I5P 9 89 A 质谱仪测定 ;核磁共振使用
Il ur e k er A CF 一 4以〕型 、 B ur e k e r A C F 一 3X() 型核磁共振
仪测定 。 薄层色谱和柱色谱用硅胶 (青岛海洋化工
J一 )
,高效薄层板 (烟台市化学工业研究所烟台化工
科技开发实验厂 ) , eS p ha ( le x LH 一 20 ( hP ~ i
。 公
司 ) ,所用试剂均为分析纯 。
RPM n翻0 ( iG lx 幻 1址 K ,m ot ir e s 公司 ) ;小牛血清
( H y
c lon e 公司 ;) 胰蛋白酶 ( is g l l a 公司 ;) 二甲基亚
矾 ( 51 9 1砚 公司 ;) M竹 , ( iS gn l a 公司 ) 。 H L - 60 阳性对
照药 : 氨甲蝶吟「沪卫药准字 ( 19 5) 第 01 20 3 7 号 ,
上海华联制药有限公司 ,批号 以X) 1以 ] 。 超净工作台
(吴县市实验动物仪器厂 ) , 恒温 c仇 培养箱 (德国
H e浅 u s 公司 ) , 酶联免疫检测仪 (美国 B 20 一DA ) , 倒
置生物显微镜 (重庆光学仪器厂 ) , 台式离心机 (上海
安亭科学仪器厂 ) ,数显水浴锅 (常州国华电管厂 ) ,
平板摇床 (太仓市光阴仪器厂 ) ,高压灭菌锅 (上海医
用核子仪器厂 ) 。 SM M (C 人肝癌细胞 ) , B一 16 (小鼠黑
色素瘤细胞 )和 H卜印 (人原髓细胞白血病细胞 )细
中国药学杂志 么洲万 年 12 月第 O4 卷第 23 期
胞株 。
药材采 自于南京八卦洲 ,经中国药科大学中药
资源教研室秦民坚副教授鉴定为萎篙 A~ is 面 se
-
龙刀群了砧钻 uT 允.z 。
2 提取与分离
萎篙叶 1 . 5 kg 以 8 一 or 倍 90 % 乙醇提取 3 次 ,
提取液浓缩 , 经石 油醚萃取脱脂 , 水层经大孔树脂
水一乙醇梯度洗脱 , 95 % 乙醇洗脱部分经反复硅胶柱
色谱 , 分别以石油醚一丙酮系统 ,得化合物 工35 grn 和
n ls mg
, 氯仿一甲醇系统梯度洗脱 , 得化合物 1 35
嗯 , VI 2 8 哩 , V 24 嗯 , 砚 19 嘿 。
3 结构鉴定
化合物 I :黄色粉末 , m p 2 52 . 0 一 2 54 . 0 ℃ ,易溶
于氯仿 、 醋酸乙醋等有机溶剂 。 盐酸一镁粉反应阳
性 , 三氯化铁反 应 阳性 。 IR p黑 ( C m 一 ’ ) : 3 147 ,
3 0 83
,
1 6 5 3
,
1 6 13
,
1 5 97
,
1 5 16
,
1 50 1
,
1 4 2 9
,
1 3 54
,
1 2 54
,
1 1印 , 1 15 1 , 1 0 17 , 84() 。 V[J 入m a x (mn ) : 2 6 9 ,
3 3 9 ( M eO H )
: 2 69
,
34 2 ( N
a 0 A C ) ; 2 77
,
3 67 ( NaO呱 ) , 提
示为黄酮类化合物 , 但不含有 4’ 一 o H 及 7一 o H。 ’ H -
NM R ( 3X() M zH
,
DM SO

d6 ) a
: 12
.
9 3 ( I H
, s , 5

OH )
,
10
.
8 8 ( I H
, s , OH )
,
7
.
67 ( I H
,
d
,
J
= 2
.
0
,
8
.
S ZH
,
6
, -
H )
,
7
.
5 5 ( I H
,
d
,
J = 2
.
O ZH
,
2
` 一
H )
,
7
.
12 ( I H
,
d
,
J
=
8
.
6 zH
,
5
`一
H )
,
6
.
96 ( I H
, s , 3

H )
,
6
.
54 ( I H
,
d
,
J
= 1
.
9
盗 , 8一 H ) , 6 . 2 1 ( I H , d , J = 1 . 8 价 , 6一 H ) , 3 . 8 8 ( 3H , s ,
o e 3H )
,
3
.
5 5 ( 3 H
, 、 , o e 3H )
。 对照文献〔4 ] ,将该化合
物氢谱数据准确归属 , 鉴定此化合物为木犀草素 -
4
, ,
7
一二甲醚 ( 4 , , 7一 d ime ht y ll u te o l in ) 。
化合 物 n : 无 色 方 晶 (石 油 醚一丙 酮 ) , mP
l科 . 0 一 l肠 . 0 ℃ , [。 」普= + 0 . 5 0 ( e H e l3 ) , 易溶于氯
仿 ,醋酸乙酷等有机溶剂 。 vIR 欲 ( cm 一 ` ) : 3 42 9 ,
2 9 3 0
,
2 864
,
1 7 82
,
1 7 5 0
,
1 692
,
1 64 3
,
1 6 19
,
l 科 0 ,
1 374
,
1 2 22

VU 为旧 ax (mn ) : 2 55 ( M eo H )
。 ’ H一N MR
(月城X) M zH
,
C DC13 ) 占: 6 . 19 ( I H , S , 3 一 H ) , 3 . 50 ( I H , d ,
J
= 10
.
I zH
,
5

H )
,
3
.
7 1 ( I H
,
t
,
J = 10
.
I zH
,
6

H )
,
3
.
25 ( I H
,
t t
,
J
= 3
.
0
,
10
.
4 zH
,
7

H )
,
4
,
9 2 ( I H
,
dt
,
J
=
1
.
7
,
I O
.
g zH
,
8

H )
,
2
.
7 5 ( I H
,
d
,
J
= 2
.
3
,
1 1
.
I ZH
,
9
-
H )
,
2
.
46 ( I H
,
d d
,
J = 1
.
7
,
13
.
4 ZH
,
9

H )
,
6
.
2 3 ( I H
,
d
,
J 二 3
.
0 比 , 13一 H ) , 5 . 64 ( I H , d , J = 3 . O ZH , 13 一H ) ,
2
.
45 ( 3 H
, s , 14

H )
,
2
,
3 4 ( 3H
, s , 15

H )
,
2
.
16 ( 3 H
, s ,
e o e 3H )
。 ’ 3 e 一NM R ( 20 M zH
,
e D c l3 ) a
: 13 3
.
6 ( e

l )
,
194
.
9 ( C

2 )
,
136
.
0 ( C

3 )
,
169
.
2 ( C一 ) , 5 1 . 6 ( C一 5 ) ,
8 1
.
4 ( C

6 )
,
5 5
.
0 ( C

7 )
,
6 9
.
3 ( C

8 )
,
4
.
4 ( C

9 )
,
14
.
6
( C

10 )
,
16 8
.
3 ( C

11 )
,
13 3
.
6 ( C

12 )
,
12 1
.
9 ( C

13 )
,
2 1
.
3 ( C

14 )
,
19
.
8 ( C

15 )
,
169
.
7 ( C OC 3H )
,
2 1
.
0
hC 认 月切 m l J , 2仪万 D戊曰 资访『 , 1of/
.
40 oN
. 刀 · 1 77 9 ·
(o c c H: )
。 对照文献囚 , 鉴定此化合物为 H , 13 一 id -
hyd
~
itr c iar
n ,首次应用 MH QC , MH B c 等二维技术
对该化合物的碳氢信号进行了确切归属 。
化合物 m : 黄色粉末 , m p 220 . 0 一 221 . 0 ℃ 。 易
溶于甲醇 。 盐酸一镁粉反应阳性 , 三氯化铁反应 阳
性 , M o li s h 反 应阳 性 。 肠黯 ( c m 一 ’ ) : 3 4 1 5 , l 。以〕,
1 60 3
,
1 49 6
,
1 3 3 9
,
1 2 5 9
,
1 17 7
,
1 20 7
,
1 116
,
1 0 8 3
,
1 0 2 7
,
842

UV沁1狱 (mn ) : 2 6 8 , 3 4 8 ( M e() H ) ; 2 6 8 , 34 8
( N a以 c ) ; 260 , 4田 ( N a 0 M e ) , 提示为黄酮类化合物 ,
且含有 4 ’ 一 o H 。 生H一N MR ( 30 M比 , DM s o 一d6 ) a : 12 . 9 7
( I H
, 。 , 5一 O H )
,
6
.
4 5 ( IH
,
d
,
J = 1
.
S zH
,
6

H )
,
6
.
87
( I H
,
d
,
J = 1
.
S ZH
,
8

H )
,
7
.
X() ( I H
, s , 3

H )
,
6
.
94 ( I H
,
d
,
J = 8
.
S ZH
,
5
’ 一
H )
,
7
.
96 ( ZH
,
m )
,
5
.
06 ( I H
,
d
,
J
=
6
.
9 H
z ,
gl
u l

H )
。 ’ 3 C一 NMR ( 7 5 MZH
,
DM SO

d6 ) 6 : 182
.
2
( C

4 )
,
164
.
3 ( C

2 )
,
16 3
.
1 ( C

7 )
.
16 1
.
3 ( C

5 )
,
157
.
1
( C

9 )
,
15 1
.
1( C

4
`
)
,
14 8
.
2 ( C

3
`
)
,
12 1
.
5 ( C

l
`
)
,
120
.
7
( (二一 6 ` ) , 116 . 0 ( C一 5 ’ ) , 1 10 . 5 ( C一 2 , ) , 105 . 5 ( C一 10 ) ,
10 3
.
6 ( e

3 )
,
9
.
7 ( e

6 )
,
9 5
.
2 ( C

8 )
,
9
.
8 ( gl
u 一 C

l )
,
7 7
.
1 ( gl
u 一C

3 )
,
7 6
.
3 ( gl
u 一C

5 )
,
7 3
.
0 ( gl
u 一 C

2 )
,
6 9
.
5
( gl
u 一 C

4 )
,
60
.
5 ( gl
u 一 c

6 )
。 对照文献 〔“ ] , 鉴定此化合
物为柯伊利素一 7一 o 一口一 D 一葡萄糖昔 ( c h叮 s oe ir d一 7 一 o 一月-
D

gl
u e os ide )

化合物 W : 黄色粉末 , 易溶于甲醇 。 盐酸 一镁粉
反应阳性 , 三氯化铁反应阳性 , M iol hs 反应阳性 ,薄
层酸水解检测有葡萄糖 。 -vu 为rn aX ( nI ) : 26 8 , 335
( E to H )

E IM S 而 z ( % ) : 2 8 6 [ M 一 咖」十 ( 10 ) , 153
( 30 )
, 一34 ( 10 ) 。 ` H一 NM R ( 3田 M氏 , D MOS 一 d6 ) 台: 12 . 9 2
( I H
, ,
.
5

O H )
,
6
.
20 ( I H
,
d
,
J 二 1
.
g zH
,
6

H )
,
6
.
50
( I H
,
d
,
J = 1
.
g ZH
,
8

H )
,
6
.
8 3 ( I H
, s , 3

H )
,
7
.
2 0
( I H
,
d
,
J
二 8
.
0 H z
,
H

5

)
,
7
.
4 8 ( I H
,
dd
,
J = 2
.
3
,
8
.
0
H z
,
H

6
,
)
,
7
.
5 1 ( IH
,
d
,
J 二 2
.
3 ZH
,
H

2
`
)
,
4
.
90 ( I H
,
d
,
J
二 6
.
g ZH
,
gl
u l

H )
。 `3 C一N MR ( 7 5 M F阮, DM s O 一d6 )
a : 18 1
.
9 ( C

4 )
,
16 3
.
2 ( C

2 )
,
16 1
.
9 ( C

7 )
,
16 1
,
3 ( C

5 )
,
15 7
.
8 ( C

9 )
,
14 8
.
8 ( C 4
`
)
,
146
.
7 ( C

3

)
,
124
.
0 ( C

l

)
,
1 18
.
5 ( C

6
,
)
,
1 16
.
1 ( C

5

)
,
1 13
.
0 ( C

2
`
)
,
1以 . 3 ( C-
10 )
,
10 3
.
0 ( C

3 )
,
9 8
.
5 ( C

6 )
,
94
.
8 (C

8 )
,
10 1
.
4 ( gl
u 一 C
-
l )
,
7 6
.
0 ( gl
u 一C

3 )
,
7 7
.
5 (glu

C

5 )
,
7 3
.
4 ( glu

C

2 )
,
69
.
9
( gl
u 一 c一 ) , 60 . 9( gl u 一 c 一6) 。 对照文献圈 ,鉴定此化合
物为木犀草素一 4 ` 一 O 一月一 D 一葡萄糖昔 ( lu eolt in 一` 一 。 一月-
D

gl
u e os id e )

化合物 V :黄色粉末 , 易溶于甲醇 。 盐酸 一镁粉
反应阳性 , 三氯化铁反应阳性 , oM il hs 反应阳性 , 薄
层酸水解 检测有木糖 。 u V沁刀 ax ( nr ) : 257 , 346
( MeO H )
。 ’ H一NM R ( 3X() M浅 , DMOS 一d6 ) 各: 12 . 6 1 ( IH ,
S , 5

OH )
,
6
.
2 1 ( I H
, s , 6

H )
,
6
.
4 1 ( I H
, s , 8

H )
,
6
.
8 5
( Z H
,
d
,
J = 8
.
S ZH
,
3
` ,
5
` 一
H )
,
7
.
58 ( ZH
,
d
,
J = 8
.
S zH
,
2
` ,
6
, 一
H )
,
5
.
3 5 ( I H
,
d
,
J
= 7
.
4 比 ,拜 1 1一H ) 。 ’ 3 e 一NM R
( 7 5 M H z
,
DMOS

d6 ) 6
: 17 7
.
5 ( C

4 )
,
164
.
6 ( C

7 )
,
16 1
.
6
( C

5 )
,
156
.
5 ( C

2 )
,
156
.
4 ( C

9 )
,
14 8
,
7 ( C

4
,
)
,
14 5
.
1
( C

3
`
)
,
13 3
.
4 ( C

3 )
,
12 1
.
6 ( C

l

)
,
12 1
.
1 ( C

6
,
)
,
1 16
.
3
( C

5

)
,
1 15
.
5 ( C

2
`
)
,
l以 . 0 ( C一 10 ) , 9 9 . 1 ( C一6 ) , 93 . 7
( C

8 )
,
10 1
.
9 (
x y l

C

l )
,
7 6
.
2 (
x y l

C

3 )
,
7 3
.
8 ( x y l

C

2 )
,
6 9
.
6 (叮l一 C 4 ) , 6 . 3 ( xyl 一 c 一 5 ) 。 对照文献 L7 ] ,鉴定此
化合物为懈皮素一3一 0 一月一 D 一木糖昔 ( qu e二et in 一 3一 。 一月-
D
一 x刃c os ids ) 。
化合物 U : 白色粉末 , mP 289 一 290 ℃ ,难溶于一
般有机溶剂 , 能溶于氯仿 一甲醇混合溶液或毗吮 ,
U eb ~

B u 允h田月反应阳性 , oM h hs 反应 阳性 。 与
胡萝 卜昔对照 品比较 , T LC 中 fR 值及 显色行为一
致 ,将其与胡萝 卜昔对照品混合后熔点不下降 。 因
此鉴定此化合物为胡萝 卜昔 ( d a u c o s et rD )I 。
4 单体化合物的生物活性
用标准 MTT 法测定了各化合物对 SM M (C 人肝
癌细胞 ) , B 一16 (小鼠黑色素瘤细胞 )和 H卜印 (人原
髓细胞白血病细胞 )的活性 。 其中 , 化合物 1 1 , 13 -
d ihy d or m a t l i c幼 n ( 1 ) 在 一。 一 ’ mo l · L 一 `时对 B一 6 细胞
(小鼠黑色素瘤细胞 )和 H L 印 细胞 (人原髓细胞白
血病细胞 ) 有显著 的抑制 活性 , 抑制率分别为
93
.
42 % 和 90 .印% ;随着样品浓度的递减 , 抑制作用
也逐渐减弱 ;对 SM M (C 人肝癌细胞 )有较弱的抑制
活性 ,抑制率为 20 . 98 % ;其余化合物均未显示任何
活性 。
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(收稿日期 : 2X() 5扔 一26 )
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