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田基黄的药理与质量控制研究进展



全 文 :2011年 12月第 49卷第 34期 ·综 述·
田基黄始载于我国清代何克谏所撰写的《生草药性备要》,民
间别名有小元宝草、雀舌草、七层塔等,为藤黄科金丝桃属植物地
耳草(Hypericum japonicum Thunb)的干燥全草。据《中国植物志》
记载其原植物地耳草为一年生纤细草本,广泛分布于辽宁、山东
至长江以南各省区,生田边、沟边、草地以及撩荒地上。其味甘、微
苦、性凉,归肝、胆、大肠经,具有清热利湿,解毒、散瘀、消肿、止痛
等功效,中医临床上常用于治疗肝炎、急性黄疸型肝炎、肠炎、急
性肾炎、急性结膜炎以及毒蛇咬伤、跌打损伤等[1]。本文现对近年
来田基黄的药理及临床应用、含量测定、指纹图谱的研究概况总
结如下。
1 药理作用
1.1 保肝作用
林久茂等[2]以四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤的模型,
并以田基黄水煎剂灌胃,通过监测小鼠血清中的丙氨酸氨基转移
酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活
力以及一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)- 6
的含量,观察肝组织的病理损伤程度。结果表明不同浓度的田基
黄能不同程度地降低 CCl4所致异常升高的小鼠血清中的 ALT、
AST、NO、TNF-α和 IL- 6含量,升高 SOD活性,并对细胞因子介
导的免疫炎症反应性损伤具有保护作用,可保护和修复肝细胞病
理学损伤。提示田基黄对 CCl4所致小鼠肝损伤具有防治作用,其
作用机制可能与降低转氨酶、提高抗氧化能力和抑制 NO、TNF-α
和 IL- 6过量生成等有关。
1.2 抑癌作用
肖大江等[3]应用 SRB法检测田基黄对 CNE22细胞生长的抑制
作用,PI分析细胞周期的变化,AnnexinV检测细胞凋亡的发生。
结果显示田基黄抑制 CNE22细胞的生长,引起细胞死亡;田基黄
诱导 CNE22细胞发生凋亡和坏死;田基黄作用人鼻咽癌细胞后
S期细胞的比例增加,G2/M期细胞的比例减少。因此,一定浓度
的田基黄可明显抑制人鼻咽癌细胞 CNE22生长,并诱导其凋亡,
其机制可能与阻滞细胞停留在 S期有关。
1.3 抗病毒作用
刘妮等[4]建立体内抗病毒实验,以甲 3型流感病毒滴鼻感染
小鼠,观察田基黄对肺指数、病毒致小鼠死亡率的影响。结果表明
口服 10g/(kg·d)田基黄可明显抑制甲 3型流感病毒引起的小鼠
肺组织炎性实变,降低甲 3型流感病毒感染小鼠的死亡率。因此,
田基黄是一种治疗流行性感冒的有效药物,并对病毒性感冒的病
因治疗具有良好的前景,安全有效,值得进一步开发。许潘健等[5]
将田基黄与等量的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)或乙型肝炎
病毒核心抗原(HBeAg)阳性血清混匀,使混合后的浓度分别为
6g/L、12g/L、24g/L、48g/L和 96g/L,孵育 8h、16h。然后采用 ELISA
法测定 HBsAg或 HBeAg的滴度,观察其对 HBsAg或 HBeAg的
抑制作用。结果表明 96g/L和 48g/L浓度的田基黄在作用 16h后
田基黄的药理与质量控制研究进展
陈 霞
(浙江省诸暨市红十字医院药剂科,浙江诸暨 311800)
[摘要] 田基黄作为传统中药在临床上作为抗肝类药物使用已久,其具有广泛的药理作用,有待于更深入的研究和探讨,使
田基黄能更多地应用于临床。本文通过查阅近半年来国内外相关文献,结合田基黄的药理及临床应用、含量测定,指纹图谱
的研究概况进行归纳并综述。
[关键词] 田基黄;药理作用;质量控制
[中图分类号]R285 [文献标识码]A [文章编号]1673- 9701(2011)34- 31- 03
The Progression of Pharmacological Effect and Qualit y Cont rol of Hy-
per icum J aponicum
CHEN Xia
Department of Pharmacy,Zhuji Red Cross Hospital in Zhejiang Province,Zhuji 311800,China
[Abst r act ] Hypericum japonicum as traditional Chinese medicine having extensively pharmacological effect has been used in clinical
practice for a long time and more researches are required to expand its clinical application. The pharmacology and clinical application,
assaying and finger print of hypericum japonicum combined with the foreign and domestic literatures were reviewed and summarized.
[Key words] Hypericum japonicum;Pharmacological effect;Quality control
CHINA MODERN DOCTOR 中国现代医生 31
2011年 12月第 49卷第 34期
对 HBsAg或 HBeAg具有明显的抑制作用(P<0.01),因此田基黄
在体外也有较强的抗 HBsAg和 HBeAg作用。
1.4 抗痛风作用
夏隆江等[6]观察田基黄提取物对尿酸(MSU)所致大鼠足爪肿
胀的影响、对MSU诱导家兔急性关节炎的影响、对次黄嘌呤所致
小鼠高尿酸血症的影响、对小鼠扭体反应的影响及小鼠耳廓肿胀
法观察田基黄提取物品抗炎、镇痛作用。结果表明田基黄对MSU
所致大鼠足爪肿胀有较好的抑制作用,能减轻 MSU所致家兔急
性关节炎炎症,降低高尿酸血症模型小鼠血尿酸值,有一定的抗
炎作用,但镇痛作用较弱。说明田基黄具有抗痛风作用,值得进一
步研究开发。
1.5 抗菌作用
虞金宝等[7]采用液体稀释法,将田基黄浸膏及提取物与幽门
螺杆菌共同培养,通过比较细菌生长情况而测定田基黄浸膏及提
取物的MIC和MBC。结果发现田基黄浸膏及提取物对幽门螺杆
菌具有明显抑杀作用。
1.6 其他药理作用
传统中药田基黄除作为保肝药物外,还有治疗高脂血症、肾
炎的作用。陈厚平等[8]在研究以田基黄为主的复方田基黄茶治疗
高脂血症的临床疗效时发现其具有治疗高血脂症的作用。他将
96例高脂血症患者随机分为治疗组 56例,其余 40例采用脂必
妥片对照治疗,共治疗 8周,观察疗效。结果表明,治疗组的有效
率为 91%,与对照组有效率 72.5%比较,差异有显著性意义(P<
0.01)。王邦鼎[9]用自制地耳草汤(地耳草、鸭跖草、益母草、白茅根
各 30g,白僵蚕、蝉蜕各 12g,石韦、车前草各 15g)治疗急性肾炎
62例,取得了良好的效果。
2 质量控制
2.1 含量测定
随着对田基黄活性成分研究的不断深入,用于鉴别和测定其
含量的方法也有了较大的提高。唐丹等[10]采用分光光度法测定田
基黄中总黄酮的含量,他利用黄酮类化合物母核上的酚羟基能与
铝离子络合而显色,采用分光光度法,以槲皮苷为对照品,以 10%
三氯化铝醇溶液为显色剂,在波长 273nm处对样品中的总黄酮
进行含量测定。结果表明总黄酮在(3.20~16.0)μg/mL范围内
线性良好(r=0.9999),该法的平均加样回收率为 98.25%,RSD为
2.21%(n=9),该法稳定性较好,24.0h内吸光度基本无变化,RSD
为 0.40%(n=6)。实验证明该方法稳定、简便、快速,适用于田基黄
药材中总黄酮的含量测定。Juan Su等[11]使用 HPLC- DAD- ESI/MS
法同时测定田基黄药材中的五种成分,分别为 Taxfolin- 7- O-α-
l- rhamnoside、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素 - 7- O-α- l- 鼠李糖苷和
槲皮素。此分析采用 ZORBAX SB- C18色谱柱,流动相为乙腈:
0.5%甲酸水溶液,其线性及回收率均符合规定,最低检测限为
0.5~7.5ng,含量范围为(2.0~34.18)mg/L。王欣欣等[12]采用反
相高效液相色谱法测定田基黄中槲皮素的含量,使用迪马(钻石)
C18 色谱柱,以甲醇 - 0.06%磷酸(52∶48)为流动相,流速为
1.0mL/min,检测波长为 360nm。结果表明槲皮素的线性范围是
(7~42)μg/mL(r=0.9999),槲皮素平均回收率为 100.3%,RSD=
2.1%。该方法简便、准确,可用于田基黄中槲皮素的含量测定。熊
丽等[13]使用高效液相色谱法测定田基黄中槲皮素 - 7- O-α- L-
鼠李糖苷的含量,首次建立了田基黄中槲皮素 - 7- O-α- L- 鼠李
糖苷的含量测定的 HPLC法,并测定了 16个不同购买地的田基
黄中槲皮素 - 7- O-α- L- 鼠李糖苷的含量,平均回收率为 99.1%,
该方法简便、快速、精密度好,为田基黄药材质量控制和综合开发
利用提供了科学依据。秦盛莹等[14]首次建立采用 RP- HPLC测定
田基黄中异巴西红厚壳素的含量的方法,本研究采用正交试验设
计优化异巴西红厚壳素的提取方法,选择提取溶剂用量、提取次
数、提取时间 3个因素,每个因素 3个水平,按 L9(34)正交表安
排试验,以异巴西红厚壳素的含量为考察指标对正交试验的结果
进行直观和方差分析,最后选定最佳提取方法为 12倍量提取溶
剂,回流提取 2次,1h/次。该分析线性范围为(5.01~80.2)μg/mL
(r=0.9999),平均回收率为 97.5%(n=9),该方法简便、快速、准确、
重复性好,可以为田基黄药材的质量控制提供依据。而熊丽等[15]
改进了异巴西红厚壳素的质量分析方法,并通过实验优选了提取
方式:采用 80%乙醇超声提取两次,并同时测定了十六个产地药
材的含量,在其测定的不同产地中,以江苏南通购买的药材含量
最高。在同时测定有效成分含量方面,熊丽等[16]还使用 RP- HPLC
同时测定田基黄药材中异槲皮苷、槲皮苷和槲皮素的含量。其采
用梯度洗脱的方式进行测定,其中异槲皮苷、槲皮苷和槲皮素浓
度分别在(9.90~330)μg/mL(r=0.9996,n=6)、(19.2~640)μg/mL
(r=0.9998,n=6)和(2.16~72.0)μg/mL(r=0.9997,n=6)范围内与
峰面积线性关系良好;平均加样回收率(n=9)分别为 97.2%,99.1%,
98.9%,为田基黄药材质量控制提供了方法。
2.2 指纹图谱
蔡泽凡等[17]利用高效液相色谱建立了田基黄的色谱指纹图
谱。根据色谱指纹图谱各个谱峰的相对保留时间值α和相对面
积 Sr对色谱指纹图谱进行分析对比研究,建立了一个快速、简易
鉴别田基黄样品的色谱指纹图谱分析方法。他们在实验中比较了
田基黄与遍地金两种药材的指纹图谱差异,并通过相似度判定二
者的区别,使之成为一种鉴别田基黄的行之有效的方法。王永刚
等[18]收集了 30多个不同产地的田基黄药材样品,经过色谱条件
的选择和优化,构建了田基黄药材 HPLC指纹图谱,获得了其指
纹特征,利用指纹特征考察了不同来源的田基黄药材间的质量差
异,并论证不同生长期的药材所含的次生代谢产物含量有差异,
并在指纹图谱上有所反映。因此规定药材的长度可以间接地固定
药材生长期。并建议在挑选田基黄注射液投料药材时,该药材指
纹图谱与参照指纹图谱(或共有模式)的相似度大于 0.92。李仕海
等[19]用 RP- HPLC法梯度洗脱,测定田基黄及其混伪品细叶金丝
桃的指纹图谱,并作相似度比较分析。结果表明田基黄不同样品
指纹图谱相似度较好,而田基黄与细叶金丝桃的指纹图谱具有一
定差异。该 HPLC指纹图谱具有重现性好、特征性强、方法简便
等特点,可用于田基黄药材的鉴别。Wei- Na Gao 等 [20]采用
·综 述·
32 中国现代医生 CHINA MODERN DOCTOR
2011年 12月第 49卷第 34期
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(收稿日期:2011- 09- 23)
HPLC- PAD- ESI- MS技术对十个不同产地的田基黄药材进行指
纹图谱测定,并将色谱指纹图谱中的 20个共有峰进行归纳鉴定,
分别为黄酮类及其苷类、间苯三酚类、黄烷醇类、口山酮类、色酮
等。该法将指纹图谱与质量分析相组合,为田基黄的质量控制提
供了依据。
3 结语与展望
田基黄是我国传统中药,并作为抗肝炎药物使用已久,现有
各种制剂生产,如田基黄注射液、田基黄软胶囊、田基黄颗粒等。
近年来许多学者对其进行了各方面的研究,在对其药理作用的研
究中,发现其除了具有传统的保肝作用,还具有抑癌、抗痛风、抗
病毒、抗菌等多种药理作用,但对于具有这些药理活性的作用机
理还未完全阐明。在含量分析方面,主要是以槲皮素为主的各式
槲皮苷为含量测定的主要对象,鉴于目前 2010版《中华人民共和
国药典》中,没有收录田基黄含量测定内容,为使其质量标准更加
完善,有必要为原药材建立含量测定指标。同时对于不同产地的
田基黄质量评价有待于进一步研究。另外,在质量控制方面,能否
运用新的技术和手段建立其较为完善的质量评价体系,也有待深
入研究。
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·综 述·
CHINA MODERN DOCTOR 中国现代医生 33