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分光光度法测定天名精总黄酮含量



全 文 :贵 州 化 工
GuizhouChemicalIndustry
2012 年 12 月
第 37 卷第 6 期

分光光度法测定天名精总黄酮含量
何可群1,李相兴2
(1.贵州民族大学化学与环境科学学院,贵州 贵阳 550025;2.贵州民族大学民族学与社会学学院,贵州 贵阳 550025)
摘 要:以芦丁为对照品,用超声辅助提取、紫外 -可见分光光度法测定了天名精总黄酮含量。结果表明:天
名精中总黄酮的相对百分含量为 10. 03%,精密度实验 RSD为 1. 41%;芦丁对照品在 0. 01375 ~ 0. 2200mg /mL范围
有良好的线性关系,回归方程为 A =9. 9261C + 0. 013,相关系数 R2 = 0. 9997。该方法操作简便、结果可靠,能为天
名精药用价值的开发及扩大资源利用提供科学的依据。
关键词:天名精;分光光度法;总黄酮
中图分类号:R282. 71 文献标识码:A 文章编号:1008 - 9411(2012)06 - 0028 - 03
天名精(Carpesium abrotanoides L.)是菊科天名
精属植物,别名:挖耳草、金挖耳草、皱面草、烟斗菊
等。天名精以全草入药,性味甘、寒,具有消炎、截
疟、止泻的功效。用于小儿肺炎、急性肝炎、疟疾、腹
泻、喉痹、急慢惊风、牙痛、疮痈肿毒、痔瘘、皮肤痒
疹,外用治疗蛇、犬咬伤等[1 - 4];天名精的果实又名
鶴虱,具有杀虫消积的功效,用于蛔虫、蛲虫、绦虫及
虫积腹痛、小儿疳积等症[3,4]。已有的研究表明天名
精的化学成分主要为倍半萜内酯:天名精内酯酮、鹤
虱内酯、大叶土木香内酯、依瓦菊素等[4 - 7],其果实
主要含天名精酮、天名精内酯、正己酸等[3]。通过文
献检索,国内外还未见有关天名精总黄酮测定的研
究报道,本实验对天名精地上部分 70%乙醇提取液
的紫外光谱及总黄酮含量进行研究,以便为该民族
药的进一步开发及扩大资源利用提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
1. 1. 1 天名精
采自贵阳市花溪十里河滩,经贵州民族大学民
族药物研究所卢文芸副教授鉴定为天名精(Carpe-
sium abrotanoides L.) ,标本保存于贵州民族大学化
学与环境科学学院药学教研室。
1. 1. 2 仪器
756PC紫外 -可见分光光度计(上海舜宇恒平
科学仪器有限公司) ,METTLERAE240 电子分析天
平(上海天平仪器厂) ,BGZ - 30 电热鼓风干燥箱
(上海博迅实业有限公司医疗设备厂) ,SG3200HE
超声清洗仪(上海冠特超声仪器有限公司) ,数显恒
温水浴锅(常州博远实验分析仪器有限公司)
1. 1. 3 试剂
氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、无水乙醇、石油醚
均为分析纯,芦丁对照品 (色谱纯,购自贵州迪大科
技有限责任公司)。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 天名精总黄酮的提取方法[8 - 10]
将自然晾干的天名精枝叶在电热鼓风干燥箱中
于 60 ± 1℃烘干 5h,粉碎,精确称取干燥的天名精粉
末适量,按 1∶ 20 的固液比用体积分数为 70%的乙醇
浸泡、超声提取。提取条件:时间 30min,超声频率
40kHz,功率 150W,提取结束后,合并提取液、过滤、
冷却、用沸程 30℃ ~ 60℃的石油醚萃取除去叶绿
素,浓缩、用 70%的乙醇定容、摇匀备用。
1. 2. 2 芦丁标准曲线的绘制[11 - 18]
(1)芦丁标准溶液的制备:精确称取 120℃干燥
至恒质量的芦丁 27. 5mg,置 50mL 容量瓶中,加
70%乙醇适量,置水浴上微热使其溶解、冷却,加入
70%乙醇至刻度,摇匀,每 1mL含芦丁 0. 550mg。
(2)标准曲线的绘制:精确吸取质量浓度 0.
550mg /mL的芦丁标准溶液 0,0. 25,0. 50,1. 00,2.
00,3. 00,4. 00mL 分别置于 7 支 10mL 比色管中,
加体积分数 70% 的乙醇补足至 5. 0mL,分别加入
50g /L亚硝酸钠溶液 0. 40mL,摇匀,放置 6min后,精
确加入 50g /L硝酸铝溶液 0. 40mL,摇匀,放置 6min,
再精确加入 40g /L 氢氧化钠溶液 4. 00mL,并用体
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* 基金项目:国家社会科学基金(12XMZ033)
收稿日期:2012 - 10 - 31
作者简介::何可群(1971 -) ,女(白族) ,云南云龙人,副教授,硕士,研究方向为药用植物学、分析化学。
2012 年 12 月
第 37 卷第 6 期
何可群等: 分光光度法测定天名精总黄酮含量
积分数为 70%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置 12min。
以试剂空白为参比,于 510nm波长下测定吸光度 A,
以吸光度为纵坐标,显色液中芦丁的质量浓度 C
(mg /mL)为横坐标,绘制标准曲线,经回归处理得
方程:A =9. 9261C + 0. 013,相关系数:R2 = 0. 9997,
芦丁浓度在 0. 01375 ~ 0. 2200mg /mL 范围内吸光度
与质量浓度线性关系良好。
1. 2. 3 芦丁、天名精紫外吸收光谱的研究
精确吸取芦丁标准溶液(0. 550mg /mL)、天名精
的提取液各 1. 00mL,分别置于 2 支 10mL比色管中,
加体积分数 70% 的乙醇补足至 5. 0mL,分别加入
50g /L亚硝酸钠溶液 0. 40mL,摇匀,放置 6min 后,
精确加入 50g /L 硝酸铝溶液 0. 40mL,摇匀,放置
6min,再精确加入 40g /L 氢氧化钠溶液 4. 00mL,并
用体积分数为 70% 乙醇稀释至刻度,摇匀,静置
12min。以试剂空白建立基线,在 200 ~ 700nm 波长
范围进行波长扫描,得到芦丁和天名精提取液显色
后的紫外吸收光谱。
1. 2. 4 样品测定[11 - 18]
精确量取 1. 2. 1 所得天名精乙醇提取液
1. 00mL,按标准曲线的绘制方法加显色剂处理,于
510nm波长下测得天名精的吸光度 A,代入回归方
程得天名精的总黄酮类化合物以芦丁计算的质量浓
度 C(mg /mL) ,换算为干燥药材中总黄酮的%含量。
1. 2. 5 重复性试验
精确称取天名精全草样品 5 份,按含量测定方
法进行测定,计算平均含量及 RSD%值。
1. 2. 6 加标回收试验
精确称取一定量天名精全草样品 3 份,再精确
加入芦丁标准溶液(浓度为 0. 550mg /mL)4. 00mL,
按样品含量测定方法进行提取、测定,计算加标回收
率及 RSD%值。
2 结果与分析
2. 1 标准曲线
于 510nm波长下测定芦丁标准溶液系列的吸
光度 A,以吸光度为纵坐标,显色液中芦丁的质量浓
度 C(mg /mL)为横坐标,绘制标准曲线(图 1) ,经
回归处理得方程:A = 9. 9261C + 0. 013,相关系数:
R2 =0. 9997,芦丁浓度在 0. 01375 ~ 0. 2200mg /mL
范围内吸光度与质量浓度线性关系良好。
2. 2 芦丁、天名精紫外吸收光谱的研究
图 2、图 3 表明,在加显色剂前后,芦丁标准溶液
和天名精样品溶液的紫外吸收光谱均有改变,显色
后在 510nm处有较平缓的吸收峰,适于定量测定。
图 1 芦丁标准曲线
图 2 芦丁标准溶液显色后的紫外吸收光谱
图 3 天名精样品显色后的紫外吸收光谱
2. 3 样品总黄酮含量的测定
总黄酮测定及精密度试验结果见表 1。由表 1
可知,天名精样品中总黄酮的平均含量为 10. 03%,
重复性试验 RSD为 1. 41%,精密度高。
表 1 总黄酮测定及精密度试验结果
测定次数 1 2 3 4 5
样品总黄酮含量(%) 9. 85 9. 91 10. 09 10. 13 10. 17
平均值(%) 10. 03
RSD (%) 1. 41
2. 4 加标回收率
加标回收试验结果见表 2。由表 2 可知加标回
收率在 97. 22% ~98. 53%,RSD%为 0. 712%。
表 2 加标回收试验结果
样品重量
/mg
样品黄酮
含量 /mg
加标量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
%
100. 00 10. 03 2. 200 11. 89 97. 22
100. 00 10. 03 2. 200 11. 92 97. 47 97. 74 0. 7122 05 8 53
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3 结 论
本文首次对天名精全草的紫外光谱及总黄酮含
量进行研究,结果表明天名精干燥全草中黄酮类物质
极为丰富,质量分数为 10. 03%,为该民族药的药用价
值开发及扩大资源利用提供了一定的科学依据。
参考文献:
[1]云南省卫生厅编,云南中草药[M]. 昆明:云南人民出版
社,1971.
[2]施兆宏.天名精根的临床运用[J].基层中药杂志,2002,
16(2) :61 - 62.
[3]徐国钧,王强主编. 中草药彩色图谱(第三版) [M]. 福
州:福建科学技术出版社,2006.
[4]秦付林,何雪莲,张洁,等.中药鶴虱的研究进展[J]. 亚
太传统医药,2008,4(11) :136 - 137.
[5]Masao Maruyama,Fumiko Shibata. Stereochemistry of gra-
nilin isolated from carpesium abrotanoides[J]. Phytochem-
istry,1975,14(10) :2247 - 2248.
[6]董云发,丁云梅.天名精倍半萜内酯化合物[J].植物学
报(英文版) ,1988(01) :135 - 138.
[7]冯俊涛,张亚梅,王俊儒,等. 天名精内酯酮衍生物合成
及其抑菌活性[J].农药学学报,2007,9(2) :185 - 188.
[8]方敏,占才贵,宫智勇.玉米须总黄酮的提取与抗氧化活
性研究[J].食品科学,2009,30(18) :206 - 208.
[9]南江,王星,黄伟敏,等. 超声辅助提取野菊花黄色素及
其稳定性研究[J].食品与发酵工业,2011,37(4) :243 -
246.
[10]景小楠,钟菡,张宏,等. 黑骨藤中总黄酮含量的测定
[J].四川师范大学学报(自然科学版) ,2010,33(1) :89
- 92.
[11]李艳提,赵金凤,张卫明,等.罗布麻茶总黄酮含量测定
方法研究[J].食品科技,2010,35(6) :274 - 278.
[12]何书美,刘敬兰.芹菜中黄酮类物质的提取和测定[J].
分析试验室,2006,25(8) :84 - 87.
[13]蔡定建,柳茶花,钟鸿鸣,等.野菊花中黄酮类物质的提
取和鉴定[J].中国食品添加剂,2010,(02) :143 - 147.
[14]张桂兰.茶藨子中总黄酮的测定[J]. 食品科学,2007,
28(11) :506 - 508.
[15]甄会贤,李平,张虹,等.白英中总黄酮的含量测定[J].
中华中医药学刊,2008,26(10) :2231 - 2233.
[16]熊春华,姚彩萍.浙产菊米中总黄酮的含量测定[J].食
品科技,2008,(5) :213 - 215.
[17]左爱华,韦群辉,曾元儿,等.紫外可见分光光度法测定
青刺尖总黄酮含量[J]. 云南中医中药杂志,2008,29
(6) :43 - 45.
[18]张岭苓,李楠,徐凌川,等.不同炮制方法的杜梨叶中总
黄酮含量测定[J].食品科技,2011,35(10) :269 - 271.
Determination of Total Flavonoids from Carpesium abrotanoides L
HE Ke - qun1,LI Xiang - xing2
(1. Chemistry and Environmental Science Department of Guizhou Minzu University;2. Ethnology and sociology De-
partment of Guizhou Minzu University,Guiyang,Guizhou,550025,China)
Abstract:The percentage of total flavonoids in Carpesium abrotanoides L. was determined by ultraviolet and
visible spectrophotometry at 510 nm based on the standard curve with rutin as controlled sample. The results showed
the percentage of total flavonoids in Carpesium abrotanoides L. was10. 03% and there was good linearity (R2 = 0.
9997)during the range of 0. 01375 ~ 0. 2200mg /mL for rutin,the regression equation:A =9. 9261C + 0. 013. The
relative standard deviation RSD was 1. 41% . The ultraviolet and visible spectrophotometry method is simple and re-
liable to measure the content of total flavonoids in. Carpesium abrotanoides L. . It provides a certain referential gist
for the exploitation and expand resource utilization of the Carpesium abrotanoides L. 's medical value.
Key words:Carpesium abrotanoides L.;spectrophotometry;total flavones content
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