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第 1 6卷 第 3 期
2014 年 3 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 16 No. 3
Mar .，2014
鼠麴草（Gnaphalium affine D.Don.）又名鼠曲草、
白头翁、鼠壳棉（潮汕）、清明菜，为菊科鼠麴草属一
年生草本植物[1]。全草可入药，性味甘平、无毒，有
化痰、止咳、祛风寒之功效，主治咳嗽、痰多、气喘，感
冒风寒，腹泻症，尤其润肺化痰效果显著，可代替川
贝母入药。在潮汕地区，鼠麴草分布广泛，多生于草
地，于春节前后稻田中最为常见。以前鼠麴草是作
为野草食用，后以其掺入糯米碾成粉做粿皮，包上馅
蒸制成粿——鼠麴粿，在清明或除夕夜用来祭拜祖
先[2]。鼠麴草除了在潮汕民俗应用上占有重要的地
位之外，它营养丰富，具有一定的食疗价值，是药食
两用的保健食品[1]。鼠麴草还含有较为丰富的黄酮
类化合物。黄酮类化合物拥有“维生素P”之美誉，
其在医药、食品、化妆、日化等领域上广泛应用[3]，具
有抗菌、抗癌、抗病毒、抗氧化、镇咳、祛痰、保肝、对
心脑血管方面等活性[4]。黄酮类化合物是自然界分
布较广泛的一大类天然酚性化合物，是药用植物中
的主要活性成分之一。有关黄酮类化合物及其抗氧
化性一直受到国内外的广泛重视，成为研究和开发
利用的热点[3-10]。本文采用微波辅助提取鼠麴草黄
酮类化合物，通过邻苯三酚自氧化法及硫代硫酸钠
滴定法，对鼠麴草黄酮类化合物的抗氧化性进行了
研究，希望能够为鼠麴草的开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
材料：鼠麴草采自潮州市郊区，将鼠麴草在
70 ℃下鼓风干燥4 h，自然冷切后制成粉末（过60
目筛），备用；新鲜猪油（市售）。
试剂：芦丁、无水乙醇、石油醚、亚硝酸钠、硝酸
铝、氢氧化钠、硫代硫酸钠、三氯甲烷、冰醋酸、磷酸
氢二钠、硫酸二氢钾、邻苯三酚、三羟甲基氨基甲烷
（Tris）、盐酸等均为国产分析纯。
仪器：鼓风干燥箱（上海市实验仪器总厂）、
组织捣碎机（江苏金坛市宏华仪器厂）、SHZ-D
（III）循环水式真空泵（巩义市英峪予华仪器厂）、
WD800G型微波炉（格兰仕微波炉电器有限公司）、
WFJ7200型可见分光光度计[尤尼柯（上海）仪器
有限公司]、HH-8数显恒温水浴锅（江苏金坛市亿
通电子有限公司）、电子天平（沈阳龙腾电子有限公
司）、磁力搅拌机（江苏金坛市宏华仪器厂）、高速离
心机（上海安亭科学仪器厂）。
1.2 方法
1.2.1 鼠麴草黄酮类化合物的提取
（1）标准曲线的测定：配制方法参考文献[5] ：
准确称取芦丁60 mg，用30%乙醇于65 ℃下水浴
2 h，使之溶解，全部移入100 mL容量瓶，并用30%
乙醇定容。取上述芦丁标准液0、1、2、4、6、8、10、
12 mL，移入8只50 mL的容量瓶中，用30%乙醇补
足至25 mL，加入1.4 mL的NaNO2（1∶20），摇匀，放
置5 min，加入1.4 mL AL（NO3）3（1∶10），摇匀，放
置6 min，再加入10 mL浓度为1 mol/L的NaOH溶液，
混匀，最后用30%乙醇溶液定容至刻度，在510 nm
鼠麴草黄酮类化合物抗氧化性研究
张秋燕1，张福平2，陈秋华2，姚晓霞2
（1.韩山师范学院门诊部，广东 潮州 521041 ；2.韩山师范学院生物系，广东 潮州 521041）
摘 要：采用微波辅助提取鼠麴草黄酮类化合物，并测定其体外抗氧化性。结果表明：当鼠麴草黄酮提取液浓
度超过5%时，抑制超氧阴离子自由基（O2-）能力逐渐增强，对猪油的抗氧化作用明显，且与VC、柠檬酸有较好的协
同增效作用。这说明鼠麴草黄酮类合物抗氧化性明显，值得开发利用。
关键词：鼠麴草；黄酮；抗氧化性
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2014) 03- 0030- 03
收稿日期：2013-07-10
基金项目：潮州市科技计划项目（2013S31）
作者简介：张秋燕（1971-），女，广东饶平人，副主任医师，研究方向：学校医疗保健工作。
Study on Anti-Oxidation Activity of Flavonoids from Gnaphalium Affine
ZHANG Qiuyan1，ZHANG Fuping2，CHEN Qiuhua2，YAO Xiaoxia2
（1.The Clinic of Hanshan Normal University，Chaozhou 521041，Guangdong，China ；2.Department
of Biology，Hanshan Normal University，Chaozhou 521041，Guangdong，China）
Abstract ：In this paper，microwave-aided extraction was used to extract flavonoids from Gnaphalium
affine and their antioxidant activity in vitro was tested.The results showed that the extract concentration
of Gnaphalium offine flavonoids was more than 5%，the inhibitory ability to O2- gradually strengthened，
antioxidation effect to lard obvious，and good synergistic effect mixed with the VC，and citric acid.Based on
these results，it can be concluded that Gnaphalium affine flavonoids is a promising free radical scavenger，
and it is worthy of exploiting.
Key words ：Gnaphalium affine ；flavonoids ；antioxidant activity
DOI ：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.03.011
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的吸收波长下测定吸光度（以试剂空白为参比），以
芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，绘制标准
曲线，建立回归方程。
（2）鼠麴草黄酮类化合物的提取：根据微波辅
助提取鼠麴草黄酮类化合物的正交试验，确定其最
佳提取工艺，按最佳提取工艺提取鼠麴草黄酮类化
合物提取液：取经过乙醚去脂后的鼠麴草粉末1 g→
加入60%乙醇40 mL→90 ℃水浴浸提1 h→480 W
微波40 s→抽滤→定容至50 mL→备用。
1.2.2 鼠麴草黄酮类化合物对超氧阴离子自由基
（O2-）的抑制率测定
（1）邻苯三酚自氧化速率的测定：测定方法参
考文献[6] ：取2支试管各加入50 mmol/L Tris-HCl缓
冲溶液（pH 8.2）4.5 mL和蒸馏水4.2 mL，混匀后在
25 ℃水浴中保温20 min，取出后立即加入预热过的
3 mmol/L邻苯三酚0.3 mL（空白管用10 mmol/L HCl
代替邻苯三酚），迅速摇匀后倒入比色杯，在420 nm
波长处测定光吸收值，每隔30 s读数1次，测定3 min
内每分钟光吸收值的变化。
（2）加入样品液后邻苯三酚自氧化速率的测
定：以样品管取代自氧化管。样品管测定时先分别
加入0.04%、0.2%、1%、5%、25%的鼠麴草黄酮类化
合物提取液，蒸馏水减少，再加入邻苯三酚。其余步
骤同邻苯三酚自氧化速率的测定。抑制率的计算如
下：
抑制率（%）=（ΔA0/Δt-ΔA/Δt）/（ΔA0/Δt）×
100%
式中：ΔA0/Δt为邻苯三酚自氧化时反应速率；
ΔA/Δt为加入样品液后邻苯三酚自氧化时反应速
率，单位均为吸光度每分钟的增值。
1.2.3 对猪油过氧化值（POV）测定
测定方法参考文献[7] ：取新鲜猪油各30 g，
分别加入10 mL 0.04%、0.2%、1%、5%、25%的鼠
麴草黄酮类化合物提取液及0.04%VC+0.04%提
取液、0.04%柠檬酸+0.04%提取液（空白组不加
样液），50 ℃水浴使猪油融化，并搅匀，然后置于
60 ℃恒温箱中保存。24 h后，量取1.5 mL混匀样
品，各加入三氯甲烷+冰乙酸溶液（体积比2∶3）
15 mL混匀，再加入0.1 mol/L碘溶液（加入饱和碘
化钾1.4 g/mL做稳定剂）1.5 mL，摇匀，放在暗处
5 min，然后加水25 mL，以2 mmol/L硫代硫酸钠标
准溶液滴定至淡黄色时，加入1%淀粉0.5 mL作
为指示剂，继续滴定至蓝色消失为止。以空白试
剂滴定作为对照，连续测定7 d。按GB5538-1995
测定POV值，进而比较不同浓度的黄酮提取液抗
氧化性以及VC、柠檬酸对黄酮提取液抗氧化性的
影响。
样品POV=（V1-V2）×C×1000/V
空白POV=（V0-V2）×C×1000/V
式中：POV：过氧化值（meq/L）；V0 ：对照耗硫代
硫酸钠的体积（mL）；V1 ：样品耗硫代硫酸钠的体积
（mL）；V2 ：空白耗硫代硫酸钠的体积（mL）；C：硫代
硫酸钠的浓度（mol/L）；V：样品的体积（L）。
2 结果与分析
2.1 标准曲线及回归方程
由“1.2.1（1）”测得的结果以芦丁浓度为纵坐
标，吸光度为横坐标绘制标样测定点的散点图，并对
吸光度芦丁浓度进行线性回归，散点图与回归方程、
回归线及决定系数见图1。由图1可知，测定吸光度
与芦丁浓度有很好的线性关系。
y = 9.4997x + 0.0035
R2 = 0.9973
0.000
0.200
0.400
0.600
0.800
1.000
1.200
1.400
1.600
0.000 0.024 0.048 0.072 0.096 0.120 0.144 0.168
吸
光
度
Ab
s
芦丁浓度（mg/mL）
图1 标准曲线图
2.2 鼠麴草黄酮类化合物含量的测定结果
根据微波辅助提取鼠麴草黄酮类化合物的正
交试验结果得知，鼠麴草提取黄酮的最佳工艺条件
为：乙醇浓度为60%，固液比为1∶40，提取温度为
90 ℃，微波时间为40 s。在最佳工艺条件下，测定得
到的黄酮类物质提取量为53.333 mg/g。
2.3 对超氧阴离子自由基的抑制作用
8.00
10.00
12.00
14.00
16.00
18.00
0.04 0.2 1 5 25
抑
制
率
（
%
）

浓度（%）
图2 对超氧阴离子自由基的抑制作用
由图2可见，鼠麴草黄酮提取液对超氧阴离子
自由基具有一定的抑制作用。鼠麴草黄酮提取液的
浓度在0.04%~5%时，对超氧阴离子自由基的抑制
率相当，为10.53% ；当浓度超过5%时，随着浓度的
增加，其抑制率明显升高。
2.4 对猪油过氧化值（POV）的影响
0.00
15.00
30.00
45.00
60.00
1 2 3 4 5 6 7
PO
V
(m
eq
/L
)
空白
0.04%提取液
0.2%提取液
1%提取液
5%提取液
时间（d）
图3 对猪油的抗氧化作用
由图3可见，鼠麴草黄酮提取液对猪油有明显
的抗氧化作用，其抗氧化性不与浓度成一定的规律
性关系，随着测定时间的改变，鼠麴草黄酮提取液对
猪油的过氧化值呈动态变化。
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辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
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Mar .，2014
0.00
5.00
10.00
15.00
20.00
25.00
1 2 3 4 5 6 7
PO
V
(m
eq
/L
)
0.04%提取液
0.04%VC+0.04%提取液
0.04%柠檬酸+0.04%提取液
时间（d）
图4 VC、柠檬酸对鼠麴草黄酮类化合物
抗猪油氧化效果的影响
由图4可见，分别添加0.04%VC和0.04%柠檬
酸的样液，其抗氧化性均高于0.04%提取液的抗氧
化性。可见，VC和柠檬酸对鼠麴草黄酮提取液均有
协同增效作用，且柠檬酸的增效作用强于VC。但在
第4天测定的数值中，0.04%VC+0.04%提取液的过
氧化值反而高于0.04%提取液的过氧化值，其中的
原因有待研究。
3 结 论
本实验采用微波辅助提取鼠麴草总黄酮的
提取工艺，简单、方便易行，其优点在于可以节省
时间，而且能获得较好的提取效果，是黄酮类物
质理想的提取工艺。本试验所确定的鼠麴草提
取黄酮类化合物的最优方案为：以鼠麴草为原
料，乙醇浓度为60%，固液比为1∶40，提取温度
为90 ℃，微波时间为40 s，在此条件下，鼠麴草黄
酮类物质提取量可达53.333 mg/g，其提取率比王世
宽等所采用的提取工艺[微波作用时间5 min，乙醇体
积分数15%，料液比1∶60（g/mL），微波功率700 W，
鼠麴草黄酮提取率为 4.72%]高出11.50%[8]。试验
表明：鼠麴草黄酮提取液具有一定的清除超氧阴
离子自由基的能力和抗脂质过氧化等活性。其中，
其抗脂过氧化性更为明显，且与VC、柠檬酸呈现出
较好的协同增效作用。鼠麴草黄酮类化合物是一
种良好的天然抗氧化剂，鼠麴草的药用价值较高，
分布较广，来源丰富，值得开发利用。◆
参考文献
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汕区域文化研究：韩山师范学院大学生学术科技创新成果
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提取研究[ J ] .时珍国医国药，2007，18 ( 3 ) ：552-554.
补阳还五汤对大鼠坐骨神经损伤的修复作用
谢国庆1，龚炎培2，陆金荣1，申世源1，金文孝1
（1.武警浙江省总队医院关节外科，浙江 嘉兴 314000 ；2.南通大学附属医院，江苏 南通 226001）
摘 要：目的：研究补阳还五汤（BYHWD）对大鼠坐骨神经夹伤损伤的修复作用。方法：SD雄性大鼠 50只，
随机分为BYHWD高、中、低剂量组（剂量分别为 25.92、12.96、6.48 g生药/kg）、弥可保组（剂量为 625 μg/kg）、生理
盐水阴性对照组。行大鼠坐骨神经夹伤5 mm术，术后每日灌胃给药，持续4周。于术后1、2、3、4周行足迹实验，测
定展趾功能，术后4周行电生理检测，测定复合肌动作电位和神经干动作电位，组织形态学分析，运用光镜和电镜组
织学方法对手术侧再生神经进行形态学和免疫组织化学检测，利用图像分析系统进行计量分析，观察BYHWD对大
鼠坐骨神经损伤的修复作用。结果：与生理盐水对照组相比，BYHWD组展趾功能、复合肌动作电位和神经干动作
电位波幅及恢复率、板层数显著高于生理盐水组。结论：BYHWD可促进大鼠坐骨神经夹伤后神经功能的恢复，且
存在剂量-效应关系。
关键词：补阳还五汤；坐骨神经；神经夹伤；大鼠
中图分类号：R745.4 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2014) 03- 0032- 04
收稿日期：2013-05-03
作者简介：谢国庆（1984-），男，安徽安庆人，医师，硕士，研究方向：骨与关节损伤。
Repairing Effects of Buyang Huanwu Decoction on Rat Sciatic Nerve Crush Injury
XIE Guoqing1，GONG Yanpei2，LU Jinrong1，SHEN Shiyuan1，JIN Wenxiao1
（1.Department of Orthopaedics，Armed Police Hospital of Zhejiang Province，Jiaxing 314000，
Zhejiang，China ；2.Affilited Hospital of Nantong University，Nantong 226001，Jiangsu，China）
Abstract ：Obejective ：To study the effects of reairing sciatic nerve crush injury of rats by Buyang
Huanwu Decoction（BYHWD）. Methods ：After a sciatic nerve crush model of 5 mm injury in the middle
of rat femoral bone，50 Sprague-Dawley male rats were randomly divided into 5 groups for daily intragastric
DOI ：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.03.012