全 文 ：一些松科树种初生组织培养最优
培养基的选择及其生长情况的研究
近十年来 , 组织培养法开始广泛应用于植物生理学领域 , 它对研究树木生理有特别
广阔的发展前途 , 因为树木同草本植物相比 , 体积高大 , 生长缓慢 , 是一种更复杂的研
究对象 。
许多作者进行针叶树种的组织培养是用加各种无机基质的培养基 。 现列举其 中应用
较 J一的 ,如 B O 二和 K o H 。 T “ 6二 b 给无机基质加厂 。 T夕e 培养基 , K o H a 夕一 加 y a 认 T a 培养
基 , 尸 a r o3 H H 、 抓 a R一加夕a 批 a培 养 基 以 及汀 C 、夕 旋“ P a 和 C K y r a 培养 基 , 万心 “ -
H 6 “ P r和 c K 、 r一加自己配制的同厂 O T夕“ 培养基不相同的 培养 基 , 尸“ n H e P r 和 y a 盆 T
配制了专门用于 P ; 。 “ a g l a u 。 a 的培养基 , T o P 。 : 、:和 T 。 、 M a H一配制了尸 。 认H e P T 改
良培养基 , 石 a P H e 。和 H a 认二叭 , 以及汀 a B 。一拟制了 r e 二 e 夕a 培养基 。 近儿 年 , M y f a -
。二 “ 和 〔_ K y r培养基 a 得到广泛应用 , 不仅常常用于草本植 物 组织的离体培养 , 而且还
用于树木 , 其中包括针 l什树组织的培养 。
目前研究的任务 , 在于研究松科某些属 、 种树木愈伤组织发生 的能力 , 但是为了解
决这个任务 , 必须有采用某种统一的培养基 , 使我们取作试验的十个树种能同样成功地
生长 。
为此 , 把所有移植什栽培在五种应用最广的培养基上 : 即M y P a ` r a 和 厂脚 、 a 培养
基 , 汀 召解 H 6 e P r a和 K y r a 培养基 ,尸 e 盆 H e P T a培养基 , r e IJ 二 e P a培养基 以及H 二 Y a
培养基 。 为了促迸增生作用 , 每个作者建议在用维生素和氨基酸的同时 , 给培养 基 加
入生理活性附加物 。 有两个附加物处理方案 : a一茶乙酸 ( 之毫克 /升 ) 加动力精 ( 1毫
克 /升 )一即万 Y K 十 K 和 三. 4一二氯苯氧乙酸 ( 丁毫克 /升 ) 一即 2 . 4 一 D 。 对 照 用 纯 琼
脂 , 1盯 1年 5月 、 7日试验 , 共 : 驹个处理 : 10 个树种 火 5种培养基 x Z个生理活性附加物处
理。
试验材料用生长于列宁格勒林学院加一 40 年生长树木的 3一 5年生枝条 。 培 养 的 移
植体有 : 扫帚松 ( p ` “ : 5 p e : 。 e G r i s ) , 山松 ( p : n u s m 。 ” r a n a 拼 f l z ) , 欧
洲赤松 ( P , ” u s s ` l 。 e s 才 r ` s L ) , 白松 ( P ` n u s S t r o 乙。 s L ) , 岩 松 ( P : ” u s
S f d川 。 a ( 尺 : `夕: ) 拼 a 夕: ) , 树胶冷杉 ( 月 d 、 e s d a l : a o f j e : a 万 * 1 1 ) , 西伯
利亚冷杉 ( A 6 ` e 5 5 : 6 : r i 。 e L J 6 ) , 尖叶云杉 (尸 ` 。 e a 尸 u n g e , ` : 百 “ 9 0 1。 ) , 欧
洲云杉 ( 尸、 。 。 a a b 、 。 : ( L ) K a : : t 。 ” ) 以及西伯利亚落叶松 ( L a : 侧 S : b f : 、 ca
L d b )
。
.
3 5
.
树 种 附 加 物 处 理 …:
}
}
{
l
各 种 培 养 基 样 本
月 e s e a 6 e P r a
和 C K y r a P e盆 a e P r a l 厂 e 二二 e P a
扫 帚 松 一 a蔡乙酸 十 动力精 止亘二一 卜, 卫奥一 {~一奥红 ,
0
.
1 (坏此 ) { 0 . 1 (坏此 ) } 0 . 3 (坏此 )
2
.
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白 松 a 一蔡 乙酸 十
2
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4一刀
· 力精…
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0
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岩 松 a 一蔡 乙酸 + 动力精 0
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5
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.
5 (坏死 )
1
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0
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5
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5 (坏死 )
2
.
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5 (坏死 )
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5
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5 (坏死 )
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7
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.
7 (坏死 )
山 松 a 一 蔡乙酸 + 动力精 0
.
1
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.
1 (坏死 )
0
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1
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1 (坏死 )
2
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4一刀 0
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5 (坏死 )
0
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3
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3 (坏死 )
欧 洲 赤 松 a 一禁乙酸 + 动力精 1
.
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0 (坏死 )
2
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2
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0
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5
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西伯利亚冷杉 a 一蔡乙酸 + 动力精
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1
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0
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5
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尖 叶 云 杉 a 一禁 乙酸 十 动力精 0
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5 (坏死 )
欧 洲 云 杉 a 一茶乙酸 + 动力精
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7 (坏死 )
西伯利亚落叶松 }a 一蔡乙酸 十 动力精
0
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0
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7
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7 (坏死 )
0
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1
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7
0
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2
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4一刀 0
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7
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.
7 (坏死 )
0
。
7
0
.
7 (坏死 )
3 6
侧 面 的 增 生 部 分 试 验 末 My 户
培养基中一个样本
H
班 材 a l
Pa e oe r和 C : y ra生长愈伤组织平均数
干物重 、 克
0
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5
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17 54
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0
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2
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1 7 6 3
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八匕OAùQU.…勺dn)tJ.一`4,1..0
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7
0
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7 (坏死 ) 0 . 17 2 9
0
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5 7 1 3
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16 8 9
0
.
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3 (坏死 ) 0 。 36 8 9
o一035702ū19-r10一ìoj1012j
0
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3
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、坏死 ) 3 。 8
没 有
5
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0
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0
。
2 0 7 1
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.
18 3 6
长 起 来
0
.
2 0 2 5
ZU八s没6
0
。
5
0
.
5 (坏死 ) 没 有 生 长 起 来
附注: 分子一试验开始后十日增生量估计 : 分母一试验开始后一个月增生量估计 。
·
3 7
.
, 译者注 : 此横行俄文字为基本培养基名称 , 其 中M y于 a `一 。 r “ 和 C K y r a培养基 , 即
M
.
S 培养基 , 其配方如下 :
化 合 物 毫克 / 升 { 化 合 物 毫克 / 升 化 合 物 毫克 / 升
C a C l
: 一 a
H
:
O
K N O
3
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o 4 · 7H
:
O
N H
4
N O s
K H
: 尸 0 4
4 4 0
F e
二 。 4 · 7 H 。 。溶于一升水 , 每升培养基取此液 5毫升 C u S O
4 · SH
:
0 0
.
0 2 5
6H酸素醇糖脂犷胺哆1C氨硫比oC甘撇麒肌蔗烟琼PH八d八hQ乙Odù匀--g曰,自q乙00口nù .-,曰n“1 9 00
3 7 0
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5
.
8
摘 自: 单倍体育种资料集 ( 中国科学院植物研究听 ) 第一集 19 页 。
按通常采用的方法设置试验 。 试验材料按以前写过的方法进行消毒处理 。
将经过灭菌处理的长 20 厘米的枝段移入灭菌玻璃房 , 在玻璃房内再用 96 %的酒精消
毒 , 并用酒精灯火焰烘干 , 然后从枝条撕下树皮 , 切成长 了毫米的小块 , 以其横断面垂
直地放进 10 0毫升日尸二 e H M c 益 e P烧瓶 , 烧瓶盛 40 毫升琼脂培养基 。 每树种每项处 理 重
天次。 一半以顶端向上放置 ,一半一顶端向下放置 , 以检验极性对愈伤组织形成强度的影
响 。 将培养物置于温度 25 ℃和空气温度80 %的暗室恒温箱中迸行培养 。 平均试验时间达
三个月 ( 树胶冷杉一一 5 个月 ) 。 在培养的第一个月 ,每周观察一次 , 以后每两周观察一
次 。 按照移植体侧面愈伤组织覆盖的程度鉴定增生作用 , 并用相对单位 . 01 至 1 . 0表示 。
愈伤组织生长情况由其最终体积立方厘米和干物重决定 。
在五种培养基上设置试验的第十天 , 开始出现组织增生 。 而在贫薄的琼脂培养基 _仁
没有愈伤组织发生 。 在M y P a 。 。 e 和 C , r a培养基 _匕 上述所有树种移植体都出 现增 ,
生 , 但是西伯利亚冷杉 (用附加 a一蔡乙酸加动力精和 2 . 4一D 的培养基 ) 和树胶冷杉 (用
附 加蔡 乙 酸加动力精的培养基 ) 推迟到设置试验后 20 天开始增生 。 在其它四种培养基
上 , 开始组织增生是极一致的 ( 到第十天开始增生 ) , 但不是所有树种势成愈伤组织 ,
而出现少数愈伤组织迅速 ( 设置试验后三个星期 ) 坏死 , 没有继续生长更新 , 针叶树种
移植体在各种培养基和各种处理中的生长指标制表一 。
由表可 以看出 , 培养基M y p a c o r e 和了 K y r a是适宜于针叶树种的培养的 。 用附加
物 a 一蔡乙酸加动力精的培养基 , 大多数树种愈伤组织形成得更快 , 特别是在培养 基 表
面愈伤组织生长的时候 。
通常开始增生的特点是 , 在培养标本侧表面出现愈伤组织的薄层 。 在松树首先 观察
到垂直树脂道和水平树脂道的活力。 设置试验后一个半月 , 在培养标本上形成许多愈伤
组织 , 其生长持续 2一 3个月 (树胶冷衫持续 5个月以上 ) , 同时大多数移植体 , 在其周围的
培养基表面愈伤组织生长很快 。
大多数树种在培养基M y pa。 。 e :和 C、 、 ra_ L的坏死现象 , 只是在试验后一个半 月
至两个月表现出来 ( 树胶冷杉一经过 4个月坏死 , 云衫实际上没有坏死现象 ) ,随后就更
新生长 。 主要的更新组织有形成层 , 树脂道细胞 ,髓心和韧皮部薄壁组织以及叶迹细胞 ,
按照各种组织增生的程度 , 可将树种分为下列几种 。 在欧洲赤松的移植体 , 上面列述的
组织都能发生增生作用 ; 在云杉同样那些组织能增生 , 但欧洲云杉村脂道在附山松 , 扫
加 a 一禁乙酸加动力精的培养基上增生 , 而尖叶云杉一在附加 2 , 4一 D的培养基上增生 ,
帚松和岩松一形成层 , 韧皮部和树脂道都能增生 , 而其余一些树种移植体一只有形成层
和韧皮部能增生 。
在树胶冷杉和西伯利亚冷杉移植体观察到增生作用是很强的 , 在欧洲赤松 , 扫帚松 ,
欧洲云杉 。 白松 , 山松 , 落叶松 , 尖叶杉 以及岩松的移植体 , 其愈伤组织形成的能力依
次缩小 。
组织培养的标本 , 顶端向上或向下的位置对组织增生作用的强度没有影响 。
林科所资料室译自苏联 《 刀 “ 。 。 ` 飞众 沉 y p H a 二 》 19 7 7年 1 · 2 页
李世英大队十二年半生的衫
木林相外貌
三 、 李世英大队林场场 员对衫木
进行扩槽抚育
二 、 童司牌大队十三年半生 的衫木林相
平均树高 6 . 9米
平均胸径 12 . 4厘米
每亩材积 1 . 3 46 立方米
抚育措施 : 扩槽间伐
四 、 李世英大队十二年半生衫木
林少数单株胸径 己达 2 2厘米
五 、 李世英 大队十二书半生籽 木林
平均树高 1 1 . 2米
平均胸径 14 . 8厘米
每亩材积 14 . 4 4 8立方米
抚育措施 : 开 沟排渍 , 才翻巴间 伐
六 、 李世英大队 7年生衫木林 ( 71 年
造林 ) 切 山抚育后根系生长情况
土攘 : 三类 ( 铁板脚 )
七 、 李世英大队 了年生杉木林
(7 1 年造林 ) 扩槽抚育
后根系生长情况
土攘 :三类 (铁板脚 )
八 、 李世英大队 了年生衫木林
(了 1 年造林 ) 扩 槽 、 换
土抚育后根 系生长情况土
攘 :三 类 (铁板脚 )
九 、 李世英大队 了年生衫木林 (了 1
年造林 ) 扩槽十换土十施肥
抚育后根 系生长情况
土攘 :三 类 (铁板脚 )
十 、 李甘英大队十三年生杉木林 ,
土攘 : 三类 。
右 . ( 标地号 : 速 2D ) 造林后每年
切山一次 。
平均树高 6 . 6米
平均胸径 8 . 5了厘米 ( 小径材
占8 6 . 4 % )
每亩材积 3 . 8 34 立方米 , ( 己
成林 )
左 : ( 标地号 : 速 2 1 ) , 造林后 头
两年切 山各一次 , 以 后停止 。
平均树高 3 . 6 9米
平均脑径 5 . 25 厘米 ( 小径材
占2 1 . 了% )
每亩材积 0 . 81 6立方米 ( 未
成林 )
十一 、 李世英大队十三年生衫木林间
伐后林相 ( 标地号 : 间四 )
造林密度 : 每亩 24 0株
间伐后密度 : 每亩 18 0株
平均树高 : 9 . 8T 米
平均胸径 : 14 . 2厘米
每亩材积 : 13 . 943 立方米